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岩藻糖基转移酶7失调对脂多糖诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响
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作者 易丽君 李红 《中国生物制品学杂志》 2025年第7期790-795,共6页
目的 探讨岩藻糖基转移酶7(fucosyltransferase 7,Fut7)失调对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响,以期为临床相关疾病的炎症发生机制的研究提供实验依据。方法 采用不同浓度LPS(0、0.5、1、2、4、10μg/... 目的 探讨岩藻糖基转移酶7(fucosyltransferase 7,Fut7)失调对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响,以期为临床相关疾病的炎症发生机制的研究提供实验依据。方法 采用不同浓度LPS(0、0.5、1、2、4、10μg/mL)作用THP-1细胞,RT-qPCR法检测细胞中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因mRNA转录水平,确定建立炎性细胞模型的LPS刺激浓度。采用最佳浓度LPS刺激THP-1细胞,建立细胞炎性反应模型,并采用RT-qPCR法检测Fut7、小分子药物唾液酸路易斯寡糖X(sialyl Lewis X,sLeX)和FutT活性抑制剂SGN-2FF对炎性细胞模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平的影响。结果 确定建立炎性细胞模型的LPS刺激浓度为4μg/mL。Fut7过表达及sLeX可明显增加LPS诱导THP-1细胞炎性反应模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平(t=3.93~30.05,P均<0.05);Fut7抑制表达可明显降低LPS诱导THP-1细胞炎性反应模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平(t=6.89~39.50,P均<0.01),SGN-2FF可明显降低IL-1β、IL-6、IL-8基因mRNA转录水平(t=5.17~6.44,P均<0.001),但TNF-α基因mRNA的转录水平则明显升高(t=12.31,P<0.001)。结论 Fut7过表达及sLeX可通过促进炎性细胞因子的表达加剧LPS诱导THP-1细胞的炎性反应;Fut7抑制表达及Fut7活性抑制剂SGN-2FF可有效缓解炎症,为炎性疾病治疗提供了新策略。 展开更多
关键词 岩藻糖基转移酶7 人单核细胞thp-1 唾液酸路易斯寡糖X 炎性反应 细胞因子
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刚地弓形虫Ⅰ/Ⅲ型ROP16调控TAF15对THP‑1细胞影响及机制研究
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作者 殷荷 马磊 +2 位作者 党甜甜 李佳铭 赵志军 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第1期103-111,共9页
目的探究刚地弓形虫Ⅰ、Ⅲ型棒状体蛋白16(ROP16)通过调控TATA结合蛋白相关因子15(TAF15)对人单核细胞白血病细胞(THP-1)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法将Ⅰ、Ⅲ型ROP16过表达慢病毒转染至THP-1细胞,构建稳定表达ROP16的细胞株(THP-1... 目的探究刚地弓形虫Ⅰ、Ⅲ型棒状体蛋白16(ROP16)通过调控TATA结合蛋白相关因子15(TAF15)对人单核细胞白血病细胞(THP-1)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法将Ⅰ、Ⅲ型ROP16过表达慢病毒转染至THP-1细胞,构建稳定表达ROP16的细胞株(THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ),以转染空载体慢病毒的细胞为空载体对照组(THP-1-Venus),未转染细胞为对照组(THP-1),通过实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blotting)验证过表达效果。利用免疫沉淀-质谱联用技术(IP-MS)在THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ细胞株中预测ROP16的互作蛋白,并通过RT-qPCR和Western blotting检测细胞中互作蛋白TAF15的表达。将3条作用于TAF15基因不同位点的小干扰RNA(siRNA 1215、siRNA 825、siRNA 288)分别干扰THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ细胞株,分为THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA 1215/825/288组,同时设未干扰对照组(THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC),Western blotting验证TAF15沉默效果。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)与流式细胞术检测各组细胞增殖及凋亡情况,Western blotting检测细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)、周期素依赖性激酶6(CDK6)、G1/S特异性周期蛋白(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(caspase-9)及磷酸化信号转导和转录激活因子3(P-STAT3)蛋白的表达。结果THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组ROP16 mRNA的相对转录水平为2679.427±250.600、2395.410±325.700,均高于THP-1-Venus组(1.036±0.102)(F=153.3,P<0.01);ROP16蛋白的相对表达水平为4.526±0.020、5.457±0.250,均高于THP-1-Venus组(1.688±0.653)(F=76.4,P<0.01)。TAF15为Ⅰ、Ⅲ型ROP16的互作蛋白,THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组TAF15 mRNA的相对转录水平为6.027±0.313、5.567±0.088,均高于THP-1-Venus组(0.985±0.027)(F=869.4,P<0.01);TAF15蛋白的相对表达水平为1.789±0.145、1.593±0.029,均高于THP-1-Venus组(1.010±0.365)(F=50.6,P<0.01)。TAF15 siRNA转染48 h后,THP-1-ROP16Ⅰ+siRNA 1215/825/288组TAF15蛋白的相对表达水平分别为0.384±0.047、0.246±0.072、0.125±0.026,均低于THP-1-Venus组(1.007±0.019)(F=313.1,P<0.01);THP-1-ROP16Ⅲ+siRNA 1215/825/288组细胞TAF15蛋白的相对表达水平分别为0.186±0.020、0.180±0.015、0.112±0.019,均低于THP-1-Venus组(0.995±0.052)(F=3046.0,P<0.01)。THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC组细胞CCK-8实验A450值分别为0.803±0.015、0.813±0.011,低于THP-1-Venus组(0.997±0.010、0.995±0.016)(t=19.2、24.0,均P<0.01);THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA 825/288组A450值分别为0.986±0.010、0.983±0.004,0.980±0.006、0.984±0.010(F=3.5、2.9,均P>0.05)。THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC组细胞凋亡率分别为(38.19±0.45)%、(38.06±0.84)%,高于THP-1-Venus组的(28.41±0.69)%(t=20.5、17.7,均P<0.01);THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA 825/288组分别为(30.03±1.83)%、(28.78±0.72)%,(29.33±0.80)%、(28.94±0.58)%(F=1.5、0.4,均P>0.05)。