金黄色葡萄球菌内溶素AEJ-CHAP结构域重组表达及活性分析

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作者 邓婧婧 殷慧 +3 位作者 李婉儿 李展鹏 李建 吕鸿周 《食品工业科技》 北大核心 2025年第16期163-172,共10页

本研究聚焦于金黄色葡萄球菌噬菌体内溶素LysAEJ79809.1的酶活性域CHAP的克隆与表达,旨在探索内溶素酶活域的酶活性条件,本研究比较了CHAP及CHAP-Amidase在常温下裂解金黄色葡萄球菌的酶活性,并检验CHAP作为潜在食品抗菌剂在牛奶样品中... 本研究聚焦于金黄色葡萄球菌噬菌体内溶素LysAEJ79809.1的酶活性域CHAP的克隆与表达,旨在探索内溶素酶活域的酶活性条件,本研究比较了CHAP及CHAP-Amidase在常温下裂解金黄色葡萄球菌的酶活性,并检验CHAP作为潜在食品抗菌剂在牛奶样品中对金黄色葡萄球菌的裂解活性。实验通过无缝克隆技术将CHAP基因插入表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达CHAP蛋白。蛋白纯化采用镍亲和层析法,并通过SDS-PAGE验证了蛋白的表达和纯度。随后,通过浊度法测定CHAP蛋白在不同条件下的裂解活性,具体包括在不同金属离子、NaCl浓度、pH及温度条件下的活性变化。此外,研究还探讨了CHAP蛋白在牛奶基质中裂解金黄色葡萄球菌的效果。结果表明,相较于CHAP-Amidase,CHAP不仅分子量小好表达,而且它显示出更高活性。CHAPAmidase蛋白在0.5 mg/mL浓度下裂解效果最佳,CHAP蛋白在0.3 mg/mL浓度下裂解效果最佳并降低金黄色葡萄球菌的OD_(600 nm)值,裂解率高达70%。在金属离子的影响下,Mg^(2+)和Ca^(2+)增强了CHAP的裂解活性,而Mn^(2+)、Zn^(2+)和Cu^(2+)则表现出抑制作用,特别是Zn^(2+)和Cu^(2+)几乎完全抑制了其活性。NaCl浓度方面,100 mmol/L时活性增强,而300 mmol/L时则下降至一半活性。pH实验显示,CHAP蛋白在碱性环境中活性最高,尤其在pH9时效果最佳,甚至在酸性条件下(pH3)仍保持40%以上的活性。温度实验表明,CHAP在40℃以下活性良好,但在50℃以上几乎失活。此外,CHAP在牛奶基质中也表现出良好的裂解活性,显示出其在食品中的应用潜力。本研究结果为内溶素在食品工业中的应用提供了实验依据,显示出其作为抗菌剂的广泛前景。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 噬菌体内溶素 CHAP 催化结构域 克隆与表达 酶活性条件

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噬菌体内溶素在食品中的应用进展 被引量：3

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作者 赵学慧 曹青 +2 位作者 宋维丽 苟惠天 薛惠文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期845-850,共6页

耐药性细菌毒株的出现给食品安全领域带来严重的威胁及挑战。噬菌体内溶素是双链DNA噬菌体在复制后期产生的一种水解酶,可以裂解细菌细胞壁的肽聚糖成分。在控制食源性致病菌时噬菌体内溶素的应用不仅安全、无残留,而且不易产生抗性。... 耐药性细菌毒株的出现给食品安全领域带来严重的威胁及挑战。噬菌体内溶素是双链DNA噬菌体在复制后期产生的一种水解酶,可以裂解细菌细胞壁的肽聚糖成分。在控制食源性致病菌时噬菌体内溶素的应用不仅安全、无残留,而且不易产生抗性。系统介绍了噬菌体内溶素的相关结构特点及裂解过程,综述了噬菌体内溶素在控制食源性致病菌污染方面最新的研究进展及应用情况,并对未来在食品安全方面的应用进行了展望。 展开更多

