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人血清去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)H2亚基(sH2a)酶联免疫检测法的建立及临床应用 被引量:1
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作者 尹栩芳 樊一笋 +2 位作者 汪琪 饶品彬 石立立 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第5期8-12,共5页
目的探讨肝损伤患者血清中去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)的H2亚基(sH2a)水平和肝损伤进程的相关性。方法纳入苏州九龙医院210例血清样本,其中70例肝损伤组患者,包括肝硬化、病毒性肝炎、脂肪肝,同时纳入140例... 目的探讨肝损伤患者血清中去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)的H2亚基(sH2a)水平和肝损伤进程的相关性。方法纳入苏州九龙医院210例血清样本,其中70例肝损伤组患者,包括肝硬化、病毒性肝炎、脂肪肝,同时纳入140例对照组样本,包括高脂、溶血、黄疸、自身免疫性疾病、健康人。检测上述人群血清sH2a蛋白水平,对ELISA结果和临床诊断结果进行统计学分析。结果①140例对照组和70例肝损伤组的血清样本sH2a蛋白水平分别为105.92±53.41 ng/ml和69.25±27.45 ng/ml,差异有统计学显著性意义(F=14.375,t=5.397,P=0.000)。②sH2a蛋白水平诊断肝损伤的敏感度为68.57%(95%CI:56.37%~79.15%),特异度为82.86%(95%CI:75.58%~88.70%),总符合率为78.10%(95%CI:71.88%~83.49%),KAPPA系数:0.510 6(95%CI:0.387 7~0.633 6)。结论血清sH2a ELISA检测试剂盒的符合率达到临床预期要求,可以作为新的血清标志物达到辅助诊断肝损伤相关疾病的效果。 展开更多
关键词 肝损伤 去唾液酸糖蛋白受体 sh2a 酶联免疫检测
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外周血可溶性sH2a在早期诊断肝纤维化程度中的价值 被引量:4
2
作者 王磊 金沛桦 +6 位作者 瞿欢佳 蒋艳明 王洁 龚玲 陈公英 朱梦飞 施军平 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期57-61,共5页
目的 研究血清肝纤维化标志物sH2a用于诊断慢性肝病患者早期肝纤维化的临床诊断价值及意义.方法 收集67例行肝穿刺活检的慢性乙型肝炎、脂肪性肝病或两者合并患者作为研究对象,通过sH2a试剂盒检测外周血中可溶性sH2a的含量,与实验室指... 目的 研究血清肝纤维化标志物sH2a用于诊断慢性肝病患者早期肝纤维化的临床诊断价值及意义.方法 收集67例行肝穿刺活检的慢性乙型肝炎、脂肪性肝病或两者合并患者作为研究对象,通过sH2a试剂盒检测外周血中可溶性sH2a的含量,与实验室指标及肝组织病理纤维化程度进行比较,并绘制特征曲线(ROC),计算曲线下面积(AUC),分析其敏感性和特异性以评估该血清标志物对早期肝纤维化的诊断价值.结果 患者血清sH2a水平与肝脏纤维化程度呈负相关,且无纤维化(S0期)、早期纤维化(S1-S2期)和中晚期纤维化(S3-S4期)3组之间的差异有统计学意义(P<0.05).预测有无纤维化发生时,最佳诊断阈值为0.79,敏感性和特异性分别为63%、80%,AUC为0.772;评估有无明显纤维化发生时,当sH2a为0.77时,AUC为0.806,诊断灵敏度为85.7%,特异性为72.7%.结论 运用sH2a评估患者肝脏纤维化程度,可有效诊断患者肝脏早期纤维化,在区分有无明显纤维化上诊断价值更高,为临床诊断及治疗提供可靠依据. 展开更多
关键词 肝纤维化 sh2a 肝病 血清学 肝组织病理
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血清可溶性sH2a联合sICAM-1对非酒精性脂肪性肝病肝纤维化的诊断价值分析 被引量:1
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作者 田由由 陈悦 +2 位作者 丁德平 张银华 敖康健 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2018年第2期159-162,166,共5页
[目的]探讨血清可溶性sH2a联合sICAM-1对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)肝纤维化的诊断价值。[方法]本院收治NAFLD患者98例,根据肝穿刺活检术病理检查结果分为S0组、S1-S2组、S3-S4组。测定3组患者ALT、AST、GGT、ALB、总胆固醇、sH2a、sICA... [目的]探讨血清可溶性sH2a联合sICAM-1对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)肝纤维化的诊断价值。[方法]本院收治NAFLD患者98例,根据肝穿刺活检术病理检查结果分为S0组、S1-S2组、S3-S4组。测定3组患者ALT、AST、GGT、ALB、总胆固醇、sH2a、sICAM-1水平,绘制特征曲线(ROC),计算曲线下面积(AUC),分析其敏感性和特异性以评估sH2a联合sICAM-1对NAFLD肝纤维化的诊断价值。