期刊文献+
共找到189篇文章
< 1 2 10 >
每页显示 20 50 100
应用DNA shuffling及T7噬菌体展示技术定向进化并筛选鉴定sCD74突变体 被引量:2
1
作者 臧家涛 李淑慧 +2 位作者 李鹏 陈安 胡川闽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期694-697,共4页
目的利用DNA shuffling技术,结合T7噬菌体表面展示技术,定向进化MIF受体sCD74,以获得高亲和力突变体基因。方法定点突变的牛、小鼠、人CD74胞外同源区基因以DNaseⅠ消化,回收25—50bp片段进行DNA shuffling;将500bp shuffling产物... 目的利用DNA shuffling技术,结合T7噬菌体表面展示技术,定向进化MIF受体sCD74,以获得高亲和力突变体基因。方法定点突变的牛、小鼠、人CD74胞外同源区基因以DNaseⅠ消化,回收25—50bp片段进行DNA shuffling;将500bp shuffling产物经限制性酶切后与T7噬菌体DNA连接,与T7 package extracts组建噬菌体文库;采用竞争淘洗方法进行5轮筛选,富集得到高亲和力结合MIF的噬菌体;挑取20株噬菌体单克隆进行基因克隆并测序,对测序结果进行生物信息学分析,同时以竞争ELISA初步鉴定进化效果。结果20株噬菌体单克隆具有相同的sCD74突变基因,为相同克隆,将此克隆命名为sHCD74m,其基因命名为sHCD74mD;竞争性ELISA分析显示其MIF结合力提高。结论得到了与MIF高亲和力结合的sCD74突变体基因sHCD74mD。 展开更多
关键词 DNA shuffling 巨噬细胞移动抑制因子 CD74 噬菌体展示技术 MHC Ⅱ恒定链
在线阅读 下载PDF
DNA shuffling技术及其在基因工程疫苗中的应用 被引量:2
2
作者 张毅 王红宁 +2 位作者 黄勇 徐永莉 余协中 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第3期85-88,共4页
DNA shuffling技术是一项全新的体外人工进化模式,它通过基因在分子水平上的重组,再定向筛选具有预期性状的突变体,获得同时具有多个亲本基因的特征的突变基因。该文介绍DNA shuffling技术的基本原理,并列举了由该技术发展而来的新技术... DNA shuffling技术是一项全新的体外人工进化模式,它通过基因在分子水平上的重组,再定向筛选具有预期性状的突变体,获得同时具有多个亲本基因的特征的突变基因。该文介绍DNA shuffling技术的基本原理,并列举了由该技术发展而来的新技术及其在基因工程疫苗领域的应用,展望了DNAshuffling技术的发展方向。 展开更多
关键词 DNA shuffling 基因工程疫苗 定向进化
在线阅读 下载PDF
Genome shuffling育种技术应用研究进展 被引量:4
3
作者 孟国庆 陆震 +1 位作者 赵林 刘新利 《山东轻工业学院学报(自然科学版)》 CAS 2010年第2期6-11,共6页
本文综述了一种高效育种技术Genome shuffling(基因组重组)技术及其在细菌、真菌及放线菌的菌种选育方面的应用研究进展。与传统育种技术相比,Genome shuffling技术是一种全基因组重排的高效定向育种技术。菌株经过多轮递归原生质体融合... 本文综述了一种高效育种技术Genome shuffling(基因组重组)技术及其在细菌、真菌及放线菌的菌种选育方面的应用研究进展。与传统育种技术相比,Genome shuffling技术是一种全基因组重排的高效定向育种技术。菌株经过多轮递归原生质体融合,使正向突变的不同基因重组到同一个融合子中,大幅提高菌种的正突变性,打破在菌种改良过程中的诸多局限性,在现代菌种选育中得以广泛应用。 展开更多
关键词 GENOME shuffling技术 菌种选育 原生质体融合 高通量筛选
在线阅读 下载PDF
Genome shuffling技术在微生物育种中的应用 被引量:1
4
作者 杜云平 周庆丰 +3 位作者 余国莲 李小军 梁健良 刘建忠 《现代农业科学》 2008年第11期24-24,27,共2页
介绍了Genome shuffling技术的特点及作用,提出了在微生物育种中的广泛应用,推动了经典诱变方法的发展。
关键词 GENOME shuffling技术 微生物 育种
在线阅读 下载PDF
利用DNA shuffling技术鉴定草甘膦N-乙酰转移酶抗性相关位点
5
作者 金丹 陈明 +2 位作者 马瑞强 杨志荣 陈建 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2007年第5期110-114,共5页
为研究高抗草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetyltransferase,GAT)的草甘膦抗性相关位点,以高抗草甘膦的gat1基因和不具草甘膦抗性的gat2基因为出发基因,通过一轮双基因DNA shuffling,获得了抗性较野生型gat1下降的突变体14个:10个... 为研究高抗草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetyltransferase,GAT)的草甘膦抗性相关位点,以高抗草甘膦的gat1基因和不具草甘膦抗性的gat2基因为出发基因,通过一轮双基因DNA shuffling,获得了抗性较野生型gat1下降的突变体14个:10个单位点突变,3个双位点突变,1个3位点突变。其中,MTGAT3(H41Q)、MTGAT5(S52P)、MTGAT6(I53M)、MTGAT7(F56L)、MTGAT8(R82G)、MTGAT11(I19T/P22L)和MTGAT14(Y70H/L98P/K119E)7个突变体的草甘膦抗性几乎丧失。本工作为深入研究GAT1蛋白分子结构与功能之间的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 草甘膦 草甘膦N-乙酰转移酶 DNA shuffling 点突变
