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丙型肝炎病毒核心蛋白对Wnt信号抑制因子SFRPs甲基化修饰的影响 被引量：2
1
作者 陈庆美 刘娇 +4 位作者 周帆 单晓亮 陈林林 权会琴 唐霓 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第20期2116-2119,共4页
目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白是否通过对Wnt信号抑制因子SFRPs的甲基化修饰,从而活化Wnt信号通路。方法将编码HCV核心蛋白的腺病毒(AdCore)或GFP对照腺病毒(AdGFP)感染SMMC-7721细胞,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测SFRPs基因mRNA的表达... 目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白是否通过对Wnt信号抑制因子SFRPs的甲基化修饰,从而活化Wnt信号通路。方法将编码HCV核心蛋白的腺病毒(AdCore)或GFP对照腺病毒(AdGFP)感染SMMC-7721细胞,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测SFRPs基因mRNA的表达;用5-氮杂-2'-脱氧胞苷(DAC)对AdCore或AdGFP腺病毒感染的SMMC-7721细胞进行去甲基化处理,进一步采用甲基化特异性PCR(MSP)和DNA甲基化测序,检测SFRPs基因启动子区CpG岛的甲基化程度,Western blot检测甲基化转移酶Dnmts的表达。结果在HCV核心蛋白过表达的SMMC-7721细胞系中,SFRP2和SFRP5基因mRNA的表达量与对照组相比明显降低(P<0.05);甲基化分析结果表明:SFRP5基因启动子区CpG岛呈现高甲基化修饰;甲基化转移酶Dnmt1、Dnmt3a表达量增加(P<0.05)。结论 HCV核心蛋白可以促进SFRP5基因启动子区CpG岛的甲基化修饰,参与HCV相关疾病的发生。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 核心蛋白 sfrps 甲基化 细胞系 肿瘤
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食管癌组织中SFRPs基因异常甲基化检测及意义 被引量：1
2
作者 王续 刘月平 王小玲 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第36期25-30,共6页
目的检测食管鳞状细胞癌和癌旁正常组织SFRPs基因启动子区甲基化变化特征及其与临床病理变化的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)。结果 110例食管鳞癌组织SFRP1、SFRP2、SFRP4、SFRP5基因启动子区甲基化阳性率分别为61.8%(6... 目的检测食管鳞状细胞癌和癌旁正常组织SFRPs基因启动子区甲基化变化特征及其与临床病理变化的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)。结果 110例食管鳞癌组织SFRP1、SFRP2、SFRP4、SFRP5基因启动子区甲基化阳性率分别为61.8%(68/110)、66.7%(73/110)、62.7%(69/110)、64.3%(71/110),明显高于癌旁正常组织的13.3%(4/30)、13.3%(4/30)、20%(6/30)、26.7%(8/30)。淋巴结转移组和中、低分化食管鳞癌组织甲基化阳性率明显高于无淋巴结转移组及高分化食管癌组织,但是与性别,年龄及肿瘤分期无明显关联。结论本研究结果显示,SFRPs基因启动子区甲基化与食管鳞癌发生发展密切相关.这些基因的甲基化检测可为食管癌的防治和预后评价提供遗传学理论依据。。 展开更多
关键词 食管癌 sfrps 甲基化特异性聚合酶链式反应
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SFRP 4基因对牛前体脂肪细胞分化作用的影响
3
作者 赵刚奎 高海旭 +4 位作者 尹思琦 孙红红 辛怡然 昝林森 赵春平 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期611-620,共10页
旨在探究分泌型卷曲相关蛋白4(screted frizzled related protein 4,SFRP 4)基因对于牛前体脂肪细胞分化的影响,本研究以秦川牛肾周前体脂肪细胞为试验对象,处理组和对照组进行了3个生物学重复。克隆秦川牛SFRP 4基因完整的蛋白质编码... 旨在探究分泌型卷曲相关蛋白4(screted frizzled related protein 4,SFRP 4)基因对于牛前体脂肪细胞分化的影响,本研究以秦川牛肾周前体脂肪细胞为试验对象,处理组和对照组进行了3个生物学重复。克隆秦川牛SFRP 4基因完整的蛋白质编码区序列,并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术检测该基因在秦川牛各组织及肾周前体脂肪细胞各分化阶段中的表达;筛选有效的牛SFRP 4基因siRNA序列,构建腺病毒过表达载体,分别转染至牛肾周前体脂肪细胞中诱导分化,通过油红O染色、qRT-PCR和蛋白质印迹等试验方法探究SFRP 4基因对肾周前体脂肪细胞分化的影响。结果表明,秦川牛SFRP 4基因CDS全长1041 bp,氨基酸序列与绵羊和山羊具有高度同源性,与小鼠的亲缘关系较远;该蛋白分类为亲水性蛋白,共有24个磷酸化修饰位点;该基因在秦川牛各组织广泛表达,在肾脏和皮下脂肪相对表达量较高。时序表达谱显示前体脂肪细胞分化过程中SFRP 4基因表达量呈现先升高后降低趋势。干扰SFRP 4后,牛肾周前体脂肪细胞脂滴明显减少,脂质细胞成脂分化标志基因PPARγ、FABP4、PLIN2、SCD 1表达水平显著下调(P<0.05),CEBPβ表达水平极显著下调(P<0.01),PPARγ(P<0.05)和CEBPβ(P<0.01)蛋白水平显著下调;过表达该基因后,显著上调PPARγ(P<0.01)、CEBPβ(P<0.01)、FABP4(P<0.05)、PLIN2(P<0.01)、SCD1(P<0.01)基因表达水平,显著上调了PPARγ、CEBPβ、FABP4、SCD1蛋白水平(P<0.05)。以上结果为进一步阐述SFRP 4基因调控牛肾周前体脂肪细胞成脂分化和脂肪沉积提供了重要的依据。 展开更多