THP-1-ROP16Ⅰ+siRNA NC组p21、Bax、caspase-9、cleaved caspase-3及P-STAT3蛋白的相对表达水平分别为1.322±0.027、1.493±0.030、1.349±0.021、1.324±0.020、10.500±1.005,均高于THP-1-Venus组(1.000±0.026、0.996±0.016、0.989±0.019、0.994±0.010、1.000±0.001)(t=14.8、25.4、22.3、25.0、15.6,均P<0.01);CDK6、CyclinD1及Bcl-2蛋白的相对表达水平分别为0.387±0.040、0.424±0.030、0.438±0.035,均低于THP-1-Venus组(0.989±0.018、1.000±0.074、0.991±0.016)(t=23.6、12.4、25.0,均P<0.01)。THP-1-ROP16Ⅲ+siRNA NC组p21、Bax、caspase-9、cleaved caspase-3及P-STAT3蛋白的相对表达水平分别为1.409±0.020、1.493±0.030、1.349±0.021、1.324±0.020、16.210±0.664,均高于THP-1-Venus组(1.004±0.032、0.996±0.015、0.989±0.019、0.994±0.010、1.000±0.001)(t=18.7、25.4、22.3、25.0、39.7,均P<0.01);CDK6、CyclinD1及Bcl-2蛋白的相对表达水平分别为0.418±0.021、0.357±0.040、0.411±0.019,均低于THP-1-Venus组(1.000±0.001、1.001±0.042、0.991±0.016)(t=47.7、19.1、40.7,均P<0.01)。结论弓形虫Ⅰ、Ⅲ型ROP16蛋白可通过促进TAF15的表达抑制THP-1细胞增殖、促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制细胞内STAT3信号通路的活化有关。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 棒状体蛋白16 TATA结合蛋白相关因子15 thp‑1细胞
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刚地弓形虫棒状体蛋白16过表达人单核THP⁃1细胞的转录组学分析
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作者 李佳铭 陈梅 +2 位作者 党甜甜 殷荷 赵志军 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第3期317-323,共7页
目的转录组测序分析Ⅰ型RH株刚地弓形虫棒状体蛋白16(ROP16)过表达人单核THP⁃1细胞的基因表达谱变化,筛选免疫应答相关驱动基因。方法将人单核THP⁃1细胞接种于96孔板,过表达组中加入ROP16过表达慢病毒,对照组加入等量培养基,72 h后在荧... 目的转录组测序分析Ⅰ型RH株刚地弓形虫棒状体蛋白16(ROP16)过表达人单核THP⁃1细胞的基因表达谱变化,筛选免疫应答相关驱动基因。方法将人单核THP⁃1细胞接种于96孔板,过表达组中加入ROP16过表达慢病毒,对照组加入等量培养基,72 h后在荧光显微镜下观察转染情况。TRIzol法提取过表达组和对照组人单核THP⁃1细胞总RNA,并进行转录组测序,筛选差异表达基因(DEG),绘制火山图。对DEG进行聚类分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)代谢通路富集分析和基因本体(GO)功能富集分类,筛选出过表达组和对照组的DEG,并进行实时荧光定量PCR(qPCR)验证。两组间比较采用独立样本t检验。结果荧光显微镜下过表达组90%以上的人单核THP⁃1细胞表达绿色荧光,对照组细胞未见绿色荧光。qPCR结果表明,过表达组ROP16 mRNA相对转录水平(1083.484±68.990)较对照组(1.000±0)显著上调(t=22.9,P<0.01),表明已构建稳定表达ROP16的THP⁃1细胞株。共筛选出312个DEG,其中193个表达上调,119个表达下调。KEGG注释结果显示,注释到有机体系统的DEG占比最高(24.2%),显著富集于85个条目,其中免疫系统显著富集的基因有47个。KEGG富集分析发现,DEG富集至20条信号通路上,Th1和Th2细胞分化、自然杀伤细胞介导的细胞毒性及IL⁃17信号通路等3条与免疫系统相关的通路分别富集DEG 6、7和8个。GO功能注释结果显示,共有309个DEG注释到生物过程、细胞组分和分子功能等3个一级节点分类下的55个二级节点分类中。GO富集结果显示,DEG显著富集于炎症反应、肿瘤坏死因子产物负调控、细胞因子产生、γ干扰素产生的正调节,以及与免疫应答相关的通路中。qPCR检测发现ROP16过表达组中MAN2B1、FOS、C1QA的mRNA相对转录水平(25.994±0.382、60.584±2.968、36.759±0.180)均高于对照组(1.000±0.039、1.000±0.015、1.000±0)(t=92.00、28.39、280.7,P<0.05或0.01),LMNB1、IL⁃6和IL⁃12 mRNA相对转录水平(0.728±0.054、0.517±0.073、0.587±0.015)均低于对照组(1.052±0.027、1.000±0.039、1.000±0.010)(t=7.64、8.24、33.62,P<0.05或0.01)。结论Ⅰ型RH株弓形虫效应分子ROP16过表达后,人单核THP⁃1细胞基因表达谱发生了明显变化。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 棒状体蛋白16 人单核thp⁃1细胞 转录组 免疫应答
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红曲黄色素对脂多糖诱导的THP-1细胞和RAW264.7细胞炎症的影响
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作者 毛禹清 高坤辉 +1 位作者 刘曾丽 陈勉华 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第9期107-113,共7页
为研究红曲黄素C(monascinol,MC)、红曲素(monascin,MS)和红曲黄素(ankaflavin,AK)的抗炎机理,从红曲菌CP-1固态发酵后得到的红曲米中提取分离出红曲黄色素MC,并使用薄层层析法(thin-layer chromatography,TLC)和HPLC进行纯度分析。构建... 为研究红曲黄素C(monascinol,MC)、红曲素(monascin,MS)和红曲黄素(ankaflavin,AK)的抗炎机理,从红曲菌CP-1固态发酵后得到的红曲米中提取分离出红曲黄色素MC,并使用薄层层析法(thin-layer chromatography,TLC)和HPLC进行纯度分析。构建2μg/mL的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人THP-1巨噬细胞和小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症模型,并进行形态学观察,利用噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法测定细胞活力,以MS和AK作为参比,实时荧光定量法(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定红曲黄色素MC对脂多糖诱导的THP-1细胞和RAW264.7细胞中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。结果表明,提取出的红曲黄色素MC纯度能达到98%以上,可用于细胞实验。6μg/mL的MC、MS和AK诱导THP-1细胞24 h后,细胞存活率均能达到90%以上,符合实验要求。6μg/mL的MC、MS和AK处理THP-1细胞和RAW264.7细胞24 h后,在转录水平和翻译水平上均显著抑制了IL-6的表达(P<0.01)。MC在转录水平和翻译水平上显著抑制了THP-1细胞和RAW264.7细胞中TNF-α的表达量(P<0.01),MS和AK仅在翻译水平上显著抑制了RAW264.7细胞TNF-α的分泌(P<0.01)。 展开更多
关键词 红曲黄色素 thp-1细胞 RAW264.7细胞 抗炎作用 促炎细胞因子
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CLEC4A基因对THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化的影响
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作者 王德隆 高振盛 孙业盈 《滨州医学院学报》 2025年第5期449-454,460,共7页
