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宁夏某三甲医院28例尿路感染耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌分子流行特征及耐药性分析
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作者 闫丽新 朱晨宇 +3 位作者 陶佳 洪炜 胡欣欣 贾伟 《中国抗生素杂志》 北大核心 2025年第7期816-824,共9页
目的探讨宁夏医科大学总医院尿路感染碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的分子流行特点及其耐药性和同源性,为其治疗提供参考依据。方法收集2013年12月—2022年11月住院患者尿路感染CRE28株,使... 目的探讨宁夏医科大学总医院尿路感染碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的分子流行特点及其耐药性和同源性,为其治疗提供参考依据。方法收集2013年12月—2022年11月住院患者尿路感染CRE28株,使用WHONET 5.6软件统计菌株分布、耐药性;应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检4种碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaNDM、blaOXA-48和blaIMP);应用Sanger测序分析亚型;应用多克隆序列位点测定(multilocus sequence typing,MLST)方法检测菌株克隆型别;通过接合试验验证耐药基因转移性。结果尿路感染的28株CRE主要为肺炎克雷伯菌11株(39.30%)和大肠埃希菌9株(32.14%),主要分离自急诊科住院患者。药敏结果显示对多种常见抗生素耐药率≥50%,检出耐药基因为blaNDM和blaKPC,以blaNDM-5(77.27%)型为主。质粒接合试验结果显示携带blaNDM-5基因的7株大肠埃希菌和3株肺炎克雷伯菌可以成功地将其对碳青霉烯类耐药表型转移到受体菌大肠埃希菌EC600菌株中。11株肺炎克雷伯菌和9株大肠埃希菌MLST结果显示共有18种ST型别,提示克隆类型多样化,聚类分析显示同一病房菌株亲缘关系较近。结论该院尿路感染CRE菌株多为肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,对碳青霉烯类药物的耐药机制主要是产NDM-5型碳青霉烯酶。blaNDM-5基因可通过质粒进行水平播散,应引起临床高度重视,密切监测CRE菌株防止耐药基因的进一步传播,以防医院内暴发流行。 展开更多
关键词 耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌 尿路感染 NDM-5 多位点序列分型 质粒接合
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丽水市碳青霉烯耐药弗劳地枸橼酸杆菌分子流行病学研究
2
作者 龚智明 黄飞武 +4 位作者 赵赟安 陈娇丽 赵芯米 徐建芬 黄建胜 《中华全科医学》 2025年第8期1377-1381,1424,共6页
目的 分析碳青霉烯耐药弗劳地枸橼酸杆菌(CRCF)的耐药机制和分子流行病学特征,为抗感染诊治提供实验室依据。方法 收集丽水市中心医院2016年1月—2022年12月分离的共17株CRCF菌株,采用微量肉汤稀释法检测MIC值,通过PCR法检测碳青霉烯酶... 目的 分析碳青霉烯耐药弗劳地枸橼酸杆菌(CRCF)的耐药机制和分子流行病学特征,为抗感染诊治提供实验室依据。方法 收集丽水市中心医院2016年1月—2022年12月分离的共17株CRCF菌株,采用微量肉汤稀释法检测MIC值,通过PCR法检测碳青霉烯酶基因(blaKPC-2、blaNDM-1、blaIMP-1、blaVIM-1、blaOXA-48)及遗传背景;利用接合转化实验分析质粒转移性和质粒类型;采用MLST法确定分型,结合Pubmed数据库菌株数据进行系统发育分析。结果 17株CRCF对复方新诺明的耐药率为100%(17/17),对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南的耐药率均为76.5%(13/17),对美罗培南的耐药率为82.4%(14/17),对亚胺培南的耐药率为64.7%(11/17),对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为94.1%(16/17),对LVX的耐药率为58.8%(10/17),对阿米卡星的耐药率为47.1%(8/17),对多粘菌素B的耐药率为11.8%(2/17),对替加环素的耐药率最低,仅为5.9%(1/17)。11株菌携带blaNDM-1,5株携带blaKPC-2,1株携带blaIMP-4。54.5%(6/11)的blaNDM-1位于IncX3质粒;blaKPC-2均位于IncFⅡ质粒。菌株分属于14种ST型,系统发育分析显示散发。结论 丽水市CRCF对碳青霉烯类抗生素高度耐药,主要携带blaNDM-1和blaKPC-2,呈现散发流行。 展开更多
