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电动车CO_(2)、R290热泵通用化系统构建及其性能影响特性
1
作者 曹志简 宗硕 +4 位作者 张翌晨 管燕 王知明 殷翔 曹锋 《西安交通大学学报》 北大核心 2026年第1期22-30,共9页
针对汽车空调R134a制冷剂替代及电动车冬季续航衰减问题,以通用化载冷剂回路构建通用化的CO_(2)及R290间接热泵系统。首先,建立了通用载冷剂系统的CO_(2)、R290通用化热泵空调系统仿真模型并进行实验验证;然后,研究了换热器配置和水路... 针对汽车空调R134a制冷剂替代及电动车冬季续航衰减问题,以通用化载冷剂回路构建通用化的CO_(2)及R290间接热泵系统。首先,建立了通用载冷剂系统的CO_(2)、R290通用化热泵空调系统仿真模型并进行实验验证;然后,研究了换热器配置和水路流量对热泵空调性能的影响和通用化系统衰减特性;最后,提出了两种循环的通用设计和控制策略,评估了通用化系统对整车续航的影响。结果表明:调节水路流量能够有效解决通用化系统性能衰减问题;采用串联多个暖风芯体作为室内换热器的通用化方案并对水路流量加以调节,能够同时满足CO_(2)间接系统及R290间接系统的换热需求,通用化系统造成R290系统性能衰减为2.46%,CO_(2)系统性能最优。 展开更多
关键词 热泵空调 间接系统 R290 二氧化碳
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2021年中国人群可筛查癌症的疾病经济负担研究
2
作者 周心怡 孙鑫 +4 位作者 黄文凯 蔡森瑶 邹苏阳 石菊芳 魏文强 《卫生经济研究》 北大核心 2026年第1期26-30,36,共6页
目的:量化我国人群可筛查干预的8种常见癌症所致疾病经济负担,讨论筛查干预的可能影响。方法:基于多源公开数据,采用人力资本法结合伤残调整寿命年,测算我国人群可筛查干预的8种癌症所致间接经济负担;基于核心文献,延展简析对应的直接... 目的:量化我国人群可筛查干预的8种常见癌症所致疾病经济负担,讨论筛查干预的可能影响。方法:基于多源公开数据,采用人力资本法结合伤残调整寿命年,测算我国人群可筛查干预的8种癌症所致间接经济负担;基于核心文献,延展简析对应的直接经济负担。结果:2021年,我国人群可筛查干预的8种癌症所致间接经济负担为7685.22亿元,占所有癌种的75.76%,占同年GDP的0.67%;早亡所致间接经济负担为7530.91亿元(97.99%),消化系统癌症(食管癌、胃癌、结直肠癌和肝癌)间接经济负担合计为4581.83亿元,疫苗可防的癌症(肝癌和宫颈癌)间接经济负担为1248.33亿元,女性乳腺癌和宫颈癌间接经济负担合计为548.20亿元,肺癌在单个癌种中所致间接经济负担最高(2329.15亿元);延展分析显示,2021年我国人群可筛查干预的8种癌症所致直接经济负担从42.68亿元至1212.11亿元不等。结论:我国人群可筛查干预癌症所致经济负担特别是间接经济负担总量不容忽视,随着筛查技术进一步成熟、可及性持续提高,筛查有望产生更大效益。 展开更多
关键词 癌症 疾病经济负担 间接经济负担 筛查
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基于开源处理器的间接访问数据预取器设计
3
作者 宗鹏陈 曲劭儒 +2 位作者 赵文哲 任鹏举 夏天 《集成电路与嵌入式系统》 2026年第1期47-53,共7页
间接内存访问在图计算、稀疏线性代数等数据密集型应用中广泛存在,其非规则访存模式因时空局部性差导致缓存性能显著下降。传统流式预取器难以有效捕获通过索引数组动态计算目标地址的访问模式(如x[a[i]])。文中提出动态多模式感知预取... 间接内存访问在图计算、稀疏线性代数等数据密集型应用中广泛存在,其非规则访存模式因时空局部性差导致缓存性能显著下降。传统流式预取器难以有效捕获通过索引数组动态计算目标地址的访问模式(如x[a[i]])。文中提出动态多模式感知预取器(DMP)来解决这一挑战:DMP采用轻量化移位差分匹配机制,比较索引数据序列与目标地址序列,完成间接访问模式的识别;基于开源玄铁C910 RISC V处理器的FPGA原型验证表明,DMP使稀疏矩阵向量乘(SpMV)的L1数据缓存缺失率降低了27.3%,算法运行时间加速了1.07~1.22倍。实验结果证明,DMP在提升间接访存性能的同时,保持了低硬件开销与高可移植性,为现代处理器非规则访存优化提供了实用解决方案。 展开更多
关键词 数据预取 间接内存访问 缓存优化 非连续访问 硬件高效性 非规则访存
