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桔梗素D通过下调成纤维细胞TRPC6表达改善小鼠肺纤维化 被引量：10
1
作者 梁梓琛 余常辉 +5 位作者 梁世秀 周梓聪 周子丽 孟晓静 邹飞 蔡绍曦 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期60-69,共10页
目的探究桔梗素D(PD)对肺纤维化的影响及其机制。方法博来霉素(BLM)气道内滴入构建C57BL/6J小鼠肺纤维化模型,再予PD(10 mg/kg)灌胃,28 d后处死小鼠。分组如下:对照组(control)、BLM(10 mg/kg)模型组、BLM(10 mg/kg)+PD(10 mg/kg)组。... 目的探究桔梗素D(PD)对肺纤维化的影响及其机制。方法博来霉素(BLM)气道内滴入构建C57BL/6J小鼠肺纤维化模型,再予PD(10 mg/kg)灌胃,28 d后处死小鼠。分组如下:对照组(control)、BLM(10 mg/kg)模型组、BLM(10 mg/kg)+PD(10 mg/kg)组。肺组织石蜡切片HE染色、免疫组化和天狼星红染色评估小鼠肺组织纤维化程度和瞬时受体电位离子通道亚族C成员6(TRPC6)的表达与分布。Westernblot检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。小鼠原代肺成纤维细胞体外培养,分别用PD、TRPC6抑制剂醋酸落叶松酯(LA)预处理后加入转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激细胞,根据加入的TGF-β1和PD浓度不同分组如下:control组、TGF-β1(10 ng/mL)组、PD(2.5μmol/L)+TGF-β1组、PD(5μmol/L)+TGF-β1组和PD(10μmol/L)+TGF-β1组,LA处理分组如下:control组、TGF-β1(10 ng/mL)组和LA(10μmol/L)+TGF-β1组,测定细胞存活率、collagenⅠ、α-SMA和TRPC6的表达水平、活性氧(ROS)生成水平、线粒体膜电位、细胞增殖能力等指标。利用网络药理学方法结合文献分析PD作用于肺纤维化可能通过的机制。结果PD可明显减轻BLM诱导小鼠模型的肺部纤维化程度、减少α-SMA表达(P<0.05)。CCK-8结果显示PD、TGF-β1和LA的最适宜刺激浓度分别是10μmol/L、10 ng/mL和10μmol/L;5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色结果显示PD能够有效抑制肺成纤维细胞增殖;2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色显示PD能有效减少TGF-β1诱导的细胞ROS生成(P<0.0001);线粒体膜电位检测(Jc-1染色)结果显示PD能有效缓解TGF-β1诱导的细胞线粒体膜电位下降(P<0.001);蛋白电泳结果显示PD能显著抑制TGF-β1诱导的α-SMA和collagenⅠ的表达(P<0.05)。网络药理学结合文献分析发现PD可能通过TRPC6作用于肺纤维化。免疫组织化学结果显示PD明显减轻了BLM诱导的肺组织TRPC6表达。蛋白电泳结果显示PD可明显抑制TGF-β1诱导的TRPC6表达(P<0.05);使用LA可明显抑制细胞TRPC6、α-SMA、collagenⅠ的表达(P<0.05)。结论PD可降低小鼠肺纤维化,其机制可能与下调TRPC6并减少ROS产生有关。 展开更多
关键词 肺纤维化 桔梗素D 瞬时受体电位离子通道亚族c成员6 活性氧
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基质辅助激光解析质谱成像可视化分析桔梗皂苷空间分布 被引量：1
2
作者 徐丽丽 崔亚鹏 +1 位作者 刘娟 陈双喜 《中草药》 北大核心 2025年第7期2268-2273,共6页