关键词 碳青霉烯耐药弗劳地枸橼酸杆菌 耐药机制 耐药性 多位点序列分型 IncX3质粒
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表达SFTSV Gn基因的重组5型腺病毒的构建与鉴定
3
作者 张璇 王新宇 +4 位作者 刘宇婷 涂影叶 梁耀文 易昌华 殷国平 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第9期8-12,17,共6页
为了构建出表达新布尼亚病毒(SFTSV)Gn基因的重组5型腺病毒,试验根据GenBank上发表的SFTSV Gn基因序列(登录号为ADZ04482.1)设计合成引物,采用特异性PCR方法在Gn基因前添加了KOZAK序列和tPA信号肽序列;然后通过酶切、连接等方法构建重... 为了构建出表达新布尼亚病毒(SFTSV)Gn基因的重组5型腺病毒,试验根据GenBank上发表的SFTSV Gn基因序列(登录号为ADZ04482.1)设计合成引物,采用特异性PCR方法在Gn基因前添加了KOZAK序列和tPA信号肽序列;然后通过酶切、连接等方法构建重组穿梭质粒PGA-KOZAK-tPA-Gn,与腺病毒骨架质粒pAd5-ΔE1ΔE3-5E4在BJ5183感受态细胞中进行同源重组,得到重组腺病毒质粒rAd5-KOZAK-tPA-Gn,用PacⅠ酶酶切重组腺病毒质粒,并将线性化的质粒转染至HEK 293细胞中进行病毒包装、扩繁和纯化;采用PCR扩增、Western-blot等技术检测病毒基因的表达情况,并测定重组腺病毒效价。结果表明:通过PCR扩增获得了1 546 bp的KOZAK-tPA-Gn基因,并成功构建了重组穿梭质粒;SFTSV Gn基因在重组腺病毒传代过程中稳定存在;重组腺病毒在HEK 293细胞中表达出分子量约为61 ku的SFTSV Gn蛋白;测得重组腺病毒效价为1×10^(-7.63)/0.1 mL TCID_(50)。说明试验成功构建出表达SFTSV Gn基因的重组5型腺病毒。 展开更多
关键词 新布尼亚病毒 Gn基因 重组5型腺病毒 质粒构建 HEK 293细胞
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细菌耐药质粒的Ⅳ型分泌系统及质粒依赖性噬菌体研究进展 被引量:1
4
作者 刘自豪 李俊 +4 位作者 吉星 魏瑞成 王冉 赵延胜 何涛 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期155-164,共10页
细菌耐药性已被认为是21世纪人类健康面临的重要威胁之一。接合转移是耐药基因在细菌群落中(尤其是肠杆菌科细菌)水平转移的最重要途径。Ⅳ型分泌系统(T4SS)是一个大分子转运系统,由Ⅳ型偶联蛋白、内膜复合体、外膜复合体和接合性菌毛组... 细菌耐药性已被认为是21世纪人类健康面临的重要威胁之一。接合转移是耐药基因在细菌群落中(尤其是肠杆菌科细菌)水平转移的最重要途径。Ⅳ型分泌系统(T4SS)是一个大分子转运系统,由Ⅳ型偶联蛋白、内膜复合体、外膜复合体和接合性菌毛组成,T4SS在耐药质粒的接合转移中起关键作用。近年来以质粒编码的T4SS为靶标的细菌耐药性防控新策略不断兴起,就耐药质粒的T4SS分类、结构和分布以及靶向T4SS的质粒依赖性噬菌体(PDBs)进行综述,并提出基于PDBs的耐药性防控策略,以期为耐药性传播的防控提供新思路。 展开更多
关键词 细菌耐药性 质粒 接合转移 Ⅳ型分泌系统 噬菌体
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A preliminary study on the cloning and expression of human papiilomavirus type 18 E6 gene in Escherichia coli
5
作者 文维延 徐钤 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1991年第1期15-20,共6页
We have cloned the E6 gene of human papillomavirus type 18 into anexpression plasmid pBD2.One of the recombinant plasmids (named pDV11) wasidentified by DNA analysis and protein product analysis.It could express a new... We have cloned the E6 gene of human papillomavirus type 18 into anexpression plasmid pBD2.One of the recombinant plasmids (named pDV11) wasidentified by DNA analysis and protein product analysis.It could express a newprotein whose molecular weight correspods well with the expected one.Afterpurification,the expressed protein showed a positive result in countercurrentimmuno-electrophoresis with anti-β-gal serum and was proved to be the expectedβ-gal/E6 fusion protein.The physical map of pDV11 was also prepared. 展开更多
