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stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒3种方法检测产志贺毒素大肠埃希菌的评估 被引量:5
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作者 白莉 胡豫杰 +7 位作者 王佳慧 吴青 赫英英 王伟 甘辛 韩春卉 李凤琴 徐进 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期797-804,共8页
目的评价stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒3种方法在检测产志贺毒素大肠埃希菌的特异性和敏感性的差异。方法运用stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒分别对29株大肠埃希菌参考菌株和45株食品分离大肠埃希菌... 目的评价stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒3种方法在检测产志贺毒素大肠埃希菌的特异性和敏感性的差异。方法运用stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒分别对29株大肠埃希菌参考菌株和45株食品分离大肠埃希菌株进行检测。结果 stx-PCR方法可以判定50株菌携带stx基因,同时Vero细胞毒性试验可以判定这些菌株具有细胞毒性,两者的一致性为100%;酶联免疫试剂盒能判定其中38株菌具有志贺毒素。结论 3种方法都具有很好的特异性。stx-PCR方法和Vero细胞毒性试验较酶联免疫试剂盒具有更高的敏感性,试剂盒适用于食源性疾病暴发事件中产志贺毒素大肠埃希菌的快速筛选,stxPCR方法推荐作为实验室常规快速检测方法,Vero细胞毒性试验是检测产志贺毒素大肠埃希菌是否具有志贺毒素生物学活性的金标准方法。 展开更多
关键词 产志贺毒素大肠埃希菌 志贺毒素 stx-pcr Vero细胞毒性试验 酶联免疫试剂盒
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检测产志贺毒素大肠杆菌的菌落PCR方法 被引量:8
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作者 李睿 许芳 +2 位作者 张忠美 宫本敬久 朱廷恒 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第16期258-260,共3页
针对产志贺毒素大肠杆菌的毒力基因stx设计特异性引物,并建立一种菌落PCR方法。菌落PCR模拟实验证实,该方法特异性强,能良好的扩增出O157的stx1和stx2基因,而普通大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌则无PCR扩增产物。应用分子检测... 针对产志贺毒素大肠杆菌的毒力基因stx设计特异性引物,并建立一种菌落PCR方法。菌落PCR模拟实验证实,该方法特异性强,能良好的扩增出O157的stx1和stx2基因,而普通大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌则无PCR扩增产物。应用分子检测初筛、选择性培养、菌落PCR相结合的方法,检测实际食品样品,分离检测到一株携带stx1的产志贺毒素大肠杆菌。本实验建立的菌落PCR方法可应用于食品检验。 展开更多
关键词 产志贺毒素大肠杆菌 食品检验 stx基因 菌落PCR
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PCR Detection of Virulence Genes Colv,Stxs and HlyE of Escherichia coli 被引量:3
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作者 史秋梅 张艳英 +5 位作者 高桂生 高光平 刘玉芹 房海 陈翠珍 沈庆鹏 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第10期2044-2047,共4页
[Objective] This study aimed to explore the presence of three causative genes Colv,Stxs and HlyE of the pathogenic E.coli from chickens,pigs and food.[Method] By using 44 E.coli strains from chickens,24 from pigs and ... [Objective] This study aimed to explore the presence of three causative genes Colv,Stxs and HlyE of the pathogenic E.coli from chickens,pigs and food.[Method] By using 44 E.coli strains from chickens,24 from pigs and 26 from food as the experimental materials,virulence genes Colv,Stxs(stx2,stx2e) and HlyE were detected with polymerase chain reaction(PCR) method.[Result] Among all the E.coli strains,the detection rate of Colv was 25% from chickens,4.2% from pigs,and 0 from food;the detection rate of Stx2(Stx2e) from all E.coli strains was 0;the detection rate of HlyE was 2.27% from chickens,0 from pigs,and 11.5% from food.[Conclusion] Virulence gene Colv shows relatively high carrying rate in E.coli from chickens and pigs;HlyE also shows a certain degree of presence in E.coli from chickens and food. 展开更多
关键词 Escherichia coli Virulence gene Colv stx2 stx2e HlyE PCR
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多重PCR方法快速检测E.coli O_(157)毒力及rfbEO_(157)基因 被引量:1
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作者 汪皓秋 孟冬梅 +2 位作者 张蔚 王衡 施世锋 《中国卫生检验杂志》 CAS 2004年第3期285-286,共2页
〔目的〕探索一种快速、特异的检测大肠埃希菌O1 57的多重PCR(multiplexPCR)方法。〔方法〕选用针对大肠埃希菌O1 57志贺样毒素 1、2 (stx1、stx2 )基因、溶血素 (hlyA)基因、粘附抹平因子 (eae)基因和O1 57特异性基因 (rfbEO1 57)的 5... 〔目的〕探索一种快速、特异的检测大肠埃希菌O1 57的多重PCR(multiplexPCR)方法。〔方法〕选用针对大肠埃希菌O1 57志贺样毒素 1、2 (stx1、stx2 )基因、溶血素 (hlyA)基因、粘附抹平因子 (eae)基因和O1 57特异性基因 (rfbEO1 57)的 5对引物 ,在同一扩增体系中进行PCR ,检测 9株不同来源的O1 57和其他大肠埃希菌 2 1株。〔结果〕通过优化多重PCR反应条件和循环参数 ,5对特异性引物只扩增相应的基因片段 ,检测结果与应用常规PCR获得的结果一致。〔结论〕该多重PCR方法能够在一次扩增中同时反应待测菌株是否为大肠埃希菌O1 57及其携带毒力基因的情况 ,可为大肠埃希菌O1 57的诊断及流行病学调查提供一种简便、经济、快速的检测手段。 展开更多
关键词 PCR方法 E.COLI O157毒力 rfbEO157基因 基因片段 流行病学
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多重PCR方法检测EHEC和EPEC毒力基因 被引量:4
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作者 潘劲草 邵浙新 +1 位作者 黄志成 孟冬梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期52-55,共4页
目的 建立简易实用的检测EHEC和EPEC多种毒力基因的方法。方法 应用多重PCR同时检测大肠埃希菌菌株的stx1、stx2、EPEC和EHEC共同的eaeA(eaeA -gen)等靶基因 ;用常规PCR检测EHECO15 7特异的eaeA(eaeA -O15 7)基因 ,以区分EHEC和EPEC的... 目的 建立简易实用的检测EHEC和EPEC多种毒力基因的方法。方法 应用多重PCR同时检测大肠埃希菌菌株的stx1、stx2、EPEC和EHEC共同的eaeA(eaeA -gen)等靶基因 ;用常规PCR检测EHECO15 7特异的eaeA(eaeA -O15 7)基因 ,以区分EHEC和EPEC的eaeA基因。结果 对分别分离自美国和我国江苏的EHECO15 7菌株以MPCR检测 ,stx1、stx2和eaeA -gen基因均阳性 ,同时常规PCR扩增eaeA -O15 7也阳性。在 8株分离自杭州的志贺毒素阴性的大肠埃希菌O15 7菌株中 ,stx1、stx2和eaeA -O15 7基因均阴性 ,仅 2株扩增出EPECeaeA基因。在 2 8株EPEC血清型、12株ETEC血清型、12株EIEC血清型大肠埃希菌菌株中 ,stx1和stx2基因均阴性 ;3株EPEC血清型菌株eaeA - gen基因阳性。结论 MPCR技术可同时检测菌株的stx1、stx2和eaeA基因 ,可为EHEC和EPEC感染的诊断及流行病学调查 ,提供一种简便、实用。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 毒力基因 聚合酶链反应
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