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睾丸酮丛毛单胞菌teiR基因插入失活突变体构建及降解特性分析 被引量:3
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作者 陈建秋 潘大仁 +3 位作者 艾育芳 周以飞 潘菲 林彬辉 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期830-834,共5页
睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)是革兰氏阴性菌,能够以各种类固醇化合物作为唯一碳源和能源,生物信息学分析发现睾丸酮丛毛单胞菌teiR基因编码蛋白属于LuxR-type转录调控蛋白.利用同源重组原理构建teiR基因插入失活突变体C.m... 睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)是革兰氏阴性菌,能够以各种类固醇化合物作为唯一碳源和能源,生物信息学分析发现睾丸酮丛毛单胞菌teiR基因编码蛋白属于LuxR-type转录调控蛋白.利用同源重组原理构建teiR基因插入失活突变体C.mut,初步研究了teiR基因在类固醇代谢途径中的作用,以及对睾丸酮丛毛单胞菌关键降解酶3a-HSD/CR的表达影响.结果发现,teiR基因插入失活突变体C.mut在LB培养基中的生长速率不受影响,突变体C.mut抑制了teiR基因和关键降解酶3a-HSD/CR的表达,同时突变体C.mut丧失了以睾丸酮作为碳源进行生长的能力.结果表明teiR基因调节睾丸酮丛毛单胞菌类固醇代谢,同时teiR基因表达对3a-HSD/CR基因的表达是必需的. 展开更多
关键词 睾丸酮丛毛单胞菌 teir基因 同源重组 降解酶3a-HSD/CR类固醇 类固醇
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TeiR融合蛋白分离及多克隆抗体的制备
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作者 陈建秋 艾育芳 +4 位作者 潘大仁 周以飞 潘菲 林彬辉 郭玉春 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第3期255-259,共5页
提取睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)基因组DNA,PCR扩增teiR基因,将扩增产物克隆到pET28a中,经酶切验证后获得teiR基因表达载体pET28a-teiR.将重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,添加终浓度为1 mmol.L-1的IPTG进行... 提取睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)基因组DNA,PCR扩增teiR基因,将扩增产物克隆到pET28a中,经酶切验证后获得teiR基因表达载体pET28a-teiR.将重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,添加终浓度为1 mmol.L-1的IPTG进行诱导,提取细菌总蛋白进行蛋白的SDS-PAGE电泳.并根据融合蛋白特性,利用Ni-NTA Spin Column对TeiR融合蛋白进行分离纯化,经分离纯化后的重组蛋白在SDS-PAGE上呈现出单一条带.进一步以获得的TeiR融合蛋白为抗原,制备兔抗TeiR多克隆抗体,经ELISA测定该抗体的效价为1∶10000,该抗体与睾丸酮丛毛单胞菌天然TeiR蛋白反应良好,说明该抗体特异性良好. 展开更多
关键词 睾丸酮丛毛单胞菌 teir SDS—PAGE 多克隆抗体
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基于管理与环境视角的中国旅游效率研究 被引量:19
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作者 王慧英 《旅游科学》 CSSCI 2014年第5期31-40,53,共11页
从管理和环境的角度对区域旅游产业效率进行分析,测算全要素旅游管理效率和旅游环境影响率,判断究竟是内生变量还是外生环境影响了全要素旅游效率的高低,有助于旅游资源利用方式的优化和产业管理效率的提高。本文利用四阶段DEA模型... 从管理和环境的角度对区域旅游产业效率进行分析,测算全要素旅游管理效率和旅游环境影响率,判断究竟是内生变量还是外生环境影响了全要素旅游效率的高低,有助于旅游资源利用方式的优化和产业管理效率的提高。本文利用四阶段DEA模型对剔除环境因素影响的我国区域旅游效率进行实证分析,研究结果表明,2005~2009年我国旅游效率水平总体偏低,旅游业发展管理都是无效的;现阶段旅游效率的提升主要是依赖外生环境的改善,管理效率的提升明显不足;区域间全要素旅游效率、全要素旅游管理效率和旅游环境影响率之间存在明显的区域差异,东部地区全要素旅游效率明显高于中部与西部地区。从提高旅游业管理水平和改善旅游业外部环境方面提出不同区域提高旅游业效率的发展对策:北京、天津、江苏等应重点改善区域旅游管理能力;河北、辽宁、新疆等应从管理和环境两个层面推进;山西、内蒙古和黑龙江等应重点优化外部环境。 展开更多
关键词 DEA四阶段模型 区域 全要素旅游效率 全要素旅游管理效率 旅游环境影响率
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