关键词 HUMAN PAPILLOMAVIRUS type 18 recombinant and EXPRESSION LAC promoter EXPRESSION plasmid fusion protein
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耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌复合群的耐药谱和分子流行病学特征 被引量:3
6
作者 陈娇丽 赵赟安 +4 位作者 赵芯米 任建敏 赵志钢 武蓉珍 黄建胜 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期2241-2247,共7页
目的分析碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌复合群(CRECL)的耐药谱和分子流行病学特征,指导临床抗感染治疗.方法收集丽水市中心医院2012-2022年分离的非重复CRECL菌株,采用VITEK MS全自动快速微生物质谱检测系统进行菌种鉴定,以微量肉汤稀释法... 目的分析碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌复合群(CRECL)的耐药谱和分子流行病学特征,指导临床抗感染治疗.方法收集丽水市中心医院2012-2022年分离的非重复CRECL菌株,采用VITEK MS全自动快速微生物质谱检测系统进行菌种鉴定,以微量肉汤稀释法检测最小抑菌浓度值(MIC),利用聚合酶链式反应(PCR)扩增bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(IMP)、bla_(VIM)、bla_(OXA-48)等碳青霉烯酶基因并测序确认.通过接合实验和复制起始子扩增检测分析耐药基因定位及质粒类型;采用多位点序列分析(MLST)确定各菌株ST型,并结合BV-BRC数据库来源的CRECL构建系统发育树和最小生成树,分析CRECL的分子流行病学特征.结果共收集非重复CRECL菌株22株,分布于14个临床科室,分属于16个ST型;22株菌对美罗培南、头孢他啶、头孢噻肟均100.00%耐药,对左氧氟沙星、氨曲南和多黏菌素的耐药率分别是81.81%、63.63%和31.81%,仅对替加环素100.00%敏感;经测序确认,17株CRECL菌株携带bla_(NDM)基因,占77.27%,且其中15株位于IncX3型质粒,2株位于IncFⅡ型质粒;根据系统发育树和最小生成树分析,CRECL呈散发分布,未发现优势克隆群.结论CRECL呈散发流行,医院分离菌株主要携带bla_(NDM)基因,IncX3型质粒是介导该基因转移的主要原因. 展开更多
关键词 多位点序列分析 微量肉汤稀释法 临床科室 替加环素 散发流行 阴沟肠杆菌 最小抑菌浓度 最小生成树
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临床分离喹诺酮耐药大肠埃希菌的耐药性及分型研究 被引量:1
7
作者 周妍妍 梁静雯 +2 位作者 杜小莉 马立艳 于礼 《中国消毒学杂志》 CAS 2024年第7期524-527,532,共5页
目的研究临床分离喹诺酮耐药大肠埃希菌表型特征及分子机制。方法通过药敏试验从临床分离大肠埃希菌中筛选喹诺酮耐药株,经多位点序列分型(MLST),采用PCR检测和测序分析喹诺酮耐药决定区(QRDR)、质粒介导的喹诺酮耐药基因(PMQR)。结果... 目的研究临床分离喹诺酮耐药大肠埃希菌表型特征及分子机制。方法通过药敏试验从临床分离大肠埃希菌中筛选喹诺酮耐药株,经多位点序列分型(MLST),采用PCR检测和测序分析喹诺酮耐药决定区(QRDR)、质粒介导的喹诺酮耐药基因(PMQR)。结果所收集53株大肠埃希菌对左氧氟沙星呈中介耐药或耐药,在21个MLST分型中以ST53、ST43为主。QRDR测序显示,与敏感菌株相比,以基因Gyr A的S83L和D87N、基因Par C的S80I突变为主,分别占94.33%、79.25%、79.25%,ST53和ST43均存在此3个点突变。32.08%菌株检出PMQR基因,包括aac(6)-Ib-cr、qnr B和qnr S,62.26%菌株检出消毒剂耐药基因qac E△1。结论喹诺酮耐药大肠埃希菌的耐药机制主要与QRDR区域点突变有关,同时也应对质粒介导的耐药基因水平传递加强监测。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 质粒介导的喹诺酮耐药 喹诺酮耐药决定区 多位点序列分型
