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Anti-tumor effects of p53N15-based fusion peptide in the transfected H1299 lung cancer cells
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作者 王宏涛 《外科研究与新技术》 2011年第3期157-157,共1页
Objective Loss-of-function mutation of p53,a tumor suppressor gene,is an important mechanism for the development of human cancers. In this study we tried to transfect p53N15-based fusion peptide into H1299,a lung canc... Objective Loss-of-function mutation of p53,a tumor suppressor gene,is an important mechanism for the development of human cancers. In this study we tried to transfect p53N15-based fusion peptide into H1299,a lung cancer cell line,and evaluate the anti-tumor effects of the fusion peptide. Methods Adeno-associated virus (AAV) vectors were used for transfecting p53N15 fusion peptide into p53-null lung adenocarcinoma H1299 cells. 展开更多
关键词 LUnG Anti-tumor effects of p53n15-based fusion peptide in the transfected H1299 lung cancer cells
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NT4-p53(N15)-Ant融合基因的克隆和鉴定 被引量:4
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作者 宋丽萍 李跃萍 +2 位作者 邱曙东 杨广笑 王全颖 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期333-336,共4页
目的构建NT4-p53(N15)-Ant融合基因表达盒并进行序列分析。方法应用互为模板的引物PCR技术及T载体克隆法克隆p53(N15)-Ant基因,筛选阳性克隆、酶切鉴定并测序。扩增阳性重组质粒后限制性内切酶切取p53(N15)-Ant片段连入pBV220/NT4质粒... 目的构建NT4-p53(N15)-Ant融合基因表达盒并进行序列分析。方法应用互为模板的引物PCR技术及T载体克隆法克隆p53(N15)-Ant基因,筛选阳性克隆、酶切鉴定并测序。扩增阳性重组质粒后限制性内切酶切取p53(N15)-Ant片段连入pBV220/NT4质粒。结果克隆了p53(N15)-Ant基因,经酶切及测序证实结果正确;重组质粒pBV220/NT4p53(N15)Ant经限制性内切酶及琼脂糖凝胶电泳,结果显示酶切片段大小和理论值一致。结论通过分子克隆体外重组技术成功制备了含有NT4-p53(N15)-Ant表达盒的pBV220质粒,为进一步开展肿瘤的基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 p53(n15)-Ant nT4信号肽 基因克隆 肿瘤
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NT4p53(N15)Ant重组腺病毒对肝癌细胞腹腔种植瘤的治疗作用 被引量:2
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作者 吴学元 白斌 +1 位作者 张党锋 马巍 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期73-76,107,共5页
目的研究NT4p53(N15)Ant融合基因重组腺病毒预先感染ICR小鼠腹腔后,对肝癌细胞株H22腹腔种植瘤的治疗作用。方法将16只ICR小鼠随机平均分成2组,分别于腹腔内预先感染Ad-NT4p53(N15)Ant(治疗组)及等量空病毒(对照组)。将H22细胞悬液接种... 目的研究NT4p53(N15)Ant融合基因重组腺病毒预先感染ICR小鼠腹腔后,对肝癌细胞株H22腹腔种植瘤的治疗作用。方法将16只ICR小鼠随机平均分成2组,分别于腹腔内预先感染Ad-NT4p53(N15)Ant(治疗组)及等量空病毒(对照组)。将H22细胞悬液接种于小鼠腹腔,建立小鼠腹腔泛发性种植瘤模型。根据小鼠生长情况、生存期以及腹水瘤细胞形态、细胞凋亡率和小鼠腹腔内瘤体重量等结果,评价Ad-NT4p53(N15)Ant对H22细胞种植瘤及癌性腹水的治疗效果。结果成功构建了小鼠腹腔泛发性种植瘤动物模型。与对照组相比,Ad-NT4p53(N15)Ant组小鼠生存期延长、腹水的产生时间延迟,腹水中多核巨细胞减少,细胞凋亡及坏死的比率升高,腹腔内瘤体的质量减少。结论 Ad-NT4p53(15)Ant可有效抑制H22肝癌细胞腹腔移植瘤生长,延迟腹水形成,诱导体内腹水瘤细胞凋亡及坏死,延长小鼠生存期。 展开更多