在线阅读 下载PDF
Genome shuffling筛选ε-聚赖氨酸高产菌及其对代谢流量分配的影响 被引量:8
6
作者 李双 颜鹏 +3 位作者 曾晨 张宏建 毛忠贵 唐蕾 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2568-2577,共10页
【目的】从代谢流量分配的角度,探讨Genome shuffling导致链霉菌ε-聚赖氨酸合成量提升的原因。【方法】从葡萄糖耐受型的亲本菌株Streptomyces sp.AS32和ε-聚赖氨酸耐受型的亲本菌株Streptomyces albulus F15出发,进行三轮Genome shuf... 【目的】从代谢流量分配的角度,探讨Genome shuffling导致链霉菌ε-聚赖氨酸合成量提升的原因。【方法】从葡萄糖耐受型的亲本菌株Streptomyces sp.AS32和ε-聚赖氨酸耐受型的亲本菌株Streptomyces albulus F15出发,进行三轮Genome shuffling,筛选得到ε-聚赖氨酸产量提高的链霉菌株Streptomyces sp.AF3-44,采用通量分析方法构建链霉菌ε-聚赖氨酸合成代谢网络,并对上述3株菌的代谢通量进行比较。【结果】AF3-44的ε-聚赖氨酸摇瓶产量为3.1 g/L,较AS32和F15分别提高了34%和29%。3株菌株中AS32三羧酸循环(TCA)的代谢通量最高;F15磷酸戊糖途径(PPP)代谢通量最高;AF3-44流向赖氨酸合成前体天冬氨酸以及ε-聚赖氨酸的通量最高,TCA和PPP通量位于两亲本菌株的中间水平,其中TCA中流向异柠檬酸的通量分别为AS32和F15的77%和116%,PPP中流向5-磷酸核酮糖的通量分别为AS32和F15的149%和92%。【结论】Genome shuffling导致了代谢流的重新分布,流向前体赖氨酸和ε-聚赖氨酸通量的增加,以及PPP和TCA通量配比的改变是链霉菌ε-聚赖氨酸合成量增加的重要因素。 展开更多
关键词 GENOME shuffling 代谢通量 代谢网络 Ε-聚赖氨酸
原文传递
GENOME SHUFFLING技术优化及其应用进展
7
作者 付婕琴 胡昌华 《广西轻工业》 2010年第4期10-11,共2页
Genomeshuffling作为一种新型的育种方法,与传统方法相比更加高效快捷,近年来不断被应用于制药、食品制品、环境工程等众多领域的菌种改良中。对genome shuffling近年来技术的优化及其应用进展进行综述。
关键词 GENOME shuffling 基因组重排 菌种改良
在线阅读 下载PDF
分段DNA shuffling:一种大分子海藻糖合酶有效的定向进化方法 被引量:2
8
作者 刘艳超 王宇凡 +4 位作者 钱柯帆 张峻 肖辰鹏 邢来君 李明春 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期362-372,共11页
【目的】红色亚栖热菌(Meiothermus ruber)海藻糖合酶(Trehalose synthase,M-TreS)将麦芽糖转化生成海藻糖只需一步反应,且具有很好的热稳定性及pH耐受性,是潜在的工业生产海藻糖的酶源。为了提高该酶的性能,有必要对其进行定向进化。... 【目的】红色亚栖热菌(Meiothermus ruber)海藻糖合酶(Trehalose synthase,M-TreS)将麦芽糖转化生成海藻糖只需一步反应,且具有很好的热稳定性及pH耐受性,是潜在的工业生产海藻糖的酶源。为了提高该酶的性能,有必要对其进行定向进化。【方法】M-TreS基因(M-treS)大小为2 889 bp。该蛋白质分子本身具有很大的进化空间,但是却不宜进行全长基因Shuffling。分段DNA shuffling是为大分子蛋白质(基因≥2 000 bp)的进化而设计的一种方法。该方法分为三步:(1)用两对引物分别扩增目的基因的上游片段和下游片段;(2)上下游片段各自进行Shuffling;(3)利用重叠延伸PCR连接上下游突变群,建立完整基因的突变文库。【结果】结合易错PCR,通过该方法经一轮进化获得一株酶活力是野生型1.6倍、催化效率是野生型2倍的突变株。序列分析表明,该突变株共有6个位点发生了氨基酸的替代,其中一个来自易错突变,2个来自同源重组,3个为随机突变。【结论】分段DNA shuffling是进化大分子蛋白质的有效方法。 展开更多
关键词 红色亚栖热菌 海藻糖合酶 定向进化 易错PCR 分段DNA shuffling
原文传递
DNA shuffling技术提高干扰素比活性的研究 被引量:1
9
作者 尼钢钢 范清林 +1 位作者 胡伟伟 宋礼华 《生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第5期14-18,共5页
DNA shuffling技术可以定向进化干扰素,获得比rhIFN-α2b标准品更高比活的干扰素。rhIFN-α2b基因与Infergen基因用DNaseI酶切成30~50 bp小片段,回收之后进行无引物PCR重聚和有引物PCR扩增基因。将重组基因连接到载体pUC19中,转化至DH... DNA shuffling技术可以定向进化干扰素,获得比rhIFN-α2b标准品更高比活的干扰素。rhIFN-α2b基因与Infergen基因用DNaseI酶切成30~50 bp小片段,回收之后进行无引物PCR重聚和有引物PCR扩增基因。将重组基因连接到载体pUC19中,转化至DH5α并挑选阳性克隆测序。将测序正确的突变基因连接到载体pET30a中并转化至BL21(DE3)中,然后诱导蛋白表达、SDS-PAGE凝胶电泳和Western blot分析。经过表达细胞诱导、细胞裂解、包涵体变性、复性和单克隆抗体亲和层析之后,获得高纯度的重组干扰素。经测定纯化后的重组干扰素比活达到5.8×108IU/mg,比rhIFN-α2b标准品高出5倍左右。实验结果证明此实验方法对提高干扰素的比活是有效的,可以获得比标准品更高比活的干扰素。 展开更多