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基于NCBI数据库的全球鼠伤寒沙门菌的流行和分布特点 被引量:2
8
作者 华苗苗 曹小利 沈瀚 《临床检验杂志》 CAS 2024年第8期607-613,共7页
目的分析全球鼠伤寒沙门菌的流行和分子特点。方法从NCBI数据库批量下载全球沙门菌基因组和相应血清型及meta信息。使用在线软件ResFinder、PlasmidFinder、Mobile Element Finder和MLST分析抗生素耐药基因(ARGs)、质粒、移动遗传元件(M... 目的分析全球鼠伤寒沙门菌的流行和分子特点。方法从NCBI数据库批量下载全球沙门菌基因组和相应血清型及meta信息。使用在线软件ResFinder、PlasmidFinder、Mobile Element Finder和MLST分析抗生素耐药基因(ARGs)、质粒、移动遗传元件(MGEs)在鼠伤寒沙门菌中的分布及其序列分型(STs)。结果323株鼠伤寒沙门菌中共检出101种ARGs,其中最常见的是aac(6′)-Iaa(322/323,99.69%),其次为sul2(155/323,47.99%)、aph(3″)-Ib(128/323,39.63%)、aph(6)-Id(127/323,39.32%)、tet(B)(109/323,33.75%)和blaTEM-1B(106/323,32.82%)。共检出36种质粒,以IncFⅡ(S)(110/323,34.06%)和IncFⅠB(S)(108/323,33.44%)最为常见。另外,鉴定到376个MGEs,包括367种插入序列和9种转座子,以MITEEc1(322/323,99.69%)和ISSen1(308/323,95.36%)最为流行。323株鼠伤寒沙门菌鉴定到32种不同的STs,其中,ST19(157/323,48.61%)和ST34(105/323,32.51%)是最为常见的2种STs,占82%以上。人类来源的115株细菌中鉴定出18种STs,也是以ST19(52/115,45.22%)和ST34(39/115,33.91%)最为常见。结论鼠伤寒沙门菌携带有多种类型的ARGs,并伴有大量插入序列和质粒的流行为耐药的流行播散提供了有利条件,针对该菌应加强感染防控措施。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 耐药基因 质粒 移动遗传元件 序列分型
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多黏菌素B和米诺环素对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性检验研究
9
作者 董颜颜 《中国医药指南》 2024年第15期63-65,共3页
目的 探究多黏菌素B和米诺环素对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性。方法 择取2021年1月至2023年1月本院80例鲍曼不动杆菌感染患者深入分析,均采用多黏菌素B、米诺环素检验鲍曼不动杆菌,分析体外抗菌活性。结果 鲍曼不动杆菌产酶类型有产金... 目的 探究多黏菌素B和米诺环素对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性。方法 择取2021年1月至2023年1月本院80例鲍曼不动杆菌感染患者深入分析,均采用多黏菌素B、米诺环素检验鲍曼不动杆菌,分析体外抗菌活性。结果 鲍曼不动杆菌产酶类型有产金属β内酰胺酶(MBLs)、质粒型AmpC酶、诱导型AmpC酶。鲍曼不动杆菌产MBLs阳性例数为75例,阳性率为93.75%;产质粒型AmpC酶阳性例数为35例,阳性率为43.75%;产诱导型AmpC酶阳性例数为30例,阳性率为37.50%。多黏菌素B产MBLs型、产质粒型AmpC型、产诱导型AmpC酶鲍曼不动杆菌最低抑菌浓度(MIC)范围、MIC50、MIC90低于米诺环素,抑菌率较米诺环素高(P<0.05)。结论 在对鲍曼不动杆菌检测时,多黏菌素B与米诺环素相比,米诺环素活性更强。 展开更多
关键词 多黏菌素B 米诺环素 鲍曼不动杆菌 抗菌活性 产质粒型AmpC酶
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四株革兰氏阴性细菌的红绿色荧光蛋白标记及其生物学特性研究
10
作者 吴启叶 卢丽娜 +5 位作者 刘迎龙 平媛 何鹏搏 何月秋 吴毅歆 何鹏飞 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2024年第12期239-247,共9页
