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携带荧光蛋白UnaG的口蹄疫病毒复制子系统的构建及其鉴定
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作者 李雪彤 黄园园 +4 位作者 郭祥龙 张韵 孙世琪 郭慧琛 吴金恩 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第7期1411-1416,1436,共7页
为构建携带荧光蛋白(UnaG)的口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)亚基因组复制子系统,本研究以FMDV全长cDNA质粒为模板,通过双酶切去除FMDV的部分结构蛋白和非结构蛋白,应用表达绿色荧光蛋白UnaG的报告基因序列替换FMDV的... 为构建携带荧光蛋白(UnaG)的口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)亚基因组复制子系统,本研究以FMDV全长cDNA质粒为模板,通过双酶切去除FMDV的部分结构蛋白和非结构蛋白,应用表达绿色荧光蛋白UnaG的报告基因序列替换FMDV的部分结构蛋白基因序列,成功构建FMDV-UnaG复制子。经PCR和测序验证后,将线性化的FMDV-UnaG复制子转染至表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞,并采用荧光显微镜和激光共聚焦技术观测荧光信号。结果表明,构建的FMDV-UnaG复制子能够有效表达UnaG蛋白且该蛋白与FMDV的3A蛋白存在共定位现象。此外,通过Western blot和RT-qPCR也分别检测到该复制子RNA可以表达病毒的非结构蛋白并且在BSR/T7细胞中能够进行自主复制。总之,FMDV-UnaG亚基因组复制子的成功构建为后续深入研究FMDV的复制和翻译机制及发展疫苗载体等提供了有利工具。 展开更多
关键词 UnaG 口蹄疫病毒 复制子
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影响慢性肾脏病急性加重患者预后的尿相关生物标记物研究 被引量：2
2
作者 杜律律 王琴 +6 位作者 车霞静 张敏芳 王春林 谢园园 袁燕红 倪兆慧 牟姗 《中国中西医结合肾病杂志》 2017年第1期50-53,共4页
目的:明确慢性肾脏病急性加重患者预后相关危险因素,重点研究相关尿生物标志物的预测价值。方法:选择慢性肾脏病急性加重患者共115例,排除慢性肾脏病4~5级患者,最终入选108例慢性肾脏病1~3级患者,随访3个月后,观察比较其转归结局。根据... 目的:明确慢性肾脏病急性加重患者预后相关危险因素,重点研究相关尿生物标志物的预测价值。方法:选择慢性肾脏病急性加重患者共115例,排除慢性肾脏病4~5级患者,最终入选108例慢性肾脏病1~3级患者,随访3个月后,观察比较其转归结局。根据其临床预后将患者分为恢复患者和未恢复患者,比较两组患者基线肌酐水平、急性加重时肌酐水平、尿视黄醇结合蛋白、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶及尿白蛋白水平,采用Logistic回归统计方法,分析慢性肾脏病急性加重患者预后的独立危险因素。结果:随访3个月后,108例纳入患者中有43例患者肾功能得到恢复。和恢复组患者相比,未恢复组患者的年龄、基线肌酐水平、急性加重时肌酐水平、基线蛋白尿、尿视黄醇结合蛋白、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶及尿白蛋白水平明显升高(P<0.05)。单因素Logistic回归分析提示患者年龄、基线肌酐水平、急性加重时肌酐水平、尿视黄醇结合蛋白、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶及尿白蛋白水平是影响慢性肾脏病急性加重患者预后的相关因素。多因素Logistic回归分析提示矫正年龄、性别及血清肌酐后,尿视黄醇结合蛋白水平是影响慢性肾脏病急性加重患者预后的独立危险因素(HR 1.162,95%CI 1.036~1.303,P<0.05)。结论:尿视黄醇结合蛋白水平可以预测慢性肾脏病急性加重患者的肾功能恢复情况,是影响慢性肾脏病急性加重患者预后的独立危险因素。 展开更多
关键词 uRBP uNAG UALB A-on-C 预后研究
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日本鳗鲡UNAG蛋白的克隆及其在非结合胆红素检测中的应用
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作者 刘晋强 李增鹏 陈建明 《应用海洋学学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期413-417,共5页
血清中非结合胆红素含量升高与新生儿脑损伤的发展相关,但目前临床上没有方法可以直接测定非结合胆红素的血清水平.从日本鳗鲡(Anguilla japonica)中成功克隆了其UNAG基因,在原核细胞中成功表达UNAG重组蛋白,并通过Ni^(2+)-NTA进行纯化... 血清中非结合胆红素含量升高与新生儿脑损伤的发展相关,但目前临床上没有方法可以直接测定非结合胆红素的血清水平.从日本鳗鲡(Anguilla japonica)中成功克隆了其UNAG基因,在原核细胞中成功表达UNAG重组蛋白,并通过Ni^(2+)-NTA进行纯化得到含量为1.8 mg/cm^3的UNAG目的蛋白,银染检测说明其纯度较高.利用该基因可以与非结合胆红素结合并发光的特异性,设计了一种新型的非结合胆红素检测方法,结果表明UNAG发光值与胆红素浓度呈良好的线性关系,回归方程为Y=17.96 X+4.333 3(R=0.994 9).该法可用于胆红素浓度的测定. 展开更多
关键词 海洋生物学 胆红素 日本鳗鲡 UNAG基因 分子克隆 检测
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