[结果]S1-S2组sH2a低于S0组,S3-S4组sH2a低于S0、S1-S2组,差异有统计学意义(t=23.56、19.56、22.19,P<0.05),S1-S2组sICAM-1高于S0组,S3-S4组sICAM-1高于S0、S1-S2组,差异有统计学意义(t=24.78、26.33、21.48,P<0.05)。各组ALT、AST、GGT、ALB、总胆固醇组间比较差异无统计学意义。sH2a与肝脏病理纤维化分期负相关关系明显,sICAM-1与肝脏病理纤维化分期正相关关系明显,差异有统计学意义(r=-0.42、0.56,P<0.05)。ALT、AST、GGT、ALB、总胆固醇与肝脏病理纤维化分期相关关系不明显,差异无统计学意义。sH2a、sICAM-1、sH2a+sICAM-1诊断肝纤维化的AUC曲线下面积分别为0.773、0.762、0.811,sH2a+sICAM-1诊断方法的灵敏度略高于sH2a、sICAM-1单独诊断,特异度略低于sH2a、sICAM-1单独诊断,但差异均无统计学意义。[结论]血清可溶性sH2a联合sICAM-1诊断NAFLD肝纤维化具有较高的灵敏度和特异性,值得在临床上推广应用。 展开更多
关键词 sh2a SICAM-1 非酒精性脂肪性肝病 肝纤维化
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鸡生长性状相关SH3RF2、LncFAM及IGF2BP1基因SV变异的聚合效应分析
4
作者 刘阳 马浩翔 +9 位作者 王文韬 刘树立 唐燕飞 蒋华连 苏立燧 韩瑞丽 刘小军 田亚东 王香南 李转见 《中国家禽》 北大核心 2025年第1期8-14,共7页
试验旨在对生长性状大效应基因SH3RF2、LncFAM及IGF2BP1的3个突变位点进行聚合效应分析,选出最优组合基因型。试验以鸡7个群体(固始-安卡F2代资源种群、AA肉鸡、哈伯德肉鸡、科宝肉鸡、817肉鸡、广西金陵麻鸡和卢氏绿壳蛋鸡)中的2228个... 试验旨在对生长性状大效应基因SH3RF2、LncFAM及IGF2BP1的3个突变位点进行聚合效应分析,选出最优组合基因型。试验以鸡7个群体(固始-安卡F2代资源种群、AA肉鸡、哈伯德肉鸡、科宝肉鸡、817肉鸡、广西金陵麻鸡和卢氏绿壳蛋鸡)中的2228个个体为研究对象,检测三个基因位点的基因型变异,利用F2资源群和广西金陵麻鸡研究鸡SH3RF2、LncFAM及IGF2BP1基因的遗传效应,对三个基因组合位点的聚合效应进行分析。结果显示:在分析群体中共有54种可能的组合基因型,通过基因型频率和生长性状关联分析发现,在7个群体中,等位基因Sh-I、Lnc-I和Ig-L1的频率均明显高于Sh-D、Lnc-D、Ig-L2及Ig-W;在F2资源群体和广西金陵麻鸡中,IIIIL1L1基因型在三个基因聚合效应中具有较高的基因频率和较高的体重。结果表明,在提高生长性状方面,IIIIL1L1基因型既能提高体重,又有较高的基因型频率,可以作为选择推荐联合标记。 展开更多
关键词 生长性状 SH3RF2基因 LncFAM基因 IGF2BP1基因 聚合效应 关联分析
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欧前胡素通过SHP1/PDGFRβ通路抑制肝星状细胞活化的实验研究
5
作者 陈志惠 罗文川 +4 位作者 陈子馨 陈亚萍 王鹭琦 南丽红 黄枚 《中药药理与临床》 北大核心 2025年第10期57-61,共5页
目的:探讨欧前胡素对人肝星状细胞(LX-2)活化的影响及可能机制。方法:将LX-2细胞随机分为转化生长因子-β1(TGF-β1)组,欧前胡素10、20、40μmol/L组及水飞蓟宾5μmol/L组,药物干预后,采用CCK-8法检测LX-2细胞活化增殖情况;划痕试验检... 目的:探讨欧前胡素对人肝星状细胞(LX-2)活化的影响及可能机制。方法:将LX-2细胞随机分为转化生长因子-β1(TGF-β1)组,欧前胡素10、20、40μmol/L组及水飞蓟宾5μmol/L组,药物干预后,采用CCK-8法检测LX-2细胞活化增殖情况;划痕试验检测细胞迁移能力;ELISA法检测细胞上清液中白介素-6(IL-6)、I型胶原(Col-I)含量;Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP1)、血小板衍生的生长因子受体β(PDGFRβ)蛋白表达及Janus激酶1(JAK1)、信号传导和转录激活因子3(STAT3)磷酸化表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组LX-2细胞形态呈长梭形的典型成纤维样细胞改变,增殖和迁移能力显著升高(P<0.01),SHP1蛋白表达显著下调(P<0.01),α-SMA、PDGFRβ、IL-6和Col-I的表达及JAK1、STAT3磷酸化表达明显上调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,欧前胡素干预后,可不同程度地改善TGF-β1诱导后的LX-2细胞形态,其增殖和迁移能力明显下降(P<0.05或P<0.01),SHP1蛋白表达显著上调(P<0.05),α-SMA、PDGFRβ、IL-6和Col-I的表达及JAK1、STAT3磷酸化表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:欧前胡素可通过调控SHP1/PDGFRβ通路抑制LX-2细胞的活化。 展开更多
关键词 欧前胡素 肝纤维化 肝星状细胞 含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1/血小板衍生的生长因子受体β通路
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敲低SH2D2A基因对胃癌细胞生物学行为的影响
6
作者 黄彩家 陈智斌 +2 位作者 黄名威 王婷安 韦尉元 《广西医学》 2025年第12期1789-1795,共7页
