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CRISPR/Cas9编辑GS3和qGL3基因创制大粒水稻新种质 被引量:5
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作者 赵春芳 梁文化 +9 位作者 赫磊 姚姝 赵凌 周丽慧 赵庆勇 陈涛 朱镇 路凯 王才林 张亚东 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1709-1717,共9页
CRISPR/Cas9基因编辑技术已成为植物新种质创制和性状定向改良的重要手段。GS3和qGL3是调控水稻籽粒伸长的主效基因,功能缺失后产生大粒表型。本研究拟以小粒型粳稻品种南粳5055为试验材料,对GS3和qGL3基因进行编辑,以期获得能稳定遗传... CRISPR/Cas9基因编辑技术已成为植物新种质创制和性状定向改良的重要手段。GS3和qGL3是调控水稻籽粒伸长的主效基因,功能缺失后产生大粒表型。本研究拟以小粒型粳稻品种南粳5055为试验材料,对GS3和qGL3基因进行编辑,以期获得能稳定遗传的大粒水稻新种质。利用CRISPR/Cas9系统构建了分别携带GS3-gRNA和qGL3-gRNA双靶点的pYLCRISPR/Cas9编辑载体,通过农杆菌介导的遗传转化法,成功获得了GS3和qGL3基因编辑植株,编辑效率分别为90.0%和88.9%。与南粳5055相比,GS3编辑植株在T2、T3世代中平均粒长增幅约9.0%,千粒重增幅平均为12.7%,每穗粒数降低约9.3%,穗数、穗长、结实率和单株产量差异不明显;qGL3编辑植株的粒长增幅约21.0%,千粒重增幅平均为31.7%,每穗粒数降低约31.5%,且穗数表现出增加而结实率表现降低趋势,而穗长和单株产量差异不明显。qGL3基因对粒形和粒重的贡献明显大于GS3。综上所述,通过CRISPR/Cas9技术编辑南粳5055的GS3和qGL3基因,获得了一系列大粒水稻新种质,该结果为水稻粒形改良研究提供了重要参考。 展开更多
关键词 水稻 粒形 GS3 qgl3 CRISPR/Cas9
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水稻粒长基因GS3和qGL3功能标记的设计及应用 被引量:8
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作者 丁丹 张亚东 +9 位作者 郑佳 赵春芳 陈涛 赵庆勇 朱镇 周丽慧 姚姝 赵凌 于新 王才林 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第6期1191-1197,共7页
水稻粒型是与其产量直接相关的重要性状。在前期研究证实来源于特大粒水稻TD70和籼稻品种Kasalath的重组自交系(RIL)群体中检测到已克隆的粒长GS3和q GL3基因的基础上,通过TD70和Kasalath的GS3、q GL3基因序列差异分析,设计功能标记,检... 水稻粒型是与其产量直接相关的重要性状。在前期研究证实来源于特大粒水稻TD70和籼稻品种Kasalath的重组自交系(RIL)群体中检测到已克隆的粒长GS3和q GL3基因的基础上,通过TD70和Kasalath的GS3、q GL3基因序列差异分析,设计功能标记,检测240个RILs和不同粒长的6个粳稻、9个籼稻中GS3、q GL3基因类型及其效应。结果显示:TD70和Kasalath中的GS3基因和q GL3基因分别在第2外显子上的编码区+165位置和第10外显子上的编码区+1 092位置存在一个由碱基C到碱基A的单核苷酸替换,据此设计了四引物扩增受阻突变体系(Tetra-primer ARMS-PCR)标记,TD70的GS3和q GL3基因分别扩增为270 bp和145 bp条带及448 bp和288bp条带,Kasalath的GS3、q GL3基因分别扩增为270 bp和175 bp条带及448 bp和216 bp条带;240个RILs中含有GS3-T和q GL3-T基因的株系61个,含GS3-T和q GL3-K的株系48个,含GS3-K和q GL3-T的株系17个;不同粒型基因组合的粒长存在显著差异,表现为GS3-T+q GL3-T>GS3-T+q GL3-K或GS3-K+q GL3-T>GS3-K+q GL3-K;长粒型的1个粳稻和5个籼稻品种的GS3基因表现为TD70带型,短粒型的5个粳稻和4个籼稻品种的GS3基因表现为Kasalath带型;所有水稻品种的q GL3基因均表现为Kasalath带型。表明开发的GS3和q GL3基因功能标记是有效的,可用于水稻分子标记辅助育种。 展开更多
关键词 水稻 GS3基因 qgl3基因 序列差异 四引物ARMS-PCR标记
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The protein phosphatase qGL3/OsPPKL1 selfregulates its degradation to orchestrate brassinosteroid signaling in rice
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作者 Xiuying Gao Jianbo Li +6 位作者 Jing Yin Yiheng Zhao Zhongsheng Wu Lijuan Ma Baoyi Zhang Hongsheng Zhang Ji Huang 《Plant Communications》 SCIE CSCD 2024年第6期89-99,共11页