【目的】构建广谱复制型荧光蛋白质粒,并对革兰氏阴性细菌标记以评价荧光蛋白质粒适用性。【方法】将gfp、mCherry和组成型启动子PpsbA克隆到质粒pBBR1MCS2'以构建表达载体pBBR1MCS2'-PpsbAGFP和pBBR1MCS2'-PpsbAmCherry,... 【目的】构建广谱复制型荧光蛋白质粒,并对革兰氏阴性细菌标记以评价荧光蛋白质粒适用性。【方法】将gfp、mCherry和组成型启动子PpsbA克隆到质粒pBBR1MCS2'以构建表达载体pBBR1MCS2'-PpsbAGFP和pBBR1MCS2'-PpsbAmCherry,通过接合转移将上述载体分别导入茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)EP1、胡萝卜果胶杆菌(Pectobactererium carotovorum subsp.carotovorum)WB、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella Pneumoniae)JF和洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)1-2中,观察菌落及细胞荧光表现,检测其生长曲线和质粒保持率,并验证相关功能。【结果】荧光蛋白表达载体pBBR1MCS2'-PpsbAGFP和pBBR1MCS2'-PpsbAmCherry被成功构建,并成功地利用绿色和红色荧光蛋白标记了上述4株革兰氏阴性细菌。荧光蛋白标记菌的菌落及细胞个体均有对应的荧光发出,生长速率与野生型菌株一致。然而,荧光蛋白质粒在此4株细菌中的稳定性存在较大差异:绿色和红色荧光蛋白质粒在JF菌株中的稳定性最高,无选择压力继代培养40 h后的质粒持有率分别达90.33%和94.67%,在WB和EP1菌株中次之,在1-2菌株中的稳定性均最差,分别在培养5 h和25 h后就检测不到荧光。此外,荧光标记的1-2菌株溶磷活性和WB致病性与各自野生型菌株无显著差异。【结论】成功构建2种荧光蛋白表达载体,并对R.solanacearum EP1等4株不同革兰氏阴性细菌的荧光蛋白标记。其在质粒保持率中,绿色和红色荧光蛋白在1-2菌株中稳定性较差,在其余3株菌株中均能稳定表达,为后续为革兰氏阴性细菌的标记及其相关功能研究提供重要的研究材料。 展开更多
关键词 革兰氏阴性细菌 荧光蛋白标记 广谱复制型 接合转移 质粒保持率
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铜绿假单胞菌质粒型AmpC酶DHA基因的发现 被引量:21
11
作者 李智山 邓三季 +1 位作者 杨燕 赵建忠 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期253-255,共3页
目的测定35株同时耐头孢他啶、头孢噻肟、头孢西丁、氨曲南铜绿假单胞菌质粒型AmpC酶DHA。 方法 用PCR法对铜绿假单胞菌质粒型AmpC酶DHA基因进行检测,并对阳性产物作PCR产物直接DNA测 序。结果35株铜绿假单胞菌DHA基因扩增结果2株呈阳性... 目的测定35株同时耐头孢他啶、头孢噻肟、头孢西丁、氨曲南铜绿假单胞菌质粒型AmpC酶DHA。 方法 用PCR法对铜绿假单胞菌质粒型AmpC酶DHA基因进行检测,并对阳性产物作PCR产物直接DNA测 序。结果35株铜绿假单胞菌DHA基因扩增结果2株呈阳性,其中1株测得序列为DHA-Ⅰ型。结论表明我 国同时耐头孢他啶、头孢噻肟、头孢西丁、氨曲南铜绿假单胞菌也已获得DHA基因,AmpC酶DHA基因可通过 转化、接合等方式转移给其他同种或不同种菌且易于传播,因此加强监控以防DHA基因在国内某些地区的革兰 阴性菌中流行。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 质粒型 AmpC酶DHA基因 发现
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衣原体致病机制研究进展 被引量:15
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作者 李鹏 张琪 +1 位作者 苗晋华 宋立华 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1193-1196,共4页
衣原体是一种专性胞内寄生的病原微生物,种间组织嗜性有差异,有些还是人兽共患病病原菌;其感染部位广泛、途径多,临床以沙眼、肺炎和泌尿生殖道感染多见;鹦鹉热衣原体还曾作为经典的生物战剂;衣原体由于胞内寄生,致病机制复杂,本文从三... 衣原体是一种专性胞内寄生的病原微生物,种间组织嗜性有差异,有些还是人兽共患病病原菌;其感染部位广泛、途径多,临床以沙眼、肺炎和泌尿生殖道感染多见;鹦鹉热衣原体还曾作为经典的生物战剂;衣原体由于胞内寄生,致病机制复杂,本文从三型分泌系统、衣原体质粒、脂多糖、新发现毒力因子CT135和CPAF蛋白这五个方面简要综述了衣原体的致病机制,提出以鹦鹉热衣原体为模型研究衣原体属致病机制的优越性,为进一步深入分析衣原体的致病机制提供参考。 展开更多
关键词 衣原体 致病机制 质粒 三型分泌系统 CT135基因
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RegⅢ/胰岛素原双基因质粒的构建及其对1型糖尿病小鼠的治疗作用 被引量:3
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作者 侯文睿 谢胜男 +3 位作者 鲁憬莉 奚炜 骆祥 向明 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期987-994,共8页