目的分析敲低SH2结构域蛋白2A(SH2D2A)基因对胃癌细胞生物学行为的影响。方法从癌症基因组图谱数据库获取胃癌样本RNAseq数据,分析SH2D2A基因在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达。通过慢病毒转染技术构建SH2D2A基因沉默表达的慢病毒载体... 目的分析敲低SH2结构域蛋白2A(SH2D2A)基因对胃癌细胞生物学行为的影响。方法从癌症基因组图谱数据库获取胃癌样本RNAseq数据,分析SH2D2A基因在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达。通过慢病毒转染技术构建SH2D2A基因沉默表达的慢病毒载体,将人胃癌细胞AGS分为shCtrl组(转染慢病毒空载体)和shSH2D2A组(转染SH2D2A基因沉默表达的慢病毒载体),采用实时荧光定量PCR和Western blot检测SH2D2A基因敲低效果。采用Celigo细胞计数法、AnnexinⅤ-APC单染法流式细胞仪、Transwell实验分别检测两组细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭能力。采用Western blot检测敲低SH2D2A基因对丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、v-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(c-MYC)蛋白表达的影响。结果SH2D2A基因在胃癌组织中的表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05)。与shCtrl组相比,shSH2D2A组的SH2D2A mRNA及蛋白表达水平降低,读板第2至第5天时胃癌细胞数量减少,胃癌细胞凋亡率升高,迁移细胞数量及侵袭细胞数量减少,AKT、p-AKT、c-MYC蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论SH2D2A基因在胃癌组织中高表达,沉默SH2D2A基因可抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,并促进其凋亡,该作用机制可能与其调控AKT信号通路及c-MYC信号通路共同发挥对胃癌的抑制效应有关。 展开更多
关键词 胃癌 SH2结构域蛋白2A 细胞凋亡 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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丹参酮IIA治疗脓毒症的分子机制
7
作者 张骁慧 姚景襦 +1 位作者 牛皓龙 张金英 《滨州医学院学报》 2025年第5期533-537,共5页
目的基于网络药理学验证丹参酮IIA(Tan-IIA)治疗脓毒症的分子机制。方法在Pubchem和Swiss Target Prediction上搜索丹参酮IIA的结构和相应的蛋白质靶点,利用Cytoscape_v3.10.0构建化合物靶点网络。在DisGeNET和GeneCardsSuite数据库中... 目的基于网络药理学验证丹参酮IIA(Tan-IIA)治疗脓毒症的分子机制。方法在Pubchem和Swiss Target Prediction上搜索丹参酮IIA的结构和相应的蛋白质靶点,利用Cytoscape_v3.10.0构建化合物靶点网络。在DisGeNET和GeneCardsSuite数据库中搜索脓毒症靶点。得到复合靶点与疾病靶点的交集靶点,并将重合靶点导入STRING数据库,构建PPI网络,进而对靶点进行GO和KEGG富集分析。培养及转染RAW 264.7细胞,通过蛋白质免疫印记(Western blot)检测相关信号通路中关键蛋白的磷酸化程度。结果在PPI网络中,Tan-IIA可能主要通过雄激素受体(AR)、非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶11(PTPN11)、蛋白酪氨酸磷酸酶受体C(PTPRC)等关键靶点干预脓毒症。GO和KEGG分析显示,Tan-IIA对脓毒症的治疗主要涉及蛋白酪氨酸磷酸酶活性等生物学过程。信号通路主要包括MAPK级联通路、T细胞受体信号通路。在细胞水平上加以验证,Tan-IIA可以显著抑制含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶-2(SHP2)的表达,抑制丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联通路。结论本研究以网络药理学为基础,在细胞水平上进一步验证,表明Tan-IIA可以通过抑制MAPK级联通路,发挥对脓毒症的治疗作用,为后续基础研究提供参考。 展开更多
关键词 脓毒症 丹参酮IIA 网络药理学 含有SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶-2 非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶11 丝裂原活化蛋白激酶级联通路
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雌激素调控SHP-1抑制肝癌发生、发展
8
作者 史长威 孙兆晴 +3 位作者 杨雪莲 王姗娜 张晓伟 刘春华 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 2025年第10期590-595,共6页