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基于腹水、IBIL、Ca、ALB构建慢性乙型肝炎肝硬化服用芪苓益肝颗粒的疗效预测模型
4
作者 杨萌 王莹 +7 位作者 刘利 谢玺媛 周宇捷 蔺薛瑞 秦硕 李怀长 姜楠 王晓玲 《检验医学与临床》 2026年第1期112-119,共8页
目的构建并验证基于腹水、间接胆红素、血钙、清蛋白的芪苓益肝颗粒治疗慢性乙型肝炎肝硬化疗效的预测模型,为临床精准用药提供决策支持。方法选取2020年5月至2023年4月山西省中医药研究院/山西省中医院收治的135例接受芪苓益肝颗粒治疗... 目的构建并验证基于腹水、间接胆红素、血钙、清蛋白的芪苓益肝颗粒治疗慢性乙型肝炎肝硬化疗效的预测模型,为临床精准用药提供决策支持。方法选取2020年5月至2023年4月山西省中医药研究院/山西省中医院收治的135例接受芪苓益肝颗粒治疗满3个月以上的慢性乙型肝炎肝硬化患者作为内部训练集,另选取2023年5月至2024年5月30例患者作为外部验证集。通过单因素分析筛选潜在预测因子,结合Lasso回归特征选择与赤池信息准则优化,建立高斯朴素贝叶斯预测模型。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估区分度,Bootstrap法校准曲线评价模型校准度,并通过决策曲线分析验证临床实用性。结果基于临床意义与单因素分析,将内部训练集中的红细胞计数等18项因素纳入Lasso线性回归,结果显示,腹水(β=0.842)、间接胆红素(β=0.004)、血钙(β=-0.237)和清蛋白(β=-0.066)为关键预测因子。根据以上4项预测因子构建9种预测模型,其中高斯朴素贝叶斯模型最优,内部训练集和外部验证集的AUC分别为0.866(95%CI:0.699~1.033)、0.869(95%CI:0.705~1.000),校准曲线显示该模型预测的概率良好(Brier Score=0.144)。据此开发在线预测工具,输入腹水程度等4项因子数值,获得疗效预测结论:若疾病概率≤39.2%,预估有效,推荐使用芪苓益肝颗粒;反之则无效。结论基于腹水、间接胆红素、血钙和清蛋白4项指标构建疗效在线预测工具,能较为可靠地预测服用芪苓益肝颗粒乙型肝炎肝硬化患者的疗效。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎肝硬化 芪苓益肝颗粒 疗效 预测模型 高斯朴素贝叶斯模型 腹水 间接胆红素 血钙 清蛋白
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我国水污染物排放标准间接排放的发展历程、特点、问题及对策建议 被引量：2
5
作者 赵丽娜 郭佳 +1 位作者 薛瑞 蔡木林 《给水排水》 北大核心 2025年第4期77-83,共7页
系统梳理了我国水污染物排放标准中间接排放模式的6个发展阶段,分析了各阶段间接排放特点的差异性,总结标准间接排放模式实施存在的问题,结合我国实际情况提出相应对策建议。具体包括:划清城镇污水处理厂和工业废水集中处理厂界限,修订... 系统梳理了我国水污染物排放标准中间接排放模式的6个发展阶段,分析了各阶段间接排放特点的差异性,总结标准间接排放模式实施存在的问题,结合我国实际情况提出相应对策建议。具体包括:划清城镇污水处理厂和工业废水集中处理厂界限,修订并统一相关标准中的间接排放要求,规范园区环境管理要求,加强监测与环境信息公开。 展开更多
关键词 排放标准 间接排放 发展历程 对策建议
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一种基于截短N蛋白的猪丁型冠状病毒抗体ELISA检测方法的建立 被引量：1
6
作者 王东升 于瑞明 +5 位作者 张莉萍 白英杰 刘霞 王永录 杜晓华 刘新生 《生物工程学报》 北大核心 2025年第7期2760-2773,共14页
