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二倍体野生种马铃薯Solanum pinnatisectmum原生质体分离纯化与培养的研究 被引量：2
1
作者 孙海宏 周云 +1 位作者 贺苗苗 王舰 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期140-146,共7页
为获得较好的原生质体分离和原生质体纯度,试验以野生种马铃薯(S.pinnatisectmum)试管苗叶片为材料,进行了原生质体分离和纯化的研究。结果表明:培养3周左右的试管苗叶片均在含有0.4%纤维素酶+0.7%果胶酶+0.1%离析酶,渗透压为0.3 mol/L... 为获得较好的原生质体分离和原生质体纯度,试验以野生种马铃薯(S.pinnatisectmum)试管苗叶片为材料,进行了原生质体分离和纯化的研究。结果表明:培养3周左右的试管苗叶片均在含有0.4%纤维素酶+0.7%果胶酶+0.1%离析酶,渗透压为0.3 mol/L的酶解液中解离效果最好,原生质体产量为1.93×106/g FW;在(25±1)℃酶解温度条件下静置14 h,可促进叶片原生质体的大量释放。而且,外源激素组合0.5 mg/L IAA+2.5 mg/L Zeatin有利于S.pinnatisectmum叶片原生质体的分裂,原生质体一次分裂频率达到6.32%。研究获得了稳定的原生质体分离体系以及较好的原生质体培养条件,为马铃薯野生种Solanum pinnatisectmum的体细胞融合提供了依据。 展开更多
关键词 马铃薯野生种Solanum pinnatisectmum 原生质体 分离和纯化
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马铃薯野生种Solanum pinnatisectmumgn与栽培种下寨65原生质体融合与培养研究 被引量：2
2
作者 孙海宏 王芳 +1 位作者 叶广继 王舰 《江苏农业科学》 2018年第18期21-23,共3页
为获得较佳的原生质体融合培养体系,以野生种马铃薯Solanumpinnatisectmum和栽培种下寨65试管苗叶片为材料,进行原生质体分离纯化与融合培养研究,对2个融合亲本的无菌苗叶片进行原生质体化学融合和电融合。结果表明,采用电融合方式,融... 为获得较佳的原生质体融合培养体系,以野生种马铃薯Solanumpinnatisectmum和栽培种下寨65试管苗叶片为材料,进行原生质体分离纯化与融合培养研究,对2个融合亲本的无菌苗叶片进行原生质体化学融合和电融合。结果表明,采用电融合方式,融合参数为交变电压80 V/cm,成串时间10 s,直流脉冲1 000 V/cm,作用时间60μs,脉冲l次,原生质融合效率最高,达到45. 72%。融合细胞在液体浅层培养中形成0. 1 mm的愈伤组织后,转入到增殖培养基(0. 4 mg/L 6-BA+1 mg/L IAA)中培养80 d以上,愈伤组织变为鲜绿色时,移入诱导分化培养基(0. 5 mg/L IAA+2. 5 mg/L Zeatin)中,愈伤组织在分化培养基上生长约60 d时,开始分化形成小芽,分化频率平均达16. 7%,显著好于其他分化处理。 展开更多
关键词 马铃薯野生种Solanum pinnatisectmum 栽培种下寨65 原生质体融合 培养
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