目的 探究雌激素在含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1(src homology region 2 domain-containing phosphatase-1,SHP-1)调控背景下,对肝癌细胞迁移与增殖行为的影响,以期揭示SHP-1与雌激素在肝癌发生、发展过程中的作用,为肝癌的预防和治... 目的 探究雌激素在含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1(src homology region 2 domain-containing phosphatase-1,SHP-1)调控背景下,对肝癌细胞迁移与增殖行为的影响,以期揭示SHP-1与雌激素在肝癌发生、发展过程中的作用,为肝癌的预防和治疗提供新的理论依据和潜在靶点。方法 采用Lipofectamine 2000对人肝癌HUH-7细胞进行以下处理:SHP-1过表达,转染pcDNA3.1-SHP-1质粒(浓度2.5 g/L);SHP-1基因沉默,转染小干扰RNA(silencing RNA,siRNA)(浓度10 mmol/L);雌激素干预,加入1 nmol 17β-雌二醇刺激。通过划痕实验观察细胞迁移,采用单细胞克隆形成实验定量克隆形成数目检测细胞增殖。结果 与对照组相比,过表达SHP-1的HUH-7细胞划痕愈合速度显著减缓,而沉默SHP-1的HUH-7细胞划痕愈合速度明显加快,此外,雌激素处理组的细胞划痕愈合速度有减缓趋势,差异均有统计学意义(P均<0.05)。在单细胞克隆形成实验中,过表达SHP-1的HUH-7细胞以及经雌激素刺激的细胞,其克隆形成数量均显著少于对照组,沉默SHP-1的HUH-7细胞克隆形成数量明显增多,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 SHP-1和雌激素在调控肝癌细胞迁移和增殖方面具有显著的抑制作用,能够有效抑制肝癌细胞的恶性生物学行为;雌激素可能通过调控SHP-1的表达或活性,间接抑制肝癌细胞的迁移和增殖能力。 展开更多
关键词 肝细胞癌 含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1 雌激素 细胞划痕实验
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SH_2A抑制IGFⅡ诱导的抗凋亡作用
9
作者 李婷婷 李伟 +3 位作者 吕晶玉 刘洪 李英慧 赵彦艳 《生命科学研究》 CAS CSCD 2009年第4期327-331,共5页
为研究SH2A的生物学特性,构建野生型和缺陷型SH2A表达载体,通过流式细胞术和蛋白激酶C(PKC)活性检测,研究其对细胞凋亡的影响.研究结果显示SH2结构域是SH2A的主要功能域;SH2A可以诱导细胞快速进入凋亡晚期而促进细胞凋亡;同时发现SH2A... 为研究SH2A的生物学特性,构建野生型和缺陷型SH2A表达载体,通过流式细胞术和蛋白激酶C(PKC)活性检测,研究其对细胞凋亡的影响.研究结果显示SH2结构域是SH2A的主要功能域;SH2A可以诱导细胞快速进入凋亡晚期而促进细胞凋亡;同时发现SH2A抑制胰岛素样生长因子Ⅱ(Insulin-like growth factorⅡ,IGFⅡ)的抗凋亡作用,并阻滞IGFⅡ诱导的Ca2+释放和PKC激活.因此,SH2A可能通过抑制PKC信号通路而促进细胞凋亡. 展开更多
关键词 sh2a 细胞凋亡 PKC IGFⅡ
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SH3BP2在胶质瘤中表达的临床意义及其对肿瘤细胞增殖、迁移的影响
10
作者 沈亚洁 赵自豪 +1 位作者 郑文静 王涛 《空军军医大学学报》 2025年第7期869-875,共7页
目的基于生物信息学分析与体外实验,解析SH3结构域结合蛋白2(SH3BP2)在胶质瘤中的表达特征及其临床意义,阐明其对肿瘤细胞增殖和迁移表型的调控作用。方法整合TCGA数据库分析SH3BP2在胶质瘤中的表达模式、分子分型关联及预后价值;通过... 目的基于生物信息学分析与体外实验,解析SH3结构域结合蛋白2(SH3BP2)在胶质瘤中的表达特征及其临床意义,阐明其对肿瘤细胞增殖和迁移表型的调控作用。方法整合TCGA数据库分析SH3BP2在胶质瘤中的表达模式、分子分型关联及预后价值;通过慢病毒介导的shRNA敲低技术构建SH3BP2稳定沉默的U251细胞系,采用CCK-8增殖实验与划痕迁移实验验证其功能。结果SH3BP2在胶质瘤组织中的表达水平显著高于正常组织(P<0.01),且与胶质瘤患者的临床特征密切相关(患者生存分析P<0.01,预后分析P<0.05)。SH3BP2的表达水平可作为胶质瘤诊断和预后的生物标志物,肿瘤组织高表达SH3BP2预示不良预后。体外功能实验表明,沉默SH3BP2可抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移能力。结论SH3BP2通过促进胶质瘤细胞增殖与迁移参与疾病进展,其表达水平具有诊断及预后评估价值,可作为潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 SH3结构域结合蛋白2 胶质瘤 癌症基因组图谱 生物信息学 短发夹RNA 细胞增殖 细胞迁移分析 预后
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阴沟肠杆菌B8发酵液对植物的促生作用和IAA分析 被引量:27
11
作者 徐幼平 臧荣春 +1 位作者 陈卫良 娄沂春 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期282-284,共3页
