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结核分枝杆菌Rv3407蛋白抗原表位的预测 被引量：8
1
作者 赵亚静 白雪娟 +4 位作者 梁艳 张俊仙 阳幼荣 赵卫国 吴雪琼 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第6期486-488,共3页
目的预测结核分枝杆菌Rv3407的抗原表位。方法利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv3407氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位。结果 Rv3407蛋白具有... 目的预测结核分枝杆菌Rv3407的抗原表位。方法利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv3407氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位。结果 Rv3407蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,潜在的B细胞抗原表位较少,可能位于11-26、28-43、50-61、66-74、76-99位氨基酸残基或其附近,这些区域基本上含有β转角结构,亲水性、表面可能性和柔韧性指数都较高。该蛋白潜在的T细胞抗原表位较多,可能位于2-12、22-26、34-37、40-44、56-60、75-79、86-93位氨基酸残基或其附近。结论结核分枝杆菌Rv3407是一个T细胞抗原表位占优势的蛋白抗原,B细胞抗原表位略少,预测结果为该蛋白抗原表位的进一步研究与应用奠定了基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 抗原表位 rv3407蛋白 二级结构
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结核分枝杆菌Ag85B+Rv3407融合基因自杀性DNA疫苗的构建及鉴定 被引量：1
2
作者 邵丽军 李猛 伊正君 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期368-371,共4页
目的构建表达结核分枝杆菌生长期抗原Ag85B和休眠期蛋白Rv3407的自杀性DNA疫苗融合基因表达载体,并检测其在BHK-21细胞中的表达。方法采用PCR方法从结核分枝杆菌基因组中扩增Ag85B基因和Rv3407蛋白基因,再以二者的混合物为模板扩增Ag85B... 目的构建表达结核分枝杆菌生长期抗原Ag85B和休眠期蛋白Rv3407的自杀性DNA疫苗融合基因表达载体,并检测其在BHK-21细胞中的表达。方法采用PCR方法从结核分枝杆菌基因组中扩增Ag85B基因和Rv3407蛋白基因,再以二者的混合物为模板扩增Ag85B+Rv3407融合基因,构建真核表达载体pSCA1/Ag85B+Rv3407,以ELISA法检测其在BHK-21细胞中的瞬时表达。结果从结核分枝杆菌基因组中扩增得到Ag85B+Rv3407融合基因,片段大小为1 323bp,与预期相符。成功构建重组质粒pSCA1/Ag85B+Rv3407,该重组质粒能在BHK-21细胞中表达目的蛋白(实验组P/N≥2.1)。结论成功构建结核分枝杆菌自杀性DNA疫苗融合基因表达载体,该重新载体能在真核细胞中表达目的蛋白。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 自杀性DNA疫苗 生长期抗原Ag85B 休眠期蛋白rv3407 pSCAl载体
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结核DNA疫苗质粒pVAX1-Rv3407的构建及体外表达 被引量：3
3
作者 刘蓉娜 方习静 +3 位作者 张爱华 杨晓明 张雅婷 闭兰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期137-139,147,共4页
目的构建结核DNA疫苗质粒pVAX1-Rv3407,并检测其在哺乳动物细胞293T中的表达。方法以基因重组卡介苗(rBCG)AERAS-422基因组为模板,PCR扩增Rv3407基因,构建真核表达质粒pVAX1-Rv3407,转染293T细胞,采用免疫荧光法及Western blot法检测Rv3... 目的构建结核DNA疫苗质粒pVAX1-Rv3407,并检测其在哺乳动物细胞293T中的表达。方法以基因重组卡介苗(rBCG)AERAS-422基因组为模板,PCR扩增Rv3407基因,构建真核表达质粒pVAX1-Rv3407,转染293T细胞,采用免疫荧光法及Western blot法检测Rv3407蛋白的表达。结果 PCR扩增获得长300 bp的Rv3407基因片段;重组真核表达质粒pVAX1-Rv3407经双酶切及DNA测序证明构建正确;转染48 h后,Rv3407蛋白在293T细胞中有效表达,且主要分布在细胞质中。结论成功构建了结核DNA疫苗质粒pVAX1-Rv3407,为新型结核病疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 rv3407蛋白 疫苗 DNA 潜在结核感染
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新型腺病毒载体肺结核疫苗的免疫原性研究 被引量：3
4
作者 史晓雨 隋秀文 +4 位作者 苗伟 高德进 王畅 魏梦函 朱涛(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期719-722,共4页
目的:评价双价肺结核疫苗的免疫原性。方法:ESAT6、rv3407、RpfB三种抗原基因融合后(TPA-3Ag)与Ag85A一种抗原基因均用重组人5型腺病毒载体进行表达,按照1∶0.2、1∶1、1∶2、1∶4四种不同滴度配比免疫小鼠。使用酶联免疫吸附实验(ELISA... 目的:评价双价肺结核疫苗的免疫原性。方法:ESAT6、rv3407、RpfB三种抗原基因融合后(TPA-3Ag)与Ag85A一种抗原基因均用重组人5型腺病毒载体进行表达,按照1∶0.2、1∶1、1∶2、1∶4四种不同滴度配比免疫小鼠。使用酶联免疫吸附实验(ELISA)进行抗原特异性体液免疫评价,使用酶联免疫斑点法(ELISpot)和细胞内细胞因子染色(ICS)进行抗原特异性细胞免疫评价。结果:双价疫苗均产生体液免疫应答和细胞免疫应答。结论:双价疫苗有提高肺结核保护范围的可能性,可能成为预防结核病的新型疫苗。 展开更多
关键词 人5型腺病毒 ESAT6 rv3407 RpfB AG85A 肺结核
暂未订购
新型肺结核三抗原组分疫苗的开发和小鼠免疫原性研究 被引量：1
5
作者 赵燕慧 赵辉 +4 位作者 彭少丹 崔海燕 李军强 苗伟 朱涛 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2018年第2期176-181,共6页
目的构建高效表达结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）ESAT6、rv3407、Rpf B三个显性抗原基因（3 antigens,3Ag）的重组人5型腺病毒（Adenovirus 5,Ad5）载体疫苗,在小鼠模型中初步完成药效学研究。方法用Ad EasyTMXL腺病... 目的构建高效表达结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）ESAT6、rv3407、Rpf B三个显性抗原基因（3 antigens,3Ag）的重组人5型腺病毒（Adenovirus 5,Ad5）载体疫苗,在小鼠模型中初步完成药效学研究。方法用Ad EasyTMXL腺病毒载体系统构建重组质粒p Ad5-3Ag,经Pac I线性化后转染AD293细胞获得表达3Ag融合蛋白的Ad5-TPA-3Ag;采用Western blot检测腺病毒载体中融合蛋白的表达;将纯化的病毒颗粒以肌肉注射和滴鼻两种方式免疫小鼠,采用ELISA检测血清中抗体效价,对病毒的免疫剂量进行优化。结果含3Ag基因的重组腺病毒载体构建成功。包装的病毒Ad5-TPA-3Ag以8×10^7IFU的剂量免疫小鼠42d时各抗原的效价最高,ESAT6肌肉注射和滴鼻的最高效价分别为4.54和4.87;rv3407肌肉注射和滴鼻的最高效价分别为3.41和3.60;Rpf B肌肉注射和滴鼻的最高效价为3.63和2.42。结论 Ad5-TPA-3Ag在小鼠模型中可以诱导良好的免疫应答,可能成为一种新型的针对MTB潜伏感染的候选疫苗。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 ESAT6 rv3407 RpfB 人5型腺病毒
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