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RPE细胞光损伤相关新基因s-lap编码区克隆及s-lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞中的表达与定位 被引量:1
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作者 宋忆淑 李玉新 +2 位作者 费向东 鲍永利 谭大鹏 《眼科新进展》 CAS 2005年第1期11-13,共3页
目的 克隆新基因s lap编码区序列 ,研究其编码的蛋白质在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。方法 分析s lapcDNA序列 ,建立视网膜色素上皮 (retinalpigmentep ithelium ,RPE)细胞光损伤模型 ,RT PCR克隆其编码区序列 ,构建了带有绿色荧... 目的 克隆新基因s lap编码区序列 ,研究其编码的蛋白质在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。方法 分析s lapcDNA序列 ,建立视网膜色素上皮 (retinalpigmentep ithelium ,RPE)细胞光损伤模型 ,RT PCR克隆其编码区序列 ,构建了带有绿色荧光蛋白的目的基因真核表达重组质粒 pcDNA3 .1 GFP/s lap ,转染B16黑色素瘤细胞 ,观察s lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。结果 s lapcDNA序列含有编码10 1个氨基酸的开放读码框架 ,有 2个可能的N 糖基化位点 ,1个可能的caseinkinaseII磷酸化位点和 2个可能的PKC磷酸化位点 ;成功地克隆了s lap蛋白编码区序列 ,构建了其真核表达载体 ,荧光显微镜观察 ,在转染 pcDNA3 .1 GFP质粒的B16黑色素瘤细胞中 ,荧光呈网状分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染s lap/GFP融合基因的B16黑色素瘤细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 新基因s lap编码的蛋白质可在B16黑色素瘤细胞中获得表达 ,并以细胞核内高表达。 展开更多
关键词 s-lap基因 克隆 s-lap/GFP 融合蛋白 基因表达 基因定位
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新基因s-lap编码区的克隆及其重组表达质粒PHB/s-lap的构建 被引量:2
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作者 宋忆淑 宋志宇 +3 位作者 费向东 贺冰 李玉新 谭大鹏 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期856-859,共4页
目的 :克隆新基因 s- lap编码区序列并构建其重组表达质粒。方法 :利用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR )方法 ,以可见光损伤早期的培养的猪视网膜色素上皮 (RPE)细胞 ds c DNA为模板 ,扩增新基因 s- lap编码区序列 ;利用基因重组技术构建 P... 目的 :克隆新基因 s- lap编码区序列并构建其重组表达质粒。方法 :利用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR )方法 ,以可见光损伤早期的培养的猪视网膜色素上皮 (RPE)细胞 ds c DNA为模板 ,扩增新基因 s- lap编码区序列 ;利用基因重组技术构建 PHB/ s- lap重组表达质粒。结果 :经测序证实获得了正确的新基因 s- lap编码区序列 ,酶切鉴定及 DNA序列分析表明已经将 s- lap基因编码区序列克隆到 PHB表达载体 ,成功地构建了 PHB/ s- lap重组表达质粒。结论 :成功地克隆了新基因 s- lap编码区序列 ,并构建了其重组表达质粒 PHB/ s- lap。 展开更多
关键词 基因 s-lap基因 克隆 分子 逆转录聚合酶链反应 基因表达 质粒
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s-lap/GFP融合蛋白在Hela细胞中的表达与定位 被引量:1
3
作者 宋忆淑 宋志宇 +2 位作者 费向东 贺冰 李玉新 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期39-41,共3页
目的 :观察 s- lap/ GFP融合蛋白在 Hela细胞中的表达及定位。方法 :根据 s- lap基因的编码区序列 ,应用 PCR技术突变其 3′末端终止密码子 ,并通过基因重组技术将其与 GFP基因融合 ,构建 s- lap/ GFP重组质粒 ;采用脂质体转染法 ,将 s-... 目的 :观察 s- lap/ GFP融合蛋白在 Hela细胞中的表达及定位。方法 :根据 s- lap基因的编码区序列 ,应用 PCR技术突变其 3′末端终止密码子 ,并通过基因重组技术将其与 GFP基因融合 ,构建 s- lap/ GFP重组质粒 ;采用脂质体转染法 ,将 s- lap/ GFP融合基因转入 Hela细胞中 ,用荧光显微镜观察其表达。结果 :s- lap/ GFP重组质粒序列测定的结果与预期设计完全一致。荧光显微镜显示 ,在转染 GFP基因的 Hela细胞中 ,荧光呈网状均匀分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染 s- lap/ GFP融合基因的 Hela细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 :s- lap/ GFP融合蛋白可在人 Hela细胞中表达 ,并主要定位于细胞核。 展开更多