关键词 DNA shuffling 干扰素 酶切 比活
在线阅读 下载PDF
利用DNA shuffling技术构建含5个cry基因的突变体库以筛选高毒力杀虫蛋白 被引量:1
10
作者 张小琼 林拥军 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期13-17,共5页
以改造合成的5个Bt基因(cry1C*、cry2A*、cry1Ab、cry1Ac和cry9C*)为材料,利用DNAshuff-ling的体外分子进化技术构建1个含有1 000个重组基因克隆的大肠杆菌表达库;通过诱导表达重组蛋白,ELISA方法测定蛋白表达量,以棉铃虫(Helicoverpa a... 以改造合成的5个Bt基因(cry1C*、cry2A*、cry1Ab、cry1Ac和cry9C*)为材料,利用DNAshuff-ling的体外分子进化技术构建1个含有1 000个重组基因克隆的大肠杆菌表达库;通过诱导表达重组蛋白,ELISA方法测定蛋白表达量,以棉铃虫(Helicoverpa armigera)为试验昆虫进行毒性试验。结果显示:重组克隆的蛋白毒性与阳性对照Cry1Ac相比,增强的有122个,持平的有38个,有毒性但毒性降低的有232个,失去毒性的有608个;对这1 000个重组克隆进行了测序,比较了重组基因与原始基因的序列同源性,除去55个克隆未能找到其原始基因来源,将其余的945个重组克隆从5个Cry蛋白的核苷酸编码序列的同源性出发,划分为源于cry1Ab,cry1Ac,cry1C*,cry2A*和cry9C*的5个重组克隆类型。根据毒力变化分为毒力上升、持平、下降3组。对1 000个重组基因的氨基酸序列进行分析后发现,相对于毒力上升和持平组,5个毒力下降组的重组克隆间的氨基酸序列同源性最低。 展开更多
关键词 DNA shuffling Cry蛋白 序列比较 突变体库
在线阅读 下载PDF
Genome shuffling在菌种改良中的应用 被引量:6
11
作者 朱欣杰 程瑶 《河北化工》 2006年第7期11-12,15,共3页
Genomeshuffling作为一种新型的选育方法,与传统方法比更加高效快捷,近年来不断被应用于制药、食品制造、环境工程等众多领域的菌种改良研究中。综述了Genomeshuffling在菌种改良中的应用.
关键词 GENOME shuffling 基因组重排 菌种改良
在线阅读 下载PDF
An Image Encryption Approach Using a Shuffling Map 被引量:2
12
作者 XIAO Yong-Liang XIA Li-Min 《Communications in Theoretical Physics》 SCIE CAS CSCD 2009年第11期876-880,共5页
A new image encryption approach is proposed.First,a sort transformation based on nonlinear chaoticalgorithm is used to shuffle the positions of image pixels.Then the states of hyper-chaos are used to change the greyva... A new image encryption approach is proposed.First,a sort transformation based on nonlinear chaoticalgorithm is used to shuffle the positions of image pixels.Then the states of hyper-chaos are used to change the greyvalues of the shuffled image according to the changed chaotic values of the same position between the above nonlinearchaotic sequence and the sorted chaotic sequence.The experimental results demonstrate that the image encryptionscheme based on a shuffling map shows advantages of large key space and high-level security.Compared with someencryption algorithms,the suggested encryption scheme is more secure. 展开更多
关键词 IMAGE ENCRYPTION hyper-chaotic shuffling SORT
在线阅读 下载PDF
Genome Shuffling of <i>Pseudomonas</i>Sp. Ioca11 for Improving Degradation of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons 被引量:3
13
作者 Manoj Kumar Mahendra Pratap Singh Deepak Kumar Tuli 《Advances in Microbiology》 2012年第1期26-30,共5页