以甜玉米 Sh2和番茄为试验材料 ,研究阴沟肠杆菌 B8发酵液对植物的促生作用 ,并对其所含的主要生理活性物质进行了分析 .结果表明 :以适当浓度的发酵液喷施植株幼苗期的叶面 ,两周后 ,发现其株高与对照相比明显增加 ,根系也较对照发达 .... 以甜玉米 Sh2和番茄为试验材料 ,研究阴沟肠杆菌 B8发酵液对植物的促生作用 ,并对其所含的主要生理活性物质进行了分析 .结果表明 :以适当浓度的发酵液喷施植株幼苗期的叶面 ,两周后 ,发现其株高与对照相比明显增加 ,根系也较对照发达 . HPL C证实该发酵液中含有植物生长激素吲哚乙酸( IAA) .在最适条件下 ,培养基中添加 0 .2 %色氨酸时 ,发酵液中 IAA含量可达 90 4 .38mg/ L.试验还发现 ,喷施发酵液后的植株内源 展开更多
关键词 阴沟肠杆菌B8 发酵液 IAA 促生作用 番茄 甜玉米sh2 生理活性研究 植物生长调节作用
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哮喘小鼠肺内及内脏感觉传入系统SH2-Bβ的表达 被引量:9
12
作者 齐金萍 曹德寿 +2 位作者 刘晓湘 张国斌 方秀斌 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期195-198,共4页
目的研究SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7~T5脊神经节及对应的脊髓后角)的表达,探讨SH2-Bβ在哮喘发病中的作用.方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组,每组15只.利用免疫组织化学方法测定两组小鼠肺... 目的研究SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7~T5脊神经节及对应的脊髓后角)的表达,探讨SH2-Bβ在哮喘发病中的作用.方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组,每组15只.利用免疫组织化学方法测定两组小鼠肺、C7~T5脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ的免疫反应变化;用免疫印迹法(Western blotting)检测肺及C7~T5节段脊髓SH2-Bβ及神经生长因子(NGF)的免疫反应变化;Metamoph图像分析系统对结果进行分析.结果免疫组织化学结果显示哮喘小鼠肺、C7~T5节段脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ免疫阳性产物平均光密度值分别为0.806±0.023、0.766±0.018、0.547±0.014,明显高于对照组(0.243±0.018、0.131±0.011、0.215±0.029)(P<0.01).Western blotting显示SH2-Bβ及NGF在哮喘小鼠的C7~T5节段脊髓及肺内表达明显强于对照组;正常对照组脊髓及肺内的平均相对光密度值分别为0.346±0.017和0.512±0.018,哮喘组为0.738±0.021和1.526±0.022.NGF在正常对照组脊髓及肺内的平均相对光密度值分别为0.357±0.021和0.734±0.013,哮喘组为1.445±0.015和1.265±0.018;且SH2-Bβ与NGF光密度值呈正相关(r=0.651,P<0.01).结论结果提示,SH2-Bβ在哮喘小鼠肺、C7~T5节段脊神经节及对应的脊髓后角过表达,可能是NGF参与哮喘发病的重要信号分子. 展开更多
关键词 SH2-BΒ 脊神经节 脊髓 哮喘 免疫组织化学法 免疫印迹法 小鼠
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电针对中枢Stat5敲除所致肥胖小鼠瘦素水平和下丘脑Kctd15、Sh2b1 mRNA的影响 被引量:12
13
作者 洪浩 卢圣锋 +2 位作者 傅淑平 偶晨 朱冰梅 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期35-37,共3页
目的观察电针对中枢Stat5条件性敲除Stat5Nestin-Cre(Stat5NKO)肥胖小鼠下丘脑Kctd15、Sh2b1基因表达的影响。方法 20只肥胖的Stat5NKO小鼠随机分为肥胖组和电针组,每组10只;10只Stat5fl/fl小鼠作为正常组。其中电针组选取单侧后三里... 目的观察电针对中枢Stat5条件性敲除Stat5Nestin-Cre(Stat5NKO)肥胖小鼠下丘脑Kctd15、Sh2b1基因表达的影响。方法 20只肥胖的Stat5NKO小鼠随机分为肥胖组和电针组,每组10只;10只Stat5fl/fl小鼠作为正常组。其中电针组选取单侧后三里、内庭穴进行针刺治疗,每日1次,双侧交替进行,每次30min,韩氏电针仪频率2/15Hz,疏密波,6d为1个疗程,共治疗4个疗程。运用ELISA法检测血清中瘦素(Leptin)含量,qPCR技术检测下丘脑中肥胖相关基因Kctd15、Sh2b1mRNA的表达。结果与正常组小鼠比较,肥胖组小鼠体质量明显增加(P〈0.01)伴随血清Leptin含量升高(P〈0.05),下丘脑Leptin水平下降(P〈0.05),同时下丘脑Kctd15、Sh2b1mRNA表达下调(P〈0.05~0.01);与肥胖组小鼠比较,电针组小鼠的体质量明显下降(P〈0.01),血清Leptin含量降低(P〈0.01),且下丘脑Leptin水平回升(P〈0.01),Kctd15、Sh2b1mRNA表达水平上调(P〈0.01)。结论电针可能通过调节Leptin水平并促进Kctd15、Sh2b1表达,实现对Stat5NKO小鼠的减肥效应。 展开更多
关键词 肥胖 电针 瘦素 Kctd15 Sh2b1
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SH2-B在结肠癌组织中表达及临床意义 被引量:9
