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利用酵母双杂交筛选槟榔黄化相关病毒p26的宿主互作蛋白
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作者 梁泳琪 王雨天 +4 位作者 高保森 赵瑞白 王洪星 李瑾 曹先梅 《热带生物学报(中英文)》 2026年第1期91-100,共10页
槟榔黄化病(yellow leaf disease,YLD)是严重威胁海南槟榔(Areca catechu L.)产业的病害,其致病因子槟榔黄化相关病毒(areca palm velarivirus 1,APV1)编码的p26蛋白在病毒侵染中发挥关键作用,但是与其宿主相互作用的蛋白还未明确。本... 槟榔黄化病(yellow leaf disease,YLD)是严重威胁海南槟榔(Areca catechu L.)产业的病害,其致病因子槟榔黄化相关病毒(areca palm velarivirus 1,APV1)编码的p26蛋白在病毒侵染中发挥关键作用,但是与其宿主相互作用的蛋白还未明确。本研究采用酵母双杂交技术筛选槟榔cDNA文库,以p26为靶标筛选互作因子。成功构建pGBKT7-p26诱饵载体并通过毒性及自激活检测,确认其适用于互作筛选体系。之后通过筛库获得6个候选互作蛋白,包括Ras相关蛋白RABE1c、叶绿体铁蛋白(ferritin-4)、油棕应激蛋白PHOS34和三个未知功能蛋白。经复筛和测序比对,聚焦于含卷曲螺旋结构域的未知功能蛋白——卷曲螺旋结构域蛋白2(CHCHD2)。回转验证表明,p26与CHCHD2在酵母中存在特异性互作。生物信息学分析显示,CHCHD2分子式为C_(628)H_(1007)N_(201)O_(198)S_(8),分子质量14.8 kDa,属亲水性不稳定蛋白,二级结构以无规则卷曲为主,亚细胞定位预测定位于叶绿体,无信号肽及跨膜结构域。本研究揭示APV1的p26与宿主CHCHD2的互作关系,为解析p26在病毒侵染中的功能及CHCHD2介导的宿主防御机制提供了理论基础。 展开更多
关键词 槟榔黄化相关病毒 p26蛋白 酵母双杂交 宿主互作蛋白 CHCHD2
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绵羊肺炎支原体Y98 P26-P40融合基因的表达及免疫原性 被引量:2
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作者 刘文青 范琼瑛 +2 位作者 赵红艳 车腾飞 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1552-1558,共7页
根据猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae,Mhp)外膜蛋白P30基因和P46基因序列设计引物,通过PCR克隆了绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)标准株Y98膜蛋白P26基因和P40基因片段。通过对该序列的同源性分析表明MO P26基因与M... 根据猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae,Mhp)外膜蛋白P30基因和P46基因序列设计引物,通过PCR克隆了绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)标准株Y98膜蛋白P26基因和P40基因片段。通过对该序列的同源性分析表明MO P26基因与Mhp P30基因核酸序列同源性为79%,MO P40基因与Mhp P46基因核酸序列同源性为74%。分别将MO P26基因、MO P40基因以及P26-P40融合基因与原核表达载体pET28a连接构建了表达质粒pET28a-P26,pET28a-P40,pET28a-P26-P40,并转化受体菌BL21(DE3)得到重组菌株BL21(DE3)(pET28a-P26),BL21(DE3)(pET28a-P40),BL21(DE3)(pET28a-P26-P40)。经IPTG诱导后SDS-PAGE表明有26 000,40 000和66 000左右的目的条带出现;Western blotting表明表达的目的蛋白具有良好的反应原性;小鼠免疫试验表明重组菌株BL21(DE3)(pET28a-P26),BL21(DE3)(pET28a-P40),BL21(DE3)(pET28a-P26-P40)表达的蛋白对小鼠的保护率分别为90%,90%和100%;重组菌株BL21(DE3)(pET28a-P26-P40)表达的蛋白对绵羊的保护率为85%。本试验结果为研制绵羊肺炎支原体基因工程疫苗奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体Y98 p26 P40融合基因 基因表达 免疫原性
