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5种提取恶性疟原虫DNA方法用于PCR的结果评价 被引量:2
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作者 刘慧 张国森 +2 位作者 杨亚明 沈旭 张翔 《中国热带医学》 CAS 2002年第2期139-141,共3页
目的 比较 5种DNA模板制备方法的优缺点。 方法 采用 5种方法所制备的DNA进行PCR扩增 ,经统计学处理比较制备的成功率 ,与 6对不同引物PCR反应的敏感性 ,方便性 ,快速和费用等因素进行综合分析。结果 用于PCR ,方法 1~ 3的成功率... 目的 比较 5种DNA模板制备方法的优缺点。 方法 采用 5种方法所制备的DNA进行PCR扩增 ,经统计学处理比较制备的成功率 ,与 6对不同引物PCR反应的敏感性 ,方便性 ,快速和费用等因素进行综合分析。结果 用于PCR ,方法 1~ 3的成功率显著高于法 4和 5 (P <0 .0 0 1) ;法 3制备的DNA敏感性最高 ,适用性最强。 结论  5种方法各有其优缺点 ,应根据实验目的的选用。 展开更多
关键词 PCR 恶性疟原虫 DNA提纯 聚合酶链式反应 疟疾
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柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白的原核表达及纯化
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作者 潘朋歌 李克生 +1 位作者 杜惠芬 曾潮宁 《安徽农业科学》 CAS 2018年第30期99-101,共3页
[目的]原核表达并纯化柯萨奇病毒A组16型(CVA16) VP1蛋白。[方法]根据Gen Bank CVA16 VP1基因序列,合成VP1全基因,连接到载体p ET30a,构建原核表达质粒p ET30a-CVA16-VP1。将测序正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表... [目的]原核表达并纯化柯萨奇病毒A组16型(CVA16) VP1蛋白。[方法]根据Gen Bank CVA16 VP1基因序列,合成VP1全基因,连接到载体p ET30a,构建原核表达质粒p ET30a-CVA16-VP1。将测序正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,Ni-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组蛋白。[结果]成功构建重组质粒p ET30a-CVA16-VP1,表达蛋白经SDS-PAGE显示分子量约为38.7 k Da,目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白经复性、纯化,纯度达90%以上;经Western Blot检测,证实表达的蛋白为VP1蛋白。[结论]成功获得了高纯度的VP1蛋白,为此抗原用于临床诊断打下了基础。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16型(CVA16) VP1蛋白 原核表达 纯化
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