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IL-18增强pcDNA3.1/SjOST48抗血吸虫感染的免疫保护性研究
1
作者
谭潇
肖楚丽
+3 位作者
肖非
王硕
卿蕊
黄泽智
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期279-285,共7页
目的探讨白细胞介素18(IL-18)是否能增强DNA疫苗候选抗原pcDNA3.1/SjOST48对日本血吸虫病感染的免疫保护效果。方法构建pcDNA3.1/SjOST48和pcDNA3.1/IL-18真核载体,表达重组蛋白。Western blotting检测HeLa细胞内重组质粒pcDNA3.1/SjOS...
目的探讨白细胞介素18(IL-18)是否能增强DNA疫苗候选抗原pcDNA3.1/SjOST48对日本血吸虫病感染的免疫保护效果。方法构建pcDNA3.1/SjOST48和pcDNA3.1/IL-18真核载体,表达重组蛋白。Western blotting检测HeLa细胞内重组质粒pcDNA3.1/SjOST48和pcDNA3.1/IL-18表达情况,ELISA检测细胞培养基中IL-18的表达情况。100只雌性BALB/c小鼠随机均分为PBS组(空白对照组)、pcDNA3.1组(空质粒组)、pcDNA3.1/IL-18组、pcDNA3.1/SjOST48组和pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组等5组,各组小鼠左后腿股四头肌肌内注射相应的重组质粒(30μg),共免疫3次,每次间隔14 d。末次免疫后2周,各组取5只小鼠采集血样,ELISA检测各组小鼠血清IgG抗体及其亚类(IgG1和IgG2a)水平。末次免疫后3周,各组取5只小鼠脾组织,无菌分离小鼠脾淋巴细胞,ELISA检测小鼠脾淋巴细胞上清中TNF-α、INF-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-17含量及脾淋巴细胞增殖水平。末次免疫后2周,各组取15只免疫小鼠感染血吸虫尾蚴(20±1)条/鼠。感染后6周处死小鼠,无菌分离肝,计算减卵率;门静脉灌注法收集成虫,计算减虫率;另取肝组织,切片后行HE染色,显微镜下观察肝虫卵肉芽肿数量及炎症浸润情况。结果末次免疫后2周,ELISA结果显示,pcDNA3.1/SjOST48+p cDNA3.1/IL-18组、pcDNA3.1/SjOST48组、pcDNA3.1/IL-18组小鼠的IgG抗体水平分别为0.82±0.07、0.41±0.06、0.16±0.05,均高于pcDNA3.1组的0.12±0.03(P<0.05);pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组较pcDNA3.1/SjOST48组和pcDNA3.1/IL-18组均增高(P<0.05);pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组和pcDNA3.1/SjOST48组的IgG2a/IgG1比值分别为4.02±0.01、2.51±0.01(P<0.05),均>1,其他3组均<1。末次免疫后3周,pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组小鼠脾淋巴细胞上清中的IL-2、TNF-α、INF-γ、IL-6和IL-17含量分别为(101.82±8.90)、(738.02±146.22)、(593.41±51.07)、(685.64±171.2)、(261.32±48.19)pg/ml,高于pcDNA3.1/SjOST48组[(55.82±9.69)、(538.21±85.26)、(393.41±51.07)、(335.64±62.63)、(118.32±8.91)pg/ml](P<0.05)和pcDNA3.1/IL-18组[(35.16±6.43)、(284.40±69.96)(141.91±24.48)、(198.44±38.15)、(47.66±14.33)pg/ml](P<0.05),三者均高于pcDNA3.1组[(12.91±8.01)、(74.86±6.64)(23.75±6.06)、(82.75±10.96)、(22.91±13.80)pg/ml](P<0.05);IL-4含量为(12.28±7.08)pg/ml,与pcDNA3.1/SjOST48组[(15.03±10.12)pg/ml]、pcDNA3.1/IL-18组[(13.59±4.42)pg/ml]、pcDNA3.1组[(16.13±10.08)pg/ml]比较差异无统计学意义(P>0.05)。pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组脾淋巴细胞增殖水平为11.84±0.16,高于pcDNA3.1/SjOST48组(5.93±0.25)(P<0.05)和pcDNA3.1/IL-18组(3.19±0.36)(P<0.05),三者均高于pcDNA3.1组(2.08±0.16)(P<0.05)。末次免疫后2周,经日本血吸虫感染后6周,pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组小鼠的平均检获成虫数为(14.33±1.08);与pcDNA3.1组比较,减虫率和减卵率分别为46.19%和44.68%,高于pcDNA3.1/SjOST48免疫组(32.18%和35.78%)和pcDNA3.1/IL-18组(13.22%和16.68%)(P<0.05)。各组小鼠肝组织切片HE染色结果显示,与其他4组比较,pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组小鼠肝组织虫卵结节较少,虫卵肉芽组织数量明显减少,炎症浸润不明显。结论IL-18能使pcDNA3.1/SjOST48免疫小鼠诱导较高水平的Th1型和Th17型免疫应答,并且增强其抗血吸虫感染的免疫保护效果。
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关键词
日本血吸虫
白细胞介素18
pcdna3.1/sjost48
候选抗原
免疫保护性
原文传递
题名
IL-18增强pcDNA3.1/SjOST48抗血吸虫感染的免疫保护性研究
1
作者