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马传染性贫血病毒p26蛋白单克隆抗体的制备 被引量:1
3
作者 韩秀娥 张萍 +4 位作者 王雪峰 李萌 魏萍 周建华 尹杰超 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期565-567,共3页
为制备马传染性贫血病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的EIAVp26蛋白作为免疫原免疫8周龄的BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,建立抗EIAV衣壳蛋白p26抗体的杂交瘤细胞。应用重组p26蛋白为抗原建立ELISA筛选方法,获... 为制备马传染性贫血病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的EIAVp26蛋白作为免疫原免疫8周龄的BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,建立抗EIAV衣壳蛋白p26抗体的杂交瘤细胞。应用重组p26蛋白为抗原建立ELISA筛选方法,获得两株能够稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为E11和F8。经试验证明,这些抗p26MAb均能够与感染驴胎皮肤细胞的EIAV和经SDS-PAGE分离的EIAV总蛋白中的p26蛋白结合。这两株p26蛋白MAb的获得将为EIAV的检测及鉴别诊断奠定基础。 展开更多
关键词 马传染性贫血病毒 p26蛋白 单克隆抗体
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汉赛巴尔通体P26蛋白基因克隆、分子特征及重组蛋白抗原特性分析
4
作者 李重阳 孟庆玲 +5 位作者 乔军 贡莎莎 王立霞 伍晔晖 才学鹏 陈创夫 《生物技术》 北大核心 2017年第5期422-427,共6页
[目的]研究汉赛巴尔通体(Bartonella henselae,Bh)P26蛋白的抗原特性。[方法]根据GenBank中Bh P26基因DNA序列设计特异性引物,对阳性猫血液样品进行PCR扩增,克隆测序后进行分子特征分析。构建表达载体pETP26,转化至感受态细胞E.coli BL2... [目的]研究汉赛巴尔通体(Bartonella henselae,Bh)P26蛋白的抗原特性。[方法]根据GenBank中Bh P26基因DNA序列设计特异性引物,对阳性猫血液样品进行PCR扩增,克隆测序后进行分子特征分析。构建表达载体pETP26,转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3)进行诱导表达;将重组蛋白纯化后免疫小鼠,用间接ELISA抗体检测试剂盒检测抗体,分析其免疫学特性。[结果]P26基因全长738 bp,编码246个氨基酸。推导的P26蛋白氨基酸序列含有4个潜在的N-糖基化位点、4个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2个N-豆蔻酰化位点和1个信号肽序列;抗原表位主要集中在106~190位。SDS-PAGE和Western Blot分析结果表明,表达的分子量为35 kDa,可与B h阳性血清发生反应;重组蛋白免疫小鼠后其血清样本Bh抗体检测结果为阳性。[结论]P26重组蛋白在大肠杆菌的高效表达且具有良好的反应和免疫原性,为进一步探讨P26蛋白在Bh感染诊断研究中的潜在价值提供前期基础。 展开更多
关键词 汉赛巴尔通体 p26蛋白基因 分子特征 抗原特性
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G_1期细胞周期调控因子CyclinE,p26^(kipl)与大肠癌