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作者 李建国 华建江 +3 位作者 黄大毛 曾亮 段朝军 唐发清 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第13期2004-2007,共4页
目的探讨SH2-B在结肠癌癌变过程中的演变规律,分析SH2-B表达与结肠癌临床分期的关系,分析SH2-B表达与结肠癌转移的关系。方法免疫组织化学方法检测69例结肠癌组织、27例结肠腺瘤组织、29例结肠息肉组织中SH2-B蛋白的表达。69例结肠癌患... 目的探讨SH2-B在结肠癌癌变过程中的演变规律,分析SH2-B表达与结肠癌临床分期的关系,分析SH2-B表达与结肠癌转移的关系。方法免疫组织化学方法检测69例结肠癌组织、27例结肠腺瘤组织、29例结肠息肉组织中SH2-B蛋白的表达。69例结肠癌患者Ⅰ期11例、Ⅱ期22例、Ⅲ期19例、Ⅳ期17例,其中无转移34例,淋巴节转移35例。结果免疫组织化学检测结果显示,SH2-B蛋白在结肠息肉组织、结肠腺瘤组织、结肠癌组织中的表达呈浆-核型,以胞浆为主。结肠息肉患者SH2-B阳性率为31%(9/29),结肠腺瘤患者SH2-B阳性率为52%(14/27),结肠癌患者SH2-B阳性率为93%(27/29)。结肠癌组织中SH2-B的阳性细胞率(0.64±0.26)明显高于结肠腺瘤组织(0.26±0.27)和结肠息肉组织(0.12±0.21)(P<0.001),结肠腺瘤组织中阳性细胞表达率明显高于结肠息肉组织(P<0.05)。结肠癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期强阳性率分别为18.2%(2/11)、45.4%(10/22)、57.9%(11/19)和82.3%(14/17)。转移组和非转移组强阳性率为45.7%(16/35)和23.5%(8/34),转移组SH2-B强阳性率显著高于无转移组(P<0.05)。结论 SH2-B过表达可能参与了结肠癌癌变过程,可能是结肠癌变的早期事件。SH2-B表达与结肠临床分期有关。SH2-B可能参与了结肠癌转移,SH2-B高表达与结肠癌转移呈正相关。 展开更多
关键词 结肠癌 SH2-B 免疫组织化学 临床分期 转移
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重组腺病毒Ad5-hSH2-EGFP及其突变体的构建与鉴定 被引量:10
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作者 史静 彭智 +5 位作者 罗红伟 曹唯希 陶崑 李亚娟 王海霞 冯文莉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第5期507-512,共6页
目的构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和HA标签的SH2基因重组腺病毒Ad5-hSH2-EGFP及其突变体Ad5-hSH2mt-EGFP,并观察其对K562细胞增殖的影响。方法设计并化学合成引物,采用RT-PCR法扩增hSH2基因,重叠PCR法扩增hSH2mt基因,分别克隆至pAd... 目的构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和HA标签的SH2基因重组腺病毒Ad5-hSH2-EGFP及其突变体Ad5-hSH2mt-EGFP,并观察其对K562细胞增殖的影响。方法设计并化学合成引物,采用RT-PCR法扩增hSH2基因,重叠PCR法扩增hSH2mt基因,分别克隆至pAdTrack-CMV,构建穿梭质粒,经PmeⅠ酶切,转化感受态pAdEasy-BJ5183,在细菌内同源重组产生复制缺陷型重组腺病毒质粒pAd5-hSH2-EGPF和pAd5-hSH2mt-EGPF,PacⅠ酶切后转染AD293细胞进行包装,获得重组腺病毒Ad5-hSH2-EGFP和Ad5-hSH2mt-EGFP,扩增病毒,测定滴度并经PCR和Western blot鉴定。重组腺病毒感染K562细胞,MTT法检测病毒对K562细胞增殖活性的影响。结果重组腺病毒质粒pAd5-hSH2-EGFP和pAd5-hSH2mt-EGFP经酶切鉴定构建正确;重组腺病毒Ad5-hSH2-EGFP和Ad5-hSH2mt-EGFP的滴度均可达1.6×1012;PCR结果表明,2种重组腺病毒包装和扩增成功,Western blot结果表明,重组腺病毒携带的目的基因能够在AD293细胞中表达;MTT检测证实,Ad5-hSH2-EGFP对K562细胞的增殖具有明显的抑制作用。结论已成功构建重组腺病毒Ad5-hSH2-EGFP和Ad5-hSH2mt-EGFP,Ad5-hSH2-EGFP能在体外明显抑制K562细胞的增殖,为进一步探讨SH2基因对慢性粒细胞白血病的治疗作用及其机制奠定了基础。 展开更多
关键词 重组腺病毒 含SH2域蛋白质酪氨酸磷酸酶类 K562细胞 细胞增殖
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地塞米松抑制哮喘小鼠SH2-Bβ蛋白表达 被引量:4
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作者 齐金萍 王巧玲 +1 位作者 金韵 胡颖 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1501-1504,共4页