构建含小鼠RegⅢ和胰岛素原基因的双基因质粒,观察其对1型糖尿病小鼠的治疗作用,并初步探讨其作用机制。采用连续小剂量STZ腹腔注射的方法建立1型糖尿病小鼠模型,肌内注射给予RegⅢ/胰岛素原双基因质粒,治疗4周,每周给药1次,动态监测小... 构建含小鼠RegⅢ和胰岛素原基因的双基因质粒,观察其对1型糖尿病小鼠的治疗作用,并初步探讨其作用机制。采用连续小剂量STZ腹腔注射的方法建立1型糖尿病小鼠模型,肌内注射给予RegⅢ/胰岛素原双基因质粒,治疗4周,每周给药1次,动态监测小鼠血糖的变化;并通过Western blotting、ELISA、MTT、HE病理组织学分析及Tunel检测等方法研究其作用机制。结果表明,双基因质粒可显著改善1型糖尿病小鼠的高血糖症状(P<0.01),抑制脾淋巴细胞增殖,恢复1型糖尿病小鼠体内Th1/Th2反应的平衡和胰岛素的正常分泌;HE及Tunel分析表明,双基因质粒可减少胰岛炎性细胞浸润和胰岛细胞的凋亡。提示RegⅢ/胰岛素原双基因质粒对1型糖尿病具有明显的治疗作用,其作用机制与诱导免疫耐受和促进β细胞再生有关。 展开更多
关键词 RegⅢ/胰岛素原双基因质粒 1型糖尿病 免疫耐受 β细胞再生
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产ESBLs鲍曼不动杆菌的耐药特性、质粒谱及耐药基因型 被引量:25
14
作者 李蓉 李文林 +5 位作者 石小玉 梁朝 赵林 廖晚珍 徐小文 崔伟光 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期202-205,共4页
目的了解并研究产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌的流行、耐药特点及质粒图谱,对产ESBLs菌株进行基因分型。方法先后用nitrocefin纸棒、最低抑菌浓度(M IC)初筛法和纸片扩散确认法从临床分离的鲍曼不动杆菌中检测产ESBLs菌株,用... 目的了解并研究产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌的流行、耐药特点及质粒图谱,对产ESBLs菌株进行基因分型。方法先后用nitrocefin纸棒、最低抑菌浓度(M IC)初筛法和纸片扩散确认法从临床分离的鲍曼不动杆菌中检测产ESBLs菌株,用凝胶电泳分析其质粒图谱,并用聚合酶链反应(PCR)对产ESBLs基因进行分型。结果93株鲍曼不动杆菌中,对β-内酰胺酶类抗菌药物耐药47株(79.66%),中度敏感12株(20.34%);产ESBLs菌株有16株,占17.20%。产ESBLs鲍曼不动杆菌对头孢曲松、头孢他啶、头孢唑肟、头孢吡肟、氨曲南、庆大霉素、妥布霉素、磺胺甲唑、环丙沙星和阿米卡星的耐药率均显著高于非产ESBLs菌株(P<0.05)。保留的15株产ESBLs菌具有4种质粒谱,主要为Ⅰ型和Ⅲ型;它们均携带1~2种TEM型或SH V型或PER型β-内酰胺酶基因,且80%携带OXA-23型碳青霉烯酶基因。结论产ESBLs鲍曼不动杆菌常为多重耐药菌,耐药率与产ESBLs密切相关;同一克隆株在同一病房有流行趋势;本院流行株均携带2~3种耐药基因型,主要为TEM型、PER型β-内酰胺酶基因和OXA-23型碳青霉烯酶基因。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs) 耐药性 质粒图谱 基因分型
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不同源鼠伤寒沙门氏菌耐药性质粒不相容性分群的初步研究 被引量:2
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作者 李静怡 崔可琦 +3 位作者 冯赛祥 贺现辉 廖明 徐成刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期54-58,共5页
试验利用PCR方法检测101株不同源鼠伤寒沙门氏菌携带质粒的不相容群,共设计18对引物,PCR分为5个三重PCR和3个单一PCR,用来检测识别FIA、FIB、FIC、HI1、HI2、I1、L/M、N、P、W、T、A/C、K、B/O、X、Y、F和FII复制子。101株不同源鼠伤寒... 试验利用PCR方法检测101株不同源鼠伤寒沙门氏菌携带质粒的不相容群,共设计18对引物,PCR分为5个三重PCR和3个单一PCR,用来检测识别FIA、FIB、FIC、HI1、HI2、I1、L/M、N、P、W、T、A/C、K、B/O、X、Y、F和FII复制子。101株不同源鼠伤寒沙门氏菌中94株(93.1%)携带质粒不相容群,共携带10种质粒不相容群,分别是Inc HI1、Inc HI2、Inc I1、Inc FIA、Inc FIB、Inc N、Inc Y、Inc P、Inc FIIA和Inc FrepB,其中76.6%的菌株携带2个或2个以上质粒不相容群。结合药物敏感性试验结果,追踪鼠伤寒沙门氏菌耐药传播机制。本研究调查了耐药性质粒在鼠伤寒沙门氏菌的水平传播特性,不同环境中大量的菌株介导特定多重耐药性质粒的扩散,对调查跟踪质粒赋予耐药的流行病学有重要意义。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门氏菌 质粒分型 质粒不相容群