目的探讨C型凝集素结构域家族4成员A(C-type lectin domain family 4 member A,CLEC4A)基因对THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化的影响。方法在THP-1细胞系中采用CRISPR/Cas9基因敲除技术和瞬时转染技术分别敲除和过表达CLEC4A,采用蛋白免疫... 目的探讨C型凝集素结构域家族4成员A(C-type lectin domain family 4 member A,CLEC4A)基因对THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化的影响。方法在THP-1细胞系中采用CRISPR/Cas9基因敲除技术和瞬时转染技术分别敲除和过表达CLEC4A,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)以及流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测CLEC4A的敲除情况,采用逆转录定量聚合酶链式反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和流式细胞术检测CLEC4A的过表达情况;对THP-1细胞进行M1型诱导,分别采用RT-qPCR法、Western blot、流式细胞术和免疫荧光法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、人类白细胞抗原-DR亚型(human leukocyte antigen-DR isotype,HLA-DR)和CD80的表达变化。结果本研究采用CRISPR/Cas9基因编辑技术实现了CLEC4A基因的高效敲除(敲除效率>95%),通过瞬时转染技术使CLEC4A表达水平上调至200%。基因功能实验显示,CLEC4A的敲除显著降低了脂多糖和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)诱导的M1型巨噬细胞标志物iNOS、HLA-DR和CD80的表达。相反,CLEC4A过表达组中上述标志物的表达量显著增加。结论CLEC4A基因可以促进THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化。 展开更多
关键词 thp-1 C型凝集素结构域家族4成员A M1型巨噬细胞极化
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A complex-valued Vandermonde precoding technique for VLC-OFDM systems
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作者 WANG Zhongpeng SHEN Wengyu +1 位作者 QIU Weiwei XUE Linlin 《Optoelectronics Letters》 2025年第9期541-546,共6页
High peak-to-average power ratio(PAPR)is the main disadvantage of visible light communication-based orthogonal frequency division multiplexing(VLC-OFDM)systems.To address this problem,a novel precoding method is propo... High peak-to-average power ratio(PAPR)is the main disadvantage of visible light communication-based orthogonal frequency division multiplexing(VLC-OFDM)systems.To address this problem,a novel precoding method is proposed in this paper.The complex-valued precoding matrix is constructed by a Vandermonde matrix.The researched results show the proposed precoding scheme has better PAPR performance when compared to the conventional real-valued precoding methods.Moreover,a general closed-form expression of bit error rate(BER)for Vandermonde precoded VLC-OFDM is derived for multipath fading channel.The obtained BER formula shows that Vandermonde precoding can improve the BER performance of VLC-OFDM system over multipath fading channel.This is verified by the simulation results.The researched results also show that different precoding schemes have the same BER performance but different PAPR performance. 展开更多
关键词 VLC OFDM BER Multipath fading complex valued precoding precoding method Vandermonde matrix orthogonal frequency division multiplexing vlc ofdm systemsto PAPR
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Enhancing generalized receive spatial modulation by symbol-level precoding:Design guidelines with or without intelligent reflecting surfaces
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作者 Lei Zhang Miaowen Wen +2 位作者 Qiang Li Guangyuan Zheng Lixia Xiao 《Digital Communications and Networks》 2025年第4期1261-1269,共9页
Existing Generalized Receive Spatial Modulation(GRSM)with Symbol-Level Precoding(SLP)forces the received signals(excluding noise)at unintended antennas to be zero,which restricts the generation of strong constructive ... Existing Generalized Receive Spatial Modulation(GRSM)with Symbol-Level Precoding(SLP)forces the received signals(excluding noise)at unintended antennas to be zero,which restricts the generation of strong constructive interference to intended receive antennas and thus limits the performance improvement over conventional GRSM with Zero-Forcing(ZF)precoding.In this paper,we propose a novel GRSM-SLP scheme that relaxes the zero receive power constraint and achieves superior performance by integrating Intelligent Reflecting Surfaces(IRSs).Specifically,our advanced GRSM-RSLP jointly exploits SLP at the transmitter and passive beamforming at the IRS to maximize the power difference between intended and unintended receive antennas,where the received signals at unintended antennas are relaxed to lie in a sphere centered at origin with a preset radius that depends on the Signal-to-Noise Ratio(SNR)value.The precoding matrix and passive beamforming vectors are optimized alternately by considering both phase