目的基质辅助激光解析质谱成像(matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging,MALDI-MSI)是一种新型的分子成像技术,具有样本处理简单、免标记、空间分辨率高、检测范围广以及可视化的特点。通过MALDI-MSI... 目的基质辅助激光解析质谱成像(matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging,MALDI-MSI)是一种新型的分子成像技术,具有样本处理简单、免标记、空间分辨率高、检测范围广以及可视化的特点。通过MALDI-MSI技术探索皂苷类物质在桔梗Platycodon grandiflorum中的空间分布特征。方法根据桔梗浸提液在2,5-二羟基苯甲酸(2,5-dihydroxybenzoic acid,DHB)、α-氰基-4-羟基肉桂酸(α-cyano-4-hydroxycinnamic acid,CHCA)、9-氨基吖啶(9-aminoacridine,9-AA)3种基质作用下采集的质谱信号响应强度,选择DHB作为成像的喷涂基质。将厚度为25μm的桔梗冷冻切片经真空干燥后,使用基质喷涂仪在循环60次、湿度为40%,孵育时间为30 s的条件下,将DHB均匀地覆盖于切片上。在正离子反射模式下采集质量范围为m/z 200~1600的质谱信号用于MALDI-MSI分析。结果在桔梗的周皮、韧皮部、形成层、木质部和髓部,观察到12种具有显著空间分布差异的离子峰。经傅里叶变换离子回旋共振质谱(fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry,FT-ICR MS)分析其精确相对分子质量、分子式、同位素峰以及碎片离子,最终确认为桔梗皂苷D、桔梗皂苷C、桔梗皂苷E和桔梗皂苷J等12种桔梗皂苷。结论为桔梗中皂苷类成分空间分布情况的表征提供了可视化的方法。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析飞行时间质谱 质谱成像 桔梗 桔梗皂苷D 桔梗皂苷c 桔梗皂苷E 桔梗皂苷J 傅里叶变换离子回旋共振质谱
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桔梗总皂苷对支气管肺发育不良新生大鼠肺损伤的作用及机制研究 被引量：11
3
作者 吴朋 李银华 +3 位作者 谭心海 闵锋 袁利娟 郑婷 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第5期52-57,共6页
目的探讨桔梗总皂苷(PGS)对高氧致支气管肺发育不良(BPD)新生大鼠肺损伤及HGF/c-Met信号通路的影响。方法将66只SD新生大鼠分为对照组、BPD组、地塞米松(TD)组及桔梗总皂苷低、中、高剂量组,每组11只。除对照组外,通过持续吸入高浓度氧... 目的探讨桔梗总皂苷(PGS)对高氧致支气管肺发育不良(BPD)新生大鼠肺损伤及HGF/c-Met信号通路的影响。方法将66只SD新生大鼠分为对照组、BPD组、地塞米松(TD)组及桔梗总皂苷低、中、高剂量组,每组11只。除对照组外,通过持续吸入高浓度氧(氧体积分数为90%)复制BPD模型。桔梗总皂苷低、中、高剂量组分别腹腔注射50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg桔梗总皂苷,地塞米松组腹腔注射地塞米松5 mg/kg,BPD组和对照组给予等量生理盐水。连续给药14 d后,检测各组大鼠肺组织湿重/干重(W/D)值,HE染色法观察各组大鼠肺组织病理变化,并进行肺组织辐射状肺泡计数(RAC),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠肺组织中炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blotting检测蛋白HGF、c-Met、p-c-Met在肺组织的表达。结果与对照组相比,BPD组大鼠肺泡结构不完整,肺泡腔增大,肺泡间隔增厚,且出现炎症细胞浸润,新生大鼠肺组织W/D值,炎症因子IL-6、TNF-α水平,HGF、p-c-Met/c-Met蛋白表达升高(P<0.05),肺组织RAC降低(P<0.05);与BPD组相比,地塞米松组、桔梗总皂苷低、中、高剂量组新生大鼠肺泡病理改变明显减轻,大鼠肺组织W/D值、炎症因子IL-6、TNF-α水平、HGF、p-c-Met/c-Met蛋白表达降低(P<0.05),肺组织RAC升高(P<0.05)。结论桔梗总皂苷可减轻BPD新生大鼠肺损伤及肺组织炎症反应,可能与HGF/c Met信号通路有关。 展开更多
关键词 支气管肺发育不良 桔梗总皂苷 肝细胞生长因子/c-Met信号通路 高氧 新生大鼠
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