关键词 内溶素 噬菌体 食源性致病菌 食品安全 抗生素

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肺炎克雷伯菌噬菌体裂解酶的研究进展 被引量：3

3

作者 柳知君 李晓宇 +3 位作者 徐永平 尹家俊 吴惧 王丽丽 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期121-127,共7页

随着耐药性肺炎克雷伯菌的增多,噬菌体的潜力逐步被发掘。裂解酶在噬菌体裂解宿主菌时起到了重要作用,作为外源纯化蛋白使用时,防控效果更为显著。现有研究中,针对革兰阳性菌噬菌体裂解酶的表达更多,因其不具有革兰阴性菌细胞壁外层的... 随着耐药性肺炎克雷伯菌的增多,噬菌体的潜力逐步被发掘。裂解酶在噬菌体裂解宿主菌时起到了重要作用,作为外源纯化蛋白使用时,防控效果更为显著。现有研究中,针对革兰阳性菌噬菌体裂解酶的表达更多,因其不具有革兰阴性菌细胞壁外层的肽聚糖层,而对肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌等革兰阴性菌的噬菌体裂解酶研究仍较为罕见。但已有研究表明,多种策略可以克服其肽聚糖层带来的阻碍。本文主要综述了近年来用于防控肺炎克雷伯菌的噬菌体裂解酶及其作用机制和防控优势,旨对其后续研究提供思路。 展开更多

关键词 裂解酶 肺炎克雷伯菌 革兰阴性菌 噬菌体

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解淀粉欧文氏菌噬菌体Kuerle的分离、基因组测定及其裂解功能分析 被引量：2

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作者 陈妞 余成敏 +5 位作者 崔百明 任彩霞 杨丽颖 董钰 刘琳 郑银英 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期295-305,共11页

【背景】解淀粉欧文氏菌(Erwiniaamylovora)是仁果类果树火疫病的病原体,对全球苹果和梨的生产构成严重威胁。随着抗生素耐药菌株的出现,火疫病的防治面临巨大的挑战。【目的】分离一种新的裂解解淀粉欧文氏菌的噬菌体,并分析该噬菌体... 【背景】解淀粉欧文氏菌(Erwiniaamylovora)是仁果类果树火疫病的病原体,对全球苹果和梨的生产构成严重威胁。随着抗生素耐药菌株的出现,火疫病的防治面临巨大的挑战。【目的】分离一种新的裂解解淀粉欧文氏菌的噬菌体,并分析该噬菌体裂解相关基因的功能,为火疫病的防治提供新的选择。【方法】以解淀粉欧文氏菌Ea102为宿主菌,采用双层平板法从流行火疫病的果园土壤中分离噬菌体。通过噬菌斑和透射电镜观察其形态。用PacBio测序技术测定噬菌体基因组,SPAdes组装序列,RAST注释基因组。通过大肠杆菌原核表达系统分析噬菌体Kuerle的裂解机制。【结果】分离纯化出一株裂解解淀粉欧文氏菌的噬菌体,命名为Kuerle。Kuerle由二十面体衣壳的头部和短尾组成,潜伏期约为50 min,裂解量约为240 pfu/cell。噬菌体基因组全长75599 bp,GC含量48.0%,末端有393 bp的重复序列,未发现与溶原调控相关的基因。共预测到85个开放阅读框(open reading frame,ORF),其中33个已知功能蛋白中包含一个由3550 aa组成的巨大病毒颗粒相关的RNA聚合酶(virion-associated RNA polymerase,vRNAP),该vRNAP是Schitoviridae科噬菌体的主要特征之一。病毒粒子和基因结构表明噬菌体Kuerle属于有尾噬菌体类的Schitoviridae科病毒。聚集在DNA晚期表达区的3个裂解相关基因holin、endolysin和spanin组成了“裂解盒”。在大肠杆菌中Kuerle-holin的表达会抑制细胞的生长,而Kuerle-endolysin的表达可裂解细胞。二者共表达时Kuerle-holin会加速Kuerle-endolysin引起的细胞裂解。用叠氮化钠抑制细菌的一般分泌系统(Sec)或Kuerle-endolysin N端信号序列的缺失均会导致endolysin裂解功能丧失。上述结果表明噬菌体Kuerle具有pinholin-SAR endolysin裂解系统。Kuerle-holin(pinholin)使细胞质膜去极化以激活分泌的Kuerle-endolysin(SAR endolysin)降解肽聚糖层。【结论】Kuerle是一株烈性噬菌体并且Kuerle-endolysin抑菌效果显著,为后续火疫病生防试剂的制备提供了理论依据和研究材料。 展开更多

