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豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI对费氏中华根瘤菌共生固氮作用的影响 被引量:2
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作者 杨成运 樊剑鸣 +1 位作者 张书杰 周俊初 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期462-467,共6页
通过两亲本接合转移,将豌豆根瘤菌T83K3共生质粒pJB5JI转入费氏中华根瘤菌HN01及其质粒缺失突变株中,获得8个转移接合子,其中受体为HN01和pSfrHN01a缺失突变株HND28的接合子能够在大豆上形成有效根瘤,无论是人工传代还是与植物共生,外... 通过两亲本接合转移,将豌豆根瘤菌T83K3共生质粒pJB5JI转入费氏中华根瘤菌HN01及其质粒缺失突变株中,获得8个转移接合子,其中受体为HN01和pSfrHN01a缺失突变株HND28的接合子能够在大豆上形成有效根瘤,无论是人工传代还是与植物共生,外源质粒pJB5JI与受体菌内源质粒均能稳定存在,但不能在豌豆上结瘤,与大豆共生固氮能力和竞争结瘤能力与受体菌亲本相比没有明显变化.消除共生质粒的突变株HND29和共生质粒与pSfrHN01a质粒均消除的突变株HND100作受体菌的接合子,既不能在大豆上结瘤,也不能在豌豆上结瘤.研究结果表明,pJB5JI与HN01的3个质粒属于不同的不相容群.pJB5JI在HN01中的表达功能可能受到受体菌的共生质粒和染色体基因的共同影响. 展开更多
关键词 共生质粒 费氏中华根瘤菌 pjb5ji 质粒转移
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外源共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌(Rhizobium huakuii)中的稳定性 被引量:2
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作者 张学贤 周俊初 李阜棣 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期1-8,共8页
将碗豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌7653R及其消除了共生质粒的突变株7653R+1。两种类型转移接合子在人工合成培养基上繁殖时,pJB5JI能稳定存在,但从它们在碗豆或紫云英上所结根瘤的分离物中,只有... 将碗豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌7653R及其消除了共生质粒的突变株7653R+1。两种类型转移接合子在人工合成培养基上繁殖时,pJB5JI能稳定存在,但从它们在碗豆或紫云英上所结根瘤的分离物中,只有部分检测到pJB5JI。以转座子Tn5及首蓿根瘤菌nod基因为探针,对未检测到pJB5JI质粒的根瘤分离物7653RA9及7653R+1Pa,进行DNA同源性分析,结果表明pJB5JI质粒并没有全部丢失,很可能全部或部分整合到了受体紫云英根瘤菌的染色体中。 展开更多
关键词 紫云英根瘤菌 质粒pjb5ji 稳定性
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豌豆根瘤菌共生基因pJB5JI与华癸中生根瘤菌7653R共生质粒的相互关系
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作者 杨成运 周俊初 +1 位作者 段广才 张伟涛 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1651-1656,共6页
华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)7653R是分离自我国南方水稻田的一株根瘤菌,含有2个内源质粒:p7653Ra和p7653Rb,其中7653Rb是共生质粒。通过Tn5-sacB的插入方法来消除质粒,获得7653Rb消除的突变株7653RD。将豌豆根瘤菌T83K3的共... 华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)7653R是分离自我国南方水稻田的一株根瘤菌,含有2个内源质粒:p7653Ra和p7653Rb,其中7653Rb是共生质粒。通过Tn5-sacB的插入方法来消除质粒,获得7653Rb消除的突变株7653RD。将豌豆根瘤菌T83K3的共生质粒pJB5JI导入7653R和7653RD中,盆栽结果表明含有pJB5JI的转移接合子7653R-197的竞争结瘤能力和共生固氮能力均高于7653R。pJB5JI不能恢复7653RD在紫云英上的结瘤能力。含有pJB5JI的7653RD可以在豌豆上结无效瘤,表明pJB5JI可以在7653R的染色体背景下表达其功能。对转移接合子中的质粒稳定性进行检测,结果表明pJB5JI在人工传代的情况下可以稳定存在,但经过共生之后发生了遗传分离,对转移接合子和出发菌株及分离菌株进行kan基因的PCR扩增,除了受体菌外其他菌株都可得到PCR产物,由此推测,pJB5JI可能部分或全部整合到了受体菌的染色体基因组中。 展开更多
关键词 共生质粒 华癸中生根瘤(Mesorhizobium huakuii) pjb5ji 质粒转移
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The function of three indigenous plasmids in Mesorhizobium huakuii 2020 and its symbiotic inter-action with Sym pJB5JI of Rhizobium leguminosarum 被引量:2
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作者 YANG ChengYun LI YouGuo +2 位作者 WEI Li CHENG GuoJun ZHOU JunChu 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2008年第4期353-361,共9页