为了建立一种猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)抗体检测方法,将PDCoV CH/XJYN/2016毒株N基因序列插入原核表达质粒载体pColdⅡ中,表达重组蛋白PDCoV-N1和PDCoV-N2,经SDS-PAGE分析和Ni+-NTA纯化后,检测重组原核蛋白PDCoV... 为了建立一种猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)抗体检测方法,将PDCoV CH/XJYN/2016毒株N基因序列插入原核表达质粒载体pColdⅡ中,表达重组蛋白PDCoV-N1和PDCoV-N2,经SDS-PAGE分析和Ni+-NTA纯化后,检测重组原核蛋白PDCoV-N1和PDCoV-N2与猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)阳性血清的反应原性和特异性。同时对重组真核蛋白PDCoV-N1和PDCoV-N2进行Western blotting和间接免疫荧光实验验证分析。最后使用重组原核蛋白PDCoV-N2建立间接ELISA方法,优化反应条件,检测敏感性、特异性及重复性,并对102份临床血清进行了检测。重组原核蛋白PDCoV-N2与PEDV抗血清交叉反应较低。以PDCoV-N2蛋白制备的间接ELISA方法的最优条件为:抗原包被浓度1.25μg/mL,37℃包被1 h,BSA封闭液4℃过夜,血清最佳稀释浓度1:50,37℃孵育1 h,酶标二抗最佳稀释比例为1:80000,37℃孵育1 h,加入四甲基联苯胺(tetramethylbenzidine,TMB)显色液37℃反应10 min。待检样品的S/P值(样本值–阴性对照值)/(阳性对照值–阴性对照值)≥0.45为阳性,S/P值≤0.38为阴性,S/P值介于0.45和0.38之间,则为可疑。检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)、猪传染性胃肠炎病毒(transmissiblegastroenteritis of swine,TGEV)、口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)、非洲猪瘟病毒(african swine fever virus,ASFV)阳性血清,结果显示,其他冠状病毒的S/P值均小于0.38,表明其具有良好的特异性;PDCoV抗血清800倍稀释后仍为阳性;批间和批内重复性实验结果显示,本方法变异系数均小于10%;临床血清样本检测结果显示,该方法与中和实验的符合率为94.12%。本研究基于截短的PDCoV N蛋白,建立了能够检测抗PDCoV特异性IgG抗体的ELISA方法,且该方法敏感、特异、稳定、重复性好,为PDCoV的临床诊断提供了新的方法。 展开更多
关键词 猪δ冠状病毒 截短N蛋白 IGG抗体 间接ELISA
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生成式人工智能服务提供者著作权侵权责任认定 被引量：29
7
作者 冯晓青 沈韵 《法治研究》 北大核心 2025年第1期46-58,共13页
生成式人工智能服务提供者不能简单以“技术中立”作为免责事由,从成本效益的经济理性、危险控制理论来看,服务提供者承担著作权侵权责任具有必要性基础。对生成式人工智能服务提供者可以采取解释论立场,确立其作为新型网络服务提供者... 生成式人工智能服务提供者不能简单以“技术中立”作为免责事由,从成本效益的经济理性、危险控制理论来看,服务提供者承担著作权侵权责任具有必要性基础。对生成式人工智能服务提供者可以采取解释论立场,确立其作为新型网络服务提供者的主体地位,并结合生成式人工智能特性与侵权场景适当调整其侵权责任认定,包括引入过错推定作为归责原则和探索注意义务的重构。注意义务的认定应遵循一种客观、动态的认定标准,具体内容涉及数据来源合法、算法优化训练、监督用户合规使用义务。实践中,生成式人工智能侵权表现为不同行为形态、违反不同注意义务内容,因而有必要类型化构建生成式人工智能服务提供者的著作权侵权责任规则。同时,为维系利益平衡与促进技术发展,需要构建包括意思自治保留下责任分配、用户免责下侵权阻却等责任限制规则。 展开更多
关键词 生成式人工智能服务提供者 著作权侵权 间接侵权 注意义务
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间接治理:刑法应对数字技术风险的基本模式 被引量：8
8
作者 储陈城 《法学论坛》 北大核心 2025年第1期65-77,共13页
数字技术从传统互联网发展到今天的生成式人工智能,刑法理论与刑事立法、司法总是呈现出激进与保守的对立、转换。预防技术风险与防止技术萎缩的立场相互博弈。出于保护新兴技术创新的考虑,刑法不宜对数字技术风险过早地作出反应。当前... 数字技术从传统互联网发展到今天的生成式人工智能,刑法理论与刑事立法、司法总是呈现出激进与保守的对立、转换。预防技术风险与防止技术萎缩的立场相互博弈。出于保护新兴技术创新的考虑,刑法不宜对数字技术风险过早地作出反应。当前刑法理论界基于防控风险而主张的积极直接介入观,对刑事立法、司法存在误导,会引发连锁的负面反应。但是,出于对法益的保护,刑法亦不能对数字技术风险置若罔闻。基于利益衡量的考虑,改造行政犯的间接治理模式,应成为数字时代技术风险应对的主要路径。从原先理论界倡导的积极直接治理模式,转向“国家管平台、平台管用户”的新型间接治理模式。发挥数字平台“看门人”的作用,构建以“看门人义务”为核心的数字平台治理体系,形成“平台+前置法+刑法”这一阶层性、渐进式的数字技术风险应对基本模式。 展开更多
