近年来,一些不法商贩向抗疲劳、壮阳和调节免疫力等类别保健食品中非法添加磷酸二酯酶5型抑制剂(phosphodiesterase type 5 inhibitors,PDE5is),严重威胁消费者健康,为提高市场监管和筛查效率,亟需建立相关现场快速检测方法。该研究基...近年来,一些不法商贩向抗疲劳、壮阳和调节免疫力等类别保健食品中非法添加磷酸二酯酶5型抑制剂(phosphodiesterase type 5 inhibitors,PDE5is),严重威胁消费者健康,为提高市场监管和筛查效率,亟需建立相关现场快速检测方法。该研究基于表面增强拉曼光谱技术,以自制金溶胶为增强试剂,盐酸氯化钠溶液为匹配剂,使用乙腈和硫酸溶液进行样品前处理,建立了液体保健食品中90种非法添加PDE5is的筛查方法。该方法灵敏度高、准确性好,检出限为1~10μg/mL,为快速检测保健食品中非法添加药物提供了可靠的技术参考。展开更多
目的探讨心外膜脂肪厚度(epicardial fat thickness,EFT)、血清分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzled-related protein 5,SFRP5)、无翅型MMTV整合位点家族成员5a(winglesstype MMTV integration site family member 5a,Wnt5a)与急性S...目的探讨心外膜脂肪厚度(epicardial fat thickness,EFT)、血清分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzled-related protein 5,SFRP5)、无翅型MMTV整合位点家族成员5a(winglesstype MMTV integration site family member 5a,Wnt5a)与急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗后支架内再狭窄(in-stent restenosis,ISR)的关系。方法纳入128例接受急诊PCI的STEMI患者,随访12个月后根据冠状动脉造影结果分为非ISR组(80例)和ISR组(48例)。比较两组的一般资料,出院前及术后1个月EFT,术前及术后1个月血清SFRP5、Wnt5a水平,以及不同冠状动脉病变程度患者指标水平的差异。采用Pearson相关性分析,评估术后1个月EFT和血清SFRP5、Wnt5a水平的相关性。采用多因素Logistic回归分析,确定STEMI患者PCI术后发生ISR的危险因素。采用ROC曲线分析,评估EFT和血清SFRP5、Wnt5a水平对ISR的预测价值。结果ISR组出院前及术后1个月EFT均大于非ISR组;术后1个月血清SFRP5低于非ISR组,血清Wnt5a高于非ISR组(均P<0.01)。非ISR组术后1个月血清SFRP5较术前显著升高,而ISR组则显著降低;非ISR组术后1个月血清Wnt5a较术前轻度升高,ISR组则显著升高(均P<0.05)。3支病变组术后1个月血清SFRP5显著低于单支或2支病变组(P<0.05)。术后1个月EFT与SFRP5呈负相关,与Wnt5a呈正相关。单因素Logistic回归分析及校正年龄、BMI等因素后的Logistic回归分析均显示,术后1个月EFT、血清SFRP5和Wnt5a是ISR的独立影响因素。ROC曲线分析显示,三者联合检测的AUC值(0.906)高于单一指标检测。结论STEMI患者术后1个月EFT增大、血清SFRP5降低及Wnt5a升高与PCI术后ISR密切相关,早期检查有助于预测ISR,联合检测的预测价值更高。展开更多
为建立牛副流感病毒5型(BPIV5)的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR(qPCR)检测方法,本研究经PCR扩增BPIV5 L基因的保守片段,构建重组质粒p MD18-T-BPIV5,并经PCR、双酶切与测序鉴定正确后作为标准品,经各反应条件优化后初步建立检测BPIV5的qPCR...为建立牛副流感病毒5型(BPIV5)的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR(qPCR)检测方法,本研究经PCR扩增BPIV5 L基因的保守片段,构建重组质粒p MD18-T-BPIV5,并经PCR、双酶切与测序鉴定正确后作为标准品,经各反应条件优化后初步建立检测BPIV5的qPCR方法。利用10倍倍比稀释的质粒标准品作为模板,利用优化的qPCR扩增,建立该方法的标准曲线,结果显示,重组质粒标准品的拷贝数与其Ct值呈良好的线性关系,相关系数为0.998,扩增效率为1.09。以BPIV5、牛肠道病毒(BEV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛诺如病毒(BNOV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)和牛冠状病毒(BCOV)的cDNA作为模板,采用该qPCR扩增,评估该方法的特异性;以10倍倍比稀释的重组质粒标准品pMD18-T-BPIV5作为模板,利用本研究建立的qPCR方法扩增,评估该方法的敏感性;以3种不同浓度的质粒标准品作为模板,利用本研究建立的qPCR方法在同一时间和不同时间分别进行批内和批间重复性试验。结果显示,该方法仅能特异性扩增BPIV5,其他相关病毒均为阴性结果;对质粒标准品的检测限为6.43拷贝/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于2%。利用该方法和已发表的qPCR方法分别检测采自内蒙古东部部分牛场的80份鼻拭子样品,结果显示,两种方法对样品的阳性检测率均为10%(8/80),阴性样品的检测率均为90%(72/80),二者的阳性符合率和总符合率均达100%。本研究建立的检测BPIV5的qPCR方法特异性较强、敏感性较高、重复性较好,可以用于临床样品的检测,为BPIV5的检测和流行病学调查提供了一种新的检测手段。展开更多