关键词 秦川牛 SFRP 4 肾周前体脂肪细胞 成脂分化
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SFRP5在不同毛色小鼠皮肤中的定位及差异表达
4
作者 焦丁兴 闫洋洋 +6 位作者 魏子博 张香斋 石锐利 刘小双 李封赛 杨姗姗 马增军 《河北科技师范学院学报》 2025年第2期12-18,共7页
为了探讨SFRP5在小鼠皮肤毛色形成中的作用,本次试验采用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组织化学试验比较了不同毛色小鼠皮肤中SFRP5的表达水平,并且利用生物信息学软件及在线分析网站对小鼠SFRP5基因进行分析。实时荧光定量PCR... 为了探讨SFRP5在小鼠皮肤毛色形成中的作用,本次试验采用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组织化学试验比较了不同毛色小鼠皮肤中SFRP5的表达水平,并且利用生物信息学软件及在线分析网站对小鼠SFRP5基因进行分析。实时荧光定量PCR结果显示,SFRP5在黑色小鼠皮肤组织中的相对表达量是白色小鼠的0.46倍(P<0.01);Western blot结果显示,SFRP5蛋白在黑色小鼠皮肤组织中的相对表达量是白色小鼠的0.25倍(P<0.01);免疫组织化学结果显示,SFRP5在不同毛色小鼠皮肤中均呈现免疫阳性反应,且SFRP5在黑色小鼠皮肤组织中的光密度值是白色小鼠的0.86倍(P<0.01);基因分析结果显示,SFRP5基因具有高度的保守性,二级结构和三级结构预测显示鼠SFRP5蛋白结构的主要组成部分为无规则卷曲,蛋白互作结果显示SFRP5与Wnt家族成员之间有较强的互作关系。综上表明,SFRP5可能参与毛色形成。 展开更多
关键词 SFRP5 毛色 小鼠 定位 表达
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SFRP4、DKK1在结肠癌中的表达及意义
5
作者 韩汉卿 王家宏 《内蒙古医学杂志》 2025年第7期787-791,共5页
目的探究SFRP4及DKK1在结肠癌组织及癌旁组织中的表达及意义。方法选取2024年1—7月某医院60例结肠癌癌组织及癌旁组织,采用免疫组织化学染色的方法检测其病理蜡块中SFRP4与DKK1的表达情况。采用SPSS 26.0统计学软件进行处理,探讨所得... 目的探究SFRP4及DKK1在结肠癌组织及癌旁组织中的表达及意义。方法选取2024年1—7月某医院60例结肠癌癌组织及癌旁组织,采用免疫组织化学染色的方法检测其病理蜡块中SFRP4与DKK1的表达情况。采用SPSS 26.0统计学软件进行处理,探讨所得数据差异与临床实验标本病理特征的关系。结果(1)结肠癌组织中的SFRP4表达程度均高于癌旁组织(P<0.05),DKK1表达程度均低于癌旁组织(P<0.05)。(2)SFRP4在临床实验病例中的表达与结肠癌TNM分期、年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位无关(P>0.05),与淋巴结转移、分化程度有关(P<0.05)。(3)DKK1在临床实验病例中的表达与结肠癌年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、分化程度无关(P>0.05),但与淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。(4)在结肠癌中,SFRP4与DKK1之间的表达有明显的相关性(r=-0.428,P<0.05)。(5)GEPIA数据库分析显示,结肠癌组织中SFRP4的表达与结肠癌患者的总生存期有明显相关性,但在结肠癌组织中DKK1表达与总生存期无明显相关性。结论结肠癌中的SFRP4表达程度均高于癌旁组织,DKK1表达程度均低于癌旁组织,提示二者与结肠癌的发生有关;SFRP4与DKK1在结肠癌中的表达呈负相关,提示二者可能共同参与结肠癌的发生、发展。GEPIA数据库分析显示结肠癌中SFRP4高表达患者的总生存期限较短,DKK1的表达则与患者总生存期限无关,这为结肠癌的治疗提供新了思路。 展开更多
关键词 结肠癌 SFRP4 DKK1 表达差异 免疫组织化学
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膀胱癌组织中SFRP4、HOXB9表达及其与患者临床病理特征、预后的关系
6
作者 任慧芳 郭凡凡 +2 位作者 马琳 韩树刚 马文波 《诊断病理学杂志》 2025年第7期773-779,共7页
目的探讨膀胱癌组织中分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)、同源框基因B9(HOXB9)表达及其与患者临床病理特征、预后的关系。方法选取张家口市第一医院2018年1月至2019年6月收治的158例膀胱癌患者,在术中收集其膀胱癌组织和癌旁组织。检测两组织... 目的探讨膀胱癌组织中分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)、同源框基因B9(HOXB9)表达及其与患者临床病理特征、预后的关系。方法选取张家口市第一医院2018年1月至2019年6月收治的158例膀胱癌患者,在术中收集其膀胱癌组织和癌旁组织。检测两组织中SFRP4、HOXB9 mRNA及蛋白表达;分析SFRP4、HOXB9与膀胱癌患者预后的关系;分析影响膀胱癌患者预后的因素。结果与癌旁组织相比,膀胱癌组织中SFRP4表达水平下降,HOXB9表达水平上升(P<0.05)。SFRP4在膀胱癌组织中阳性表达的患者5年生存率更高(P<0.05),HOXB9在膀胱癌组织中阴性表达的患者5年生存率更高(P<0.05)。预后良好组淋巴结转移、肿瘤大小>3.0 cm、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、低分化程度、SFRP4阴性表达、HOXB9阳性表达比例低于预后不良组(P<0.05)。有淋巴结转移、TNM分期为III~IV期、SFRP4阴性表达、HOXB9阳性表达为影响膀胱癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论膀胱癌组织中SFRP4表达水平下降,HOXB9表达水平上升,二者与临床病理特征以及预后相关。 展开更多
关键词 膀胱癌 SFRP4 HOXB9 临床病理特征 预后