关键词 数字技术 间接治理 数字平台 看门人义务
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禽白血病病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用 被引量：1
9
作者 苏晓月 吕转平 +2 位作者 沈亚安 赵明明 唐思静 《家畜生态学报》 北大核心 2025年第1期64-69,共6页
为了建立一种禽白血病病毒(ALV)抗体检测方法,利用原核表达禽白血病病毒的p27蛋白建立一种检测ALV抗体的间接ELISA方法。结果显示,p27蛋白以包涵体形式表达,Western blot检测显示p27蛋白具有良好的反应活性,以p27蛋白为包被抗原建立的间... 为了建立一种禽白血病病毒(ALV)抗体检测方法,利用原核表达禽白血病病毒的p27蛋白建立一种检测ALV抗体的间接ELISA方法。结果显示,p27蛋白以包涵体形式表达,Western blot检测显示p27蛋白具有良好的反应活性,以p27蛋白为包被抗原建立的间接ELISA方法检测NDV、IBDV、IBV、AIV-H9、ILTV阳性血清均为阴性,最低抗体检出效价为1︰12800,与进口试剂盒的符合率为94.87%,检测临床血清样品的阳性率为14.02%。结果说明该研究建立的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、符合性好,可为ALV的检测和净化等提供一种简单快速的方法。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 间接ELISA方法 抗体检测 净化
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小儿坏疽穿孔性阑尾炎或阑尾周围脓肿腹腔镜术后腹腔镜疝囊高位结扎术12例 被引量：1
10
作者 刘雪来 程毅菁 +4 位作者 马亚 刘军廷 范世莹 陈震 许坚吉 《中国微创外科杂志》 北大核心 2025年第2期120-124,共5页
目的探讨坏疽穿孔性阑尾炎或阑尾周围脓肿腹腔镜阑尾切除术后行腹腔镜疝囊高位结扎术的安全性、可行性,总结手术技巧。方法2015年2月~2024年5月,9例坏疽穿孔性阑尾炎和3例阑尾周围脓肿腹腔镜术后4个月~3年8个月(平均1年4个月)行腹腔镜... 目的探讨坏疽穿孔性阑尾炎或阑尾周围脓肿腹腔镜阑尾切除术后行腹腔镜疝囊高位结扎术的安全性、可行性,总结手术技巧。方法2015年2月~2024年5月,9例坏疽穿孔性阑尾炎和3例阑尾周围脓肿腹腔镜术后4个月~3年8个月(平均1年4个月)行腹腔镜疝囊高位结扎术。回顾上述病例资料。结果12例大网膜均粘连于右侧未闭的鞘膜腔,内环口皱褶冗厚。其中3例大网膜粘连于内环口,两孔法松解粘连,体外丝线牵拉辅助腹腔镜内环缝扎闭合内环口,手术时间分别为18 min、21 min和22 min;8例大网膜粘连于鞘膜腔壁,1例粘连于鞘膜腔底部,三孔法松解粘连,操作钳牵拉冗厚腹膜辅助腹腔镜内环缝扎闭合内环口,手术时间(45.5±5.7)min。无并发症,均在术后6 h内出院。11例术后随访4~20个月,平均7.5月。1例术后1年7个月出现对侧腹股沟斜疝,再次行疝囊高位结扎术。无切口感染、鞘膜积液、医源性隐睾或睾丸萎缩。结论腹腔镜阑尾炎术后行腹腔镜疝囊高位结扎术时,存在大网膜粘连于腹股沟管的可能。术中酌情增加trocar辅助离断大网膜,充分显露内环口和后腹膜,在保护好精索血管、输精管以及睾丸的前提下,松解和离断大网膜,行疝囊高位结扎,操作具有安全性、可行性。 展开更多
关键词 阑尾炎 大网膜粘连 斜疝 疝囊高位结扎术
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作为举报治理的通知删除:避风港规则反思 被引量：10
11
作者 丁晓东 《法学论坛》 北大核心 2025年第2期42-54,共13页