关键词 解淀粉欧文氏菌 噬菌体分离 基因组分析 裂解系统 HOLIN endolysin

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单核细胞增生李斯特菌噬菌体裂解酶Lys039的活性分析及初步应用

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作者 赵学慧 芝吉 +11 位作者 曹青 张浩浩 何曾文 邓静 范子秋 马永辉 马金锐 张拽中 崇倩 宋维丽 薛惠文 苟惠天 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期112-121,共10页

为探究单核细胞增生李斯特菌噬菌体裂解酶的特性及在食品基质中的初步应用,从NCBI获取李斯特菌噬菌体裂解酶lys039基因序列,分析其生物信息学,并在大肠杆菌中表达纯化,研究其裂解活性、对生物被膜的影响以及在牛奶基质中的应用。结果表... 为探究单核细胞增生李斯特菌噬菌体裂解酶的特性及在食品基质中的初步应用,从NCBI获取李斯特菌噬菌体裂解酶lys039基因序列,分析其生物信息学,并在大肠杆菌中表达纯化,研究其裂解活性、对生物被膜的影响以及在牛奶基质中的应用。结果表明:1)裂解酶Lys039由341个氨基酸组成,分子质量为36.4 ku,等电点为9.81,其结构具有酰胺酶活性,对本实验室22株单核细胞增生李斯特菌、2株无害李斯特菌、1株伊氏李斯特菌以及1株威氏李斯特菌具有裂解活性,但是对葡萄球菌、枯草芽孢杆菌以及沙门菌没有显示出裂解活性。2)随着Lys039浓度的升高,裂解活性逐渐增强,最适温度为30℃,最适pH值为6.0。3)Lys039能显著清除单核细胞增生李斯特菌形成的生物被膜,并且可以降低牛奶中单核细胞增生李斯特菌的细菌数量。综上,Lys039温度耐受范围广、耐酸耐碱且裂解谱较宽,可显著清除生物被膜以及初步应用效果良好。本研究为进一步防治及快速检测单核细胞增生李斯特菌提供理论基础。 展开更多

关键词 裂解酶 噬菌体 单核细胞增生李斯特菌 Lys039

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鲍氏不动杆菌噬菌体研究进展 被引量：1

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作者 王靖 杨永芳 +5 位作者 杨丽芳 付雪 王素娟 杨锦什 郭毛毛 李昊雪 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第17期2709-2714,共6页

碳青霉烯类抗菌药物被誉为对抗病原菌的最后一道防线,然而近年来鲍氏不动杆菌(AB)耐药性增长严重,是世界范围内最具挑战性的医院获得性病原体之一。噬菌体作为细菌的天然杀手,在应对其日益增长的多药耐药性威胁具有巨大潜力。本文综述... 碳青霉烯类抗菌药物被誉为对抗病原菌的最后一道防线,然而近年来鲍氏不动杆菌(AB)耐药性增长严重,是世界范围内最具挑战性的医院获得性病原体之一。噬菌体作为细菌的天然杀手,在应对其日益增长的多药耐药性威胁具有巨大潜力。本文综述了目前大部分噬菌体对抗AB的研究,按照单噬菌体疗法、噬菌体鸡尾酒疗法、噬菌体衍生酶来对抗病原体等方面进行分类阐述,并探讨治疗效果,为鲍氏不动杆菌噬菌体的临床应用提供更全面的认识和理论支持。 展开更多

关键词 鲍氏不动杆菌 噬菌体 内溶素 裂解酶

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治疗细菌性疾病的有力武器——噬菌体及其裂解酶 被引量：9