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小鼠内皮抑素基因克隆、测序及pEgr-IFNγ-mEndostatin重组双基因表达质粒的构建 被引量:6
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作者 杨巍 刘林林 +5 位作者 孙婷 李秀娟 田梅 朴春姬 潘艳 李修义 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期17-19,共3页
目的 :克隆小鼠内皮抑素 (m Endostatin)编码区 c DNA序列并构建含 Egr- 1启动子的 IFNγ和 m Endo-statin双基因表达载体。方法 :利用逆转录多聚酶链反应法 (RT- PCR) ,以小鼠肝细胞 m RNA为模板 ,扩增获得全长 m Endostatin,与 p MD1... 目的 :克隆小鼠内皮抑素 (m Endostatin)编码区 c DNA序列并构建含 Egr- 1启动子的 IFNγ和 m Endo-statin双基因表达载体。方法 :利用逆转录多聚酶链反应法 (RT- PCR) ,以小鼠肝细胞 m RNA为模板 ,扩增获得全长 m Endostatin,与 p MD1 8T载体连接作全自动测序 ,并利用基因重组技术构建含 Egr- 1启动子的 IFNγ和m Endostatin双基因表达质粒。结果 :经测序证实获得的 m Endostatin序列与文献报道完全一致 ,并构建了含 Egr-1启动子的 IFNγ和 m Endostatin双基因表达质粒 p Egr- IFNγ- m Endostatin。结论 :利用 RT- PCR法成功克隆了m Endostatin的 c DNA序列 ,构建了 p Egr- IFNγ- m Endostatin重组双基因表达质粒。 展开更多
关键词 内皮抑素 质粒/遗传学 干扰素Ⅱ型 EGR-1 pEgr—IFNγ-mEndostatin
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鸡源大肠杆菌河北分离株耐药性与质粒不相容群分析 被引量:3
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作者 李玉荣 陈立功 +2 位作者 胡凡 武现军 霍书英 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期103-107,共5页
为了了解鸡源大肠杆菌河北分离株的耐药情况及流行现状,本研究对其进行耐药性监测,并通过PCR方法测定其质粒不相容群。结果表明,39株大肠杆菌,对喹诺酮类药物耐药严重,其中氧氟沙星(Oxfendanzole,Ofl)最高,为76.9%,加替沙星(Gatifloxaci... 为了了解鸡源大肠杆菌河北分离株的耐药情况及流行现状,本研究对其进行耐药性监测,并通过PCR方法测定其质粒不相容群。结果表明,39株大肠杆菌,对喹诺酮类药物耐药严重,其中氧氟沙星(Oxfendanzole,Ofl)最高,为76.9%,加替沙星(Gatifloxacin,Gat)最低,为64.1%;对氨基糖苷类的耐药情况差别较大,其中卡那霉素(Kanamycin,Kan)为100%,而壮观霉素(Spectinomycin,Spe)最低,为30.8%。质粒不相容群分析表明,IncB/O、IncK、IncFIB、IncFrepB、IncI1、IncA/C、IncFIC、IncP、IncN、IncFIA、IncT、IncL/M为阳性,其中前三者的阳性率最高,依次为41.0%,38.5%和25.6%;未检测到IncW、IncY、IncHI1、IncHI2、IncX、IncFIIs的存在,且多重比较显示,保定不同地区的禽源E.coli质粒类型无显著性差异(P>0.05)。 展开更多
关键词 大肠杆菌 耐药性 质粒不相容群
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粪肠球菌内源性质粒的序列分析及其穿梭载体的构建 被引量:2
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作者 袁林 曾静 +1 位作者 郭建军 魏国汶 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第23期141-149,共9页