以通知删除规则为核心的避风港制度存在挑战。其制度存在不同版本,其适用可能存在冲突,其各方权益保护存在紧张。这些挑战的根本原因在于典型的平台间接侵权具有大规模治理型侵权的特征,区别于传统的二对一共同侵权,也无法被分割为独立... 以通知删除规则为核心的避风港制度存在挑战。其制度存在不同版本,其适用可能存在冲突,其各方权益保护存在紧张。这些挑战的根本原因在于典型的平台间接侵权具有大规模治理型侵权的特征,区别于传统的二对一共同侵权,也无法被分割为独立的个体性传统共同侵权。只有在平台特定参与个案的少数情形中,平台间接侵权才类似传统共同侵权。在典型的平台间接侵权中,通知删除规则具有举报治理的特征,即应将平台收到的通知视为举报,将其采取措施视为针对举报的治理机制。避风港制度应进行重构,无论是通知要求、平台接到通知后的反通知等措施,还是平台采取的通知删除、通知过滤等措施,不同版本的制度都无必然优劣,都应根据平台治理需求与特征而设计。法律也应给予平台以通知删除的自治性空间,当法律对平台规则进行规制时,其干预应使平台利益与社会利益对齐。 展开更多
关键词 避风港规则 通知—删除 共同侵权 平台治理 间接侵权 算法过滤
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斡旋受贿的刑法教义学分析 被引量：2
12
作者 陈兴良 《法律科学(西北政法大学学报)》 北大核心 2025年第4期15-27,共13页
斡旋受贿是指《刑法》第388条规定的国家工作人员斡旋受贿和第388条之一规定的非国家工作人员斡旋受贿,即利用影响力受贿罪。斡旋受贿在我国《刑法》规定的贿赂犯罪中具有十分重要的地位,它是贿赂犯罪罪名完善的标志性成果。国家工作人... 斡旋受贿是指《刑法》第388条规定的国家工作人员斡旋受贿和第388条之一规定的非国家工作人员斡旋受贿,即利用影响力受贿罪。斡旋受贿在我国《刑法》规定的贿赂犯罪中具有十分重要的地位,它是贿赂犯罪罪名完善的标志性成果。国家工作人员斡旋受贿的规定,扩展了单纯受贿罪的范围,织密了贿赂犯罪的法网。非国家工作人员斡旋受贿的罪名设立,将受贿罪的主体从国家工作人员扩展到非国家工作人员,即与国家工作人员和离职的国家工作人员关系密切的人。避免这些关系密切的人利用国家工作人员或者离职的国家工作人员的职务行为或者职务形成的便利条件收受财物,对于落实《联合国反腐败公约》和因应现实生活中出现的利用影响力受贿现象具有重要的现实意义。 展开更多
关键词 斡旋受贿 间接受贿 利用影响力受贿
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全球价值链间接参与与创新绩效——知识溢出的作用 被引量：2
13
作者 刘益 桑徐卫 沙维曦 《商业经济与管理》 北大核心 2025年第6期5-21,共17页
在中国,只有不到3%的企业能通过直接出口进入国际市场。非出口企业能够成为出口企业的供应商,进而间接参与全球价值链分工并获得知识溢出以提升其创新绩效。基于2007—2016年中国上市企业的客户-供应商关系,文章探讨了国内供应商的间接... 在中国,只有不到3%的企业能通过直接出口进入国际市场。非出口企业能够成为出口企业的供应商,进而间接参与全球价值链分工并获得知识溢出以提升其创新绩效。基于2007—2016年中国上市企业的客户-供应商关系,文章探讨了国内供应商的间接出口参与其创新绩效的关系。研究表明:间接出口参与能够带来显著的知识溢出效应,促进企业创新发展;间接出口对企业创新的影响在企业规模、行业、地理位置和产权性质方面存在异质性。机制检验表明,规模效应溢出、信息效应溢出和竞争效应溢出是间接出口影响企业创新绩效的机制。研究证实了在日益错综复杂的全球价值链中,间接出口参与对国内企业参与全球价值链、提升创新能力,进而提升新质生产力的重要战略价值。 展开更多
关键词 间接出口 全球价值链 创新绩效 知识溢出 国际竞争
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鸡痘病毒ORF127蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用
14
作者 华炯钢 朱寅初 +6 位作者 叶加林 张存 陈柳 倪征 付媛 霍苏馨 云涛 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第10期2057-2065,共9页