7

作者 顾敬敏 韩文瑜 +5 位作者 路荣 雷连成 杨勇军 冯新 孙长江 杜崇涛 《河北科技师范学院学报》 CAS 2011年第1期29-33,共5页

噬菌体及其裂解酶作为针对细菌性感染疾病的新型治疗制剂,可以特异性的杀灭病原菌,具有很大的应用潜力。本研究主要概述了噬菌体及其裂解酶的研究现状及其最新的应用策略。

关键词 噬菌体 裂解酶 耐药性 细菌感染

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类志贺邻单胞菌噬菌体ФP4-7裂解酶Gp2的表达及活性测定 被引量：3

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作者 何洋 荆兆元 杨洪江 《天津科技大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期16-22,共7页

多重耐药菌株的出现给临床治疗带来了困难,噬菌体编码的裂解酶能够杀死病原菌,是潜在的重要杀菌因子.本实验采用PCR技术,扩增类志贺邻单胞菌(Plesiomonas shigelloides)噬菌体ФP4-7裂解酶gp2基因并克隆至质粒p QE30上进行表达,重组蛋... 多重耐药菌株的出现给临床治疗带来了困难,噬菌体编码的裂解酶能够杀死病原菌,是潜在的重要杀菌因子.本实验采用PCR技术,扩增类志贺邻单胞菌(Plesiomonas shigelloides)噬菌体ФP4-7裂解酶gp2基因并克隆至质粒p QE30上进行表达,重组蛋白采用Ni-NTA亲和层析法进行纯化.重组裂解酶Gp2最适反应p H为9;裂解酶40,℃保温15,min,酶活剩余56.4%,.底物专一性实验结果显示,该裂解酶能够高效裂解5种革兰氏阴性菌,即铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、大肠杆菌(Escherichia coli)、粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)、摩氏摩根菌(Morganella morganii)、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),以及3种革兰氏阳性菌,即金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis).杀菌实验结果表明,裂解酶Gp2可与EDTA、LAB-35以及SDS配合使用,进一步提高该酶对铜绿假单胞菌和枯草芽胞杆菌的杀菌活性.裂解酶Gp2具有高效广谱裂菌活性,具有潜在的应用价值. 展开更多

关键词 噬菌体裂解酶 类志贺邻单胞菌噬菌体ΦP4—7 蛋白表达 杀菌活性

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大肠杆菌O157 Stx噬菌体裂解酶的克隆表达及活性分析 被引量：8

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作者 杨曦 吉文汇 +2 位作者 曹冬梅 孙建和 严亚贤 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2012年第4期25-30,共6页

为研究大肠杆菌O157Stx噬菌体编码的裂解酶(内溶素)对肠出血性大肠杆菌的抗菌作用,克隆表达了大肠杆菌O157Stx噬菌体裂解酶,并检测其裂解作用和裂菌谱。利用PCR方法扩增大肠杆菌O157Min27株中Stx2噬菌体裂解酶基因(R基因),构建表达质粒p... 为研究大肠杆菌O157Stx噬菌体编码的裂解酶(内溶素)对肠出血性大肠杆菌的抗菌作用,克隆表达了大肠杆菌O157Stx噬菌体裂解酶,并检测其裂解作用和裂菌谱。利用PCR方法扩增大肠杆菌O157Min27株中Stx2噬菌体裂解酶基因(R基因),构建表达质粒pET28a(+)-lysEC1,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)。重组质粒在BL21中获得了高表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的34%,经His-trapTM亲和层析柱纯化后,获得的重组LysEC1的纯度大于97%。体外裂解活性试验证实纯化的噬菌体裂解酶LysEC1对肠出血性大肠杆菌菌株具有很好的裂解作用,这为新型噬菌体抗菌生物制剂的研发提供了新的研发方向。 展开更多

关键词 大肠杆菌O157 Stx2噬菌体 裂解酶 酶活性

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沙门菌噬菌体T139基因组分析及其裂解酶LysT40的异源表达和活性鉴定 被引量：4

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作者 丁一峰 聂若男 +3 位作者 朱文娟 王吉 王佳 王小红 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期176-185,共10页