shift keying and quadrature amplitude modulation signaling.It is worth emphasizing that GRSM-RSLP is a universal solution,also applicable to systems without IRS,although it performs better in IRS-assisted systems.We finally conduct extensive simulations to prove the superiority of GRSM-RSLP over GRSM-ZF and GRSM-SLP.Simulation results show that the performance of GRSM-RSLP is significantly influenced by the number of unintended antennas,and the larger the number,the better its performance.In the best-case scenario,GRSM-RSLP can achieve SNR gains of up to 10.5 dB and 12.5 dB over GRSM-SLP and GRSM-ZF,respectively. 展开更多
关键词 Receive spatial modulation Constructive interference Symbol-level precoding Intelligent reflecting surface
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A Modified Interference Exploitation 1-Bit Precoding for QAM Constellations
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作者 Wang Qi Zhou Wuyang 《China Communications》 2025年第9期195-211,共17页
Compared to high-resolution digital-toanalog converters(DACs), deploying 1-bit DACs requires much less hardware complexity for a massive multi-user multiple-input multiple-output(MUMIMO) system. However, the feasible ... Compared to high-resolution digital-toanalog converters(DACs), deploying 1-bit DACs requires much less hardware complexity for a massive multi-user multiple-input multiple-output(MUMIMO) system. However, the feasible domain of a1-bit transmitting signal is non-continuous, and thus it is more challenging to exploit multi-user interference(MUI) by precoding. In this paper, to improve symbol decision accuracy, we investigate MUI exploitation 1-bit precoding methods for massive MU-MIMO systems under QAM modulations. Because MUIs may be constructive or destructive, we define a modified mean square error(MSE) metric for QAM constellations to jointly evaluate the effect of both MUIs and noise. Then, we model the 1-bit precoding optimization problems to minimize the sum modified MSE or the maximum modified MSE, where both the transmitting vector and receiving processing factor are optimization variables. Based on whether the receiving processing factor remains constant during the whole transmission block, two scenarios are taken into consideration. Referring to existing interference exploitation 1-bit precoding methods, we design efficient algorithms to solve the two modified MSE based problems.Compared to existing 1-bit precoding methods, our proposed methods provide better bit error rate performance, especially in more practical scenario Ⅱ(constant receiving processing factor in one block). 展开更多
关键词 constructive interference massive MU-MIMO MSE 1-bit DAC symbol-level precoding
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630 nm发光二极管照射脂多糖刺激的THP-1来源巨噬细胞的多组学分析
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作者 任丹丹 毕婉莹 +4 位作者 谢文婷 吴佳欣 宋武琦 张凤民 刘海亮 《照明工程学报》 2025年第2期39-48,共10页
发光二极管(Light Emitting Diode,LED)作为一种低能量光疗(Low-level Light Therapy,LLLT),已被证实可以治疗肺损伤、肌腱病、神经损伤、类风湿性关节炎等疾病。本研究采用630 nm LED红光作为光源,分析630 nm LED红光照射脂多糖(Lipopo... 发光二极管(Light Emitting Diode,LED)作为一种低能量光疗(Low-level Light Therapy,LLLT),已被证实可以治疗肺损伤、肌腱病、神经损伤、类风湿性关节炎等疾病。本研究采用630 nm LED红光作为光源,分析630 nm LED红光照射脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激的人单核细胞白血病细胞(THP-1)来源巨噬细胞的作用机制。用LPS处理THP-1细胞,并使用强度为28.8 J/cm^(2)的630 nm LED红光照射,随后检测促炎因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的mRNA表达水平及采用非标定量蛋白质组学及磷酸化蛋白质组学分析方法筛选差异表达蛋白并进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和KEGG富集;通过STRING在线网站(https://cn.string-db.org/)和Cytoscape软件分析蛋白质互作情况。结果显示,经LED照射的THP-1细胞CXCL9、CXCL10、CXCL11的mRNA表达水平较对照组显著降低。蛋白质组学结果显示,630 nm LED红光照射巨噬细胞后,23个差异表达蛋白能够显著富集在转录调节复合体、病毒防御反应的调控等通路。磷酸化蛋白质组学结果显示,有178个位点的修饰水平能够显著富集在核斑点、钙粘蛋白结合、蛋白信号转导、蛋白质定位的正向调控、肌动蛋白细胞骨架等通路中。结合多组学分析,我们推测630 nm LED红光可能是通过多种途径来实现抗炎作用的。 展开更多
关键词 发光二极管 thp-1 630 nm红光 蛋白质组学 磷酸化蛋白质组学 光生物调节
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基于THP1-Blue^(TM) NF-κB报告基因法的体外热原检测方法开发与验证 被引量:1
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作者 吴彦霖 张铭露 +2 位作者 杨泽岸 陈宏宇 张媛 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第22期2331-2337,共7页