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初诊断2型糖尿病患者外周血SFRP4水平变化与胰岛素抵抗及肥胖的相关性研究
7
作者 王俊瑶 罗昌霞 +5 位作者 孙群智 唐智翔 黄晓珊 周星辰 邱钰婷 郭一丁 《哈尔滨医药》 2025年第3期27-30,共4页
目的分析初诊2型糖尿病(T2DM)患者外周血中分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)表达水平与胰岛素抵抗(IR)及肥胖之间的关联性。方法选取50例新确诊T2DM患者作为研究对象,依据体质指数(BMI)将其划分为非肥胖亚组(n=25,BMI<25kg/m^(2))和肥胖亚... 目的分析初诊2型糖尿病(T2DM)患者外周血中分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)表达水平与胰岛素抵抗(IR)及肥胖之间的关联性。方法选取50例新确诊T2DM患者作为研究对象,依据体质指数(BMI)将其划分为非肥胖亚组(n=25,BMI<25kg/m^(2))和肥胖亚组(n=25,BMI≥25kg/m^(2));同时选取同期在该院体检的40名健康志愿者作为对照组,其中正常体重组(n=20,BMI<25kg/m^(2))和肥胖组(n=20,BMI≥25kg/m^(2))。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组SFRP4浓度,并检测空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、空腹胰岛素(Fins)等代谢指标,计算BMI、腰臀比(WHR)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛β细胞功能指数(HOMA-β),探讨SFRP4与IR及肥胖程度的相关性。结果初诊断的2型糖尿病(T2DM)患者体内分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)的浓度显著提升。通过相关性分析表明,SFRP4与体重指数(BMI)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)以及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均呈现显著正相关(P<0.05),而与胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)则表现为负相关(P<0.05)。进一步的多因素回归分析证实,HbA1c和BMI是影响SFRP4浓度的独立预测因子。结论T2DM患者血浆中SFRP4的异常升高现象在肥胖亚群中尤为突出。此外,SFRP4水平的改变与T2DM、胰岛素抵抗及肥胖状态存在密切关联。通过早期干预SFRP4的表达水平,可能为T2DM的预防和治疗开辟新的研究方向。 展开更多
关键词 SFRP4 2型糖尿病 胰岛素抵抗 肥胖
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心肌梗死患者血清SFRP5、S100A4表达与心肌损伤和左心室重构的关系
8
作者 朱伟 李蕊 《中南医学科学杂志》 2025年第1期89-91,共3页
目的分析心肌梗死(MI)患者血清分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、S100钙结合蛋白A4(S100A4)表达与心肌损伤和左心室重构的关系。方法选择心肌梗死患者(MI组)、健康体检者(对照组)各80例。比较两组左心室重构指标[左室舒张末内径(LVEDD)、左... 目的分析心肌梗死(MI)患者血清分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、S100钙结合蛋白A4(S100A4)表达与心肌损伤和左心室重构的关系。方法选择心肌梗死患者(MI组)、健康体检者(对照组)各80例。比较两组左心室重构指标[左室舒张末内径(LVEDD)、左室舒张末容积(LVEDV)、左室收缩末容积(LVESV)、左室射血分数(LVEF)]、血清SFRP5、S100A4、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平。结果MI组LVESV、LVEDV、LVEDD高于对照组,LVEF低于对照组(P<0.05)。MI组Lp-PLA2、NT-proBNP、SFRP5和S100A4水平高于对照组(P<0.05)。SFRP5、S100A4与LVESV、LVEDV、LVEDD、Lp-PLA2、NT-proBNP呈正相关,与LVEF呈负相关(P<0.05)。结论心肌梗死患者血清SFRP5和S100A4异常表达,且与心肌损伤和左心室重构关系密切。 展开更多
关键词 SFRP5 S100A4 心肌梗死 心肌损伤 左心室重构
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miR-27a靶向调控SFRP1对结直肠癌生物学行为的影响
9
作者 司马学琴 苏延停 曾智 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期418-423,共6页
目的探讨miR-27a在结直肠癌中的表达,并分析其靶向调控分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)对人结直肠癌细胞HCT116生物学行为的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中miR-27a和SFRP1 mRNA的表达情况;Western blo... 目的探讨miR-27a在结直肠癌中的表达,并分析其靶向调控分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)对人结直肠癌细胞HCT116生物学行为的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中miR-27a和SFRP1 mRNA的表达情况;Western blot检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中SFRP1蛋白表达水平;运用TargetScan预测软件及双荧光素酶报告基因实验检测miR-27a对SFRP1的靶向调控作用;将miR27a模拟物(miR-27a mimic)、miR-27a抑制物(miR-27a inhibitor)及阴性对照(NC)转染至HCT116细胞中;采用qRT-PCR测定各组细胞中miR-27a和SFRP1 mRNA的表达水平;运用四唑盐(MTT)比色法检测各组细胞增殖情况;Transwell实验评估各组细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测各组细胞中SFRP1、Wnt/β-catenin信号通路中的关键因子Wnt4和β-catenin的蛋白表达水平。