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题名大肠埃希菌trp operon的克隆与表达
被引量：1
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作者
林维平
刘晓影
武敬亮
高志芹
孙同毅
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机构
潍坊医学院基础医学部
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出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2008年第4期58-60,共3页
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文摘
色氨酸操纵子所表达酶的高效表达和酶活性的提高,从而构建高产色氨酸菌株。利用PCR的方法从大肠埃希菌基因组中直接克隆色氨酸操纵子,并将其连接到原核表达载体pBV220中,得到重组质粒pBV220-trp operon,转化大肠埃希菌DH5α,温度诱导重组蛋白表达,表达产物经SDS-PAGE分析并用比色法测定其活性。通过凝胶电泳观察PCR扩增产物大小约为7 kb,SDS-PAGE鉴定目的蛋白得到了高效表达,邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性分别比对照提高了3.4倍和2.5倍。成功构建了重组质粒pBV220-trp operon,邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的表达量和表达活性在大肠埃希菌中得到了提高,为高产色氨酸基因工程菌的构建奠定基础。
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关键词
TRP
operon
色氨酸
克隆
表达
邻氨基苯甲酸合成酶
色氨酸合成酶
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Keywords
try operon
tryptophane
clone
expression
anthranilate synthetase
tryptophane synthetase
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分类号
R378.21
[医药卫生—病原生物学]
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