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过表达AtHPT和AtTC对小麦籽粒生育酚含量和产量性状的影响 被引量:1
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作者 王丹 郭雅洁 +4 位作者 刘梦甜 韩雪莹 李慧芳 姬祥 刘会云 《麦类作物学报》 北大核心 2025年第6期727-734,共8页
小麦作为主要的粮食作物之一,是人类膳食营养的主要来源,通过生物育种手段可以提高小麦籽粒中维生素E特别是α-生育酚的含量。本研究利用农杆菌介导的遗传转化方法将拟南芥AtHPT和AtTC基因分别转入六倍体小麦Fielder中,通过qRT-PCR选择A... 小麦作为主要的粮食作物之一,是人类膳食营养的主要来源,通过生物育种手段可以提高小麦籽粒中维生素E特别是α-生育酚的含量。本研究利用农杆菌介导的遗传转化方法将拟南芥AtHPT和AtTC基因分别转入六倍体小麦Fielder中,通过qRT-PCR选择AtHPT和AtTC基因在籽粒中表达量较高的转基因株系,对其生育酚含量进行HPLC检测,并对其株高、粒长、粒宽、千粒重、小穗数和穗粒数进行考种分析。结果发现,过表达AtTC的转基因小麦株系的籽粒中未检测到β-生育酚,δ-生育酚含量与小麦Fielder相比无明显差异,α-生育酚的含量显著提高;转基因株系后代的穗长、小穗数和穗粒数均显著增加。过表达AtHPT的转基因小麦株系的籽粒中未检测到α-生育酚,β-和δ-生育酚含量与小麦Fielder相比均无明显差异。转基因株系均未检测出γ-生育酚。以上结果表明,过表达AtTC可以显著提高小麦籽粒中α-生育酚的含量,并对产量性状无负面影响。 展开更多
关键词 小麦 拟南芥 生育酚环化酶 尿黑酸植基转移酶 维生素E
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大豆2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶基因(Gm VTE3)的克隆及对转基因烟草种子中生育酚组成的影响 被引量:6
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作者 徐妙云 周建 +2 位作者 张兰 范云六 王磊 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1994-1999,共6页
【目的】克隆大豆2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶基因(GmVTE3),研究其在烟草中过量表达对转基因烟草种子中生育酚(维生素E)组分的影响。【方法】利用EST拼接和RT-PCR技术,从大豆中分离了大豆2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶(VTE3)... 【目的】克隆大豆2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶基因(GmVTE3),研究其在烟草中过量表达对转基因烟草种子中生育酚(维生素E)组分的影响。【方法】利用EST拼接和RT-PCR技术,从大豆中分离了大豆2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶(VTE3)的全长cDNA序列,通过烟草转化研究过量表达VTE3对转基因植株维生素E组分的影响。【结果】GmVTE3全长1026bp,编码342个氨基酸,与其它物种的VTE3氨基酸同源性很高,在烟草中过量表达该基因使烟草种子中γ-生育酚与δ-生育酚的比值最高增加2倍。【结论】首次克隆了大豆2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶基因GmVTE3,它能够催化烟草植株中2-甲基-6-植基-1,4-苯醌(MPBQ)的甲基化,从而改变烟草种子中生育酚的组成成分。说明可以利用克隆的GmVTE3来改变植物种子中生育酚的组成和提高α-生育酚的含量。 展开更多
关键词 大豆 2-甲基-6-植基-1 4-苯醌甲基转移酶(VTE3) 生育酚 转基因烟草
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维生素K_1合成的改进 被引量:4
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作者 冀亚飞 张雁秋 石俊英 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期98-100,共3页
The Ruettimnann’ s method[5] for vitamin K1 synthesis has been improved by usingphase transfer catalyst in Diels-Alder condensation and using mixed trans-cis phytyl chlorideinstead of natural phytol as starting mater... The Ruettimnann’ s method[5] for vitamin K1 synthesis has been improved by usingphase transfer catalyst in Diels-Alder condensation and using mixed trans-cis phytyl chlorideinstead of natural phytol as starting material in the synthesis. The vitamin K1 then obtainedby a retro-Diels-Alder reaction has a cis-trans isomer ratio of 20. 35 to 79. 65 which meets theChinese pharmacopia standard. Phytyl bromide in this case gave vitamin K1 with cis-trans ratio of 26. 30 to 73. 70. 展开更多
关键词 维生素K1 合成 植基氯 植基溴 改进
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拟南芥2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶启动子的分离及表达特性分析 被引量:4
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作者 刘宾 王磊 +2 位作者 杨娇艳 张伟 范云六 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期33-39,共7页