关键词 nT4p53(n15)Ant 重组腺相关病毒 肝癌 凋亡 癌转移 腹水
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NT4p53(N15)Ant融合基因重组腺病毒的构建及其体外抑瘤作用 被引量:1
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作者 宋丽萍 李跃萍 +3 位作者 邱曙东 黄辰 王爱英 李围围 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第2期144-148,共5页
背景与目的:有研究发现P53氨基端15肽与穿膜肽(antennapedia,Ant)的融合肽能迅速穿透细胞膜,直接、快速引起乳腺癌、胰腺癌细胞坏死而非凋亡,但对正常细胞几乎没有毒性。本研究构建缺陷型腺病毒载体表达NT4p53(N15)Ant融合基因,研究其... 背景与目的:有研究发现P53氨基端15肽与穿膜肽(antennapedia,Ant)的融合肽能迅速穿透细胞膜,直接、快速引起乳腺癌、胰腺癌细胞坏死而非凋亡,但对正常细胞几乎没有毒性。本研究构建缺陷型腺病毒载体表达NT4p53(N15)Ant融合基因,研究其体外抑瘤作用。方法:应用Ad-EasyTM系统,在大肠杆菌同源重组,构建NT4p53(N15)Ant腺病毒表达载体,在HEK-293细胞内成功包装并鉴定后,感染肝癌细胞株HepG2,用倒置相差显微镜、透射电镜观察细胞形态学变化、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色实验及培养基中的乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)测定研究其体外抑瘤作用。结果:Ad-NT4p53(N15)Ant对肝癌细胞株HepG2有明显抑制作用,48、72、96h细胞存活率分别为36.67%、20.47%、17.82%,与空病毒处理组比较差异有统计学意义(P<0.05);电镜观察到感染的HepG2细胞胞膜、核膜破坏,胞浆内出现囊泡状物质,染色质聚集。Ad-NT4p53(N15)Ant处理HepG2细胞24、48、72、96h时培养液中LDH释放分别为94、236、267、313U/L,较空病毒处理组明显增加,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:构建的腺病毒载体Ad-NT4p53(N15)Ant感染HepG2细胞后能抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 nT4p53(n15)Ant 腺病毒载体 肿瘤 基因治疗
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p53/SAT1/ALOX15铁死亡通路蛋白与特发性炎性肌病的相关性 被引量:4
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作者 马苗 柴克霞 《中国临床研究》 CAS 2021年第9期1159-1163,共5页
目的通过免疫组化法分别检测实验性自身免疫性肌炎(EAM)小鼠模型肌肉组织中p53、精脒/精胺N1-乙酰基转移酶1(SAT1)、花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)蛋白的表达,探讨特发性炎性肌病(IIM)的发病机制与p53/SAT1/ALOX15铁死亡通路蛋白的相... 目的通过免疫组化法分别检测实验性自身免疫性肌炎(EAM)小鼠模型肌肉组织中p53、精脒/精胺N1-乙酰基转移酶1(SAT1)、花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)蛋白的表达,探讨特发性炎性肌病(IIM)的发病机制与p53/SAT1/ALOX15铁死亡通路蛋白的相关性。方法随机将13只BALB/c小鼠分为EAM模型组(n=7)、对照组(n=6),通过粗略提取的豚鼠骨骼肌匀浆与完全弗氏佐剂混匀后皮下注射建立EAM小鼠模型,在末次免疫处理后1周,通过对小鼠临床表现的观察和体重、四肢的肌力、血清肌酸激酶水平、骨骼肌HE染色结果的测定等综合方法评定是否造模成功。通过免疫组化法分别检测EAM小鼠及对照组小鼠肌肉组织中p53、SAT1、ALOX15蛋白表达水平。结果经综合方法判定,EAM组小鼠6只造模成功(1只死亡)。EAM模型组小鼠肌肉组织中p53、SAT1、ALOX15三种蛋白的阳性表达率及免疫组化表达评分均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。Pearson相关分析结果显示,p53分别与SAT1、ALOX15呈正相关(r=0.976,P=0.001;r=0.963,P=0.002),SAT1与ALOX15呈正相关(r=0.951,P=0.004)。结论p53/SAT1/ALOX15铁死亡通路蛋白可能参与了特发性炎性肌病的发病。 展开更多
关键词 特发性炎性肌病 铁死亡 p53基因 精脒/精胺n1-乙酰基转移酶1 花生四烯酸-15-脂加氧酶
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