A Pseudomonas sp. strain IOCa11 exhibiting broad substrate profile for polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) degradation was isolated by enrichment techniques from oil-contaminated soil. We applied genome shuffling ... A Pseudomonas sp. strain IOCa11 exhibiting broad substrate profile for polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) degradation was isolated by enrichment techniques from oil-contaminated soil. We applied genome shuffling of Pseudomonas sp. strain IOCa11 to achieve improved degradation of PAHs. The initial mutant population was generated by nitrosoguanidine treatment and population exhibiting improved phenotype was subjected to multiple round of protoplast fusion in order to allow recombination between genomes. Mutant, designated as SF-IOC11-16A, obtained after recursive protoplast fusion showed substantial improvement in ability to degrade PAHs in liquid media. It could degrade 98% DBT in 72 hours in comparison to 74% by the wild parent strain. Similar improvement in degradation of the naphthalene (NAP), phenanthrene (PHE), and benzo (α) pyrene (BAP) was also observed in shuffled strain. The shuffled strain was also able to grow at higher concentration of PAHs and degrade them efficiently. The results indicate that genome shuffling can successfully be used to improve the PAHs degradation capability of bacteria. 展开更多
关键词 PAHs Biodegradation Genome shuffling MUTAGENESIS
暂未订购
利用DNA Shuffling技术构建重组PRRSV ORF5基因 被引量:1
14
作者 刘建奎 魏春华 +3 位作者 黄春芳 陈小燕 戴爱玲 杨小燕 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期888-896,共9页
通过DNA shuffling技术对PRRSV ORF5基因进行改组,研究其对异源毒株交叉中和能力。将获得的嵌合基因△2ORF5与载体pET-32a连接,转化到大肠杆菌Escherichia coli BL21中,经诱导表达获得约42 kDa重组蛋白。将纯化的重组△2ORF5蛋白免疫BAL... 通过DNA shuffling技术对PRRSV ORF5基因进行改组,研究其对异源毒株交叉中和能力。将获得的嵌合基因△2ORF5与载体pET-32a连接,转化到大肠杆菌Escherichia coli BL21中,经诱导表达获得约42 kDa重组蛋白。将纯化的重组△2ORF5蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,Western blotting试验表明其与4株亲本毒株重组ORF5蛋白具有良好的反应性。病毒感染抑制试验结果表明,多克隆抗体对4株亲本毒株具有较高的抑制率(>53%)。研究结果为研制新型PRRSV疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 PRRSV ORF5基因 DNA shuffling 多克隆抗体 病毒感染抑制试验
原文传递
利用Shuffling技术改良纤维素葡聚糖内切酶(EGI)酶活
15
作者 姜大磊 王丕武 +4 位作者 曲静 马建 付永平 李鲁华 张志发 《农业机械》 2012年第16期137-141,共5页
本文以纤维素葡聚糖内切酶基因为基础,利用shuffling改组技术,经过DNaseI降解、PrimerlessPCR、TouchdownPCR对纤维素内切酶基因进行了突变和改组,然后将改组的纤维素内切酶基因插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建了重组子突变体库。通... 本文以纤维素葡聚糖内切酶基因为基础,利用shuffling改组技术,经过DNaseI降解、PrimerlessPCR、TouchdownPCR对纤维素内切酶基因进行了突变和改组,然后将改组的纤维素内切酶基因插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建了重组子突变体库。通过羧甲基纤维素钠(CMC-Na)培养基的分离筛选,得到活性比较高的纤维素葡聚糖酶菌株。对这些菌株通过3,5-二硝基水杨酸法(DNS)进行酶活检测,成功获到比原来酶活高5.75倍的菌株,酶活表达量56.52U/mL,对其诱导表达条件进行优化结果表明在50℃,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度为0.1mmol/L条件下,酶的产量最高。 展开更多