维生素E是一类人体必需的脂溶性抗氧化剂,具有重要的生理功能。2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQMT)是天然维生素E合成途径中的关键酶之一,催化MPBQ甲基化,生成DMPBQ。从拟南芥分离了MPBQ MT基因1018bp的启动子序列,构建了含该... 维生素E是一类人体必需的脂溶性抗氧化剂,具有重要的生理功能。2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQMT)是天然维生素E合成途径中的关键酶之一,催化MPBQ甲基化,生成DMPBQ。从拟南芥分离了MPBQ MT基因1018bp的启动子序列,构建了含该启动子和GUS报告基因的植物表达载体,通过农杆菌介导转化拟南芥,获得了转基因植株。GUS组织化学染色结果表明,在MPBQ MT启动子驱动下,报告基因GUS在拟南芥的茎、叶、花萼、雄蕊、种荚均有表达,且在茎、叶、种荚中表达量较高,而在根、花瓣和种子中则没有观察到GUS基因的表达,表明MPBQ MT基因可能仅在拟南芥幼嫩茎、叶、种荚等绿色组织中特异性高表达。 展开更多
关键词 拟南芥 维生素E 生育酚 2-甲基-6-叶绿基-1 4-苯醌甲基转移酶(MPBQ MT) 启动子
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拟南芥2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶启动子在转基因烟草中的表达特性分析 被引量:3
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作者 刘宾 王磊 张伟 《中国农学通报》 CSCD 2007年第4期33-37,共5页
通过对报告基因GUS产物的分析进行了拟南芥2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQMT)启动子在转基因烟草中的表达特性的初步研究。构建含该启动子和GUS报告基因的植物表达载体,通过农杆菌介导转化烟草,对转基因烟草进行GUS组织化学... 通过对报告基因GUS产物的分析进行了拟南芥2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQMT)启动子在转基因烟草中的表达特性的初步研究。构建含该启动子和GUS报告基因的植物表达载体,通过农杆菌介导转化烟草,对转基因烟草进行GUS组织化学染色和GUS荧光定量分析该启动子表达特性。GUS在转基因烟草的根和种子中基本不表达,茎上有一定表达,叶上表达量最高,约是茎的4.7~10.9倍。结果表明MPBQMT基因启动子主要在烟草绿色组织中特异性高表达。 展开更多
关键词 烟草 维生素E 2-甲基-6-叶绿基-1 4-苯醌甲基转移酶(MPBQ MT) 启动子 GUS组织化学 染色
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红花2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶基因的克隆及表达分析 被引量:4
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作者 代斯宁 王文玲 +6 位作者 韩怡来 齐冬梅 顾天瑶 崔琪 官丽莉 李海燕 李校堃 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期2774-2780,共7页
目的克隆红花维生素E合成相关关键酶2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQ MT)基因,并进行生物信息学及表达分析,为红花维生素E生物合成及调控机制研究奠定基础。方法根据红花种子转录组数据库中得到的中间序列,采用RT-PCR和RACE方... 目的克隆红花维生素E合成相关关键酶2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQ MT)基因,并进行生物信息学及表达分析,为红花维生素E生物合成及调控机制研究奠定基础。方法根据红花种子转录组数据库中得到的中间序列,采用RT-PCR和RACE方法从红花种子中克隆MPBQ MT基因序列,通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,构建MPBQ MT与相关物种MPBQ MT的系统进化树,利用RT-PCR方法分析在红花种子不同发育时期MPBQ MT基因的表达量。结果MPBQ MT基因全长1 392 bp,命名为Ct MPBQ MT,具有完整的开放阅读框(ORF),共1 038 bp,编码345个氨基酸。生物信息学分析显示,该基因编码的蛋白理论相对分子质量约为38 900。保守结构域预测表明,该基因编码的蛋白具有典型的SAM蛋白功能结构域。结合其他物种的MPBQ MT基因构建系统树表明,红花MPBQ MT基因与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其中与向日葵和生菜同源性高达89%和86%。实时荧光定量PCR分析表明,MPBQ MT基因在红花开花后50 d的种子中表达量最高。结论成功地对MPBQ MT基因进行克隆及表达分析,为红花维生素E合成及调控机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 2-甲基-6-叶绿基-1 4-苯醌甲基转移酶:RACE 实时荧光定量PCR 红花 维生素E
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大狼把草的化学成分研究 被引量:9
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作者 乐佳美 吴志军 熊筱娟 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期1802-1806,共5页
目的研究大狼把草(Bidens frondosa L.)全草的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、低压ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、反相HPLC等方法对大狼把草的乙醇提取物进行分离纯化,通过理化鉴定和波谱分析鉴定其化学结构。结果从大狼把草... 目的研究大狼把草(Bidens frondosa L.)全草的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、低压ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、反相HPLC等方法对大狼把草的乙醇提取物进行分离纯化,通过理化鉴定和波谱分析鉴定其化学结构。结果从大狼把草的乙醇提取物中分离得到23个化合物,分别鉴定为己酸植基酯(1)、亚麻酸乙酯(2)、棕榈酸植醇酯(3)、三亚油精(4)、亚油酸(5)、5-十二烷基-2,2'-联噻吩(6)、大根香叶烯B(7)、莪术酮(8)、epoxycyperene(9)、反,反-吉马酮(10)、艾菊萜(11)、荚蒾宁F(12)、角鲨烯(13)、2'-羟基-4,4'-二甲基-查耳酮(14)、3,2',4'-三羟基-4-甲氧基-査耳酮(15)、2',4',3,4,α-五羟査耳酮(16)、紫铆查耳酮(17)、木犀草素(18)、山柰酚(19)、大风子素(20)、异奥卡宁(21)、紫铆素(22)和硫黄菊素(23)。结论除化合物17、18和23外,化合物1-16、19-22为首次从该植物中分到。 展开更多