目的:利用导入核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)报告基因和分泌型胚胎碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)活性的人单核细胞白血病细胞系THP-1细胞,建立一种可用于体外热原检测的方法,并考察方法的可行性和品种适... 目的:利用导入核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)报告基因和分泌型胚胎碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)活性的人单核细胞白血病细胞系THP-1细胞,建立一种可用于体外热原检测的方法,并考察方法的可行性和品种适用性。方法:参照《中华人民共和国药典》四部通则9101分析方法验证和9301注射剂安全检查法应用指导原则(附单核细胞活化反应测定法),以细菌内毒素国家标准品作为基准,对THP1-BlueTM NF-κB报告基因法进行专属性、精密度、耐用性等方法学研究;以精密度和阈值作为方法可行性分析的判断指标;并进行品种适用性研究。结果:所建立的方法符合《中华人民共和国药典》9301中单核细胞活化反应测定法的要求,R2均为0.999以上;计算最低检测限0.03 EU·mL^(-1);以内毒素含量为0.5,1.0 EU·mL^(-1)的溶液做回收实验,方法的准确度分别为101%和106%;通过本方法完成人凝血酶原复合物、冻干人纤维蛋白原、b型流感、23价肺炎、牛痘疫苗的品种适用性研究。结论:THP1-Blue^(TM) NF-κB报告基因法满足单核细胞激活实验要求,可用于体外热原物质检测。 展开更多
关键词 单核细胞激活实验 热原检测 thp1-Blue^(TM)NF-κB 报告基因法
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FHL2通过NF-κB信号通路调节THP-1巨噬细胞泡沫化 被引量:3
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作者 陈卫卫 廖煌 +1 位作者 史振鸿 罗颖 《基础医学与临床》 2024年第2期204-209,共6页
目的 明确4个半LIM结构域蛋白(FHL2)是否能够通过调节核因子κB(NF-κB)信号通路影响巨噬细胞泡沫化。方法 构建FHL2过表达质粒及合成FHL2小干扰RNA(si-FHL2),分别转染至人单核/巨噬细胞系THP-1中,Western blot检测FHL2表达;使用氧化低... 目的 明确4个半LIM结构域蛋白(FHL2)是否能够通过调节核因子κB(NF-κB)信号通路影响巨噬细胞泡沫化。方法 构建FHL2过表达质粒及合成FHL2小干扰RNA(si-FHL2),分别转染至人单核/巨噬细胞系THP-1中,Western blot检测FHL2表达;使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激细胞,ELISA检测细胞IL-6、IL-1β、TNF-α等细胞因子的表达;油红O染色检测细胞泡沫化程度;Western blot检测NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果 转染过表达FHL2质粒的细胞中FHL2表达量升高(P<0.01),而转染si-FHL2的细胞表达量降低(P<0.05);敲低FHL2能够下调炎性细胞因子的分泌(P<0.01);FHL2下调能够缓解THP-1巨噬细胞泡沫化;同时,FHL2下调抑制NF-κB信号通路的活化(P<0.05),而在过表达FHL2组中结果呈相反趋势。结论 下调FHL2的表达可通过抑制NF-κB信号通路活化,降低炎性细胞因子的分泌,缓解巨噬细胞的泡沫化。 展开更多
关键词 4个半LIM结构域蛋白(FHL2) NF-ΚB信号通路 thp-1 巨噬细胞泡沫化
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茶黄素对ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化和氧化应激的影响 被引量:3
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作者 石萌萌 黄锐 +4 位作者 黄子乐 胡军威 肖靖杰 刘艳红 武军驻 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2024年第9期747-755,共9页
[目的]探索茶黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化和氧化应激的影响及机制。[方法]使用50μmol/L茶黄素、10μmol/L核因子E2相关因子2(NRF2)抑制剂ML385预处理THP-1来源的巨噬细胞,随后加入100 mg/L ox-LDL刺激... [目的]探索茶黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化和氧化应激的影响及机制。[方法]使用50μmol/L茶黄素、10μmol/L核因子E2相关因子2(NRF2)抑制剂ML385预处理THP-1来源的巨噬细胞,随后加入100 mg/L ox-LDL刺激细胞24 h建立泡沫细胞模型。通过CCK-8法和LDH释放量检测茶黄素对THP-1巨噬细胞活力的影响。通过RT-qPCR和Western blot检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达;ELISA法检测炎症因子的释放。采用油红O染色检测细胞内脂质积累,DiL标记氧化型低密度脂蛋白(DiL-ox-LDL)染色检测脂质摄取,DCFH-DA探针检测活性氧(ROS)水平。通过Western blot和RT-qPCR检测脂质摄取、胆固醇外排及氧化应激相关蛋白的表达。[结果]经100 mg/L的ox-LDL处理,THP-1巨噬细胞活力明显降低,脂质摄取、积累明显增加,脂质摄取相关蛋白表达增加,胆固醇外排相关蛋白表达明显减少,炎症与ROS水平明显增加,髓过氧化物酶(MPO)和NADPH氧化酶2(NOX2)表达增加(P<0.05);加入茶黄素后,细胞活力升高,细胞内脂质积累明显减少,脂质摄取相关蛋白的表达明显减少,胆固醇外排相关蛋白表达明显增多,炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的表达与释放明显降低,ROS水平降低,MPO与NOX2表达减少(P<0.05)。茶黄素预处理改变了NRF2信号通路中NRF2、血红素加氧酶1(HO-1)、Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)的表达,增加了NRF2核易位,减缓了细胞内氧化应激。ML385预处理细胞后,NRF2、HO-1、KEAP1和CD36蛋白表达水平明显降低。[结论]茶黄素可以显著抑制THP-1巨噬细胞泡沫化,抑制ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞炎症并通过NRF2/HO-1信号通路减缓了氧化应激。 展开更多
关键词 茶黄素 泡沫细胞 thp-1巨噬细胞 氧化应激
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没食子酸对脂多糖诱导的人THP1巨噬细胞炎症反应的抑制作用 被引量:6
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作者 刁佳雯 徐慧 +1 位作者 马新月 全吉淑 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期41-53,共13页
目的 探讨没食子酸(gallic acid, GA)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的人THP1巨噬细胞炎症反应的抑制作用。方法 将人THP1单核细胞用佛波酯(phorbol myristate acetate, PMA)分化为巨噬细胞,用LPS诱导建立巨噬细胞炎症模型,给... 目的 探讨没食子酸(gallic acid, GA)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的人THP1巨噬细胞炎症反应的抑制作用。方法 将人THP1单核细胞用佛波酯(phorbol myristate acetate, PMA)分化为巨噬细胞,用LPS诱导建立巨噬细胞炎症模型,给予不同浓度GA进行保护。CCK-8法筛选LPS和GA对THP1细胞的安全浓度;设正常组、模型组(100μg/L LPS)和GA组(100μg/L LPS+不同浓度GA)。ELISA法检测各组细胞培养液白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平,微板法检测各组细胞培养液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)活性和一氧化氮(nitric oxide, NO)含量,荧光染色检测各组细胞活性氧(ROS)水平、细胞损伤情况和线粒体跨膜电位的变化,Western blot法检测各组细胞环氧合酶-2(COX-2)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38)、核转录因子-κB(NF-κB)、NOD样受体3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、IL-1β和消皮素D(Gasdermin D,GSDMD)蛋白表达的影响。