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鸡白痢沙门菌ssaV基因缺失株的构建及其生物学特性分析
被引量：
1
1
作者
徐冠冰
王利平
+8 位作者
崔素宁
张震
梁雪瑞
赵洁
段艳红
潘鹏涛
李雪华
殷俊磊
职丽娟
《河南农业科学》
北大核心
2021年第11期139-145,共7页
为探究ssaV基因对鸡白痢沙门菌致病性的影响,利用同源重组技术,以pKD3质粒为模板,设计同源臂,扩增外源线性DNA片段,将该片段电转化入含有pKD46的鸡白痢沙门菌C79-13,丢失pKD46后,获得重组菌C79-13ΔssaV∶∶Cm,将pCP20导入该重组菌,通...
为探究ssaV基因对鸡白痢沙门菌致病性的影响,利用同源重组技术,以pKD3质粒为模板,设计同源臂,扩增外源线性DNA片段,将该片段电转化入含有pKD46的鸡白痢沙门菌C79-13,丢失pKD46后,获得重组菌C79-13ΔssaV∶∶Cm,将pCP20导入该重组菌,通过筛选获得ssaV基因缺失株C79-13ΔssaV,同时构建其回补株C79-13ΔssaV(pBR322-ssaV),并对突变株C79-13ΔssaV的生长特性和生化特性、遗传稳定性及毒力等基本生物学特征进行分析。PCR扩增和测序结果显示,成功构建了缺失株C79-13ΔssaV,野生株C79-13、缺失株C79-13ΔssaV和回补株C79-13ΔssaV(pBR322-ssaV)呈现出一致的生长特性和生化特性,突变株C79-13ΔssaV的遗传稳定性良好,其在雏鸡体内的定殖能力降低,且口服攻毒后,缺失株C79-13ΔssaV对雏鸡半数致死量(LD50)至少是野生株(C79-13)的100倍。以上结果表明,ssaV基因与鸡白痢沙门菌的致病性相关,其缺失会明显降低鸡白痢沙门菌的毒力。
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关键词
鸡白痢沙门菌
ssav
基因
基因缺失
生长特性
毒力
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职称材料
沙门菌△aroC△ssaV株作为疫苗或载体
2
作者
侯亚莉
王亲民
《生物制品快讯》
2004年第3期9-10,共2页
关键词
沙门菌
△aroC△
ssav
株
疫苗
载体
菌株
暂未订购
一种基于温敏质粒的新型基因敲除方法
被引量：
2
3
作者
姜娜
王艳春
+2 位作者
马志宏
罗琳
刘纯杰
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期85-89,共5页
基于温敏型质粒而不用线性DNA的方法用于快速敲除沙门氏菌染色体上的目的基因。以伤寒沙门氏菌S.ty2基因组为模板扩增得到的ssaV基因的上下游同源臂,与两端带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段连接到温敏型质粒pHY304,共同构建同源重组载...