为了对粪肠球菌EXW27的内源性质粒pXW进行DNA序列的测定和分析,并基于其最小复制子构建大肠杆菌-粪肠球菌穿梭载体。本研究从具有优良益生特性的粪肠球菌EXW27中分离得到了内源性质粒pXW,对其进行了DNA序列的测定及分析,然后利用质粒pX... 为了对粪肠球菌EXW27的内源性质粒pXW进行DNA序列的测定和分析,并基于其最小复制子构建大肠杆菌-粪肠球菌穿梭载体。本研究从具有优良益生特性的粪肠球菌EXW27中分离得到了内源性质粒pXW,对其进行了DNA序列的测定及分析,然后利用质粒pXW的复制子构建大肠杆菌-乳酸菌穿梭载体,并研究大肠杆菌-乳酸菌穿梭载体的宿主范围、转化效率和稳定性。结果表明该质粒大小为8617 bp,GC含量为33.29%,包含8个ORF,推定为θ型复制质粒。质粒pXW在粪肠球菌EXW27中拷贝数最高可达32.09±0.93,表明质粒pXW属于高拷贝数质粒。本研究确定了质粒pXW的最小复制子,并基于该复制子构建了大肠杆菌-粪肠球菌穿梭载体pXWM1。该穿梭载体具有较宽的宿主范围,可成功转化至不同类型乳酸菌,转化效率介于1.96×10^(2)~8.96×10^(4) CFU/μg (质粒DNA)之间,质粒丢失率介于28.54%~54.17%之间。本研究成功构建了一个具有宽宿主范围、高转化效率以及高稳定性的大肠杆菌-粪肠球菌穿梭载体,为乳酸菌基因操作提供了新工具。 展开更多
关键词 粪肠球菌 内源性质粒 θ型复制 穿梭载体 大肠杆菌
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耐碳青霉烯鼠伤寒沙门菌的药敏及分子特征分析 被引量:2
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作者 王燕 王云英 +3 位作者 蒋敏 张雨虹 任艳丽 孙滨 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期813-819,共7页
目的分析鼠伤寒沙门菌的耐药情况及分子特征,为临床治疗和感染防控提供依据。方法对我院分离的鼠伤寒沙门菌CYEY-S001,采用VITEK2-Compact全自动微生物分析系统和K-B纸片法对药敏结果进行检测。通过全基因组测序分析其基因和分子特征,... 目的分析鼠伤寒沙门菌的耐药情况及分子特征,为临床治疗和感染防控提供依据。方法对我院分离的鼠伤寒沙门菌CYEY-S001,采用VITEK2-Compact全自动微生物分析系统和K-B纸片法对药敏结果进行检测。通过全基因组测序分析其基因和分子特征,并进行质粒接合试验,研究质粒的可转移性。利用碳青霉烯酶表型试验检测其实所含的碳青霉烯酶类型,PCR确认其携带的耐药基因,质粒复制子分型确定质粒类型。结果该鼠伤寒沙门菌CYEY-S001对除氨曲南之外的青霉素类、头孢菌素类和碳青霉烯类抗生素全部耐药,全基因组测序分析表明其为ST34型鼠伤寒沙门菌,含有bla_(NDM-5)、aac(6’)-Iaa、floR、cmlA1、sul3和tet(A)等多种耐药基因。携带的质粒类型为IncHI2,bla_(NDM-5)位于该质粒上,可通过水平转移,结合子获得了与鼠伤寒沙门菌完全一致的耐药结果。3种碳青霉烯酶表型试验均正确识别出了其携带碳青霉烯酶的类型为金属β-内酰胺酶。结论碳青霉烯耐药鼠伤寒沙门菌对感染治疗和预防控制带来了新的挑战。新发现的IncHI2-bla_(NDM-5)质粒存在向其他细菌物种横向传播的风险。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 碳青霉烯耐药 表型检测 质粒复制子分型 IncHI2-bla_(NDM-5)
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江西省部分地区鸡白痢沙门氏菌噬菌体分型、药敏性及质粒谱分析 被引量:6
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作者 谌南辉 郭敏虹 +5 位作者 黄庚明 何晓青 刘小玲 潘若男 魏旭兰 罗明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期457-463,共7页
33株鸡白痢沙门氏菌大致分为3个噬菌体型,即20株为2200型、6株为3000型、7株为0000型。依其来源,有的鸡场可能为单一型,有的为多种型。2200型11株存在7条质粒带,小质粒带分子量分别为1.9、2.0、2... 33株鸡白痢沙门氏菌大致分为3个噬菌体型,即20株为2200型、6株为3000型、7株为0000型。依其来源,有的鸡场可能为单一型,有的为多种型。2200型11株存在7条质粒带,小质粒带分子量分别为1.9、2.0、2.8、5.2、8.2Md;大质粒带,HG源株为30、50Md,Gq与JZ源株为36、44Md。3000型4株存在4条质粒带,小质粒带分子量分别为1.9、2.0、2.8Md;大质粒带,JS源株为44Md、HG源株为50Md。0000型Gq源1株存在5条质粒带,分子量分别为1.9、2.0、2.8、8.2、44Md,JX源4株存在6条质粒带,分子量分别为1.9、2.0、2.8、3.0、36(34)、40(50)Md。所测定的20株菌一致对AM、AKN、FUR、POL、ROC、GEN6种敏感,对AC、STR、BAC、NOV、ERY、MID6种耐药。菌株的药敏谱与其对应的噬菌体型、质粒谱间有着较高的相关性,特别是2200型。 展开更多
关键词 鸡病 鸡白痢 沙门氏菌 噬菌体分形 质粒谱分析
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