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Pseudomonas protegens H78中抗真菌剂藤黄绿菌素的合成及其基因簇分析 被引量:4
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作者 杨国环 王正 +2 位作者 吴玲玉 张雪洪 黄显清 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期680-684,共5页
假单胞菌株H78是本实验室从油菜根际分离得到的一株生防细菌。通过16S r RNA及藤黄绿菌素(pyoluteorin,Plt)合成基因plt C基因(编码聚酮合成酶)保守区段进行PCR测序,初步确定H78菌株可能属于P.protegens。本研究旨在进一步克隆H78菌株的... 假单胞菌株H78是本实验室从油菜根际分离得到的一株生防细菌。通过16S r RNA及藤黄绿菌素(pyoluteorin,Plt)合成基因plt C基因(编码聚酮合成酶)保守区段进行PCR测序,初步确定H78菌株可能属于P.protegens。本研究旨在进一步克隆H78菌株的Plt生物合成基因簇,分析其Plt合成特性以及H78菌株的分类地位。对假单胞菌株H78进行全基因组de novo测序;使用blast工具,分析假单胞菌株H78与P.protegens Pf-5、CHA0、P.aeruginosa M18、LESB58中Plt合成基因簇的同源性;使用KMB培养基对菌体进行发酵,测定菌体生长,对Plt合成进行HPLC测定。假单胞菌H78的Plt合成基因簇与其它4个菌株都存在保守的基因组成与布局,在Plt合成基因编码氨基酸序列上,H78与CHA0、Pf-5菌株的一致性高达99%~100%,其中与CHA0同源性更高;而与铜绿假单胞菌M18及LESB58菌株的一致性相对较低,为52%~88%。在KMB培养基中,假单胞菌株H78中累积合成Plt超过30滋g/m L。H78菌株属于P.proteg... 展开更多
关键词 假单胞菌(P.protegens)H78 藤黄绿菌素 生物合成基因簇
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Pseudomonas protegens H78中Crc调控基因突变的转录组学分析 被引量:1
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作者 张晴晴 王正 +2 位作者 刘玉洁 张雪洪 黄显清 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期4497-4503,共7页
转录后调控子Crc蛋白(Catabolite repression control protein)在防御假单胞菌(Pseudomonas protegens)H78中发挥着重要的代谢调控作用。运用RNA-seq(RNA sequencing)技术,针对H78野生型和H78Δcrc突变株开展比较转录组学研究,利用COG(C... 转录后调控子Crc蛋白(Catabolite repression control protein)在防御假单胞菌(Pseudomonas protegens)H78中发挥着重要的代谢调控作用。运用RNA-seq(RNA sequencing)技术,针对H78野生型和H78Δcrc突变株开展比较转录组学研究,利用COG(Clusters of orthologous groups of proteins)、KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)数据库对受到Crc调控的基因进行功能分类。转录组结果显示:Crc突变导致218个基因的转录子水平发生两倍以上的显著变化,其中105个基因表达上调,113个基因表达下调。Crc蛋白对碳、能量、脂肪及氨基酸代谢、抗生素合成等次级代谢具有全局调控作用,比如,脂质转运和代谢的基因簇(H78_00275~00283)表达显著下调约2.7~8.1倍,能量生产和转换的cyoA_2B_2C_2D_2E_1基因簇(H78_05248~05252)基因表达显著下调约3.4倍,调控氨基酸转运与代谢的H78_04826astAA_4DB基因簇(H78_04822~04826)基因表达显著上调约4倍,抗真菌剂藤黄绿菌素(pyoluteorin,Plt)的合成基因簇(pltLABCDEFG)、转运基因簇(pltIJKNOP)表达下调平均约3倍,而调控基因簇(pltR,pltM,pltZ)的表达平均下调不足2倍,整体上Plt合成受到Crc的显著正调控。Crc转录组学结果为进一步开展Plt等抗生素合成的分子调控网络与代谢工程研究奠定基础。 展开更多
关键词 PSEUDOMONAS protegens H78 CRC 转录组 藤黄绿菌素
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6sRNA对Pseudomonas protegensH78抗生素合成的调控
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作者 吴玲玉 王正 +2 位作者 刘玉洁 张雪洪 黄显清 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期926-931,共6页
Pseudomonas protegens H78是本实验室从上海奉贤油菜根际分离得到的一株生防菌株,可以分泌多种抗生素和铁载体等次级代谢产物,6S RNA(ssrS编码产物)主要调控细菌DNA的转录过程。以H78菌株基因组DNA为模板,体外缺失体内同源重组构建H78 ... Pseudomonas protegens H78是本实验室从上海奉贤油菜根际分离得到的一株生防菌株,可以分泌多种抗生素和铁载体等次级代谢产物,6S RNA(ssrS编码产物)主要调控细菌DNA的转录过程。以H78菌株基因组DNA为模板,体外缺失体内同源重组构建H78 ssrS突变菌株,KMB培养基中测定菌体生长,进行藤黄绿菌素(Plt)发酵分析和pltL'-、prnA'-、pchD'-'lacZ表达酶活测定,分析6S RNA对H78抗生素生物合成等次级代谢的调控作用。与H78野生型比较,ssrS突变菌株Plt产量下降大约50%,pltL、pchD基因表达没有明显变化,prnA表达约为野生型的1.5倍,表明6S RNA对H78菌株的抗生素合成存在部分但不显著的调控作用。 展开更多
关键词 PSEUDOMONAS protegens H78 6s RNA 藤黄绿菌素(Plt) LACZ
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Pleiotropic regulatory function of the RNA chaperone Hfq in the Pseudomonas protegens FD6
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作者 Deyu Wen Jieyu Hu +5 位作者 Ziying Gao Chenglin Xing Yao Xiao Tao Wu Xiaogang Wu Qingxia Zhang 《Phytopathology Research》 2024年第1期122-134,共13页
The rhizosphere bacterium Pseudomonas protegens FD6,which is associated with the production of antibiotics such as pyoluteorin(PLT)and 2,4-diacetylphloroglucinol(2,4-DAPG),has strong antagonistic effects on phytopatho... The rhizosphere bacterium Pseudomonas protegens FD6,which is associated with the production of antibiotics such as pyoluteorin(PLT)and 2,4-diacetylphloroglucinol(2,4-DAPG),has strong antagonistic effects on phytopathogens.Hfq is a conserved RNA chaperone involved in the regulation of stress tolerance,antibiotic production,and bacterial virulence.Here,we determined the regulatory effects of Hfq on biocontrol traits in P.protegens FD6.Mutation of hfq in FD6 reduced the growth rate,swimming and swarming ability,and production of proteases,siderophores,and hydrogen cyanide(HCN).Transmission electron microscopy revealed that disruption of hfq led to the loss of flagella.Furthermore,Hfq exerted a suppressive effect on biofilm formation and PLT production while not affecting antagonistic activity and control effect against tomato bacterial wilt.However,Hfq positively regulated the production of 2,4-DAPG and activated the phlD expression.Additionally,mutation of hfq abolished the function of the type VI secretion system(T6SS)due to a decrease in the expression of T6SS-related genes.Overall,these results suggest that Hfq plays a pleiotropic role in modulating the expression of biocontrol trait-related genes in P.protegens FD6. 展开更多
关键词 Biocontrol agent Pseudomonas protegens RNA chaperone Hfq Antibiotic synthesis Type VI secretion system Tomato bacterial wilt
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