A Mesorhizobium huakuii strain 2020,isolated from a rice-growing field in southern China,contains three indigenous plasmids named p2020a,p2020b and p2020c,respectively.The plasmids were deleted via Tn5-sacB insertion,... A Mesorhizobium huakuii strain 2020,isolated from a rice-growing field in southern China,contains three indigenous plasmids named p2020a,p2020b and p2020c,respectively.The plasmids were deleted via Tn5-sacB insertion,and two cured derivatives were obtained.Interestingly,the mutant 2020D29 curing of p2020c could significantly enhance the capacity of symbiotic nitrogen fixation.But the mutant 2020D8 curing of p2020b lost the ability to nodulate Astragalus sinicus.Furthermore,the third plasmid p2020a could be hardly eliminated,suggesting that some house-keeping genes necessary for strain growth located on this plasmid.Then the Sym plasmid pJB5JI of R.leguminosarum bv.viciae was transferred into 2020 and its cured derivatives.The pot plant test showed that the ability of competition and symbiotic nitrogen fixation of transconjugant 2020-137(pJB5JI)was increased evidently in con-trast to 2020.pJB5JI could not restore the ability of 2020D8 to nodulate Astragalus sinicus.2020D8-8(pJB5JI)could form ineffective nodules on peas,which implied that the symbiotic plasmid pJB5JI could express its function at the chromosomal background of Mesorhizobium huakuii 2020.The plas-mid stability was checked in transconjugants under free-living and during symbiosis.The results indi-cated that pJB5JI failed to be detected in some nodule isolates.That Km resistance gene could be am-plified from all transconjugants and nodule isolates suggested that pJB5JI was fully or partially inte-grated into the chromosome of recipients. 展开更多
关键词 Mesorhizobium huakuii indigenous plasmids pjb5ji symbiotic interaction plasmid curing
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华癸中生根瘤菌2020三个内源质粒的功能及其与豌豆根瘤菌共生质粒之间的相互关系 被引量:2
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作者 杨成运 李友国 +2 位作者 魏力 程国军 周俊初 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2008年第3期250-258,共9页
2020是一株分离自中国南方水稻田里的华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii),有3个内源质粒,分别命名为p2020a,p2020b和p2020c.用Tn5-sacB插入突变的方法对2020进行质粒消除,得到了两株质粒缺失突变株2020D29和2020D8.缺失了第一大质粒... 2020是一株分离自中国南方水稻田里的华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii),有3个内源质粒,分别命名为p2020a,p2020b和p2020c.用Tn5-sacB插入突变的方法对2020进行质粒消除,得到了两株质粒缺失突变株2020D29和2020D8.缺失了第一大质粒p2020c的突变株2020D29的结瘤固氮能力有显著的提高;而缺失了第二大质粒p2020b的突变株2020D8失去了在紫云英(Astragalus sinicus)上结瘤的能力;第三大质粒很难被消除,原因可能是该质粒上含有菌株生长所必需的基因.然后将豌豆根瘤菌(Rhizobium leguminosarum)的共生质粒pJB5JI转入2020及其质粒缺失突变株中,盆栽结果显示,2020-137(pJB5JI)的竞争结瘤能力和固氮能力显著高于2020.但是pJB5JI不能恢复2020D8在紫云英上的结瘤能力.2020D8-8(pJB5JI)可以在豌豆(Pisum sativum Linn)上形成无效瘤,这说明pJB5JI的功能可以在2020的遗传背景下进行表达.对pJB5JI在受体菌中的稳定性进行检测,结果发现在人工传代的情况下pJB5JI可以稳定的存在,但经过与植物共生之后只能在部分根瘤分离物中检测到pJB5JI,对这些转移接合子和出发菌株及分离菌株进行Km基因的PCR扩增,除了出发的受体菌外其余的菌株都可以得到PCR产物.由此推断,在没有检测到pJB5JI的分离株中,pJB5JI可能部分或全部整合到了受体根瘤菌的染色体DNA中. 展开更多
关键词 华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)内源质粒 pjb5ji 共生关系 质粒消除
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