文摘近年来,一些不法商贩向抗疲劳、壮阳和调节免疫力等类别保健食品中非法添加磷酸二酯酶5型抑制剂(phosphodiesterase type 5 inhibitors,PDE5is),严重威胁消费者健康,为提高市场监管和筛查效率,亟需建立相关现场快速检测方法。该研究基于表面增强拉曼光谱技术,以自制金溶胶为增强试剂,盐酸氯化钠溶液为匹配剂,使用乙腈和硫酸溶液进行样品前处理,建立了液体保健食品中90种非法添加PDE5is的筛查方法。该方法灵敏度高、准确性好,检出限为1~10μg/mL,为快速检测保健食品中非法添加药物提供了可靠的技术参考。
文摘目的探讨心外膜脂肪厚度(epicardial fat thickness,EFT)、血清分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzled-related protein 5,SFRP5)、无翅型MMTV整合位点家族成员5a(winglesstype MMTV integration site family member 5a,Wnt5a)与急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗后支架内再狭窄(in-stent restenosis,ISR)的关系。方法纳入128例接受急诊PCI的STEMI患者,随访12个月后根据冠状动脉造影结果分为非ISR组(80例)和ISR组(48例)。比较两组的一般资料,出院前及术后1个月EFT,术前及术后1个月血清SFRP5、Wnt5a水平,以及不同冠状动脉病变程度患者指标水平的差异。采用Pearson相关性分析,评估术后1个月EFT和血清SFRP5、Wnt5a水平的相关性。采用多因素Logistic回归分析,确定STEMI患者PCI术后发生ISR的危险因素。采用ROC曲线分析,评估EFT和血清SFRP5、Wnt5a水平对ISR的预测价值。结果ISR组出院前及术后1个月EFT均大于非ISR组;术后1个月血清SFRP5低于非ISR组,血清Wnt5a高于非ISR组(均P<0.01)。非ISR组术后1个月血清SFRP5较术前显著升高,而ISR组则显著降低;非ISR组术后1个月血清Wnt5a较术前轻度升高,ISR组则显著升高(均P<0.05)。3支病变组术后1个月血清SFRP5显著低于单支或2支病变组(P<0.05)。术后1个月EFT与SFRP5呈负相关,与Wnt5a呈正相关。单因素Logistic回归分析及校正年龄、BMI等因素后的Logistic回归分析均显示,术后1个月EFT、血清SFRP5和Wnt5a是ISR的独立影响因素。ROC曲线分析显示,三者联合检测的AUC值(0.906)高于单一指标检测。结论STEMI患者术后1个月EFT增大、血清SFRP5降低及Wnt5a升高与PCI术后ISR密切相关,早期检查有助于预测ISR,联合检测的预测价值更高。
文摘为建立牛副流感病毒5型(BPIV5)的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR(qPCR)检测方法,本研究经PCR扩增BPIV5 L基因的保守片段,构建重组质粒p MD18-T-BPIV5,并经PCR、双酶切与测序鉴定正确后作为标准品,经各反应条件优化后初步建立检测BPIV5的qPCR方法。利用10倍倍比稀释的质粒标准品作为模板,利用优化的qPCR扩增,建立该方法的标准曲线,结果显示,重组质粒标准品的拷贝数与其Ct值呈良好的线性关系,相关系数为0.998,扩增效率为1.09。以BPIV5、牛肠道病毒(BEV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛诺如病毒(BNOV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)和牛冠状病毒(BCOV)的cDNA作为模板,采用该qPCR扩增,评估该方法的特异性;以10倍倍比稀释的重组质粒标准品pMD18-T-BPIV5作为模板,利用本研究建立的qPCR方法扩增,评估该方法的敏感性;以3种不同浓度的质粒标准品作为模板,利用本研究建立的qPCR方法在同一时间和不同时间分别进行批内和批间重复性试验。结果显示,该方法仅能特异性扩增BPIV5,其他相关病毒均为阴性结果;对质粒标准品的检测限为6.43拷贝/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于2%。利用该方法和已发表的qPCR方法分别检测采自内蒙古东部部分牛场的80份鼻拭子样品,结果显示,两种方法对样品的阳性检测率均为10%(8/80),阴性样品的检测率均为90%(72/80),二者的阳性符合率和总符合率均达100%。本研究建立的检测BPIV5的qPCR方法特异性较强、敏感性较高、重复性较好,可以用于临床样品的检测,为BPIV5的检测和流行病学调查提供了一种新的检测手段。