结果 与正常组比较,模型组细胞培养液IL-6、TNF-α、IL-1β和NO的分泌增多(P<0.05),COX-2、HMGB1、p-ERK、p-JNK、p-P38、p-NF-κB、NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达升高(P<0.05),GSDMD蛋白表达水平降低(P<0.05),ROS生成和细胞损伤明显增多,线粒体跨膜电位较正常组显著降低,LDH活性显著升高(P<0.05);与模型组比较,GA组细胞培养液IL-6、TNF-α、IL-1β和NO的分泌减少(P<0.05),COX-2、HMGB1、p-ERK、p-JNK、p-P38、p-NF-κB、NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达降低(P<0.05),GSDMD蛋白表达水平升高(P<0.05),ROS生成和细胞损伤减少,线粒体跨膜电位逐渐升高,LDH活性降低(P<0.05)。结论 GA对LPS诱导的人THP1巨噬细胞炎症反应具有抑制作用,其抗炎机制可能涉及MAPK和NF-κB信号通路。 展开更多
关键词 thp1细胞 炎症 没食子酸 脂多糖
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RNA结合蛋白RBPMS调控急性髓系白血病细胞系THP-1增殖与迁移 被引量:3
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作者 赵羚延 何浏 +1 位作者 马艳妮 余佳 《基础医学与临床》 CAS 2024年第5期619-625,共7页
目的研究具有多重剪接功能的RNA结合蛋白(RBPMS)对携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系THP-1功能的影响。方法使用GEO数据库分析造血系统中RBPMS的表达情况;通过慢病毒感染THP-1细胞,RT-qPCR和Western blot检测RBPMS过表达效率;... 目的研究具有多重剪接功能的RNA结合蛋白(RBPMS)对携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系THP-1功能的影响。方法使用GEO数据库分析造血系统中RBPMS的表达情况;通过慢病毒感染THP-1细胞,RT-qPCR和Western blot检测RBPMS过表达效率;通过高通量测序检测RBPMS过表达后对THP-1细胞转录组的影响。分别用CCK-8法和流式细胞仪检测RBPMS过表达对白血病细胞增殖以及迁移能力的影响。结果RBPMS在携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病干细胞中异常低表达。RBPMS过表达后THP-1细胞的增殖和迁移能力显著降低(P<0.0001,P<0.05)。结论RBPMS可以抑制携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系的细胞增殖与迁移。 展开更多
关键词 RBPMS MLL-AF9 急性髓系白血病 急性髓系白血病细胞系(thp-1)
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钙结合蛋白S100A4对BCG感染THP-1细胞自噬的调控作用 被引量:1
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作者 刘悦阳 李梦媛 +5 位作者 聂雪伊 马亚博 侯雨欣 马伯利 杨易 徐金瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期311-322,共12页
本研究旨在探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1后,钙结合蛋白S100A4对细胞自噬的调控作用。以感染复数为10∶1的BCG感染THP-1细胞不同时间,用Western blot检测S100A4和LC3Ⅱ的... 本研究旨在探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1后,钙结合蛋白S100A4对细胞自噬的调控作用。以感染复数为10∶1的BCG感染THP-1细胞不同时间,用Western blot检测S100A4和LC3Ⅱ的表达,以确定最佳感染时间,并采用透射电镜观察自噬体数量变化。在BCG单独感染或与S100A4小干扰RNA共处理THP-1细胞12 h后,采用qRT-PCR检测S100A4及自噬相关因子--微管相关蛋白轻链3II (microtubule-associated protein light chain 3Ⅱ, LC3Ⅱ)、自噬相关蛋白7(autophagy-related gene 7, Atg7)、Beclin-1在mRNA水平上的表达,采用Western blot检测S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1在蛋白水平的表达。利用mRFP-GFP-LC3检测自噬流,激光共聚焦显微镜观察细胞中mRFP-LC3和mRFP-GFP-LC3点状聚集。结果显示:在BCG感染THP-1细胞不同时间后,S100A4和LC3Ⅱ在蛋白表达水平随感染时间的延长先上升后下降,在12 h时表达最高(P<0.001),且自噬体数量明显增多。在mRNA水平上,与siNC组相比,siNC+BCG感染组S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1的mRNA表达水平显著上调(P<0.05),当BCG和siS100A4共处理后,S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1在mRNA水平的表达显著(P<0.05)或极显著(P<0.01,P<0.001)下调;在蛋白水平上,与未感染组相比,S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1的蛋白表达量显著增多(P<0.05),BCG和siS100A4共处理后,S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1的蛋白表达量均极显著减少(P<0.001);与未感染组相比,BCG组自噬体的数量极显著增多(P<0.01),siS100A4+BCG组与siNC+BCG组相比,自噬体的数量显著减少(P<0.05)。S100A4对BCG感染巨噬细胞诱导的自噬具有调控作用,S100A4能够促进BCG诱导的THP-1细胞自噬。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 细胞自噬 S100A4 thp-1细胞
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弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白激活STAT3磷酸化调节THP-1细胞周期、增殖及凋亡 被引量:1
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作者 殷荷 马磊 +4 位作者 党甜甜 李佳铭 田婷婷 马珊妮 赵志军 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期1115-1121,1127,共8页
目的探讨弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白通过激活STAT3磷酸化对THP-1细胞周期、增殖及凋亡的影响。方法将ROP16空载体及重组慢病毒过表达载体分别转染至THP-1细胞,观察细胞荧光表达强度并验证过表达效果;通过Western blotting检测过表达ROP16Ⅰ/... 目的探讨弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白通过激活STAT3磷酸化对THP-1细胞周期、增殖及凋亡的影响。方法将ROP16空载体及重组慢病毒过表达载体分别转染至THP-1细胞,观察细胞荧光表达强度并验证过表达效果;通过Western blotting检测过表达ROP16Ⅰ/Ⅲ的THP-1细胞中STAT3及P-STAT3蛋白的表达;利用STAT3磷酸化抑制剂-Stattic干预细胞,分为THP-1组、THP-1+Stattic组、THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组及THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+Stattic组;通过流式细胞术和CCK-8法检测各组细胞周期、增殖曲线以及凋亡率的改变;Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Cleaved Caspase3、Caspase9及Bcl-2蛋白表达水平。