结果与癌旁正常组织相比,miR-27a在结直肠癌组织中高表达,而SFRP1在结直肠癌组织中低表达(P<0.05);TargetScan预测软件和双荧光素酶报告基因实验表明miR-27a靶向调控SFRP1;与NC组相比,miR-27a mimic组miR-27a表达水平升高,细胞增殖、侵袭和迁移能力增强,SFRP1蛋白表达降低,Wnt4和β-catenin蛋白表达增加(P<0.05);与miR-27a mimic组相比,miR-27a inhibitor组细胞内miR-27a表达下降,细胞增殖、侵袭和迁移能力降低,SFRP1蛋白表达增加,Wnt4和β-catenin蛋白表达降低(P<0.05)。结论miR-27a能够靶向调控SFRP1,通过上调SFRP1,阻断下游的Wnt/β-catenin信号通路,抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移等生物学过程,从而发挥抑癌作用。为临床治疗提供了新方向。 展开更多
关键词 miR-27a SFRP1 结直肠癌 Wnt4 Β-CATENIN
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低表达sFRP4通过PI3K/AKT信号通路作用于肝癌细胞的机制研究
10
作者 蒋渝 《工业微生物》 CAS 2024年第5期44-46,共3页
文章研究低表达s FRP4通过PI3K/AKT信号通路对肝癌细胞的具体作用机制,从而指导肝癌防治。实验选取肝细胞L-02、肝癌Huh7、Hep3B、Hep G2和MHCC97-H细胞进行细胞培养,以检测肝癌细胞和肝细胞内sFRP4蛋白表达、sFRP4m RNA表达、sFRP4沉默... 文章研究低表达s FRP4通过PI3K/AKT信号通路对肝癌细胞的具体作用机制,从而指导肝癌防治。实验选取肝细胞L-02、肝癌Huh7、Hep3B、Hep G2和MHCC97-H细胞进行细胞培养,以检测肝癌细胞和肝细胞内sFRP4蛋白表达、sFRP4m RNA表达、sFRP4沉默后HepG2细胞的增殖活性、各组细胞内PI3K、AKT、p21、Bcl-2、c-Myc蛋白与m RNA的表达情况,并对各项检测数据进行统计学分析。研究发现,肝癌细胞内s FRP4的表达情况高于肝细胞;sFRP4沉默后肝癌细胞的增殖、侵袭、转移能力增强,细胞凋亡减少;sFRP4沉默后PI3K/AKT信号通路相关因子的表达明显增强;肝癌中存在PI3K、p-AKT的异常表达,PI3K、AKT信号通路激活会增强肝癌细胞的增殖性、侵袭性、转移性。结果表明,低表达sFRP4通过PI3K/AKT信号通路可以促进肝癌细胞的增殖和侵袭,降低细胞凋亡率。 展开更多
关键词 sFRP4 PI3K/AKT信号通路 肝癌细胞
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HOXC6通过激活SFRP1/Wnt/β-catenin信号通路促进前列腺癌进展的机制研究 被引量：1
11
作者 郑勇军 李文敏 +5 位作者 郑立传 周燕峰 王健 夏维木 叶惟靖 俞家顺 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2024年第7期579-587,共9页
目的:探讨同源盒家族中的人类同源盒C6(HOXC6)基因在前列腺癌中的表达情况及其对前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及机制。方法:应用基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA)数据库中关于HOXC6研究的数据,对其在前列腺癌中的... 目的:探讨同源盒家族中的人类同源盒C6(HOXC6)基因在前列腺癌中的表达情况及其对前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及机制。方法:应用基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA)数据库中关于HOXC6研究的数据,对其在前列腺癌中的表达水平变化进行分析。采用GEPIA数据库分析HOXC6表达水平与前列腺癌患者生存预后之间的关系。通过Western印迹检测HOXC6蛋白在前列腺癌组织、正常前列腺组织及不同前列腺癌细胞株DU-145、PC-3以及正常人前列腺上皮细胞RWPE-1中的表达情况。在人前列腺癌细胞DU145、PC-3和正常人前列腺上皮细胞RWPE-1中,利用siRNA质粒稳定干扰HOXC6基因表达,采用CCK8、平板克隆、划痕、Transwell侵袭实验检测HOXC6基因对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。通过GEPIA数据库分析Wnt抑癌因子分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)基因与HOXC6的相关性,采用Western印迹检测HOXC6-siRNA转染后PC-3细胞中HOXC6、SFRP1、Wnt及β-catenin蛋白表达。结果:HOXC6在前列腺癌组织中的表达高于正常前列腺组织(P<0.01),在前列腺癌细胞中的表达高于正常前列腺上皮细胞(P<0.01)。结合生物信息学分析,HOXC6高表达的PCa患者比低表达的生存率低(P=0.011)。siRNA组HOXC6蛋白相对表达量、吸光度值、克隆形成数、侵袭细胞数低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。通过GEPIA数据库发现SFRP1高表达的前列腺癌患者预后较好,在体外实验中,前列腺癌PC-3细胞系中,Western印迹分析Wnt及β-catenin蛋白的表达均上升,SFRP1蛋白表达明显下降(P<0.05);与siRNA-NC、前列腺癌PC-3相比,siRNA-HOXC6转染组中的Wnt及β-catenin蛋白的表达均明显下降,SFRP1蛋白表达上升(P<0.05)。结论:HOXC6在前列腺癌组织中高表达,并与前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭有关;HOXC6通过抑制SFRP1/Wnt/β-catenin信号通路从而促进前列腺癌DU145、PC-3细胞的生长,HOXC6有可能是临床治疗前列腺癌的潜在靶标。 展开更多
