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基于糖谱法的制远志炮制前后多糖结构特征分析及抗氧化活性评价
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作者 胡美变 王瑶 +5 位作者 高奎旭 王静雅 彭溪 邓巧玲 王治焜 刘玉杰 《中国医院药学杂志》 北大核心 2025年第16期1832-1839,共8页
目的:通过多糖结构特征分析及体外抗氧化活性评价,探讨甘草汁煮制对远志多糖的影响。方法:制备远志、清水制远志、甘草制远志及甘草多糖,测定多糖相对分子质量分布和红外光谱(Fourier transform infrared,FT-IR)特征,采用糖谱法对多糖... 目的:通过多糖结构特征分析及体外抗氧化活性评价,探讨甘草汁煮制对远志多糖的影响。方法:制备远志、清水制远志、甘草制远志及甘草多糖,测定多糖相对分子质量分布和红外光谱(Fourier transform infrared,FT-IR)特征,采用糖谱法对多糖部分酸水解和酶解分析多糖的糖苷键结构特征,通过多糖完全酸水解测定多糖的单糖组成。同时,以2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid,ABTS)和2,2-联苯基-1-苦基肼基(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除实验评价体外抗氧化活性。结果:生远志与清水制远志多糖相对分子质量分布相似,而甘草制远志多糖有明显差异(10~15 min色谱峰强度增强);各样品多糖FT-IR图谱之间差异较小。糖谱法分析结果表明,生远志和清水制远志多糖水(酶)解得到的寡糖片段基本一致,而甘草制远志多糖差异明显。生远志和清水制远志多糖的单糖组成相同,摩尔比相似,而甘草制远志多糖的葡萄糖物质的量之比相比生远志多糖明显增加。与生远志多糖相比,清水制远志多糖的ABTS和DPPH自由基清除活性显著降低(P<0.01),而甘草制远志多糖活性显著增强(P<0.01)。结论:远志炮制过程中辅料甘草汁酸性加热环境和甘草多糖的引入使甘草制远志多糖的结构特征发生变化,增强了其对ABTS和DPPH自由基的清除活性,有利于阐明远志的炮制原理,为其临床应用提供依据。 展开更多
关键词 远志 炮制 糖谱法 多糖结构 抗氧化活性
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花椒多糖抗阿尔茨海默病作用及其糖谱法结构特征分析 被引量：7
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作者 胡美变 孟祥龙 +2 位作者 王璞 张朔生 刘玉杰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期174-182,共9页
目的:建立阿尔茨海默病(AD)小鼠模型,评价花椒多糖对AD的治疗作用并采用糖谱法分析其结构特征。方法:采用腹腔注射D-半乳糖联合灌胃三氯化铝建立快速衰老的AD小鼠模型,通过Morris水迷宫实验评价小鼠的学习记忆能力,苏木素-伊红(HE)染色... 目的:建立阿尔茨海默病(AD)小鼠模型,评价花椒多糖对AD的治疗作用并采用糖谱法分析其结构特征。方法:采用腹腔注射D-半乳糖联合灌胃三氯化铝建立快速衰老的AD小鼠模型,通过Morris水迷宫实验评价小鼠的学习记忆能力,苏木素-伊红(HE)染色和尼氏染色观察小鼠脑组织病理学状况和神经元损伤情况。对花椒多糖进行酸水解和不同糖苷酶酶解后,采用高效薄层色谱法(HPTLC)和荧光辅助凝胶电泳法(PACE)分析水解产物的结构特征。HPTLC色谱条件为采用硅胶60高效薄层色谱板,点样量5μL,展开剂乙酸乙酯-冰乙酸-水(2∶2∶1),展开2次,苯胺-二苯胺-磷酸溶液显色,在105℃加热10 min后日光下检视。PACE检测条件为34%分离胶和8%浓缩胶,电泳缓冲液为0.1 mol·L^(-1)三羟甲基氨基甲烷(Tris)-硼酸缓冲液(pH 8.2),电泳在0℃环境下进行,上样量3~6μL,用15 mA恒流跑至样品达凝胶前端,紫外灯365 nm下检视。结果:Morris水迷宫实验结果表明,花椒多糖明显改善了AD模型小鼠的学习和记忆能力,逃避潜伏期缩短,穿梭平台次数和目标象限停留时间明显增加。组织病理学实验结果表明,花椒多糖能改善AD小鼠海马组织CA1、CA3区的病理情况和神经元的损伤,且尼氏小体数量明显增加。糖谱法分析结果表明,HPTLC和PACE分析结果基本一致,花椒多糖主要能被纤维素酶和果胶酶催化酶解成小分子糖类,表明其主要含有β-1,4-葡萄糖苷键和α-1,4-半乳糖醛酸苷键,能被葡聚糖酶、β-半乳糖苷酶和β-甘露糖酶少量酶解,表明其含有少量α-1,6-葡萄糖苷键、β-吡喃半乳糖苷键和β-1,4-甘露糖苷键。结论:花椒多糖对AD小鼠有明显治疗作用,其结构中主要含有β-1,4-葡萄糖苷键和α-1,4-半乳糖醛酸苷键,可为中药多糖的结构解析提供有益借鉴。 展开更多
关键词 花椒多糖 阿尔茨海默病(AD) 糖谱法 糖苷酶 高效薄层色谱法(HPTLC) 荧光辅助凝胶电泳法(PACE)
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