结果ROP16重组慢病毒过表达载体转染THP-1细胞后观察到强荧光信号,ROP16 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(FmRNA=314.1,F蛋白=758.7,均P<0.001),表明细胞稳转株构建成功,且THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组细胞中P-STAT3蛋白的表达水平较THP-1组升高(F=606.1,P<0.001)。流式细胞术和CCK-8结果显示,与THP-1组比较,THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组细胞周期被阻滞在G1期,细胞增殖能力降低(tⅠ组=19.2,tⅢ组=24.0,均P<0.01)、凋亡率增加(tⅠ组=175.1,tⅢ组=205.2,均P<0.001)。Western blotting结果显示,与THP-1组比较,THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组细胞内促凋亡蛋白Bax、Cleaved Caspases3、Caspase9的表达均显著升高(tBaxⅠ组=15.8,tBaxⅢ组=11.1,tCaspase9Ⅰ组=9.1,tCaspase9Ⅲ组=10.2,tCleaved Caspase3Ⅰ组=16.5,tCleaved Caspase3Ⅲ组=12.9,均P<0.001),抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显降低(tⅠ组=18.4,tⅢ组=26.2,均P<0.001)。但在Stattic干预后,THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+Stattic组细胞周期、增殖能力、凋亡率及凋亡相关蛋白的表达均恢复至接近原水平。结论弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白通过激活STAT3磷酸化进而将THP-1细胞周期阻滞在G1期、抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 ROP16蛋白 thp-1细胞 细胞周期 细胞增殖 细胞凋亡
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THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF抑制炎症过程中关键基因的鉴别
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作者 张媛媛 吴红莲 +2 位作者 徐嫚鸿 李筱荣 邵彦 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期887-897,共11页
目的鉴别人单核细胞白血病细胞THP1过表达腺病毒介导的色素上皮衍生因子(PEDF)抑制炎症过程中的关键基因。方法对THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF进行蛋白质组学分析。将THP1细胞分为GFP组和PEDF组,分别用GFP腺病毒和PEDF腺病毒感染细胞... 目的鉴别人单核细胞白血病细胞THP1过表达腺病毒介导的色素上皮衍生因子(PEDF)抑制炎症过程中的关键基因。方法对THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF进行蛋白质组学分析。将THP1细胞分为GFP组和PEDF组,分别用GFP腺病毒和PEDF腺病毒感染细胞;将THP1细胞分为甘露醇组、高糖组、高糖+GFP组和高糖+PEDF组,分别用D-甘露醇、D-无水葡萄糖、GFP腺病毒和PEDF腺病毒培养4、4、3和3 d;将Pedf^(-/-)小鼠采用随机数表法分为Pedf^(-/-)组和Pedf^(-/-)糖尿病组,每组12只,另取10只C57BL/6小鼠为对照组,取小鼠视网膜进行实验。采用实时荧光定量PCR验证差异表达基因(DEGs)的mRNA在视网膜组织和THP1细胞系中的表达水平。与GSE5504数据集进行DEGs交集,使用String数据库构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,Cytoscape软件及MCODE应用程序提取PPI网络模块,与Set1数据集取交集并找到关键基因。采用Western blot在THP1细胞和Pedf^(-/-)小鼠中验证关键基因的表达水平。结果通过蛋白质组学和生物信息学分析,筛选出Set1数据集中的105个差异蛋白。实时荧光定量PCR结果显示,PEDF组细胞中ARF5、TCF25和KCTD9 mRNA相对表达量明显高于GFP组,RNPS1、CSF1R、OGA、IBA57和MGST2 mRNA相对表达量明显低于GFP组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。对照组、Pedf^(-/-)组和Pedf^(-/-)糖尿病组视网膜组织中表达显著下调的TCF25、KCTD9、ARF5 mRNA和表达显著上调的CSF1R、RNPS1、IBA57 mRNA相对表达量总体比较,差异均有统计学意义(F=64.057、27.561、37.179、65.757、44.024、34.248,均P<0.001);与对照组相比,Pedf^(-/-)组TCF25、KCTD9、ARF5 mRNA相对表达量降低,CSF1R、RNPS1 mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);Pedf^(-/-)糖尿病组TCF25、KCTD9、ARF5 mRNA相对表达量降低,CSF1R、RNPS1、IBA57 mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与Pedf^(-/-)组相比,Pedf^(-/-)糖尿病组TCF25 mRNA相对表达量降低,CSF1R、RNPS1和IBA57 mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Set1数据集与GSE5504数据集交集后得到20个差异蛋白,主要富集于基因表达的正向调控、ERK1和ERK2级联的正向调节、胰岛素分泌的正向调节参与细胞对葡萄糖刺激的反应和抗原加工与递呈通路上。通过构建PPI网络和Cytoscape软件中MCODE插件筛选出关键基因CSF 1 R。Western blot结果显示,高糖组和高糖+GFP组中细胞CSF1R相对表达量分别为1.961±0.085和1.000±0.069,分别高于甘露醇组的1.000±0.072和高糖+PEDF组的0.469±0.079,差异均有统计学意义(t=14.940、8.765,均P<0.01);Pedf^(-/-)糖尿病组中视网膜CSF1R相对表达量为1.633±0.192,高于Pedf^(-/-)组的1.000±0.050,差异有统计学意义(t=5.537,P<0.01)。结论CSF 1 R可能为THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF抑制炎症过程中的关键基因和治疗靶点。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 炎症 色素上皮衍生因子 生物信息学 CSF1R基因 thp1细胞
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Channel Correlation Based User Grouping Algorithm for Nonlinear Precoding Satellite Communication System 被引量:1
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作者 Ke Wang Baorui Feng +5 位作者 Jingui Zhao Wenliang Lin Zhongliang Deng Dongdong Wang Yi Cen Genan Wu 《China Communications》 SCIE CSCD 2024年第1期200-214,共15页