为开发噬菌体裂解酶作为一种新型的抗菌剂,用于沙门菌的防控,采用生物信息学及异源表达蛋白的方法,获得鼠伤寒沙门菌噬菌体T139的裂解酶,并验证裂解酶对鼠伤寒沙门菌的裂解活性。通过对鼠伤寒沙门菌噬菌体T139基因组进行分析,发现该基... 为开发噬菌体裂解酶作为一种新型的抗菌剂,用于沙门菌的防控,采用生物信息学及异源表达蛋白的方法,获得鼠伤寒沙门菌噬菌体T139的裂解酶,并验证裂解酶对鼠伤寒沙门菌的裂解活性。通过对鼠伤寒沙门菌噬菌体T139基因组进行分析,发现该基因组全长38854 bp,平均GC含量为49.10%,不包含tRNA基因。进化树分析表明噬菌体T139属于T7噬菌体属,共预测出43个ORFs,有23个被赋予已知功能。多序列比对及保守结构域分析表明,orf 40基因编码的蛋白(LysT40)包含126个氨基酸残基,具有内肽酶保守结构域,为可能的噬菌体裂解酶。LysT40二级结构中存在大量的螺旋结构(70.63%),使得该蛋白能够保持结构稳定。将orf 40进行异源表达、纯化,经过SDS-PAGE和Western blot分析,在10~15 ku处获得单一目标蛋白条带,纯化的蛋白质量浓度为280μg/mL。LysT40在30 min内对氯仿或EDTA预处理的鼠伤寒沙门菌具有较好的裂解活性,吸光值OD600相比于对照组分别下降0.18和0.31。 展开更多

关键词 鼠伤寒沙门菌 基因组分析 噬菌体裂解酶 表达纯化 裂解活性 食源性致病菌 抗菌药物替代品

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噬菌体EC-p9和SM-p2内溶酶及穿孔素的特性及联合抑菌作用 被引量：4

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作者 史东灵 解天慧 石慧 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期7-12,共6页

噬菌体的内溶酶(endolysin)和穿孔素(holin)是新型的抑菌剂,具有很大的潜力和发展空间。该文以大肠杆菌O157∶H7噬菌体EC-p9和沙门氏菌噬菌体SM-p2的内溶酶和穿孔素(Lys 9、Lys 2、Hol 9、Hol 2)为对象,通过平板菌落计数法研究了Lys 9、... 噬菌体的内溶酶(endolysin)和穿孔素(holin)是新型的抑菌剂,具有很大的潜力和发展空间。该文以大肠杆菌O157∶H7噬菌体EC-p9和沙门氏菌噬菌体SM-p2的内溶酶和穿孔素(Lys 9、Lys 2、Hol 9、Hol 2)为对象,通过平板菌落计数法研究了Lys 9、Lys 2、Hol 9、Hol 2的裂解活性;评估Lys 9、Lys 2、Hol 9、Hol 2对温度和pH的稳定性;研究了细菌是否会对这4种重组蛋白产生抗性;还研究了内溶酶、穿孔素及其混合物对细菌的联合抑菌作用。结果表明,Lys 9、Lys 2、Hol 9和Hol 2的最高裂解活性分别为61.348%、81.120%、74.251%和83.356%,具有很强的杀菌能力;Lys 9、Lys 2、Hol 9和Hol 2对温度和pH有较高的稳定性;12代内细菌不会对Lys 9、Lys 2、Hol 9和Hol 2产生抗性。此外,内溶酶和穿孔素在抑制病原菌上表现出协同作用。该实验结果为噬菌体内溶酶和穿孔素联合抑菌作用提供了理论依据。 展开更多

关键词 噬菌体 内溶酶 穿孔素 特性 联合抑菌

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铜绿假单胞菌噬菌体vB_PaeM-YQ78生物学与基因组特征及其裂解酶的改造 被引量：2

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作者 孙素越 于姣阳 +6 位作者 王卫晓 董慧 卢晓亮 韩丽梅 王世伟 胡春梅 陈伟 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1037-1047,共11页

