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鸡传染性法氏囊病病毒rVP2蛋白高效组装亚病毒颗粒的鉴定 被引量：5
1
作者 王彦伟 张素玲 +7 位作者 吴芃 耿笑林 黄玉欣 李鹏昊 王孟月 李向东 逄文强 田克恭 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1677-1684,共8页
为获得高纯度的鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)VP2蛋白自组装的亚病毒颗粒(subviral particles,SVPs),并对重组VP2蛋白(rVP2)SVPs的组装效率和均一性进行评价,本试验利用大肠杆菌表达IBDV rVP2,通过SDS-P... 为获得高纯度的鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)VP2蛋白自组装的亚病毒颗粒(subviral particles,SVPs),并对重组VP2蛋白(rVP2)SVPs的组装效率和均一性进行评价,本试验利用大肠杆菌表达IBDV rVP2,通过SDS-PAGE和Western blotting对蛋白表达情况和免疫反应性进行鉴定,通过阴离子交换层析和切向流超滤浓缩系统纯化rVP2蛋白,并通过透射电镜(TEM)、高效液相尺寸排阻色谱(HPSEC)、蔗糖密度梯度离心及粒径和表面电位(Zeta potential)等多种检测技术对单个SVP组装形态和整体组装情况进行分析检测,初步建立了IBDV rVP2 SVPs组装效率的系统性检测方法。结果显示,在大肠杆菌中实现IBDV rVP2的大部分可溶性表达,且能与鸡IBDV阳性血清有明显的免疫反应性,纯化后rVP2纯度提高66.9倍,回收率达到93.3%。TEM观察rVP2自组装成直径约25 nm的SVPs,视野内SVPs大小均一,均匀分散。HPSEC检测结果显示,rVP2 SVPs的分子质量约为2482 ku,与20个VP2三聚体形成的T=1二十面体SVPs分子质量一致。蔗糖密度梯度离心检测结果显示,rVP2 SVPs体积分布均一,组装效率高。粒径和Zeta电位检测结果表明,rVP2 SVPs颗粒分散度较好、体系稳定,有利于rVP2 SVPs的长期保存。本试验通过多种检测技术对rVP2 SVPs的组装情况进行检测分析,实现了rVP2 SVPs的高效组装,为IBDV SVPs疫苗的质量控制提供了有力支撑。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒(IBDV) rvp2蛋白 亚病毒颗粒(SVPs) 高效液相尺寸排阻色谱(HPSEC)
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鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗在防治肉鸡传染性法氏囊病上的推广应用研究 被引量：1
2
作者 刘晓 《中国畜牧兽医文摘》 2018年第6期288-288,共1页
实验选取同一鸡场同一日龄的肉鸡12000只,随机分为三组,三组分别在8日龄时于颈部皮下注射鸡传染性法氏囊炎病基因工程亚单位疫苗(rVP2)0.3ml,0.4ml和0.5ml,在同一条件下进行饲养,接种疫苗后分别在7、14、21、28、35、42天按1%的比例采... 实验选取同一鸡场同一日龄的肉鸡12000只,随机分为三组,三组分别在8日龄时于颈部皮下注射鸡传染性法氏囊炎病基因工程亚单位疫苗(rVP2)0.3ml,0.4ml和0.5ml,在同一条件下进行饲养,接种疫苗后分别在7、14、21、28、35、42天按1%的比例采血琼脂免疫扩散试验检测传染性法氏囊血清抗体,发病情况和法氏囊指数,确定可以对传染性法氏囊炎病提供切实保护的最佳疫苗注射剂量。 展开更多
关键词 rvp2 传染性法氏囊炎病 最佳 注射剂量
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