目的探讨地塞米松对哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7-T5脊神经节及对应的脊髓后角)SH2-Bβ表达的抑制作用。方法用卵蛋白法制备BABL/c小鼠哮喘模型,应用免疫组织化学和免疫印迹法,观察SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入部位的表达及... 目的探讨地塞米松对哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7-T5脊神经节及对应的脊髓后角)SH2-Bβ表达的抑制作用。方法用卵蛋白法制备BABL/c小鼠哮喘模型,应用免疫组织化学和免疫印迹法,观察SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入部位的表达及地塞米松对其表达的影响。应用小鼠肺功能仪检测气道阻力的变化。结果在肺组织、C7-T5段脊神经节及相应节段的脊髓后角内,哮喘组SH2-Bβ表达明显高于对照组和地塞米松组(P<0.01)。哮喘组气道阻力明显高于正常组及地塞米松组(P<0.01)。结论地塞米松抑制哮喘小鼠SH2-Bβ的表达可能是激素治疗哮喘的机制之一。 展开更多
关键词 SH2-BΒ 地塞米松 脊神经节 脊髓 哮喘 小鼠
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接头蛋白SH2B1在食管癌中的表达及意义 被引量:5
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作者 张航 段朝军 +2 位作者 张恒 程远大 张春芳 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期125-131,共7页
目的:研究接头蛋白SH2B1在食管癌组织中的表达水平及其临床病理意义。方法:选取120例食管癌患者手术切除的标本中的食管癌组织、癌旁组织及正常组织,分别采用免疫组织化学SABC法及Western印迹检测SH2B1的表达水平,同时分析SH2B1在食管... 目的:研究接头蛋白SH2B1在食管癌组织中的表达水平及其临床病理意义。方法:选取120例食管癌患者手术切除的标本中的食管癌组织、癌旁组织及正常组织,分别采用免疫组织化学SABC法及Western印迹检测SH2B1的表达水平,同时分析SH2B1在食管癌组织中的表达水平与临床病理特征的关系。采用RT-PCR和Western印迹检测SH2B1在食管癌细胞株TE-1,Eca-109和正常人食管上皮细胞株HEEC中的表达水平。结果:SH2B1蛋白在食管正常组织、癌旁组织、癌组织中表达逐步增强(P<0.05),并且SH2B1蛋白在食管癌组织中的表达水平与食管癌患者的肿瘤浸润程度、TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与性别、年龄、饮酒与否、肿瘤类型、分化程度均无明显相关(P>0.05);SH2B1在食管癌细胞株TE-1,Eca-109和正常人食管上皮细胞株HEEC中均表达,但在食管癌细胞株TE-1,Eca-109中均较正常人食管上皮细胞株HEEC中表达明显增高(P<0.05)。结论:SH2B1在人类食管癌中过量表达,并可能与食管癌侵袭和转移密切相关。 展开更多
关键词 SH2B1食管癌 侵袭 转移
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重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP的构建及其对K562细胞增殖的影响 被引量:3
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作者 史静 胡晶 +5 位作者 肖青 彭智 曹唯希 罗秋平 王方 冯文莉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1806-1811,共6页
目的构建表达SH2-DED融合基因的新型重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP,观察其对K562细胞增殖的抑制作用。方法重叠PCR扩增SH2-DED融合基因并克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建成穿梭质粒pAdT-SD-EGFP并进行酶切和测序鉴定。穿梭质粒经Pm... 目的构建表达SH2-DED融合基因的新型重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP,观察其对K562细胞增殖的抑制作用。方法重叠PCR扩增SH2-DED融合基因并克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建成穿梭质粒pAdT-SD-EGFP并进行酶切和测序鉴定。穿梭质粒经Pme I酶切后转化pAd5F35-GFP的BJ5183感受态,通过细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAd5F35-SD-EGFP及其突变体,Pac I酶切后转染AD293细胞进行包装。重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP经PCR和western blot鉴定后进行病毒扩增和滴度测定。体外感染K562细胞,通过MTT和流式周期检测实验观察Ad5F35-SD-EGFP对K562细胞增殖的影响。结果 PCR、酶切和测序结果均表明pAdT-SD-EGFP和pAd5F35-SD-EGFP构建成功;PCR、EGFP检测结果证明重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP包装扩增成功,滴度可达1.4×1012 pfu/ml。转染K562细胞后,Western blot可检测到目的蛋白的表达,MTT实验和流式周期检测结果证明其对K562细胞的增殖有明显的抑制作用。结论成功构建并鉴定了携带SH2-DED融合基因的重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP,其对BCR-ABL阳性K562细胞的增殖有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 Bcr-Ab1 SH2 DED 重组腺病毒 AD293细胞