5
作者 杨彦 《西南国防医药》 CAS 2003年第2期218-220,共3页
关键词 G1期 细胞周期 调控因子 CYCLINE p26^kipl 大肠癌
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46,XY,add(3)(p26)伴发育迟缓智力低下一例
6
作者 徐彩霞 杨蕾 《中国优生与遗传杂志》 2015年第12期46-46,共1页
1病例 患者,男,3岁,第5胎第1产,孕41周顺产。母38岁,前3胎为药物引产,第4胎自然流产。孕早期先兆流产,保胎治疗,母孕期贫血,产前羊水穿刺检查,胎儿3号染色体异常。父母染色体核型正常,非近亲婚配,否认家族遗传病史。咨询医生,告知因染... 1病例 患者,男,3岁,第5胎第1产,孕41周顺产。母38岁,前3胎为药物引产,第4胎自然流产。孕早期先兆流产,保胎治疗,母孕期贫血,产前羊水穿刺检查,胎儿3号染色体异常。父母染色体核型正常,非近亲婚配,否认家族遗传病史。咨询医生,告知因染色体核型罕见,预后不详。出生体重3200g,身长51cm。 展开更多
关键词 羊水穿刺检查 早期先兆流产 智力低下 近亲婚配 XY add p26 自然流产 家族遗传病史 染色体异常 人工喂养
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山羊KRTAP26-1基因鉴定及其遗传特征研究 被引量:6
7
作者 车陇杰 王继卿 +6 位作者 Huitong Zhou 李涛 赵孟丽 胡江 刘秀 李少斌 罗玉柱 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期710-717,共8页
角蛋白关联蛋白(keratin-associated proteins,KAPs)是羊毛和羊绒的主要结构成分,决定了它们的理化性质。在人类、家犬、小鼠和大鼠中已描述了高硫蛋白KAP26-1的编码基因,但在山羊中该基因尚未被鉴定。本研究以人类KRTAP26-1基因编码... 角蛋白关联蛋白(keratin-associated proteins,KAPs)是羊毛和羊绒的主要结构成分,决定了它们的理化性质。在人类、家犬、小鼠和大鼠中已描述了高硫蛋白KAP26-1的编码基因,但在山羊中该基因尚未被鉴定。本研究以人类KRTAP26-1基因编码区序列为模板,利用BLAST软件,在山羊基因组中发现了与人类KRTAP26-1基因具有高度同源性的序列并被假定为山羊的KRTAP26-1基因。PCR-SSCP分析发现,在5个山羊群体的605个个体中有4条不同的核苷酸变异序列(定义为A-D)。序列同源性和进化树研究结果表明,这4条序列与已鉴定的其它山羊KRTAPs基因序列有较低的同源性,但与人类、家犬、小鼠和大鼠的KR-TAP26-1基因序列具有最高的同源性。这说明发现的这4条序列是山羊KRTAP26-1基因的等位基因。4个等位基因的编码区内,共发现了6个SNPs位点,其中3个是非同义突变,造成了氨基酸序列的变化。4条多肽链含有36-38个磷酸化位点。5个山羊群体均处于中度多态,但是等位基因频率分布在不同群体间有差异。等位基因A、B和D在5个山羊群体中均出现,但C在中卫山羊中没有出现。结果表明,山羊KR-TAP26-1基因有较为丰富的核苷酸序列变异,这些变异可能与绒山羊的产绒性能有关。 展开更多
关键词 KRTAp26-1 核苷酸序列变异 遗传特征 PCR-SSCP 山羊 产绒性能
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一株抗马传染性贫血病毒p26蛋白单克隆抗体识别差异表位鉴定
8
作者 常浩 胡哲 +3 位作者 戈曼 郭继珂 王晓钧 周建华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期152-154,共3页