Low Earth Orbit(LEO)multibeam satellites will be widely used in the next generation of satellite communication systems,whose inter-beam interference will inevitably limit the performance of the whole system.Nonlinear ... Low Earth Orbit(LEO)multibeam satellites will be widely used in the next generation of satellite communication systems,whose inter-beam interference will inevitably limit the performance of the whole system.Nonlinear precoding such as Tomlinson-Harashima precoding(THP)algorithm has been proved to be a promising technology to solve this problem,which has smaller noise amplification effect compared with linear precoding.However,the similarity of different user channels(defined as channel correlation)will degrade the performance of THP algorithm.In this paper,we qualitatively analyze the inter-beam interference in the whole process of LEO satellite over a specific coverage area,and the impact of channel correlation on Signal-to-Noise Ratio(SNR)of receivers when THP is applied.One user grouping algorithm is proposed based on the analysis of channel correlation,which could decrease the number of users with high channel correlation in each precoding group,thus improve the performance of THP.Furthermore,our algorithm is designed under the premise of co-frequency deployment and orthogonal frequency division multiplexing(OFDM),which leads to more users under severe inter-beam interference compared to the existing research on geostationary orbit satellites broadcasting systems.Simulation results show that the proposed user grouping algorithm possesses higher channel capacity and better bit error rate(BER)performance in high SNR conditions relative to existing works. 展开更多
关键词 channel correlation inter-beam interference multibeam satellite Tomlinson-Harashima precoding user grouping
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Design and Implementation of Nonlinear Precoding for MIMO-SDMA Toward 6G Wireless
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作者 Chaowu Wu Yue Xiao +1 位作者 Shu Fang Gang Wu 《China Communications》 SCIE CSCD 2024年第1期69-87,共19页
In this paper,we present a novel and robust nonlinear precoding(NLP)design and detection structure specifically tailored for multiple-input multipleoutput space division multiple access(MIMO-SDMA)systems toward 6G wir... In this paper,we present a novel and robust nonlinear precoding(NLP)design and detection structure specifically tailored for multiple-input multipleoutput space division multiple access(MIMO-SDMA)systems toward 6G wireless.Our approach aims to effectively mitigate the impact of imperfect channel estimation by leveraging the channel fluctuation mean square error(MSE)for reconstructing a highly accurate precoding matrix at the transmitter.Furthermore,we introduce a simplified receiver structure that eliminates the need for equalization,resulting in reduced interference and notable enhancements in overall system performance.We conduct both computer simulations and experimental tests to validate the efficacy of our proposed approach.The results reveals that the proposed NLP scheme offers significant performance improvements,making it particularly well-suited for the forthcoming 6G wireless. 展开更多
关键词 MIMO-SDMA nonlinear precoding Tomlinson-Harashima precoding(thp) vector perturbation(VP)
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基于CRISPR/Cas9技术构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株及其表型研究
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作者 李雪银 吴传新 +3 位作者 刘慧玲 李丽 程莎 孙航 《免疫学杂志》 CAS CSCD 2024年第1期87-95,共9页
目的 采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的THP-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法 设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成... 目的 采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的THP-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法 设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成Lenti-IDO1-gRNA慢病毒。利用Cas9慢病毒感染THP-1细胞获得稳定表达Cas9蛋白的细胞株,再经Lenti-IDO1-gRNA慢病毒感染敲除IDO1基因,有限稀释法获得单克隆细胞株。T7E1酶切检测gRNA打靶效率,PCR产物测序和Western blot鉴定IDO1基因敲除效果。CCK8法检测IDO1基因敲除对THP-1细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测对巨噬细胞标志物CD11b、CD68和CD14表达的影响,中性红法检测巨噬细胞吞噬功能。结果 成功构建了3种IDO1-gRNA重组质粒,3条gRNA均能有效编辑IDO1基因,以gRNA2编辑效率最高。经PCR产物测序和Western blot验证获得了3株THP-1 IDO1-KO单克隆细胞株,并发现IDO1基因敲除可抑制THP-1细胞增殖,下调THP-1巨噬细胞CD11b、CD68表达,上调CD14表达,增强THP-1巨噬细胞吞噬功能。结论 成功构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株;IDO1对THP-1细胞增殖活性、分化调节以及THP-1巨噬细胞吞噬功能调节有重要作用,为后续进一步探讨IDO1基因在巨噬细胞中的功能及机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 吲哚胺-2 3-双加氧酶1 基因敲除 thp-1细胞 巨噬细胞
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