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重组腺病毒Ad5/F35-HF2S的构建及其鉴定 被引量:3
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作者 李千音 黄峥兰 +2 位作者 高淼 钟梁 冯文莉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第11期1434-1438,共5页
目的构建携带HA标签的重组腺病毒Ad5F35-HF2S。方法体外合成HA标签DNA双链,以K562细胞cDNA为模板,分别扩增FKBP1、FKBP2和SH2基因,依次亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV-HA中,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S,穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化... 目的构建携带HA标签的重组腺病毒Ad5F35-HF2S。方法体外合成HA标签DNA双链,以K562细胞cDNA为模板,分别扩增FKBP1、FKBP2和SH2基因,依次亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV-HA中,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S,穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化,与腺病毒骨架质粒pAd5/F35在Ad5/F35-BJ5183感受态细胞中同源重组,获得重组腺病毒质粒pAd5/F35-HF2S,经PacⅠ酶切线性化后,转染AD-293细胞进行包装、扩增,获得重组腺病毒Ad5/F35-HF2S,经2轮扩增后,测定病毒滴度;采用PCR及Western blot法检测感染细胞中HF2S基因的转录及蛋白的表达。结果重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S及重组腺病毒质粒pAd5/F35-HF2S经鉴定均构建正确;经包装及2轮扩增后,重组腺病毒Ad5/F35-HF2S病毒滴度可达1013IU/ml;经PCR及Western blot鉴定表明,重组腺病毒携带的HF2S基因能够在AD-293细胞中表达。结论已成功构建了表达HF2S基因的重组腺病毒Ad5/F35-HF2S,为研究Grb2-SH2结构域在CML中的基因治疗和作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 生长因子受体结合蛋白 SH2 FKBP 重组腺病毒 AD-293细胞
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NGF对哮喘小鼠肺及初级传入神经元SH2-Bβ表达的调节作用 被引量:10
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作者 齐金萍 王巧玲 +2 位作者 刘晓湘 曹德寿 方秀斌 《解剖科学进展》 CAS 2006年第1期23-26,i0002,共5页
目的探讨NGF对哮喘小鼠肺及初级传入神经元(C7-T5脊神经节及相应脊髓后角)SH2-Bβ表达的调节作用。方法BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组、anti-NGF组,每组10只。利用免疫组织化学方法,免疫印迹法(W estern B lot)... 目的探讨NGF对哮喘小鼠肺及初级传入神经元(C7-T5脊神经节及相应脊髓后角)SH2-Bβ表达的调节作用。方法BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组、anti-NGF组,每组10只。利用免疫组织化学方法,免疫印迹法(W estern B lot)测定各组SH2-Bβ的免疫反应变化;M etamoph图象分析系统对结果进行分析。结果免疫组织化学结果显示哮喘小鼠肺、C7-T5节段脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ免疫阳性产物平均光密度值(MOD)分别为0.806±0.023、0.766±0.018、0.547±0.014,明显高于对照组(0.243±0.018、0.131±0.011、0.215±0.029)(P<0.01)。而Anti-NGF组小鼠SH2-Bβ免疫阳性产物MOD分别为0.252±0.015、0.158±0.012、0.251±0.024,明显低于哮喘组(P<0.01)。W estern B lot显示哮喘小鼠的C7-T5节段脊髓及肺内SH2-BβMOD与-βactin MOD的比值(0.738±0.021和1.526±0.022)明显高于对照组(0.346±0.017和0.512±0.018,P<0.01);而Anti-NGF组小鼠在肺、C7-T5节段脊髓SH2-Bβ免疫阳性产物MOD与β-actioin MOD的比值(0.436±0.011和0.682±0.015)明显低于哮喘组(P<0.01)。结论肺内、C7-T5脊神经节及对应脊髓后角神经元的SH2-Bβ可能参与NGF介导的哮喘的发病过程。 展开更多
关键词 SH2-BΒ 神经生长因子 脊髓 脊神经节 哮喘小鼠
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