关键词 前列腺癌 HOXC6 SFRP1/Wnt通路 增殖 迁移 侵袭
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过表达sFRP3对小鼠原代心肌成纤维细胞活化增殖的影响 被引量：1
12
作者 江舜祥 涂彬 +3 位作者 宋凯 何缓缓 陶辉 曹炜 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第5期809-814,共6页
目的探讨Wnt信号通路调控剂分泌型卷曲相关蛋白3(sFRP3)在小鼠心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖中的作用。方法购入1~3 d的小鼠乳鼠,行手术对心脏取材,消化后分离CFs进行培养。细胞贴壁生长后使用转化生长因子(TGF-β1)刺激构建CFs活化增殖... 目的探讨Wnt信号通路调控剂分泌型卷曲相关蛋白3(sFRP3)在小鼠心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖中的作用。方法购入1~3 d的小鼠乳鼠,行手术对心脏取材,消化后分离CFs进行培养。细胞贴壁生长后使用转化生长因子(TGF-β1)刺激构建CFs活化增殖模型;确认模型构建成功后分别向实验组和对照组细胞转染sFRP3过表达质粒和空载质粒24~48 h。通过Western blot、qRT-PCR的方法在分子层面对sFRP3、Periostin(POSTN)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达进行检测;使用MTT法、CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖能力的改变。结果在TGF-β1刺激构建的CFs活化增殖模型中,相较于对照组,模型组sFRP3蛋白及mRNA表达下降,活化增殖相关蛋白PCNA、POSTN和CollagenⅠ表达上调。另外,在质粒转染sFRP3过表达组的CFs中,PCNA、POSTN和CollagenⅠ蛋白及mRNA表达相较于空载组下降。MTT、CCK-8与EdU实验表明,质粒转染sFRP3过表达组的CFs增殖活性较空载组明显下降。结论过表达sFRP3明显抑制CFs活化增殖,提示sFRP3可能是参与调控CFs活化增殖的关键基因。 展开更多
关键词 sFRP3 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 活化 增殖
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基于METTL3-SFRP4/Wnt/β-catenin通路探讨黄芩清热除痹胶囊改善类风湿性关节炎的机制 被引量：2
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作者 王玉亭 吴雅婕 +4 位作者 黄玉蓉 薛秋云 程成龙 缪成贵 陈光亮 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期3081-3094,共14页
研究黄芩清热除痹胶囊(Huangqin Qingre Chubi Capsules,HQC)治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的作用及机制。70只雄性SPF级大鼠随机分为正常组,模型组,HQC低(0.18 g·kg^(-1))、中(0.36 g·kg^(-1))、高(0.72 g... 研究黄芩清热除痹胶囊(Huangqin Qingre Chubi Capsules,HQC)治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的作用及机制。70只雄性SPF级大鼠随机分为正常组,模型组,HQC低(0.18 g·kg^(-1))、中(0.36 g·kg^(-1))、高(0.72 g·kg^(-1))剂量组,甲氨蝶呤(MTX,0.75 mg·kg^(-1))组,阴性对照组(NC组,模型+生理盐水)。佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)分为正常组,模型组,HQC低(5%HQC含药血清+95%滑膜培养基)、中(10%HQC含药血清+90%滑膜培养基)、高(15%HQC含药血清+85%滑膜培养基)剂量组,阴性对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印记法(Western blot)检测甲基转移酶3(methyltransgerase like 3,METTL3)、分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(CCND1)、V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(c-Myc)、纤连蛋白(fibronectin)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP3)mRNA和蛋白的表达。免疫荧光法进一步检测MMP3和β-catenin蛋白表达。在AA-FLS上敲低METTL3基因表达水平,进一步检测各基因表达情况。酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8的水平。结果显示,与正常组相比,模型组大鼠四肢均发现红肿现象,关节肿胀程度明显增加;与模型组相比,各给药组关节肿胀度显著下降(P<0.05),后足撤退阈值和体质量指数均显著增加(P<0.05)。METTL3在AA大鼠高表达,且与SFRP4的表达呈负相关。AA-FLS经给药后,METTL3、β-catenin、CCND1、c-Myc、fibronectin、MMP3 m RNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组相比,敲低METTL3后β-catenin、CCND1、c-Myc、fibronectin、MMP3 m RNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。同时HQC+敲低METTL3组的β-catenin、CCND1、c-Myc、fibronectin、MMP3 m RNA和蛋白表达均明显低于METTL3敲低组(P<0.05)。HQC能不同程度降低IL-1β、IL-6、IL-8水平(P<0.05)。结果表明,HQC对AA大鼠有明显改善作用;METTL3在AA大鼠滑膜组织和AA-FLS中表达显著升高,这可能是诊断和治疗RA的潜在靶点;HQC通过METTL3-SFRP4/Wnt/β-catenin信号通路改善RA,具有明显的抗炎和抗风湿作用。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 黄芩清热除痹胶囊 METTL3 SFRP4 WNT/Β-CATENIN