为建立快速、准确的鸡痘病毒(fowlpox virus,FPV)抗体检测方法,将FPV ORF127基因的抗原表位区域克隆于pET-28a(+)原核表达载体,诱导表达并纯化获得FPV ORF127截短蛋白,以纯化的蛋白作为包被抗原,通过优化各反应条件,建立检测FPV抗体的间... 为建立快速、准确的鸡痘病毒(fowlpox virus,FPV)抗体检测方法,将FPV ORF127基因的抗原表位区域克隆于pET-28a(+)原核表达载体,诱导表达并纯化获得FPV ORF127截短蛋白,以纯化的蛋白作为包被抗原,通过优化各反应条件,建立检测FPV抗体的间接ELISA方法,经特异性、敏感性、重复性等试验和临床血清样本检测进行系统验证。结果显示,间接ELISA检测FPV抗体的最佳反应条件为:包被抗原质量浓度为10μg·mL^(-1),待检血清稀释度为1∶100,酶标二抗稀释度为1∶25000;特异性试验结果显示,除FPV阳性血清呈阳性反应外,与其他6种病毒(新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、鸡传染性法氏囊病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、禽腺病毒4型、火鸡疱疹病毒)的阳性血清均无交叉反应;敏感性结果显示,FPV阳性血清稀释800倍后检测结果仍为阳性;批内、批间重复试验结果显示,批内变异系数为1.81%~7.07%,批间变异系数为2.12%~7.16%,均小于10%。临床血清样品检测结果显示,180份血清样本总阳性率为79.4%(143/180)。上述结果表明,本研究建立的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性和稳定性好,可为免疫鸡群FPV抗体水平监测和FPV流行病学调查提供技术支撑。 展开更多
关键词 鸡痘病毒 ORF127蛋白 间接ELISA 抗体
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溶血性曼氏杆菌OmpA的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
15
作者 尚珂 高远集 +9 位作者 刘畅 代静蕾 丁梦豪 聂孟川 王怡轩 陈松彪 贾艳艳 郭荣显 丁轲 余祖华 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第4期376-383,共8页
为建立一种快速、高效、准确的溶血性曼氏杆菌(MH)抗体的检测方法,本研究采用生物信息学软件对MH外膜蛋白A(OmpA)的理化性质和亲/疏水性、跨膜结构和信号肽进行分析后,利用PCR扩增MH OmpA基因,构建重组表达质粒pET-32a-OmpA,经生物公司... 为建立一种快速、高效、准确的溶血性曼氏杆菌(MH)抗体的检测方法,本研究采用生物信息学软件对MH外膜蛋白A(OmpA)的理化性质和亲/疏水性、跨膜结构和信号肽进行分析后,利用PCR扩增MH OmpA基因,构建重组表达质粒pET-32a-OmpA,经生物公司测序及酶切鉴定正确后转化大肠杆菌Rosetta感受态细胞,经IPTG诱导重组OmpA蛋白(r OmpA)的表达,SDS-PAGE检测结果显示,在约57 ku处出现目的条带,且rOmpA主要以为包涵体形式表达。rOmpA表达产物经镍柱亲和层析法纯化后利用western blot鉴定,结果显示,在57.03 ku处出现特异性条带,表明r OmpA可与MH阳性血清产生良好的反应原性。以rOmpA作为包被抗原,采用方阵法通过对各反应条件的优化,初步建立MH抗体的间接ELISA检测方法。利用该方法检测多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、MH-1、MH CVCC4091(A5型)以及MH-2(A1型)阳性血清,结果显示,除MH-1、CVCC4091以及MH-2检测为阳性外,其他细菌阳性血清均为阴性结果,特异性较强。利用该间接ELISA方法检测2倍倍比稀释的待检阳性血清(1:8000~1:512000),结果显示,阳性血清稀释至1:512000时仍为阳性,敏感性较高。将同一批次和不同批次纯化的r OmpA包被ELISA板,按照该ELISA方法检测5份MH阳性血清,分析该方法的重复性。结果显示,批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,表明该方法重复性好。采用建立的间接ELISA方法和间接血凝试验(IHA),对82份临床动物(羊、兔、鼠)血清样品检测,结果显示,间接ELISA检测方法的阳性率为47.6%,阴性率为52.4%;IHA检测方法的阳性率为45.1%,阴性率为54.9%。二者的阳性符合率为94.9%,阴性符合率为95.6%,总符合率为99.3%。另外,从鼠体内检出MH阳性率最高为75.0%,表明本研究建立的间接ELISA方法可以用于临床样品的检测。该检测方法的建立为临床MH抗体的检测提供可靠的技术手段,为MH的流行病学调查等奠定了基础。 展开更多