关键词 s-lap/GFP融合蛋白 重组融合蛋白质类/遗传学 基因融合/方法 HELA细胞
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Cloned s-Lap Gene Coding Area, Expression and Localization of s-Lap/GFP Fusion Protein in Mammal Cells
4
作者 SONGYi-shu SONGZhi-yu +4 位作者 LIHong-jun WuYin BAOYong-li TANDa-peng LIYu-xin 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2005年第3期298-300,共3页
s-Lap is a new gene sequence from pig retinal pigment epithelial(RPE) cells, which was found and cloned in the early period of apoptosis of RPE cells damaged with visible light. We cloned the coding area sequence of t... s-Lap is a new gene sequence from pig retinal pigment epithelial(RPE) cells, which was found and cloned in the early period of apoptosis of RPE cells damaged with visible light. We cloned the coding area sequence of the novel gene of s-Lap and constructed its recombinant eukaryotic plasmid pcDNA3.1-GFP/s-lap with the recombinant DNA technique. The expression and localization of s-lap/GFP fusion protein in CHO and B_~16 cell lines were studied with the instantaneously transfected pcDNA3.1-GFP/s-lap recombinant plasmid. ~s-Lap/GFP fusion protein can be expressed in CHO and B_~16 cells with a high rate expression in the nuclei. 展开更多
关键词 s-lap gene Fusion protein Mammal cell EXPRESSION LOCALIZATION
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关节镜下LARS韧带与自体腘绳肌腱重建前交叉韧带的早期临床疗效比较 被引量:18
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作者 范文斌 赵建宁 《中国骨与关节损伤杂志》 2013年第7期635-637,共3页
目的回顾性研究LARS韧带和自体腘绳肌腱重建前交叉韧带(ACL)的早期临床疗效。方法自2008年7月~2011年2月对54例ACL损伤分别行关节镜下LARS韧带和自体腘绳肌腱重建ACL,腘绳肌腱组31例,LARS韧带组23例,分别对其术前术后行Lysholm、Tegner... 目的回顾性研究LARS韧带和自体腘绳肌腱重建前交叉韧带(ACL)的早期临床疗效。方法自2008年7月~2011年2月对54例ACL损伤分别行关节镜下LARS韧带和自体腘绳肌腱重建ACL,腘绳肌腱组31例,LARS韧带组23例,分别对其术前术后行Lysholm、Tegner、IKDC评分,并选取最近一次随访结果进行统计分析。结果术后LARS韧带组的膝关节Lysholm、Tegner、IKDC评分略高于腘绳肌腱组,但两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LARS韧带和自体腘绳肌腱重建ACL能明显改善患者的功能,LARS韧带组和自体韧带组有相似的早期疗效,且恢复时间明显缩短。 展开更多
关键词 前交叉韧带 LARS人工韧带 自体韧带 关节镜
原文传递
B级钢/Q450NQR1钢搭接接头疲劳性能研究 被引量:2
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作者 董美云 胡飞 +1 位作者 谭文一 周海 《热加工工艺》 CSCD 北大核心 2010年第7期45-48,共4页
针对以Q450NQR1钢(中梁)为基板、B级钢(上心盘)为腹板模拟实际工装位置,疲劳断裂与货车运营实际工况不符的问题,提出以B级钢为基板、Q450NQR1钢为腹板进行三点弯曲疲劳试验,诱使疲劳裂纹向B级钢侧扩展,研究了MAG气体保护焊B级钢/Q450NQR... 针对以Q450NQR1钢(中梁)为基板、B级钢(上心盘)为腹板模拟实际工装位置,疲劳断裂与货车运营实际工况不符的问题,提出以B级钢为基板、Q450NQR1钢为腹板进行三点弯曲疲劳试验,诱使疲劳裂纹向B级钢侧扩展,研究了MAG气体保护焊B级钢/Q450NQR1钢搭接接头的疲劳性能。结果表明:B级钢/Q450NQR1钢搭接接头的疲劳裂纹多出现在B级钢侧,与货车运营的实际工况相符。在循环次数2×106、存活率95%、置信水平90%时,搭接接头焊态、打磨态、喷丸态的疲劳强度分别为201.89、225.36、232.69MPa;表面机械打磨、喷丸工艺能够较好改善B级钢/Q450NQR1钢搭接接头的疲劳性能。 展开更多
关键词 B级钢/Q450NQR1钢 焊趾处打磨 喷丸 搭接接头 P-S-N曲线
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具有非零F-S搭接时间任务的施工设备动态调度