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miR-586通过SFRP1调控骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭的机制研究 被引量：1
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作者 周子杰 张家豪 +3 位作者 姜吉霖 李书林 付解辉 汤发强 《福建医药杂志》 CAS 2024年第1期115-119,共5页
目的探究miR-586调控人骨肉瘤细胞U2OS的生物学行为的可能机制。方法通过比较骨肉瘤细胞系和人成骨细胞中miR-586的差异表达筛选目标细胞株,干扰miR-586表达后检测其对目标细胞株增殖、迁移、侵袭能力的影响;用双荧光素酶实验、实时荧... 目的探究miR-586调控人骨肉瘤细胞U2OS的生物学行为的可能机制。方法通过比较骨肉瘤细胞系和人成骨细胞中miR-586的差异表达筛选目标细胞株,干扰miR-586表达后检测其对目标细胞株增殖、迁移、侵袭能力的影响;用双荧光素酶实验、实时荧光定量聚合酶链式反应、Western blot验证miR-586与SFRP1相关性,检测干预miR-586、SFRP1后对目标细胞株迁移、侵袭能力的影响。结果相较于人成骨细胞hFOB1.19,骨肉瘤细胞系中U2OS细胞的miR-586表达量显著增加;调低miR-586后U2OS细胞增殖、侵袭、迁移能力下降,SFRP1的mRNA及蛋白表达增加;过表达miR-586后U2OS细胞增殖、侵袭、迁移能力上升,SFRP1的mRNA及蛋白表达下降;同时调低miR-586、SFRP1后,U2OS细胞侵袭及迁移能力较敲低miR-586组上升。结论在本研究中,miR-586/SFRP1轴调控骨肉瘤细胞U2OS的增殖与生物学行为,具有作为骨肉瘤的潜在诊断、治疗标志物的可能性。 展开更多
关键词 骨肉瘤 微小RNA 分泌型卷曲相关蛋白1 SFRP1
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基于GEO数据库筛选子宫平滑肌肉瘤与平滑肌瘤差异基因 被引量：1
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作者 莫劲思 彭冬先 王玳玮 《中国计划生育和妇产科》 2024年第11期95-99,F0003,F0004,共7页
目的 筛选GEO数据库关键基因,结合临床样本探讨子宫平滑肌肉瘤的发生机制,寻找新的分子标志物。方法 利用GEO数据库中的GSE207350和GSE205596数据集筛选差异表达基因(DEGs),进行GO、KEGG、DO和Reactome富集分析。构建蛋白互作网络(PPI)... 目的 筛选GEO数据库关键基因,结合临床样本探讨子宫平滑肌肉瘤的发生机制,寻找新的分子标志物。方法 利用GEO数据库中的GSE207350和GSE205596数据集筛选差异表达基因(DEGs),进行GO、KEGG、DO和Reactome富集分析。构建蛋白互作网络(PPI),筛选关键枢纽基因,选取128例临床病理样本对筛选结果进行转录及蛋白水平验证。结果 从两个数据集中共鉴定出10 397个DEGs,包括5 875个上调和4 522个下调DEGs。生物学功能富集分析揭示,这些DEGs主要与细胞增殖、细胞黏附和细胞周期调控等过程相关。重点分析发现12个核心枢纽基因,包括ACTG2、IGF1、CDH11等。qPCR实验表明,CDH11和SFRP4在子宫平滑肌肉瘤组织中的表达显著降低,ACTG2表达显著升高;但蛋白水平上仅SFRP4在子宫平滑肌肉瘤组织中的表达显著降低。结论 SFRP4基因在子宫平滑肌肉瘤的发展中起重要作用,可能成为潜在的生物标志物,为诊断和治疗提供了新靶点。 展开更多
关键词 子宫平滑肌肉瘤 子宫平滑肌瘤 SFRP4 生物标志物
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血清TGF-β1、Nesfatin-1、SFRP5与2型糖尿病胰岛素抵抗关系探究 被引量：1
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作者 孟祥雨 徐云 +1 位作者 陈雪辉 白立炜 《医学检验与临床》 2024年第2期52-55,共4页
目的:探讨血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、Nesfatin-1、分泌型卷曲相关蛋白-5(SFRP5)与2型糖尿病胰岛素抵抗的关系。方法:选取我院2021年4月-2023年4月收治的148例2型糖尿病患者为研究对象,根据稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)检测结... 目的:探讨血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、Nesfatin-1、分泌型卷曲相关蛋白-5(SFRP5)与2型糖尿病胰岛素抵抗的关系。方法:选取我院2021年4月-2023年4月收治的148例2型糖尿病患者为研究对象,根据稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)检测结果将患者分为轻度胰岛素抵抗组(91例,HOMA-IR<2.5)和中重度胰岛素抵抗组(57例,HOMA-IR≥2.5)。比较两组入院时血清TGF-β1、Nesfatin-1、SFRP5水平,分析入院时血清TGF-β1、Nesfatin-1、SFRP5水平与HOMA-IR的相关性,分析发生中重度胰岛素抵抗的影响因素、联合检测的诊断价值及危险度。结果:入院时,中重度胰岛素抵抗组血清TGF-β1、Nesfatin-1水平高于轻度胰岛素抵抗组,SFRP5水平低于轻度胰岛素抵抗组(P<0.05);入院时,HOMA-IR与血清TGF-β1、Nesfatin-1水平呈正相关,与SFRP5水平呈负相关(P<0.05);入院时,血清TGF-β1、Nesfatin-1、SFRP5水平为2型糖尿病患者发生中重度胰岛素抵抗的影响因素(P<0.05);入院时血清TGF-β1、Nesfatin-1、SFRP5水平联合诊断中重度胰岛素抵抗的AUC为0.808,最佳诊断敏感度为91.23%,特异度为70.33%;入院时血清TGF-β1、Nesfatin-1、SFRP5高水平患者发生中重度胰岛素抵抗的危险度是低水平的3.560、2.134、0.341倍(P<0.05)。结论:血清TGF-β1、Nesfatin-1、SFRP5水平与2型糖尿病胰岛素抵抗密切相关,可作为临床诊断病情的参考依据。 展开更多
