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利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼sf3a1基因敲除突变体 被引量：1
1
作者 刘倩文 潘军 +3 位作者 韩秋月 周建峰 荣小至 白艳 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2023年第3期23-30,共8页
目的构建斑马鱼sf3a1基因敲除突变体,以研究剪接因子SF3A(splicing factor 3a)中SF3A1/Sf3a1在生物体中的详细生理功能及其调控机制。方法利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼sf3a1突变体,通过T7酶切及基因组测序筛选得到F0代及能够稳定遗传... 目的构建斑马鱼sf3a1基因敲除突变体,以研究剪接因子SF3A(splicing factor 3a)中SF3A1/Sf3a1在生物体中的详细生理功能及其调控机制。方法利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼sf3a1突变体,通过T7酶切及基因组测序筛选得到F0代及能够稳定遗传的F1代突变体,F1代自交后得到F2代,观察Sf3a1纯合缺失对斑马鱼生长发育的影响。结果基因型鉴定结果显示,得到2种不同类型突变品系,分别为−7 bp和(−2+13)bp。杂合sf3a1突变体正常存活且可育,而合子型纯合突变体斑马鱼胚胎发育出现明显异常,24 hpf胚胎发育迟缓,细胞出现大量凋亡,斑马鱼mRNA剪接发生异常,于72 hpf之前死亡。结论利用CRISPR/Cas9技术成功构建了斑马鱼sf3a1基因敲除突变体,为探索sf3a1对斑马鱼生长发育的影响提供了实验材料和依据。 展开更多
关键词 斑马鱼 CRISPR/Cas9 sf3a1基因
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