关键词 溶血性曼氏杆菌5型 外膜蛋白A 原核表达 小鼠 间接ELISA
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鸭短喙矮小综合征病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用
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作者 朱小丽 王劭 +5 位作者 董慧 程晓霞 江丹丹 肖世峰 陈少莺 陈仕龙 《福建农业学报》 北大核心 2025年第7期649-655,共7页
【目的】建立一种快速检测鸭短喙矮小综合征病毒(Short beak and dwarfism syndrome virus,SBDSV)抗体的血清学方法。【方法】以蔗糖密度梯度离心纯化的SBDSV流行株M15,以此灭活全病毒作为固相包被抗原,通过系统性优化反应参数,构建一... 【目的】建立一种快速检测鸭短喙矮小综合征病毒(Short beak and dwarfism syndrome virus,SBDSV)抗体的血清学方法。【方法】以蔗糖密度梯度离心纯化的SBDSV流行株M15,以此灭活全病毒作为固相包被抗原,通过系统性优化反应参数,构建一种高特异性的间接ELISA检测方法,用于鸭短喙矮小综合征病毒(SBDSV)血清抗体的定性分析。【结果】建立的间接ELISA检测方法的最佳反应条件为:抗原包被浓度0.1 mg·mL^(−1),37℃孵育2 h后再4℃过夜包被;1%BSA 37℃封闭2 h;血清样本1∶200稀释;阴阳性临界值为0.3214。该检测方法特异性好,与其他常见水禽病毒阳性血清均无交叉反应;敏感性高,阳性高免血清(LPAI效价2^(8))1∶204800倍稀释时检测结果仍为阳性;批内、批间重复性好,变异系数均小于6%;利用所建立的ELISA方法对70份SBDSV疑似感染病鸭的血清样品进行检测,检测结果与LPAI检测结果符合率为90%。对福建省648份临床送检1日龄雏鸭血清样品进行检测,抗体阳性率约为48.30%,显示福建省养鸭场存在不同程度的SBDSV感染。【结论】本研究建立的SBDSV血清抗体间接ELISA检测方法,该方法特异性高,适合大规模血清学检测,可为监测SBDSV在我国的流行情况以及雏鸭母源抗体水平评价提供技术支撑。 展开更多
关键词 鸭短喙矮小综合征 间接ELISA 抗体检测
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葱潜隐病毒吉林分离物的鉴定及ELISA检测方法的建立
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作者 张春雨 王晨 +3 位作者 刘建青 李小宇 宋景荣 王永志 《植物保护》 北大核心 2025年第6期239-244,共6页
葱潜隐病毒(shallot latent virus,SLV)是影响葱、蒜产量和品质的主要病毒之一,本研究从吉林省珠葱中分离并鉴定了3株SLV,分离物衣壳蛋白(coat protein,CP)的基因序列与已报道的SLV分离物的相似性为78.84%~83.24%;通过原核表达并纯化病... 葱潜隐病毒(shallot latent virus,SLV)是影响葱、蒜产量和品质的主要病毒之一,本研究从吉林省珠葱中分离并鉴定了3株SLV,分离物衣壳蛋白(coat protein,CP)的基因序列与已报道的SLV分离物的相似性为78.84%~83.24%;通过原核表达并纯化病毒CP蛋白,免疫小鼠,制备了多抗血清,效价达256000倍;以纯化的多抗血清为基础建立了SLV的间接ELISA检测方法,优化了反应条件:确定待测样品包被条件为4℃过夜,封闭条件为5%脱脂奶37℃60 min,检测抗体工作浓度125 ng/mL 37℃孵育1 h,酶标抗体工作浓度500 ng/mL 37℃孵育1 h。该方法能够特异性识别感染SLV的珠葱叶片,不识别其他常见珠葱病毒,与RT-PCR方法比较,符合率94%,具有良好的稳定性和准确性。 展开更多
关键词 葱潜隐病毒 珠葱 多克隆抗体 间接ELISA
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网络著作权侵权规则的守正与创新——立法论与解释论的二元视角分析 被引量：5
