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弓形虫重组耻垢分枝杆菌M.S-P30-ROP2载体活疫苗构建及鉴定 被引量：10
1
作者 高红刚 张佃波 +1 位作者 卞传秀 刘克义 《中国热带医学》 CAS 2007年第4期489-491,503,共4页
目的构建和鉴定弓形虫P30-ROP2复合基因重组耻垢分枝杆菌M.S载体活疫苗。方法用亚克隆技术把P30-ROP2复合基因克隆入大肠杆菌/分枝杆菌穿梭质粒pSTM3,构建重组质粒pSTM3-P30-ROP2,电穿孔法导入耻垢分枝杆菌中,潮霉素筛选、PCR法鉴定阳... 目的构建和鉴定弓形虫P30-ROP2复合基因重组耻垢分枝杆菌M.S载体活疫苗。方法用亚克隆技术把P30-ROP2复合基因克隆入大肠杆菌/分枝杆菌穿梭质粒pSTM3,构建重组质粒pSTM3-P30-ROP2,电穿孔法导入耻垢分枝杆菌中,潮霉素筛选、PCR法鉴定阳性转化子,温度诱导表达鉴定。结果获得pSTM3-P30-ROP2重组穿梭表达载体,SDS-PAGE结果显示P30-ROP2复合基因表达蛋白产物分子量约为66kDa。结论成功构建弓形虫复合抗原基因P30-ROP2重组耻垢分枝杆菌疫苗,为弓形虫病的防治提供了一种新方法。 展开更多
关键词 弓形虫 p30-rop2复合基因 耻垢分枝杆菌M.S 穿梭表达载体
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弓形虫p30-Rop2复合基因大肠杆菌／分枝杆菌穿梭质粒的构建
2
作者 程鹏 张佃波 +1 位作者 王海防 公茂庆 《实用医技杂志》 2007年第20期2707-2708,共2页
目的：构建弓形虫p30—Rop2复合基因大肠杆菌／分枝杆菌穿梭表达质粒。方法：利用PCR技术从已构建的pET30-p30-Rop2质粒扩增p30-Rop2复合基因片段，亚克隆于大肠杆菌／分枝杆菌穿梭质粒pSTM3，构建重组质粒pSTM3-p30-Rop2，并进行双酶... 目的：构建弓形虫p30—Rop2复合基因大肠杆菌／分枝杆菌穿梭表达质粒。方法：利用PCR技术从已构建的pET30-p30-Rop2质粒扩增p30-Rop2复合基因片段，亚克隆于大肠杆菌／分枝杆菌穿梭质粒pSTM3，构建重组质粒pSTM3-p30-Rop2，并进行双酶切鉴定和测序分析。结果：成功构建pSTM3-p30-Rop2重组穿梭表达载体，测序结果发现有一个碱基发生突变，但没有改变开放阅读框。结论：pSTM3-p30—Rop2穿梭质粒的成功构建为弓形虫分枝杆菌疫苗的研制提供了前提条件。 展开更多
关键词 弓形虫 p30-rop2复合基因 穿梭表达载体
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