关键词 纤维素葡聚糖内切酶 shuffling改组技术 IPTG
原文传递
Two-step model of paleohexaploidy, ancestral genome reshuffling and plasticity of heat shock response in Asteraceae
16
作者 Xiangming Kong Yan Zhang +14 位作者 Ziying Wang Shoutong Bao Yishan Feng Jiaqi Wang Zijian Yu Feng Long Zejia Xiao Yanan Hao Xintong Gao Yinfeng Li Yue Ding Jianyu Wang Tianyu Lei Chuanyuan Xu Jinpeng Wang 《Horticulture Research》 SCIE CSCD 2023年第6期82-95,共14页
An ancient hexaploidization event in the most but not all Asteraceae plants,may have been responsible for shaping the genomes of many horticultural,ornamental,and medicinal plants that promoting the prosperity of the ... An ancient hexaploidization event in the most but not all Asteraceae plants,may have been responsible for shaping the genomes of many horticultural,ornamental,and medicinal plants that promoting the prosperity of the largest angiosperm family on the earth.However,the duplication process of this hexaploidy,as well as the genomic and phenotypic diversity of extant Asteraceae plants caused by paleogenome reorganization,are still poorly understood.We analyzed 11 genomes from 10 genera in Asteraceae,and redated the Asteraceae common hexaploidization(ACH)event∼70.7–78.6 million years ago(Mya)and the Asteroideae specific tetraploidization(AST)event∼41.6–46.2 Mya.Moreover,we identified the genomic homologies generated from the ACH,AST and speciation events,and constructed a multiple genome alignment framework for Asteraceae.Subsequently,we revealed biased fractionations between the paleopolyploidization produced subgenomes,suggesting the ACH and AST both are allopolyplodization events.Interestingly,the paleochromosome reshuffling traces provided clear evidence for the two-step duplications of ACH event in Asteraceae.Furthermore,we reconstructed ancestral Asteraceae karyotype(AAK)that has 9 paleochromosomes,and revealed a highly flexible reshuffling of Asteraceae paleogenome.Of specific significance,we explored the genetic diversity of Heat Shock Transcription Factors(Hsfs)associated with recursive whole-genome polyploidizations,gene duplications,and paleogenome reshuffling,and revealed that the expansion of Hsfs gene families enable heat shock plasticity during the genome evolution of Asteraceae.Our study provides insights on polyploidy and paleogenome remodeling for the successful establishment of Asteraceae,and is helpful for further communication and exploration of the diversification of plant families and phenotypes. 展开更多