目的从医院废水中筛选并鉴定铜绿假单胞菌烈性噬菌体,表达和优化其裂解酶。方法以收集的临床铜绿假单胞菌为宿主菌,分离纯化烈性噬菌体,并深入鉴定其中一株裂解能力强的广谱噬菌体的生物学特性,分析其基因组特征和进化特征,表达和改造... 目的从医院废水中筛选并鉴定铜绿假单胞菌烈性噬菌体,表达和优化其裂解酶。方法以收集的临床铜绿假单胞菌为宿主菌,分离纯化烈性噬菌体,并深入鉴定其中一株裂解能力强的广谱噬菌体的生物学特性,分析其基因组特征和进化特征,表达和改造噬菌体裂解酶,测定噬菌体与抗生素的协同杀菌作用以及不同穿膜辅助剂对于裂解酶杀菌活性的影响。结果噬菌体vB_PaeM-YQ78是一株新的铜绿假单胞菌肌尾噬菌体,潜伏期为10 min,裂解量为43;最佳感染复数为0.00001;在40℃以下和pH 5~10范围内保持稳定。噬菌体与环丙沙星具有较强的协同作用,在24 h内无突变菌株生长。不使用穿膜辅助剂时,裂解酶LysYQ78在1 h内能将多重耐药铜绿假单胞菌降低1个log单位,在添加5 mmol/L EDTA时,LysYQ78可以将细菌浓度降低6个log单位。将ApoE蛋白N端穿膜肽融合到LysYQ78的N端后,Lys1410-YQ78的杀菌活性得到显著提高,可以在1 h内将宿主菌浓度降低2个log单位。结论本实验分离鉴定了一株新的铜绿假单胞菌烈性噬菌体,其具有较宽的宿主谱,与环丙沙星具有较强的协同作用。并且,其裂解酶本身就可以穿透细胞外膜,展现杀菌活性,而与穿膜肽融合后,杀菌活性得到显著增强。本实验的裂解酶改造为进一步优化提供了思路,为将来铜绿假单胞菌的噬菌体治疗提供新的选项。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 噬菌体 协同作用 裂解酶 穿膜肽

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大肠杆菌O157∶H7噬菌体EC-p9的内溶酶和穿孔素的特性预测及克隆表达 被引量：3

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作者 解天慧 石慧 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期107-113,共7页

大肠杆菌O157∶H7是一种常见的能严重威胁公共卫生安全的食源性致病菌,噬菌体及其内溶酶、穿孔素是新型的抑菌剂。该文利用十聚体寡核苷酸随机引物初步鉴定了噬菌体EC-p9;应用PCR技术获得该噬菌体的内溶酶Lys 9和穿孔素Hol 9的基因;利... 大肠杆菌O157∶H7是一种常见的能严重威胁公共卫生安全的食源性致病菌,噬菌体及其内溶酶、穿孔素是新型的抑菌剂。该文利用十聚体寡核苷酸随机引物初步鉴定了噬菌体EC-p9;应用PCR技术获得该噬菌体的内溶酶Lys 9和穿孔素Hol 9的基因;利用生物学信息预测了这2种蛋白的特性;通过大肠杆菌表达体系表达了这2种蛋白。结果表明,噬菌体EC-p9是dsDNA肌尾科噬菌体,具有“穿孔素-内溶酶”裂解体系。内溶酶Lys 9是一种不含跨膜结构的肽聚糖水解酶。穿孔素Hol 9是Ⅲ型穿孔素,仅有1个跨膜结构。内溶酶Lys 9和穿孔素Hol 9都能通过大肠杆菌表达体系成功表达,但穿孔素Hol 9的表达会对大肠杆菌BL21(DE3)产生毒害作用,导致表达量较少。最终获得了质量浓度为2.49 g/L的内溶酶Lys 9和0.95 g/L的穿孔素Hol 9。该研究为开展内溶酶Lys 9和穿孔素Hol 9的抑菌能力以及噬菌体EC-p9的裂解体系的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 大肠杆菌O157∶H7 噬菌体EC-p9 内溶酶Lys 9 穿孔素Hol 9