关键词 2型糖尿病 胰岛素抵抗 GF-β1 NESFATIN-1 SFRP5
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支气管哮喘急性发作期患儿血清PGRN、SFRP1、CCL26与肺功能和气道炎症的相关性研究 被引量：3
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作者 连其昌 许晓丹 +2 位作者 庄娇容 郑志宏 卢蔚薇 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第10期1860-1863,共4页
目的:分析支气管哮喘急性发作期患儿血清颗粒蛋白前体(PGRN)、分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)、趋化因子配体26(CCL26)与肺功能和气道炎症的相关性。方法:选择2019年7月~2022年12月期间我院收治的支气管哮喘急性发作期患儿129例(急性组),... 目的:分析支气管哮喘急性发作期患儿血清颗粒蛋白前体(PGRN)、分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)、趋化因子配体26(CCL26)与肺功能和气道炎症的相关性。方法:选择2019年7月~2022年12月期间我院收治的支气管哮喘急性发作期患儿129例(急性组),根据肺功能检查并结合临床特点,将患儿分为轻度组(n=51)、中度组(n=42)和重度组(n=36)。另选取同期来我院治疗的支气管哮喘临床缓解期患儿60例(对照组),对比对照组和各急性组亚组的血清PGRN、SFRP1、CCL26、肺功能、气道炎症,采用Pearson相关性分析血清PGRN、SFRP1、CCL26与肺功能指标和气道炎症指标的相关性。结果:重度组、中度组、轻度组的PGRN低于对照组,SFRP1、CCL26则高于对照组(P<0.05)。且随着病情严重程度的增加,支气管哮喘儿童的PGRN不断下降,SFRP1、CCL26不断升高(P<0.05)。重度组、中度组、轻度组的用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)和最大呼气峰值流速(PEF)低于对照组(P<0.05)。且随着病情严重程度的增加,支气管哮喘儿童的FVC、FEV1、PEF不断下降(P<0.05)。重度组、中度组、轻度组的白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-17(IL-17)高于对照组(P<0.05)。且随着病情严重程度的增加,支气管哮喘儿童的IL-8、TNF-α、IL-17不断升高(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,PGRN与肺功能指标呈正相关,与气道炎症指标呈负相关(P<0.05)。SFRP1、CCL26与肺功能指标呈负相关,与气道炎症指标呈正相关(P<0.05)。结论:支气管哮喘急性发作期患儿血清PGRN异常降低,SFRP1、CCL26异常升高,参与病情程度加重,且与肺功能和气道炎症相关。 展开更多
关键词 支气管哮喘 急性发作期 PGRN SFRP1 CCL26 肺功能 气道炎症 相关性
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SFRP5通过抑制Wnt5a/JNK通路减轻缺血性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和心肌纤维化 被引量：5
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作者 刘军格 江正发 +1 位作者 焦东生 刘莎 《心脏杂志》 CAS 2024年第4期379-386,共8页
目的探讨分泌卷曲相关蛋白5(SFRP5)对缺血性心力衰竭(IHF)大鼠心肌细胞凋亡和心肌纤维化的影响及相关作用机制。方法40只SD雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(IHF组)、SFRP5组、SFRP5+Wnt5a激动剂组(SFRP5+Foxy-5组),每组10只... 目的探讨分泌卷曲相关蛋白5(SFRP5)对缺血性心力衰竭(IHF)大鼠心肌细胞凋亡和心肌纤维化的影响及相关作用机制。方法40只SD雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(IHF组)、SFRP5组、SFRP5+Wnt5a激动剂组(SFRP5+Foxy-5组),每组10只。采用超声心动图检测大鼠心功能指标;HE染色、Masson染色观察大鼠心肌病理学改变;TUNEL染色检测大鼠心肌细胞凋亡;免疫组织化学染色观察大鼠心肌组织纤连蛋白(Fn)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)阳性表达情况;Western blot法检测大鼠心肌组织SFRP5蛋白、无翅型MMTV整合位点家族成员5a(Wnt5a)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路蛋白表达。结果与Sham组比较,IHF组大鼠心功能指标左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVDs)、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)均增加,左室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)均下降(P<0.05);心肌组织存在明显病理改变,心肌纤维化面积增加,心肌细胞凋亡率升高,心肌组织Fn、α-SMA和Cleaved Caspase-3阳性表达均增多(P<0.05);心肌组织SFRP5蛋白表达下降,Wnt5a蛋白表达、p-JNK/JNK比值均升高(P<0.05)。与IHF组相比,SFRP5组大鼠心功能指标和心肌损伤均得到改善,心肌纤维化面积减少,心肌细胞凋亡率降低,心肌组织Fn、α-SMA和Cleaved Caspase-3阳性表达均减少(P<0.05);心肌组织SFRP5蛋白表达升高,Wnt5a蛋白表达、p-JNK/JNK比值均下降(P<0.05)。与SFRP5组比较,SFRP5+Foxy-5组大鼠心功能指标异常,心肌损伤加重,心肌纤维化面积增加,心肌细胞凋亡率升高,心肌组织Fn、α-SMA和Cleaved Caspase-3阳性表达均增多(P<0.05);心肌组织Wnt5a蛋白表达、p-JNK/JNK比值均升高(P<0.05)。结论SFRP5可能通过抑制Wnt5a/JNK信号通路减轻心肌细胞凋亡和心肌纤维化,从而改善大鼠IHF。 展开更多