关键词 shuffling shock PLASTICITY
原文传递
Online Shuffling with Task Duplication in Cloud
17
作者 ZANG Qimeng GUO Song 《ZTE Communications》 2017年第4期38-42,共5页
Task duplication has been widely adopted to mitigate the impact of stragglers that run much longer than normal tasks. However,task duplication on data pipelining case would generate excessive traffic over the datacent... Task duplication has been widely adopted to mitigate the impact of stragglers that run much longer than normal tasks. However,task duplication on data pipelining case would generate excessive traffic over the datacenter networks. In this paper, we study minimizing the traffic cost for data pipelining task replications and design a controller that chooses the data generated by the first finished task and discards data generated later by other replications belonging to the same task. Each task replication communicates with the controller when it finishes a data processing, which causes additional network overhead. Hence, we try to reduce the network overhead and make a trade-off between the delay of data block and the network overhead. Finally, extensive simulation results demonstrate that our proposal can minimize network traffic cost under data pipelining case. 展开更多
关键词 CLOUD computing BIG data shuffling TASK DUPLICATION TRAFFIC
在线阅读 下载PDF
Uncovering and Displaying the Coherent Groups of Rank Data by Exploratory Riffle Shuffling
18
作者 Vartan Choulakian Jacques Allard 《Open Journal of Statistics》 2021年第1期178-212,共35页
Let <i><span>n</span></i><span> respondents rank order </span><i><span>d</span></i><span> items, and suppose that <img src="Edit_c36450fa-1b61-... Let <i><span>n</span></i><span> respondents rank order </span><i><span>d</span></i><span> items, and suppose that <img src="Edit_c36450fa-1b61-4116-be40-5bede8274d30.bmp" alt="" /></span><span><span>. Our main task is to uncover and display the structure of the observed rank data by an exploratory riffle shuffling procedure which sequentially decomposes the n voters into a finite number of coherent groups plus a noisy group: where the noisy group represents the outlier voters and each coherent group is composed of a finite number of coherent clusters. We consider exploratory riffle shuffling of a set of items to be equivalent to optimal two blocks seriation of the items with crossing of some scores between the two blocks. A riffle shuffled coherent cluster of voters within its coherent