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噬菌体在控制细菌感染中的临床应用 被引量：2

14

作者 李婷华 郭晓奎 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2018年第8期939-945,共7页

近年来,由于多重耐药菌感染引起新的威胁,而新型抗生素的研发进展缓慢且成本昂贵,使得噬菌体被重新考虑作为抗生素的替代疗法。本文旨在阐述噬菌体疗法在控制人类常见病原菌感染领域的研究进展以及开发噬菌体的新策略,并总结描述多种方... 近年来,由于多重耐药菌感染引起新的威胁,而新型抗生素的研发进展缓慢且成本昂贵,使得噬菌体被重新考虑作为抗生素的替代疗法。本文旨在阐述噬菌体疗法在控制人类常见病原菌感染领域的研究进展以及开发噬菌体的新策略,并总结描述多种方法学理念,以促进对其进一步研究,早日使噬菌体作为治疗或预防药物应用于临床实践中。 展开更多

关键词 噬菌体 工程噬菌体 内溶素 噬菌体疗法

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裂解性噬菌体内溶酶和穿孔素抗革兰阴性菌的研究进展 被引量：2

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作者 荣睿璠 曾君 +4 位作者 郭志良 左君豪 赵瑞利 郭海悦 孙旭阳 《畜牧兽医杂志》 2023年第4期37-40,43,共5页

随着细菌耐药情况的日益严重,人们开始寻找抗生素的代替物,噬菌体内溶酶(endolysin)和穿孔素(holin)受到了关注。其中内溶酶展现了良好的抑菌潜力,与抗生素和噬菌体制剂相比有着一定的优点。而内溶酶的作用特点决定了其在抑制革兰阴性... 随着细菌耐药情况的日益严重,人们开始寻找抗生素的代替物,噬菌体内溶酶(endolysin)和穿孔素(holin)受到了关注。其中内溶酶展现了良好的抑菌潜力,与抗生素和噬菌体制剂相比有着一定的优点。而内溶酶的作用特点决定了其在抑制革兰阴性菌时需要穿孔素的协同,因此有研究利用基因工程把内溶酶和穿孔素进行重组来解决这一问题。此外,在噬菌体-细菌相互作用的研究中,已有研究表明噬菌体基因参与调控细菌间的通讯系统,内溶酶和穿孔素正是其中重要的调控因素。本文通过对噬菌体与噬菌体制剂的研究进展、内溶酶和穿孔素抗革兰阴性菌的研究进展及其应用进行了综述,以期为未来有关噬菌体裂解酶的研究提供思路。 展开更多

关键词 裂解性噬菌体 革兰阴性菌 内溶酶 穿孔素

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噬菌体防治细菌生物被膜相关感染的研究进展 被引量：4

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作者 贺丽莎 杨灼 +2 位作者 冉蕾 陈红伟 杨洪早 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期3670-3684,共15页

细菌生物被膜是由细菌产生的胞外多聚物围绕而成的聚集体,其对抗菌剂和宿主免疫防御机制展现出显著抗性,成为临床细菌感染疾病难以根治的关键因素。噬菌体作为一类能够特异性感染并裂解细菌的病毒,在防治生物被膜相关感染领域展现出巨... 细菌生物被膜是由细菌产生的胞外多聚物围绕而成的聚集体,其对抗菌剂和宿主免疫防御机制展现出显著抗性,成为临床细菌感染疾病难以根治的关键因素。噬菌体作为一类能够特异性感染并裂解细菌的病毒,在防治生物被膜相关感染领域展现出巨大潜力。本文综述了噬菌体、噬菌体内溶素以及噬菌体协同抗生素防治生物被膜相关感染的作用效果、体内外研究方法与作用机理,并探讨了噬菌体在防治生物被膜相关感染中的前景与潜在障碍,同时进行展望,旨在为开发更高效的治疗药物提供有价值的参考。 展开更多

关键词 噬菌体 细菌生物被膜 内溶素 噬菌体-抗生素联合疗法

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噬菌体裂解酶的抗菌特性 被引量：10

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作者 王琰 陆承平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1277-1281,共5页