关键词 大狼把草 查耳酮 己酸植基酯 大根香叶烯B 大风子素 硫黄菊素
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花生2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶基因VTE3的克隆及多态性分析 被引量:4
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作者 郭安强 万勇善 刘风珍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1685-1695,共11页
【目的】分离花生2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQ MT)基因VTE3,揭示其分子生物学特征及遗传多态性。【方法】利用EST拼接、RT-PCR以及以DNA为模板的PCR扩增技术,从花生属栽培种中分离VTE3全长cDNA;从不同类型栽培品种和花生属... 【目的】分离花生2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQ MT)基因VTE3,揭示其分子生物学特征及遗传多态性。【方法】利用EST拼接、RT-PCR以及以DNA为模板的PCR扩增技术,从花生属栽培种中分离VTE3全长cDNA;从不同类型栽培品种和花生属花生区组二倍体野生种(Arachis duranensis和A.ipaensis)中分离VTE3全长DNA,进行VTE3序列多态性分析,并构建VTE3的进化树。【结果】从3个栽培品种中分别克隆得到2条VTE3 cDNA序列(命名为rVTE3-1和rVTE3-2),rVTE3-1和rVTE3-2的编码区长均为1 059 bp,二者同源性97.8%,存在10个变异位点,其中8个为SNP变异;二者均编码351个氨基酸,氨基酸序列同源性98.6%,存在5个氨基酸差异。从13个栽培品种分别克隆得到2条VTE3 DNA序列(命名为gVTE3-1和gVTE3-2),13个品种间gVTE3-1的同源性为99.9%,gVTE3-2的同源性为100%。其中丰花2号gVTE3-1序列长2 710 bp,存在3个内含子,分别位于44—163、772—1 295和1 603—2 437 bp处;gVTE3-2序列长2 706 bp,也存在3个内含子,分别位于44—169、778—1 291和1 599—2 433 bp处。丰花2号gVTE3-1和gVTE3-2同源性96.6%,内含子区域存在36个SNP位点和3个限制性内切酶识别的多态性位点。从A.duranensis分离的VTE3 DNA序列命名为gVTE3-A,从A.ipaensis分离的VTE3 DNA序列命名为gVTE3-B。利用栽培种丰花2号gVTE3-1和gVTE3-2以及野生种gVTE3-A和gVTE3-B 4条DNA序列进行进化分析,推测序列gVTE3-1和gVTE3-2分别来自丰花2号的A、B染色体组。花生MPBQMT氨基酸序列与其它物种的同源性较高,具有很强的保守性。【结论】本研究克隆了花生VTE3的全长cDNA和DNA;推断栽培品种的gVTE3-1和gVTE3-2分别来自A、B染色体组,不同染色体组的VTE3多态性位点丰富;不同栽培品种间等位基因核苷酸序列差异很小,所检测13个栽培品种的gVTE3-1以及野生种的gVTE3-A间存在等位变异,13个栽培品种的gVTE3-2以及野生种gVTE3-B间未发现等位变异。 展开更多
关键词 花生 维生素E 2-甲基-6-植基-1 4-苯醌甲基转移酶 基因克隆
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集胞藻PCC 6803中Sll0875蛋白参与调控光系统Ⅰ活性的生物功能研究
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作者 王蕾 石亚伟 卢从明 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期198-206,共9页
叶绿醌是由1个萘醌环和1个半不饱和植基侧链组成的一类光系统Ⅰ(photosystemⅠ,PSⅠ)特有的辅因子。目前,在蓝藻中对其生物合成途径的研究主要集中在萘醌环的形成方面,而对其植基侧链的合成尚缺乏相关报道。本研究通过与近期在拟南芥中... 叶绿醌是由1个萘醌环和1个半不饱和植基侧链组成的一类光系统Ⅰ(photosystemⅠ,PSⅠ)特有的辅因子。目前,在蓝藻中对其生物合成途径的研究主要集中在萘醌环的形成方面,而对其植基侧链的合成尚缺乏相关报道。本研究通过与近期在拟南芥中发现的1种催化植基单磷酸形成植基二磷酸的激酶(VTE6)进行同源序列比对,在集胞藻PCC 6803中发现1个与之高度同源的蛋白质Sll0875。研究发现,在Sll0875缺失突变体中,叶绿醌和生育酚的含量缺失,叶绿素的含量降低(P<0.05),且该突变体在无葡萄糖培养基中生长迟缓。进一步利用叶绿素荧光、P700氧化还原动力学、77K低温荧光光谱和免疫印迹分析等方法分析了该蛋白质的缺失对PSⅠ功能的影响。研究表明,在突变体Δsll0875中,PSⅠ活性下降,PSⅠ亚基含量与野生型相比显著降低(P<0.01)。这一结果表明,叶绿醌的缺失影响了PSⅠ复合物的累积,导致PSⅠ功能受损,从而影响了蓝藻正常的生长和发育。本研究在蓝藻中证实植醇磷酸化途径对叶绿醌合成的重要性,为进一步研究蓝藻中叶绿醌在PSⅠ复合物的合成、组装和稳定等过程中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 集胞藻PCC 6803 Sll0875 植基二磷酸 叶绿醌 光系统Ⅰ
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Photooxidation of α-Tocopherol in Micelles. A New Singlet Oxygen Oxidation Product
