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志贺毒素B(ShT-B)亚单位在两种表达载体中表达形式的分析
1
作者 喻华英 王景林 +3 位作者 高丰 康琳 吴东林 赵金红 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第8期679-683,共5页
用KpnⅠ和HindⅢ双酶切pGEM -TB3 克隆质粒 ,得到为大小约为 2 2 5bp的ShT -B基因片段 ,分别将其插入到经双酶切的 pQE4 0和 pQE30表达载体中 ,构建了两个ShT -B的重组表达质粒pQE4 0 -B3 和 pQE30 -B2 ,分别转化到E .coliM15。经IPTG... 用KpnⅠ和HindⅢ双酶切pGEM -TB3 克隆质粒 ,得到为大小约为 2 2 5bp的ShT -B基因片段 ,分别将其插入到经双酶切的 pQE4 0和 pQE30表达载体中 ,构建了两个ShT -B的重组表达质粒pQE4 0 -B3 和 pQE30 -B2 ,分别转化到E .coliM15。经IPTG诱导后 ,重组质粒目的蛋白均得到表达。其中 ,pQE4 0 -B3 和pQE30 -B2 ,分别化到E .coliM 15 ,经IPTG诱导后 ,重组质粒目的蛋白均得到表达。其中 ,pQE4 0 -B3 表达蛋白约占菌体总蛋白的 37% ,主要为包涵体形式。pQE30 -B2 表达蛋白约占菌体总蛋白的 16 % ,主要为可溶性形式 ,约 9 2 %。为重组抗原的制备提供了必要的物质基础。 展开更多
关键词 志贺毒素B亚单位 表达载体 表达分析 pqe40 pQE30
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果蝇dro基因的克隆与原核表达载体构建
2
作者 高小明 吴卫 +2 位作者 王贤磊 田歆珍 李冠 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第3期1-2,共2页
目的:检测drosocin对农作物致病菌的抑菌作用,构建含drosocin基因dro的原核表达载体。方法:以黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)DNA为模板,由特异引物通过PCR方法扩增dro基因的编码序列,将此片段连接在克隆载体pMD18-T上进行测序,再用... 目的:检测drosocin对农作物致病菌的抑菌作用,构建含drosocin基因dro的原核表达载体。方法:以黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)DNA为模板,由特异引物通过PCR方法扩增dro基因的编码序列,将此片段连接在克隆载体pMD18-T上进行测序,再用酶切-连接的方法将目的片断亚克隆到携带有6×组氨酸二氢叶酸还原酶标签的原核表达载体pQE40上。结果:克隆得到大小为195bp的dro基因片段,并成功构建了原核表达载体pQE40/dro。结论:克隆到dro基因,构建了原核表达载体pQE40/dro,并获得了转化株M15[pREP4]/dro。 展开更多
关键词 果蝇 抗菌肽 dro基因 pqe40
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