噬菌体裂解酶是一类细胞壁水解酶,可水解肽聚糖,造成细菌的破裂。裂解酶一般具有两到三个结构域,参与对底物的催化和结合。作为一种新型的杀菌制剂,裂解酶已被越来越多地应用于化脓链球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性细菌... 噬菌体裂解酶是一类细胞壁水解酶,可水解肽聚糖,造成细菌的破裂。裂解酶一般具有两到三个结构域,参与对底物的催化和结合。作为一种新型的杀菌制剂,裂解酶已被越来越多地应用于化脓链球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性细菌病的治疗。与抗生素治疗相比,裂解酶不易使细菌产生抗性且作用相对专一,这可能是解决现在日趋严重的细菌耐药性的一种可行方法。另外,裂解酶还具有高效性,作用协同性,且自身抗体不削弱其作用等优势,使之成为未来预防、控制致病菌一种可能的新途径。 展开更多

关键词 噬菌体裂解酶 抗生素 抗菌特性

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五株克雷伯氏菌噬菌体的生物学特性及比较基因组学研究 被引量：3

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作者 王猛 王雪 +8 位作者 赵佳男 曾君 左君豪 郭志良 季芳 邵建立 张立敏 王承民 秦建华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3110-3128,共19页

【目的】耐药性克雷伯氏菌属(Klebsiella)的细菌作为人类感染的重要病原,是临床治疗重要的挑战。本研究对多株克雷伯氏菌裂解性噬菌体的生物学特性和基因组特征进行比较分析,为其应用提供更多科学数据。【方法】使用双层平板法从人类和... 【目的】耐药性克雷伯氏菌属(Klebsiella)的细菌作为人类感染的重要病原,是临床治疗重要的挑战。本研究对多株克雷伯氏菌裂解性噬菌体的生物学特性和基因组特征进行比较分析,为其应用提供更多科学数据。【方法】使用双层平板法从人类和动物新鲜粪便、污水中分离纯化裂解性克雷伯氏菌噬菌体;通过磷钨酸染色和透射电镜观察其形态;采用双层平板噬菌斑法确定其宿主范围,测定温度和pH稳定性、一步生长曲线和体外抑菌效果等生物学特性;基于全基因组测序对分离株进行比较基因组学分析;通过体内抑菌试验评估噬菌体对多重耐药变栖克雷伯氏菌(Klebsiella variicola)BS375-3感染的大蜡螟(Galleria mellonella)幼虫的保护作用。【结果】5株噬菌体分别属于Schitoviridae(pKP-BM327-1.2)、Autographiviridae(pKP-M186-2.1、pKP-M186-2.2和pKV-BS375-3.1)、Drexlerviridae(pKP-BS317-1.1)家族;噬菌体pKV-BS375-3.1可裂解受试菌中的8株,pKP-BM327-1.2可裂解受试菌中的3株,pKP-M186-2.1、pKP-M186-2.2和pKP-BS317-1.1则分别裂解受试菌中的1株;5株噬菌体感染10–20 min后即进入指数增长期,在–20–37℃、pH 6–10环境下均能够保持稳定活性;感染变栖克雷伯氏菌BS375-3后经噬菌体pKV-BS375-3.1处理[感染复数(multiplicity of infection,MOI)=100]的大蜡螟幼虫96 h内存活率达到80%(8/10);5株噬菌体基因组长度在42–77 kb之间,未携带抗生素抗性基因和毒力基因,基于内溶素(endolysin)的溯源分析显示该蛋白在克雷伯氏菌噬菌体中呈现多样性,属内呈保守性。【结论】5株克雷伯氏菌噬菌体均具有较好的体外抑菌活性,生物学特性稳定,endolysin在噬菌体属内呈现保守性。宿主谱宽、潜伏期短的噬菌体pKV-BS375-3.1在治疗Klebsiella pneumoniae和K.variicola临床感染方面具有潜在应用前景。 展开更多

关键词 克雷伯氏菌 裂解性噬菌体 生物学特性 比较基因组学 内溶素

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