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题名sikFBA4基因启动子的克隆及低温表达模式分析
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作者
张尧
李忠晴
王爱英
祝建波
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机构
农业生物技术重点实验室
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出处
《草业学报》
CSCD
北大核心
2018年第12期199-207,共9页
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基金
国家自然基金项目(31360053)资助。
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文摘
天山雪莲生长于常年积雪覆盖高海拔处的高山区域,具有很强的极端低温生境适应能力,属于研究植物低温适应的良好模式植物。前期的研究表明,sikFBA4基因可以显著提高番茄的抗寒能力。为进一步研究sikFBA4基因的耐寒响应模式,以天山雪莲为材料,采用实时荧光定量PCR分析sikFBA4在低温胁迫下的表达模式;利用高效热不对称PCR法(Hi-Tail PCR)克隆sikFBA4启动子序列并进行生物信息学分析。为分析PsikFBA4序列克隆的完整性及转录表达特性,将PsikFBA4与GUS基因融合在烟草中进行瞬时表达。结果表明,sikFBA4在低温胁迫条件下的表达发生瞬时显著上调,并在1h达到峰值,而后表达下调。通过启动子克隆分析,在PsikFBA4序列-1648bp位置处具有冷响应元件LTRE;进一步的GUS染色和酶活力测定结果表明,低温能够显著提高GUS基因的表达活性,说明sikFBA4属于低温诱导型基因。SikFBA4基因启动子的克隆、序列分析以及表达分析,为进一步探究雪莲果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(sikFBAs)基因的表达与调控机制奠定了基础。
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关键词
天山雪莲
sikfba4
高效热不对称PCR
启动子
GUS
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Keywords
Saussurea involucrata
sikfba4
Hi-Tail PCR
promoter
GUS
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分类号
Q943.2
[生物学—植物学]
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