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家蚕谷光甘肽-S-转移酶GSTe3基因的鉴定及其真核表达 被引量:5
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作者 潘敏慧 许湲 +4 位作者 余泉友 刘佳 刘迪 赵丹红 鲁成 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期873-880,共8页
【目的】谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathiones S-tansferases,GSTs)是一类由多基因编码的多功能同工酶超家族,在解毒内源和外源性有毒物质中起着重要作用,家蚕GSTs的研究,可为解析家蚕解毒机制奠定基础。【方法】利用生物信息学和分子生物... 【目的】谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathiones S-tansferases,GSTs)是一类由多基因编码的多功能同工酶超家族,在解毒内源和外源性有毒物质中起着重要作用,家蚕GSTs的研究,可为解析家蚕解毒机制奠定基础。【方法】利用生物信息学和分子生物学方法克隆和分析家蚕GSTe3(BmGSTe3),利用RT-PCR分析该基因在家蚕体内的表达情况,利用重组杆状病毒真核表达系统在sf9细胞中真核表达BmGSTe3。【结果】在家蚕中克隆了家蚕的GSTe3,该基因由5个外显子与4个内含子组成,外显子总长度为512bp,属于昆虫特异的Epsilon家族。BmGSTe3包含N-末端和C-末端2个结构域,N-末端由β-α-β-α-β-β-α共7个结构基序组成,而C-末端则由5个α螺旋构成,在启动子上游2500bp区域内共发现了15个可能的转录调控元件。BmGSTe3的表达具有较高的组织特异性,它只在家蚕血液和头部表达。BmGSTe3在sf9细胞中表达的BmGSTe3蛋白具有较好的GSTs酶活性。【结论】BmGSTe3属于昆虫特异的Epsilon家族,其蛋白具有较好的GSTs酶活性。 展开更多
关键词 家蚕 Bm6ste3 真核表达 GSTs酶活
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ste3与ste4基因双敲除对依博素生物合成的影响
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作者 白利平 姜蓉 +2 位作者 郭连宏 张洋 李元 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期23-28,共6页
目的:以往研究已确定链霉菌胞外多糖依博素的生物合成基因簇(ste),生物信息学分析基因簇中ste3和ste4编码糖转运相关膜蛋白,现研究分析ste3和ste4与依博素生物合成的相关性。方法:通过基因同源重组双交换获得ste3和ste4双基因缺失突变株... 目的:以往研究已确定链霉菌胞外多糖依博素的生物合成基因簇(ste),生物信息学分析基因簇中ste3和ste4编码糖转运相关膜蛋白,现研究分析ste3和ste4与依博素生物合成的相关性。方法:通过基因同源重组双交换获得ste3和ste4双基因缺失突变株,经Southern杂交验证后,对该菌株进行了基因互补研究。分离提取各菌株发酵液的胞外多糖,并计算产量。结果:双基因缺失株产生的胞外多糖依博素与野生株相比,产量从319mg/L降低至153mg/L,平均产量降低52%以上;基因互补后,依博素平均产量上升到299mg/L,基本恢复至野生株依博素产量水平。结论:本研究首次阐明了编码糖转运相关膜蛋白基因ste3和ste4在依博素的生物合成中起重要作用,为研究链霉菌139的初级代谢和次级代谢之间的相关性奠定了基础。 展开更多
关键词 链霉菌 基因双敲除 ste3 ste4 依博素
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大鼠脊髓损伤组织中Mst3b和NF-200的表达及意义 被引量:1
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作者 杨文君 吕刚 《江苏医药》 CAS 北大核心 2013年第3期272-274,共3页
目的研究大鼠脊髓损伤组织中哺乳动物ste20样蛋白激酶3b(Mst3b)和神经丝蛋白200(NF-200)的表达及其意义。方法 64只SD大鼠随机均分为假手术组(B组)、单纯损伤组(C组)、肌苷治疗组(D)组、6-硫代鸟嘌呤组(E组);另选4只大鼠作为正常对照(A... 目的研究大鼠脊髓损伤组织中哺乳动物ste20样蛋白激酶3b(Mst3b)和神经丝蛋白200(NF-200)的表达及其意义。方法 64只SD大鼠随机均分为假手术组(B组)、单纯损伤组(C组)、肌苷治疗组(D)组、6-硫代鸟嘌呤组(E组);另选4只大鼠作为正常对照(A组)。术后3、7、14、28d,用免疫组化法检测Mst3b和NF-200表达,BBB评分法对各组大鼠左后肢进行评分。结果 A组大鼠脊髓中Mst3b、NF-200无表达,其余各组术后7d的Mst3b阳性表达率最高,14d的NF-200阳性表达率最高(P<0.01)。与C组相比,D组Mst3b、NF-200表达及BBB评分明显增加(P<0.01),而E组各指标显著减少(P<0.05)。Mst3b与NF-200表达呈正相关(r=0.864,P<0.01)。结论 Mst3b、NF-200可能在脊髓损伤修复过程中起重要作用。 展开更多
关键词 脊髓损伤 哺乳动物ste20样蛋白激酶3b 神经丝蛋白200 神经再生
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大鼠脊髓损伤模型脊髓组织中Mst3b、GAP-43的表达及意义
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作者 杨文君 吕刚 梅晰凡 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第10期27-28,共2页
目的观察大鼠损伤脊髓组织中哺乳动物ste20样蛋白激酶3b(Mst3b)、神经生长相关蛋白43(GAP-43)的表达变化,探讨其意义。方法 68只SD大鼠,取4只作正常对照(A组),余随机均分为假手术(B)组、单纯损伤(C)组、肌苷治疗(D)组和6-硫代鸟嘌呤(6-T... 目的观察大鼠损伤脊髓组织中哺乳动物ste20样蛋白激酶3b(Mst3b)、神经生长相关蛋白43(GAP-43)的表达变化,探讨其意义。方法 68只SD大鼠,取4只作正常对照(A组),余随机均分为假手术(B)组、单纯损伤(C)组、肌苷治疗(D)组和6-硫代鸟嘌呤(6-TG,E)组。C、D、E组建立大鼠脊髓半横断损伤模型,B组只咬除棘突及椎板不损伤脊髓。各组分别于术后3、7、14、28 d采用免疫组化SP法检测脊髓中的Mst3b和GAP43蛋白。采用BBB运动功能评分法评定术后各时点C、D、E组动物左右肢功能。结果 A组大鼠脊髓组织中Mst3b、GAP-43无表达,B组极少表达,C、D、E组有明显表达(P均<0.01);Mst3b、GAP-43分别在术后7、14 d表达率最高,与大鼠左右肢功能的恢复趋势一致(P均<0.01);Mst3b与GAP-43的表达呈正相关(r=0.804,P<0.01)。大鼠左右肢BBB评分D组高于C组,C组高于E组(P均<0.01)。结论 Mst3b、GAP-43在大鼠正常脊髓组织中无表达,在损伤脊髓组织中表达明显,且二者表达呈正相关关系。Mst3b、GAP-43可能在脊髓损伤修复过程中起重要作用。 展开更多
关键词 脊髓损伤 哺乳动物ste20样蛋白激酶3b 生长相关蛋白-43 神经再生
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