为研究本实验室制备的抗马传染性贫血病毒(EIAV)p26蛋白单克隆抗体(MAb)1G11的B细胞表位识别特性,本研究通过对不同EIAV株p26蛋白进行系统进化分析,将其划分为3大分支群。根据已经鉴定的线性表位(命名为1G11),通过对3个分支群中的... 为研究本实验室制备的抗马传染性贫血病毒(EIAV)p26蛋白单克隆抗体(MAb)1G11的B细胞表位识别特性,本研究通过对不同EIAV株p26蛋白进行系统进化分析,将其划分为3大分支群。根据已经鉴定的线性表位(命名为1G11),通过对3个分支群中的8株代表性病毒株p26蛋白1G11表位区域分析,并原核表达8株病毒1G11表位区域多肽P26-(1~8),经SDS-PAGE和western blot鉴定,结果表明除表位多肽P26-7以外,其他多肽均能够被MAb 1G11所识别。分析显示P26-7多肽序列同时发生N^200S和M^215L变异。由于N^200S和M^215L单独改变并不影响MAb 1G11识别,因此我们推测N^200与M^215同时改变可能影响两侧末端半胱氨酸(C)及附近氨基酸所形成的表位构象,进而影响MAb 1G11识别;同时,其他氨基酸差异并不影响MAb 1G11识别,表明该抗体对1G11表位区域识别具有广谱性。这为进一步应用该MAb作为检测抗体和开发广谱性诊断检测方法提供了依据。 展开更多
关键词 马传染性贫血病毒 p26蛋白 单克隆抗体1G11 1G11表位
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家蚕核型多角体病毒p26基因及部分hr5区的克隆和序列分析 被引量:1
9
作者 张耀洲 吴祥甫 +1 位作者 李载平 李德葆 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期271-277,共7页
家蚕核型多角体病毒p26基因及部分hr5区的克隆和序列分析张耀洲,吴祥甫,李载平,李德葆(浙江农业大学生物技术研究所,杭州310029)关键词家蚕核型多角体病毒,核苷酸序列,p26基因,hr5家蚕核型多角体病毒(Bo... 家蚕核型多角体病毒p26基因及部分hr5区的克隆和序列分析张耀洲,吴祥甫,李载平,李德葆(浙江农业大学生物技术研究所,杭州310029)关键词家蚕核型多角体病毒,核苷酸序列,p26基因,hr5家蚕核型多角体病毒(Bombyxmorinuclearpo... 展开更多
关键词 家蚕 核型 多角体病毒 核苷酸 序列
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非霍奇金淋巴瘤患者P-gp、P26-bcl-2表达的临床研究 被引量:5
10
作者 傅小玉 于丁 +7 位作者 毛永荣 杨小玲 何家林 柯玉华 杨玲 蒋晖 吴昌鸣 邓华邦 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期310-312,共3页
目的 探讨多药耐药基因mdr 1及其蛋白P gp、凋亡抑制基因bcl 2及其相关蛋白P2 6 bcl 2在中、高度恶性非霍奇金淋巴瘤 (NHL)患者中表达的临床意义及潜在的预后价值。方法 应用免疫组织化学S P法对 6 0例NHL患者进行检测。结果  6 0... 目的 探讨多药耐药基因mdr 1及其蛋白P gp、凋亡抑制基因bcl 2及其相关蛋白P2 6 bcl 2在中、高度恶性非霍奇金淋巴瘤 (NHL)患者中表达的临床意义及潜在的预后价值。方法 应用免疫组织化学S P法对 6 0例NHL患者进行检测。结果  6 0例患者中P gp表达阳性者 15例 ,P2 6 bcl 2表达阳性者 2 5例。P gp和P2 6 bcl 2共同表达为阴性者的 3年生存率明显高于阳性表达者 (分别为48 48%和 15 .38% ,P =0 .0 38)。结论 P gp、P2 6 bcl 2表达与中、高度恶性NHL患者的化疗效果及预后相关。P gp和P2 6 bcl 2共同表达情况可作为预测中、高度恶性NHL患者化疗敏感性及预后的指标 。 展开更多
关键词 非霍奇金淋巴瘤 多药抗药性 基因表达 P-GP p26-bcl-2 预后
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急性白血病患者MRP、P26和P170表达与多药耐药关系的分析 被引量:3
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作者 赵瑜 于力 +4 位作者 楼方定 浦津 王永平 史子江 靳海杰 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期40-41,共2页
关键词 白血病 AML 多药耐药 MRP p26 P170
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肾小管细胞外泌体miR-26a-5p靶向巨噬细胞FGF21促进肾小管间质炎症