关键词 SFRP5 缺血性心力衰竭 细胞凋亡 纤维化 Wnt5a/JNK信号通路
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水牛SFRP 1基因序列分析、真核表达载体构建及组织表达分析 被引量：1
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作者 黄丽清 段安琴 +2 位作者 郑海英 杨春艳 尚江华 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1807-1818,共12页
【目的】获取水牛分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)基因CDS区序列,并预测其编码蛋白的结构功能,构建SFRP 1基因真核表达载体,检测SFRP 1基因在水牛不同组织中的表达情况,为探索SFRP 1基因在水牛生长发育中的作用奠定基础。【方法】以水牛卵... 【目的】获取水牛分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)基因CDS区序列,并预测其编码蛋白的结构功能,构建SFRP 1基因真核表达载体,检测SFRP 1基因在水牛不同组织中的表达情况,为探索SFRP 1基因在水牛生长发育中的作用奠定基础。【方法】以水牛卵巢组织cDNA为模板,通过RT-PCR对SFRP 1基因CDS区序列进行扩增并测序,利用生物信息学在线分析软件对水牛SFRP 1基因与不同物种进行比对和系统进化树构建,并预测SFRP1蛋白理化性质、信号肽、跨膜结构等。将获得的目的基因连接至pCMV-HAhyPBase-mcheery载体并转染至水牛颗粒细胞,检测转染后荧光和基因表达情况。通过实时荧光定量PCR检测水牛不同组织中SFRP 1基因表达情况。【结果】水牛SFRP 1基因CDS区长927 bp,共编码308个氨基酸。多重序列比对结果显示,水牛SFRP 1基因氨基酸序列与黄牛、牦牛、山羊、虎鲸、黑猩猩、北极狐、猫、人、小鼠的相似性分别为100%、100%、99.65%、98.58%、98.23%、98.23%、98.58%、98.23%、96.45%,存在CRD_FZ、NTR_like和DUF3367结构域。水牛SFRP 1基因核苷酸序列与黄牛、绵羊、山羊、牦牛、野牛、马鹿、野骆驼、猪、人的相似性分别为97.3%、95.9%、95.8%、94.5%、94.2%、93.7%、80.4%、78.5%和77.3%。系统进化树结果显示,水牛与黄牛、牦牛、野牛聚为一支。生物信息学分析结果显示,SFRP1蛋白呈碱性,为不稳定蛋白;第1—15位氨基酸处存在信号肽,为分泌型蛋白,存在跨膜结构,主要定位于细胞外;存在21个磷酸化位点和8个O-糖基化修饰位点。二级结构主要由α-螺旋、延伸链和无规则卷曲构成;水牛、黄牛、人的SFRP1蛋白三级结构高度相似。成功构建pCMV-mcheery-SFRP1真核表达载体并转染水牛颗粒细胞,转染72 h后pCMV-mcheery-SFRP1重组质粒组细胞内SFRP 1基因表达量极显著高于对照组(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,SFRP 1基因在水牛不同组织中均有表达,且在脾脏中表达量最高,极显著高于其他组织(P<0.01)。【结论】SFRP 1基因在不同物种以及遗传进化过程中具有高保守性,在水牛不同组织中广泛表达。研究结果为今后探究SFRP 1基因在水牛生长发育中的功能及分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 水牛 SFRP 1基因 序列分析 真核表达载体 组织表达
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宣肺通络平喘汤辅助丙酸氟替卡松治疗哮喘效果及对患者血清SFRP5、YKL-40水平的影响 被引量：2
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作者 吴志建 张博 +1 位作者 宋江南 赵惠芳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期1314-1317,共4页
目的 探讨宣肺通络平喘汤辅助丙酸氟替卡松治疗哮喘效果及对患者血清分泌性卷曲相关蛋白(SFRP)5、甲壳质酶蛋白(YKL)-40水平的影响。方法 将116例支气管哮喘患者随机分为观察组和对照组各58例。对照组给予丙酸氟替卡松,观察组同时给予... 目的 探讨宣肺通络平喘汤辅助丙酸氟替卡松治疗哮喘效果及对患者血清分泌性卷曲相关蛋白(SFRP)5、甲壳质酶蛋白(YKL)-40水平的影响。方法 将116例支气管哮喘患者随机分为观察组和对照组各58例。对照组给予丙酸氟替卡松,观察组同时给予宣肺通络平喘汤治疗。比较两组临床疗效、临床症状好转时间、中医证候评分、肺功能、炎性指标、血清SFRP5及YKL-40水平。结果 观察组治疗后总效率显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,观察组临床症状好转时间及中医证候评分明显降较低(P<0.05);治疗后观察组肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)水平和FEV1/FVC]明显高于对照组,炎症因子水平及血清YKL-40水平明显低于对照组,血清SFRP5水平明显高于对照组(均P<0.05)。结论 宣肺通络平喘汤辅助丙酸氟替卡松治疗哮喘患者可以降低YKL-40水平,提高SFRP5水平,具有较好的临床疗效。 展开更多
关键词 宣肺通络平喘汤 丙酸氟替卡松 哮喘 血清分泌性卷曲相关蛋白(SFRP)5、甲壳质酶蛋白(YKL)-40
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