group is essentially characterized by the following facts: 1) Voters have identical first TCA factor score, where TCA designates taxicab correspondence analysis, an L</span><sub><span>1</span></sub><span> variant of corresponden</span><span>ce analysis;2) Any preference is easily interpreted as riffle shuffling of its items;3) The nature of different riffle shuffling of items can be seen in the structure of the contingency table of the first-order marginals constructed from the Borda scorings of the voters;4) The first TCA factor scores of the items of a coherent cluster are interpreted as Borda scale of the items. We also introduce a crossing index, which measures the extent of crossing of scores of voters between the two blocks seriation of the items. The novel approach is explained on the benchmarking SUSHI data set, where we show that this data set has a very si</span><span>mple structure, which can also be communicated in a tabular form.</span></span> 展开更多
关键词 Borda Score and Scale Exploratory Riffle Shuffle Coherent Group Coherent Cluster Crossing Index Taxicab Correspondence Analysis
在线阅读 下载PDF
一种方便、无PCR过程的DNA shuffling方法 被引量:1
19
作者 王强 刘秋云 +1 位作者 李刚 李宝健 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期448-450,共3页
目前大多数的DNA shuffling方法都需要PCR过程。由于一些限制内切酶的识别位点与切割位点不重叠而产生不同的黏性末端,当再连接的时候,同源片段之间就可以混合起来按照正确顺序组装成新的嵌合体分子。利用这种性质,构建了一种新的、无PC... 目前大多数的DNA shuffling方法都需要PCR过程。由于一些限制内切酶的识别位点与切割位点不重叠而产生不同的黏性末端,当再连接的时候,同源片段之间就可以混合起来按照正确顺序组装成新的嵌合体分子。利用这种性质,构建了一种新的、无PCR过程的、简便的shuffling方法。 展开更多
关键词 DNA shuffling 限制性内切酶 组织型纤溶酶原激活剂 基因重组 嵌合体分子
原文传递
β-葡萄糖苷酶Bgl3热稳定性有益突变的鉴定与结构基础分析
20
作者 许本宏 蒋奕文 +5 位作者 罗敬时 杨向鹏 李广 袁珊 刘玉焕 曹立创 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第15期1-8,共8页
DNA shuffling是蛋白质定向进化的一种常用策略,其优点是可以快速积累多突变效果,但同时由于突变数较多,其中真正发挥作用的突变及其结构基础往往不清楚。β-葡萄糖苷酶是纤维素高效降解的限速酶,良好的热稳定性是影响其实际催化效率的... DNA shuffling是蛋白质定向进化的一种常用策略,其优点是可以快速积累多突变效果,但同时由于突变数较多,其中真正发挥作用的突变及其结构基础往往不清楚。β-葡萄糖苷酶是纤维素高效降解的限速酶,良好的热稳定性是影响其实际催化效率的关键因素。该研究以DNA shuffling策略产生的热稳定性β-葡萄糖苷酶突变体Bgl3-6511(含60个突变,T_(50)值比野生型提高4.6℃)为研究对象,通过序列比对、定点突变和热稳定性测定,对其中的有益突变进行鉴定。结果显示,6个单点突变Y50F、R52H、R56K、V65I、T67A和P143A分别将该酶的T_(50)值提高2.9、4.2、1.5、2.8、3.2、1.2℃。同时,鉴定到5个有害突变将该酶的T_(50)值降低1.0~3.4℃。将获得单点有益突变进行组合,获得T_(50)值提高13.4℃的M6(Y50F/R52H/R56K/V65I/T67A/P143A),说明DNA shuffling策略积累的有害突变确实损害了性能优化。结构分析和分子动力学模拟显示,有益突变主要是通过增强分子内氢键、π-π键和稳定二级结构发挥作用。该研究对Bgl3-6511中的单点有益突变进行鉴定,对其结构基础进行了分析,并获得了热稳定性更加优良的突变酶,相关信息可为其他酶的分子改造提供有益借鉴。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖苷酶 热稳定性 DNA shuffling 有益突变 定点突变 结构分析
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 10 下一页 到第
使用帮助 返回顶部