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转基因耐除草剂大豆LP012-1转化体实时荧光定量PCR检测方法的研究
1
作者 张月秋 傅芳奇 +9 位作者 张华 陈一帆 王晨尧 蒋红叶 李亚辉 廖一尘 王丹 孙宇 付伟 陈红 《生物技术进展》 2025年第2期276-286,共11页
转化体标准化检测方法为生物育种产业化的应用和定量标识制度实施提供了重要的技术支撑。基于插入序列左边界的信息,以耐除草剂大豆LP012-1转化体为研究对象,建立了实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法。以外源... 转化体标准化检测方法为生物育种产业化的应用和定量标识制度实施提供了重要的技术支撑。基于插入序列左边界的信息,以耐除草剂大豆LP012-1转化体为研究对象,建立了实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法。以外源插入序列位点左边界为靶标序列设计引物及其相应的探针,筛选获得了最优的引物组合,并优化引物探针浓度和退火温度,确定线性动力学范围在0.018~100 ng,检出限和定量限分别为0.05%、0.10%;正确度、精密度、实验室内稳健性和实验室间的联合验证误差均小于25%。研究建立的qPCR检测方法特异性好、灵敏度高、稳健性强,可以为耐除草剂转基因大豆LP012-1的安全监管提供技术支撑,并服务于生物育种商业化。 展开更多
关键词 转基因大豆 实时荧光定量PCR lp012-1转化体
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转基因耐除草剂大豆LP012-1转化体普通PCR定性检测方法的研究
2
作者 张月秋 傅芳奇 +8 位作者 赵桐桐 陈子言 裴欣瑶 高芳瑞 李佳岢 李辉 江晓丹 王颢潜 陈红 《生物技术进展》 2025年第3期466-475,共10页
转基因耐除草剂大豆LP012-1转化体由我国企业自主研发,具有广阔的生物育种产业化应用前景。通过建立LP012-1转化体的定性检测方法,可为标识管理和安全监管提供有力支撑。基于此,从优化DNA提取方法、设计转化体特异性引物并优化引物浓度... 转基因耐除草剂大豆LP012-1转化体由我国企业自主研发,具有广阔的生物育种产业化应用前景。通过建立LP012-1转化体的定性检测方法,可为标识管理和安全监管提供有力支撑。基于此,从优化DNA提取方法、设计转化体特异性引物并优化引物浓度和退火温度、验证方法特异性、测试检出限以及其稳健性等方面构建LP012-1转化体的普通PCR定性检测方法。研究建立了灵敏度高、特异性好的LP012-1转化体检测方法,填补了该转化体定性检测方法的空白,可为后期的规范管理和推广应用提供支持。 展开更多
关键词 转基因耐除草剂大豆 PCR定性检测 lp012-1转化体
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