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作者 孔祥俊 《政法论丛》 北大核心 2025年第2期36-52,共17页
网络著作权侵权规则是以“避风港”为标志,由通知删除、间接侵权、网络服务被动中立以及过错归责的“具体知情”“红旗标准”等构成的独特规则体系。环环相扣的具体规则和判断标准构造了各方利益折中妥协的公约数,承载了独有的网络著作... 网络著作权侵权规则是以“避风港”为标志,由通知删除、间接侵权、网络服务被动中立以及过错归责的“具体知情”“红旗标准”等构成的独特规则体系。环环相扣的具体规则和判断标准构造了各方利益折中妥协的公约数,承载了独有的网络著作权利益格局,最终实现著作权有限保护、网络服务提供者适当免责以及社会公众信息获取自由的利益平衡。随着巨型互联网平台的勃兴、算法和过滤等技术的发达以及AI生成等新型网络平台的出现,国内外均有废改“避风港”规则的理论讨论和实践变化,但总体上均未动摇现有的立法框架和利益格局。司法裁判要遵循立法与司法的边界,强化利益平衡思维,不宜以拥抱创新和加强保护为名,进行僭越司法权的恣意创新。凡属于体现法律界限并分配责任和风险的刚性侵权规则,都不是基于技术能力而酌情裁量的事项,不能通过采用“概括知情”、强化实施过滤和主动治理义务等方式,轻率改变法定的侵权治理范式和政策目标。 展开更多
关键词 信息网络传播权 避风港制度 间接侵权责任 事先审查过滤义务 网络著作权治理范式
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我国法院适用民商事条约的路径探析 被引量：1
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作者 李大朋 《法律科学(西北政法大学学报)》 北大核心 2025年第2期154-167,共14页
长期以来,我国法院适用民商事国际条约的路径不统一,且《中华人民共和国民法典》并未采纳《中华人民共和国民法通则》第142条的规定,这进一步引起理论争论与实践中的迷茫。总体上,法院采用直接适用路径是国际法“条约必须信守”原则的要... 长期以来,我国法院适用民商事国际条约的路径不统一,且《中华人民共和国民法典》并未采纳《中华人民共和国民法通则》第142条的规定,这进一步引起理论争论与实践中的迷茫。总体上,法院采用直接适用路径是国际法“条约必须信守”原则的要求,也是国内法的授权。法院对条约的适用是法院以条约作为审判案件的法律渊源对当事人依据条约提出的权利主张进行裁判的司法活动。在司法审判权范围内,除国家缔结或者参加民商事国际条约时作出相关保留、立法机关特别要求或者国内法特别规定等特殊(例外)情形外,我国法院原则上应直接根据特定民商事国际条约对特定案情进行识别;经识别,特定争议事项属于条约调整范围时,应直接援引条约进行裁判。 展开更多
关键词 民商事国际条约 间接适用路径 直接适用路径 识别 冲突规范
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增值税税率下调与产业链间接税税负差异——基于产业链投入产出表的分析 被引量：2
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作者 何代欣 刘诗阳 尹利伟 《产业经济评论》 2025年第1期91-107,共17页
增值税减税对企业的间接税税负影响巨大,但少有研究从产业链视角探究增值税减税对上下游企业的非对称影响。本文利用2018年我国增值税税率下调的政策冲击,采用双重差分模型研究增值税税率下调与制造业产业链的间接税税负变动的关系。本... 增值税减税对企业的间接税税负影响巨大,但少有研究从产业链视角探究增值税减税对上下游企业的非对称影响。本文利用2018年我国增值税税率下调的政策冲击,采用双重差分模型研究增值税税率下调与制造业产业链的间接税税负变动的关系。本文运用产业链投入产出表测算了制造业产业链的间接税负,发现在2018年增值税税率下调之前,上游制造业企业的间接税税负就比下游制造业企业高9%。基准回归结果表明,增值税税率下调具有非对称的减负效应,下游制造业企业的间接税税负比上游企业降低得更多(-0.36%),这导致产业链两端的税负差距继续扩大。进一步分析发现,行业集中度高的下游企业间接税税负减轻更多,居民消费率高的下游企业间接税负下降更明显。本文结论表明制定精准有效的减税政策需要考虑产业链税负差异,对上下游企业实施差异化策略。 展开更多
关键词 间接税税负 增值税税率 制造业产业链 投入产出表
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