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roGFP1探针在玉米幼胚中响应细胞氧化还原状态改变的初步研究
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作者 吴佳梅 刘晓宁 赵军 《安徽农业科学》 CAS 2014年第12期3491-3493,3496,共4页
[目的]建立roGFP1探针响应玉米体内氧化还原状态变化的稳定表达系统。[方法]首先利用基因枪介导玉米幼胚转化法瞬时表达roGFP1基因,利用激光共聚焦显微镜405和488 nm激发光通道对10 mmol/L H2O2和2 mmol/L DTT溶液处理下的幼胚进行510nm... [目的]建立roGFP1探针响应玉米体内氧化还原状态变化的稳定表达系统。[方法]首先利用基因枪介导玉米幼胚转化法瞬时表达roGFP1基因,利用激光共聚焦显微镜405和488 nm激发光通道对10 mmol/L H2O2和2 mmol/L DTT溶液处理下的幼胚进行510nm的GFP荧光成像,后通过ImageJ处理图像和分析荧光比值[405/488 nm];同时利用农杆菌介导玉米幼胚转化法开展roGFP1基因的玉米稳定转化,进行Southern Blot鉴定和荧光显微镜观察。[结果]在玉米幼胚瞬时表达系统中,经10 mmol/L H2O2处理后,roGFP1探针的荧光强度比值[405/488 nm]由原来的0.844升高至1.837,而在2 mmol/L DTT溶液处理下的荧光强度比值下降至0.911;经Southern Blot鉴定和GFP荧光检测获得了roGFP1转基因阳性植株。[结论]在玉米幼胚瞬时表达系统中,roGFP1探针能够响应由外源氧化还原剂引起的体内氧化还原状态改变;获得了表达roGFP1的转基因玉米植株。 展开更多
关键词 rogfp1 荧光强度比值 玉米 瞬时表达 稳定转化
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基于mt-roGFP1荧光探针研究几种植物源除草化合物对拟南芥根尖细胞氧化还原电位的影响
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作者 桑杰 吕鹏飞 +1 位作者 朱雪珍 周利娟 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期875-881,共7页
[目的]本文旨在研究源于秃杉的秃杉素、台湾脂素H(Taiwanin H)和台湾脂素E(Taiwanin E)等新型除草化合物对拟南芥根尖细胞氧化还原电位的影响。[方法]采用mt-roGFP1标记的拟南芥转基因植株测定了不同浓度的新型除草化合物处理拟南芥后,... [目的]本文旨在研究源于秃杉的秃杉素、台湾脂素H(Taiwanin H)和台湾脂素E(Taiwanin E)等新型除草化合物对拟南芥根尖细胞氧化还原电位的影响。[方法]采用mt-roGFP1标记的拟南芥转基因植株测定了不同浓度的新型除草化合物处理拟南芥后,对其根的根冠、分生区、过渡区和伸长区细胞氧化还原电位的影响。[结果]不同浓度的秃杉素、台湾脂素H和台湾脂素E均能降低根尖细胞氧化还原电位,且在一定范围内,随着化合物浓度的增加,对根分生区细胞氧化还原电位的影响越大。0.1、1、5和10μg·mL^(-1)的秃杉素分别处理mt-roGFP1标记的拟南芥转基因植株后,根分生区细胞平均氧化还原电位变化最大差值分别为13.06、18.59、27.74和29.92 mV;1、5和10μg·mL^(-1)台湾脂素H和台湾脂素E分别处理mt-roGFP1标记的拟南芥转基因植株后,其根分生区细胞平均氧化还原电位变化最大差值分别为12.21、15.72和22.67 mV以及14.71、24.03和28.69 mV。[结论]在一定浓度范围内,秃杉素、台湾脂素H和台湾脂素E的浓度越大,拟南芥根分生区细胞氧化还原电位变化差值越大,具有较好的剂量-效应关系。这对利用mt-roGFP1荧光探针技术研究除草化合物对根细胞线粒体的作用提供了基础,同时为建立除草活性化合物快速筛选平台提供理论依据。 展开更多
关键词 mt-rogfp1 植物源除草化合物 氧化还原电位
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