Brassinosteroids(BRs)are a class of phytohormones that regulate plant growth and development.In previous studies,we cloned and identified PROTEIN PHOSPHATASE WITH KELCH-LIKE1(OsPPKL1)as the causal gene for the quantit... Brassinosteroids(BRs)are a class of phytohormones that regulate plant growth and development.In previous studies,we cloned and identified PROTEIN PHOSPHATASE WITH KELCH-LIKE1(OsPPKL1)as the causal gene for the quantitative trait locus GRAIN LENGTH3(qGL3)in rice(Oryza sativa).We also showed that qGL3/OsPPKL1 is mainly located in the cytoplasm and nucleus and negatively regulates BR signaling and grain length.Because qGL3 is a negative regulator of BR signaling,its turnover is critical for rapid response to changes in BRs.Here,we demonstrate that qGL3 interacts with the WD40-domain-containing protein WD40-REPEAT PROTEIN48(OsWDR48),which contains a nuclear export signal(NES).The NES signal is crucial for the cytosolic localization of OsWDR48 and also functions in the self-turnover of qGL3.We show that OsWDR48 physically interacts with and genetically acts through qGL3 to modulate BR signaling.Moreover,qGL3 may indirectly promote the phosphorylation of OsWDR48 at the Ser-379 and Ser-386 sites.Substitutions of both phosphorylation sites in OsWDR48 to non-phosphorylatable alanine enhanced the strength of the OsWDR48-qGL3 interaction.Furthermore,we found that brassinolide can promote the accumulation of non-phosphorylated OsWDR48,leading to strong interaction intensity between qGL3 and OsWDR48.Taken together,our results show that OsWDR48 facilitates qGL3 retention and induces degradation of qGL3 in the cytoplasm.These findings suggest that qGL3 self-modulates its turnover by binding to OsWDR48 to regulate its cytoplasmic localization and stability,leading to efficient orchestration of BR signal transduction in rice. 展开更多
关键词 Oryza sativa BRASSINOSTEROID grain length qgl3/OsPPKL1 SELF-REGULATION
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水稻粒长基因qGL3功能标记的开发与鉴定 被引量:4
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作者 裔传灯 李玮 +5 位作者 王德荣 蒋伟 薛松 耿金鹏 周勇 梁国华 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2016年第4期55-59,102,共6页
基于基因组DNA序列和PCR分析,对稻属已测序的野生稻、294份水稻微核心种质和2007~2013年江苏省审定的65份粳稻品种中粒长基因qGL3的变异类型进行鉴定。结果表明:稻属不同野生稻均含有基因qGL3的同源序列,但进化树显示其序列存在明显的... 基于基因组DNA序列和PCR分析,对稻属已测序的野生稻、294份水稻微核心种质和2007~2013年江苏省审定的65份粳稻品种中粒长基因qGL3的变异类型进行鉴定。结果表明:稻属不同野生稻均含有基因qGL3的同源序列,但进化树显示其序列存在明显的分化;基于基因qGL3第10外显子的A/C功能变异开发了易于操作的dCAPS标记,并发现在水稻微核心种质中只有1个品种为A型(qgl3基因型),其余品种均为C型(qGL3基因型),表明碱基A变异为稀有变异;江苏省近年来审定的65份粳稻品种基因型均为qGL3。 展开更多
关键词 水稻 粒长 qgl3基因 功能标记
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