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ptsH基因过表达对乳酸乳球菌N8自身免疫耐受性及其生理代谢的影响 被引量:1
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作者 刘冠楠 轩辕铮铮 +3 位作者 徐海津 白艳玲 张秀明 乔明强 《生物技术通讯》 CAS 2016年第5期601-606,共6页
目的:通过基因工程方法提高HPr蛋白编码基因ptsH在乳链菌肽(nisin)高产野生乳酸乳球菌株N8中的表达,揭示ptsH基因与乳酸乳球菌乳链菌肽耐受性等相关生物学功能的关系。方法:构建ptsH过表达质粒pLEV16-ptsH并转化至N8,使其ptsH基因过量表... 目的:通过基因工程方法提高HPr蛋白编码基因ptsH在乳链菌肽(nisin)高产野生乳酸乳球菌株N8中的表达,揭示ptsH基因与乳酸乳球菌乳链菌肽耐受性等相关生物学功能的关系。方法:构建ptsH过表达质粒pLEV16-ptsH并转化至N8,使其ptsH基因过量表达,进而对比分析ptsH过表达菌株与野生菌株在生长曲线、乳链菌肽耐受性、效价、Biolog等方面的差异。结果:N8-ptsH过表达菌株与N8菌株在菌落形态、大小、表面湿滑程度及生长曲线等方面没有明显差异;ptsH基因过表达使N8菌株的乳链菌肽耐受性提高了8.3%,2个乳链菌肽耐受性相关基因nisI和nisF的表达量分别提高了15.45倍和近45倍;ptsH基因过表达略微减缓了N8菌株中乳链菌肽的产生,但乳链菌肽的最终产量略有提高;ptsH基因过表达菌株中PTS系统糖苷和磷酸化糖类的利用率比原始菌株显著提高。结论:ptsH基因主要与乳酸乳球菌的乳链菌肽耐受性有关。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌N8 ptsh基因过表达 乳链菌肽 耐受性 生物学功能
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调整葡萄糖转运系统提高大肠杆菌L-苏氨酸产量 被引量:2
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作者 朱丽飞 王小元 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期70-80,共11页
葡萄糖的有效利用是提高大肠杆菌合成L-苏氨酸能力的关键,作者通过优化葡萄糖转运来提高大肠杆菌L-苏氨酸合成能力。利用CRISPR基因编辑技术在大肠杆菌TWF001中分别敲除了PTS系统关键基因pts H和pts G,并在30 g/L葡萄糖质量浓度下进行... 葡萄糖的有效利用是提高大肠杆菌合成L-苏氨酸能力的关键,作者通过优化葡萄糖转运来提高大肠杆菌L-苏氨酸合成能力。利用CRISPR基因编辑技术在大肠杆菌TWF001中分别敲除了PTS系统关键基因pts H和pts G,并在30 g/L葡萄糖质量浓度下进行了摇瓶发酵。与对照菌株TWF001相比,TWF001Δpts H和TWF001Δpts G合成L-苏氨酸能力均有明显改善;TWF001Δpts H L-苏氨酸产量提升38.02%。在TWF001Δpts H基因组上用trc启动子过表达gal P基因,构建了TWF001Δpts H,Ptrc::Pgal P。对3株突变菌在40、50、60 g/L葡萄糖质量浓度下进行了摇瓶发酵;36 h后TWF001Δpts H,Ptrc::Pgal P在40 g/L葡萄糖质量浓度时,L-苏氨酸产量达到26.16 g/L,糖酸转化率为0.65 g/g,L-苏氨酸产量提升幅度达42.12%。研究结果说明优化葡萄糖转运可以有效提高大肠杆菌L-苏氨酸合成能力。 展开更多
关键词 大肠杆菌 L-苏氨酸 PTS系统 galP ptsh ptsG
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