基于温敏型质粒而不用线性DNA的方法用于快速敲除沙门氏菌染色体上的目的基因。以伤寒沙门氏菌S.ty2基因组为模板扩增得到的ssaV基因的上下游同源臂,与两端带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段连接到温敏型质粒pHY304,共同构建同源重组载体;然后转化S.ty2,通过筛选得到带有抗性标记的重组菌。通过转入重组酶表达质粒pCP20,去除抗性标记,得到ssaV基因缺失的重组菌,并在DNA水平进行了鉴定。建立了一种改进的基于温敏质粒的沙门氏菌的基因敲除方法,此方法也值得在其他革兰氏阴性菌的基因敲除中尝试应用。
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关键词
伤寒沙门氏菌
温敏质粒
λRed重组系统
ssav
基因敲除
原文传递
题名
鸡白痢沙门菌ssaV基因缺失株的构建及其生物学特性分析
被引量：
1
1
作者
徐冠冰
王利平
崔素宁
张震
梁雪瑞
赵洁
段艳红
潘鹏涛
李雪华
殷俊磊
职丽娟
机构
新乡学院医学院
新乡学院生命科学与基础医学学院
出处
《河南农业科学》
北大核心
2021年第11期139-145,共7页
基金
河南省自然科学基金项目(202300410014)。
文摘
为探究ssaV基因对鸡白痢沙门菌致病性的影响,利用同源重组技术,以pKD3质粒为模板,设计同源臂,扩增外源线性DNA片段,将该片段电转化入含有pKD46的鸡白痢沙门菌C79-13,丢失pKD46后,获得重组菌C79-13ΔssaV∶∶Cm,将pCP20导入该重组菌,通过筛选获得ssaV基因缺失株C79-13ΔssaV,同时构建其回补株C79-13ΔssaV(pBR322-ssaV),并对突变株C79-13ΔssaV的生长特性和生化特性、遗传稳定性及毒力等基本生物学特征进行分析。PCR扩增和测序结果显示,成功构建了缺失株C79-13ΔssaV,野生株C79-13、缺失株C79-13ΔssaV和回补株C79-13ΔssaV(pBR322-ssaV)呈现出一致的生长特性和生化特性,突变株C79-13ΔssaV的遗传稳定性良好,其在雏鸡体内的定殖能力降低,且口服攻毒后,缺失株C79-13ΔssaV对雏鸡半数致死量(LD50)至少是野生株(C79-13)的100倍。以上结果表明,ssaV基因与鸡白痢沙门菌的致病性相关,其缺失会明显降低鸡白痢沙门菌的毒力。
关键词
鸡白痢沙门菌
ssav
基因
基因缺失
生长特性
毒力
Keywords
Salmonella pullorum
ssav
gene
Gene deletion
Growth characteristics
Virulence
分类号
S855.1 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
沙门菌△aroC△ssaV株作为疫苗或载体
2
作者
侯亚莉
王亲民
出处
《生物制品快讯》
2004年第3期9-10,共2页
关键词
沙门菌
△aroC△
ssav
株
疫苗
载体
菌株
分类号
R378.22 [医药卫生—病原生物学]
暂未订购
题名
一种基于温敏质粒的新型基因敲除方法
被引量：
2
3
作者
姜娜
王艳春
马志宏
罗琳
刘纯杰
机构
北京市农林科学院北京市水产科学研究所
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期85-89,共5页
文摘
基于温敏型质粒而不用线性DNA的方法用于快速敲除沙门氏菌染色体上的目的基因。以伤寒沙门氏菌S.ty2基因组为模板扩增得到的ssaV基因的上下游同源臂,与两端带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段连接到温敏型质粒pHY304,共同构建同源重组载体;然后转化S.ty2,通过筛选得到带有抗性标记的重组菌。通过转入重组酶表达质粒pCP20,去除抗性标记,得到ssaV基因缺失的重组菌,并在DNA水平进行了鉴定。建立了一种改进的基于温敏质粒的沙门氏菌的基因敲除方法,此方法也值得在其他革兰氏阴性菌的基因敲除中尝试应用。
关键词
伤寒沙门氏菌
温敏质粒
λRed重组系统
ssav
基因敲除
Keywords
Salmonella Typhi Temperature sensitive plasmid λRed recombination system
ssav
Gene knockout
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡白痢沙门菌ssaV基因缺失株的构建及其生物学特性分析
徐冠冰
王利平
崔素宁
张震
梁雪瑞
赵洁
段艳红
潘鹏涛
李雪华
殷俊磊
职丽娟
《河南农业科学》
北大核心
2021
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
沙门菌△aroC△ssaV株作为疫苗或载体
侯亚莉
王亲民
《生物制品快讯》
2004
0
暂未订购
3
一种基于温敏质粒的新型基因敲除方法
姜娜
王艳春
马志宏
罗琳
刘纯杰
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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