谭潇
肖楚丽
肖非
王硕
卿蕊
黄泽智
机构
湖南省邵阳学院医学检验学院
出处
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期279-285,共7页
基金
湖南省教育厅科学研究项目(No.15C1257)
湖南省教育厅优秀青年项目(No.17B240)。
文摘
目的探讨白细胞介素18(IL-18)是否能增强DNA疫苗候选抗原pcDNA3.1/SjOST48对日本血吸虫病感染的免疫保护效果。方法构建pcDNA3.1/SjOST48和pcDNA3.1/IL-18真核载体,表达重组蛋白。Western blotting检测HeLa细胞内重组质粒pcDNA3.1/SjOST48和pcDNA3.1/IL-18表达情况,ELISA检测细胞培养基中IL-18的表达情况。100只雌性BALB/c小鼠随机均分为PBS组(空白对照组)、pcDNA3.1组(空质粒组)、pcDNA3.1/IL-18组、pcDNA3.1/SjOST48组和pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组等5组,各组小鼠左后腿股四头肌肌内注射相应的重组质粒(30μg),共免疫3次,每次间隔14 d。末次免疫后2周,各组取5只小鼠采集血样,ELISA检测各组小鼠血清IgG抗体及其亚类(IgG1和IgG2a)水平。末次免疫后3周,各组取5只小鼠脾组织,无菌分离小鼠脾淋巴细胞,ELISA检测小鼠脾淋巴细胞上清中TNF-α、INF-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-17含量及脾淋巴细胞增殖水平。末次免疫后2周,各组取15只免疫小鼠感染血吸虫尾蚴(20±1)条/鼠。感染后6周处死小鼠,无菌分离肝,计算减卵率;门静脉灌注法收集成虫,计算减虫率;另取肝组织,切片后行HE染色,显微镜下观察肝虫卵肉芽肿数量及炎症浸润情况。结果末次免疫后2周,ELISA结果显示,pcDNA3.1/SjOST48+p cDNA3.1/IL-18组、pcDNA3.1/SjOST48组、pcDNA3.1/IL-18组小鼠的IgG抗体水平分别为0.82±0.07、0.41±0.06、0.16±0.05,均高于pcDNA3.1组的0.12±0.03(P<0.05);pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组较pcDNA3.1/SjOST48组和pcDNA3.1/IL-18组均增高(P<0.05);pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组和pcDNA3.1/SjOST48组的IgG2a/IgG1比值分别为4.02±0.01、2.51±0.01(P<0.05),均>1,其他3组均<1。末次免疫后3周,pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组小鼠脾淋巴细胞上清中的IL-2、TNF-α、INF-γ、IL-6和IL-17含量分别为(101.82±8.90)、(738.02±146.22)、(593.41±51.07)、(685.64±171.2)、(261.32±48.19)pg/ml,高于pcDNA3.1/SjOST48组[(55.82±9.69)、(538.21±85.26)、(393.41±51.07)、(335.64±62.63)、(118.32±8.91)pg/ml](P<0.05)和pcDNA3.1/IL-18组[(35.16±6.43)、(284.40±69.96)(141.91±24.48)、(198.44±38.15)、(47.66±14.33)pg/ml](P<0.05),三者均高于pcDNA3.1组[(12.91±8.01)、(74.86±6.64)(23.75±6.06)、(82.75±10.96)、(22.91±13.80)pg/ml](P<0.05);IL-4含量为(12.28±7.08)pg/ml,与pcDNA3.1/SjOST48组[(15.03±10.12)pg/ml]、pcDNA3.1/IL-18组[(13.59±4.42)pg/ml]、pcDNA3.1组[(16.13±10.08)pg/ml]比较差异无统计学意义(P>0.05)。pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组脾淋巴细胞增殖水平为11.84±0.16,高于pcDNA3.1/SjOST48组(5.93±0.25)(P<0.05)和pcDNA3.1/IL-18组(3.19±0.36)(P<0.05),三者均高于pcDNA3.1组(2.08±0.16)(P<0.05)。末次免疫后2周,经日本血吸虫感染后6周,pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组小鼠的平均检获成虫数为(14.33±1.08);与pcDNA3.1组比较,减虫率和减卵率分别为46.19%和44.68%,高于pcDNA3.1/SjOST48免疫组(32.18%和35.78%)和pcDNA3.1/IL-18组(13.22%和16.68%)(P<0.05)。各组小鼠肝组织切片HE染色结果显示,与其他4组比较,pcDNA3.1/SjOST48+pcDNA3.1/IL-18组小鼠肝组织虫卵结节较少,虫卵肉芽组织数量明显减少,炎症浸润不明显。结论IL-18能使pcDNA3.1/SjOST48免疫小鼠诱导较高水平的Th1型和Th17型免疫应答,并且增强其抗血吸虫感染的免疫保护效果。
关键词
日本血吸虫
白细胞介素18
pcdna3.1/sjost48
候选抗原
免疫保护性
Keywords
Schistosoma japonicum
IL-18
pcdna3.1/sjost48
Candicate antigen
Immune protection
分类号
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
IL-18增强pcDNA3.1/SjOST48抗血吸虫感染的免疫保护性研究
谭潇
肖楚丽
肖非
王硕
卿蕊
黄泽智
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
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