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pcolcea和pcolceb基因在斑马鱼骨骼发育中的功能分化
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作者 王文秀 陈宇龙 +2 位作者 肖正雨 高泽霞 聂春红 《水产学报》 北大核心 2026年第1期22-33,共12页
【目的】探究硬骨鱼类前胶原蛋白酶增强因子(PCOLCE)的2种亚型(pcolcea和pcolceb)在斑马鱼骨骼发育中的作用。【方法】采用生物信息学分析、原位杂交、荧光定量PCR、CRISPR/Cas9基因编辑及显微型计算机断层扫描等分析技术和实验手段以... 【目的】探究硬骨鱼类前胶原蛋白酶增强因子(PCOLCE)的2种亚型(pcolcea和pcolceb)在斑马鱼骨骼发育中的作用。【方法】采用生物信息学分析、原位杂交、荧光定量PCR、CRISPR/Cas9基因编辑及显微型计算机断层扫描等分析技术和实验手段以明确斑马鱼pcolcea和pcolceb基因的序列特征、蛋白结构、组织表达以及功能缺失对骨骼发育的影响。【结果】pcolcea和pcolceb基因主要在脊椎、头部和胸鳍表达。与野生型斑马鱼相比,pcolcea^(-/-)斑马鱼和pcolcea^(-/-);pcolceb^(-/-)双突变斑马鱼脊椎骨的密度显著降低,而pcolceb^(-/-)斑马鱼与野生型相比无显著性差异。在pcolcea^(-/-)突变体的尾部椎骨中,bmp1b、col1a1a、col1a2、runx2b、alpl、sp7基因的表达显著下调,在pcolcea^(-/-);pcolceb^(-/-)双突变体的尾部椎骨中,bmp1b、col1a1a、col1a1b、col1a2、runx2b、entpd5a、bglap、sp7基因的表达均显著低于野生型斑马鱼。【结论】pcolcea基因功能的丧失会影响斑马鱼骨骼组织的正常矿化,且pcolcea和pcolceb基因的同时缺失会显著加重该表型。本研究揭示了pcolcea和pcolceb在斑马鱼骨骼发育中的作用,为进一步研究鱼类骨骼发育的分子调控机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 斑马鱼 pcolcea pcolceb 骨骼发育 CRISPR/Cas9 基因表达
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