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作者 边星 晋良海 +2 位作者 梁巧秀 郑霞忠 陈述 《人民长江》 北大核心 2016年第23期76-81,共6页
针对工程施工过程中经常发生非零F-S搭接时间任务的设备调度问题,考虑任务间的搭接约束,引入标准时间任务、搭接时间任务和扩展任务工艺树概念,提出了一种将非零F-S搭接时间任务变换为紧密衔接任务的处理方法。根据调度任务批次,采用拟... 针对工程施工过程中经常发生非零F-S搭接时间任务的设备调度问题,考虑任务间的搭接约束,引入标准时间任务、搭接时间任务和扩展任务工艺树概念,提出了一种将非零F-S搭接时间任务变换为紧密衔接任务的处理方法。根据调度任务批次,采用拟关键路径法和最佳适应调度法实现关键设备上的任务尽量紧凑执行的调度目标,开发出了一种具有非零F-S搭接时间任务的动态调度算法。工程案例应用表明:该调度算法能较好地解决非零F-S搭接时间的施工设备调度问题,而且能够扩展至动态紧密衔接任务的施工设备调度。 展开更多
关键词 非零F-S搭接时间 施工调度 水电工程
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异性材料对接和搭接焊的高温性能对比试验研究 被引量:1
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作者 王金生 王亚芳 +2 位作者 耿晓亮 王安强 岳珠峰 《燃气涡轮试验与研究》 2003年第4期18-20,共3页
通过对K163-GH3030材料对接和搭接焊进行高温瞬时拉伸、高温疲劳寿命试验,得出该对接和搭接焊接头的S-N曲线,举例评定了构件的疲劳寿命,比较分析了对接焊与搭接焊疲劳寿命的差异,指出了在承力结构中应该尽量避免搭接焊。
关键词 异性材料 搭接焊 对比试验 疲劳寿命 S-N曲线 拉伸强度 对接焊 焊接接头
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基于混合驱动的分离罗拉运动轨迹规划研究
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作者 张玉香 吕传硕 +1 位作者 杨淑启 王延蒙 《纺织器材》 2024年第4期6-10,共5页
针对当前棉精梳机分离接合机构运动输出特性固定、振动大等问题,分析棉精梳机分离罗拉分离接合工艺,确定分离罗拉运动的位移关键点位置,根据差动轮系的运动规律提出交替驱动和分段驱动2种动力分配方案,并采用三次样条曲线作为交替驱动... 针对当前棉精梳机分离接合机构运动输出特性固定、振动大等问题,分析棉精梳机分离罗拉分离接合工艺,确定分离罗拉运动的位移关键点位置,根据差动轮系的运动规律提出交替驱动和分段驱动2种动力分配方案,并采用三次样条曲线作为交替驱动位移曲线、S型加减速曲线作为分段驱动位移曲线,通过对比分析得到最佳分离罗拉运动轨迹。指出:当设定棉纤维长度为30 mm时,2种驱动方案均能满足分离接合要求;采用混合驱动机构对分离罗拉高速正反转运动进行分解,实现伺服电机混合驱动分离罗拉,其运动性能更佳。 展开更多
关键词 混合驱动 棉精梳机 分离罗拉 差动轮系 三次样条曲线 S型加减速曲线 分离接合
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高强钢筋电弧搭接焊连接疲劳性能试验研究 被引量:3
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作者 王亚飞 王伟 刘迎倩 《铁道工程学报》 EI 北大核心 2021年第3期113-117,共5页
研究目的:针对HRB400、HRBF400、HRB500、HRBF500共4种规格的高强钢筋电弧搭接焊连接,开展包含不同直径和应力比的疲劳试验,获得高强钢筋的p-S-N曲线,为高强钢筋在铁路工程的合理高效利用提供坚实数据支撑。研究结论:(1)试验共计完成有... 研究目的:针对HRB400、HRBF400、HRB500、HRBF500共4种规格的高强钢筋电弧搭接焊连接,开展包含不同直径和应力比的疲劳试验,获得高强钢筋的p-S-N曲线,为高强钢筋在铁路工程的合理高效利用提供坚实数据支撑。研究结论:(1)试验共计完成有效试件124个,获得了9条高强钢筋电弧搭接焊连接接头的S-N曲线;(2)试验数据表明加载频率对疲劳试验结果无明显影响,随着应力比、钢筋直径的增加,疲劳强度略有下降;(3)将所有试验数据通过总体回归,得到存活率R=95%、置信度C=75%的p-S-N曲线作为铁路工程用高强钢筋电弧搭接焊的设计S-N曲线,该曲线总体偏保守、适用范围广泛、便于运用;(4)总体回归的S-N曲线中高强钢筋电弧搭接焊接头的200万次中值疲劳强度约为82 MPa,在中等寿命区S-N曲线斜率为3.13;(5)本研究结果可为高强钢筋电弧搭接焊接头在铁路工程的应用提供依据,其他疲劳敏感工程也可参照使用。 展开更多
关键词 高强钢筋 疲劳试验 电弧搭接焊 S-N曲线
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三圈理论视角下精准扶贫中地方政府行为研究 被引量:1
11
作者 陈睿睿 《广西政法管理干部学院学报》 2018年第3期61-64,共4页
地方政府在精准扶贫过程中扮演着十分重要的角色。精准扶贫与粗放式扶贫相较,更加强调政府行为中的精准性和优化性。随着精准扶贫概念的提出,给地方政府的行为提出了新的要求。基于三圈理论的视角分析下,现阶段,按我国对地方扶贫的要求... 地方政府在精准扶贫过程中扮演着十分重要的角色。精准扶贫与粗放式扶贫相较,更加强调政府行为中的精准性和优化性。随着精准扶贫概念的提出,给地方政府的行为提出了新的要求。基于三圈理论的视角分析下,现阶段,按我国对地方扶贫的要求,地方政府行为主要困境体现在价值层面的缺失、能力上的不足以及政策制度上的支持力度不够。因此,树立正确的扶贫价值观念,提高自身的扶贫能力,创新与完善扶贫政策机制。从而实现精准扶贫中政府行为的精准性和优化性,从而能够使得扶贫政策进一步完善。 展开更多
关键词 三圈理论 精准扶贫 政府行为
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