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脂肪储存小滴蛋白5基因真核表达载体的构建及亚细胞定位
被引量:
2
1
作者
刘芳
张利军
+5 位作者
叶菁
张丽英
李烦繁
李航
谷雨
李青
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期438-439,443,共3页
目的:构建pCMV5-HA与脂肪储存小滴蛋白5(LS-DP5)的融合基因真核表达载体,观察其在非洲绿猴肾成纤维细胞COS7中的表达,通过免疫荧光技术确定LSDP5的亚细胞定位。方法:采用NdeI和BamHI酶切pCMV5-HA质粒,用BglII和NdeI酶切pMD18-LSDP5质粒...
目的:构建pCMV5-HA与脂肪储存小滴蛋白5(LS-DP5)的融合基因真核表达载体,观察其在非洲绿猴肾成纤维细胞COS7中的表达,通过免疫荧光技术确定LSDP5的亚细胞定位。方法:采用NdeI和BamHI酶切pCMV5-HA质粒,用BglII和NdeI酶切pMD18-LSDP5质粒,克隆到pCMV5-HA载体,测序鉴定后,通过脂质体法转染COS7细胞,通过免疫荧光技术观察其在COS7细胞中的表达,并利用荧光染料Bodipy493/503定位脂滴,探讨LSDP5与脂滴之间的关系。结果:酶切及DNA测序证实重组质粒pCMV5-HA-LSDP5构建成功。荧光显微镜观察显示,pCMV5-HA-LSDP5融合蛋白定位于细胞质内,并定位于脂滴表面。结论:成功构建了重组质粒pCMV5-HA-LSDP5;融合蛋白分布于细胞质并与脂滴存在共定位关系。
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关键词
脂肪储存小滴蛋白
5
融合蛋白
pcmv5-ha
COS7细胞
亚细胞定位
原文传递
题名
脂肪储存小滴蛋白5基因真核表达载体的构建及亚细胞定位
被引量:
2
1
作者
刘芳
张利军
叶菁
张丽英
李烦繁
李航
谷雨
李青
机构
第四军医大学西京医院病理科
解放军第
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期438-439,443,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30671087
30700268)
文摘
目的:构建pCMV5-HA与脂肪储存小滴蛋白5(LS-DP5)的融合基因真核表达载体,观察其在非洲绿猴肾成纤维细胞COS7中的表达,通过免疫荧光技术确定LSDP5的亚细胞定位。方法:采用NdeI和BamHI酶切pCMV5-HA质粒,用BglII和NdeI酶切pMD18-LSDP5质粒,克隆到pCMV5-HA载体,测序鉴定后,通过脂质体法转染COS7细胞,通过免疫荧光技术观察其在COS7细胞中的表达,并利用荧光染料Bodipy493/503定位脂滴,探讨LSDP5与脂滴之间的关系。结果:酶切及DNA测序证实重组质粒pCMV5-HA-LSDP5构建成功。荧光显微镜观察显示,pCMV5-HA-LSDP5融合蛋白定位于细胞质内,并定位于脂滴表面。结论:成功构建了重组质粒pCMV5-HA-LSDP5;融合蛋白分布于细胞质并与脂滴存在共定位关系。
关键词
脂肪储存小滴蛋白
5
融合蛋白
pcmv5-ha
COS7细胞
亚细胞定位
Keywords
LSDP
5
fusion protein
pcmv5-ha
COS7 cell
subcellular localization
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
脂肪储存小滴蛋白5基因真核表达载体的构建及亚细胞定位
刘芳
张利军
叶菁
张丽英
李烦繁
李航
谷雨
李青
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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