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作者 Wei YU Li YANG Zhong Li LIU (National Laboratory of Applied Organic Chemistry, Lanzhou UniversityLanzhou, Gansu 730000) 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 1998年第9期823-826,共4页
Methylene blue sensitized singlet oxygen oxidation of dl-α-tocopherol in dodecylsulfate (SDS) or cetyl trimethyl ammonium brondde (CTAB) ndcelles led to the formation, besidesα-tocopherol quinone and its epoxide, of... Methylene blue sensitized singlet oxygen oxidation of dl-α-tocopherol in dodecylsulfate (SDS) or cetyl trimethyl ammonium brondde (CTAB) ndcelles led to the formation, besidesα-tocopherol quinone and its epoxide, of a hitherto unknown spiro compound 6-hydroxy-2,6,8,9-tetramethyl-2-phytyl- 1-oxaspiro [4, 5] dec -8 - en - 7, 10-dione. 展开更多
关键词 Α-TOCOPHEROL singlet oxygen 6-hydroxy-2 6 8 9-tetramethyl-2-phytyl-1-oxaspiro[4 5]-dec-8-en-7 10-dione
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Influence of pigment substitution on the electrochemical properties of Rhodobacter sphaeroides 601 reaction centers
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作者 邹永龙 赵杰权 +3 位作者 陈志龙 孔继烈 曾小华 徐春和 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2001年第5期524-532,共9页
With the help of pigment substitution, self-assembled monolayer film and square wave voltammetry, the influence of pigment substitution on the electrochemical properties of Rhodobac-ter sphaeroides 601 reaction center... With the help of pigment substitution, self-assembled monolayer film and square wave voltammetry, the influence of pigment substitution on the electrochemical properties of Rhodobac-ter sphaeroides 601 reaction centers was investigated. Results showed that the charge separation could also be driven by externally electric field, similar to the primary photochemical reaction in purple bacterial reaction center. On the surface of Au electrode, a self-assembled monolayer film (the RC-PDDA-DMSA film) was made up of 2,3-dimercaptosuccinic acid (DMSA), poly-dimeth-yldiallylammonium chloride (PDDA) and reaction center (RC). When square wave voltammetry was used to study the RC-PDDA-DMSA film, four redox pairs in the photochemical reaction of RC were observed by changing frequency. With nonlinear fitting, the standard potential of P/P+ and the corresponding electrode reaction rate constant were determined to be 0.522 V and 13.04 S-1, respectively. It was found that the redox peak at -0.02 V changed greatly when bacteriopheophytin was substituted by plant pheophytin in the reaction center. Further studies indicated that this change resulted from the decrease in electron transfer rate between Bphe7Bphe (Phe7Phe) and QA-/QA after pigment substitution. After investigations of spectra and electrochemical properties of different RCs and comparisons of different function groups of pigments, it was indicated that the phytyl tail, similar to other substituted groups of pheophytin, affected the efficiencies of pigment substitution. 展开更多
关键词 pheophytin substitution monolayer film square wave voltammetry primary photochemical reaction redox pair phytyl.
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