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作者 田英 丁弘 +1 位作者 李作林 朱进华 《东南大学学报(医学版)》 2026年第1期11-23,共13页
目的:探讨肾小管上皮细胞外泌体microRNA-26a-5p(miR-26a-5p)在调控巨噬细胞成纤维细胞生长因子21(FGF21)表达及其促进肾小管间质炎症中的作用机制。方法:采用单侧输尿管梗阻(UUO)模型和脂多糖(LPS)诱导脓毒症小鼠模型,通过外泌体分泌... 目的:探讨肾小管上皮细胞外泌体microRNA-26a-5p(miR-26a-5p)在调控巨噬细胞成纤维细胞生长因子21(FGF21)表达及其促进肾小管间质炎症中的作用机制。方法:采用单侧输尿管梗阻(UUO)模型和脂多糖(LPS)诱导脓毒症小鼠模型,通过外泌体分泌抑制、敲减miR-26a-5p及过表达FGF21等手段,结合逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、Western blotting、免疫组化、免疫荧光及荧光素酶实验,研究外泌体miR-26a-5p在肾小管上皮细胞与巨噬细胞间的信号传递作用。结果:体内实验显示,抑制外泌体分泌或敲减miR-26a-5p均减轻肾小管间质炎症,过表达FGF21缓解肾小管间质炎症。体外实验显示,抑制肾小管上皮细胞外泌体分泌及外泌体miR-26a-5p表达、过表达巨噬细胞FGF21均减轻LPS诱导的巨噬细胞炎症;荧光素酶报告基因显示miR-26a-5p特异性结合FGF21 mRNA。结论:肾小管上皮细胞分泌外泌体miR-26a-5p,靶向抑制巨噬细胞FGF21表达,促进肾小管间质炎症。 展开更多
关键词 肾小管间质炎症 肾小管上皮细胞 巨噬细胞 microRNA-26a-5p 成纤维细胞生长因子21 小鼠
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miR-26a-5p调控TLR4/MyD88/NF-κB通路对银屑病样皮损大鼠皮肤损伤和免疫炎症的影响
13
作者 雷卫 李蒙 +1 位作者 张峻 陈柳青 《临床皮肤科杂志》 北大核心 2026年第2期92-98,共7页
目的探究miR-26a-5p调控Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)4/髓样分化因子(myeloid differentiation primary response protein 88,MyD 88)/NF-κB通路对银屑病样皮损大鼠皮肤损伤和免疫炎症的影响。方法通过外用咪喹莫特(IMQ)乳膏的... 目的探究miR-26a-5p调控Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)4/髓样分化因子(myeloid differentiation primary response protein 88,MyD 88)/NF-κB通路对银屑病样皮损大鼠皮肤损伤和免疫炎症的影响。方法通过外用咪喹莫特(IMQ)乳膏的方法构建银屑病样皮损大鼠32只,将大鼠随机分为模型组、阴性对照组(NC agomir组)、miR-26a-5p过表达组(miR-26a-5p agomir组)及脂多糖(LPS)组(过表达miR-26a-5p+TLR4/MyD88/NF-κB通路激活剂LPS);另取仅剃毛处理的大鼠作为对照组,注射等量生理盐水。采用RT-qPCR法检测皮损组织中miR-26a-5p、TLR4 mRNA的表达;ELISA法检测皮损组织中IL-6、TNF-α、IL-1β的水平及血清中IgG、IgM、IgA的水平;Western blot法检测皮损组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验检测miR-26a-5p与TLR4的靶向关系。结果与对照组相比,模型组大鼠改良银屑病面积与严重程度指数(psoriasis area and severity index,PASI)评分,TLR4 mRNA,TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达,IL-6、TNF-α、IL-1β、IgM水平均升高(P<0.05);表皮增厚、过度角质化并伴随明显炎症细胞浸润;细胞miR-26a-5p表达、血清IgG、IgA水平均降低(P<0.05)。与模型组、NC agomir组相比,miR-26a-5p agomir组大鼠PASI评分,TLR4 mRNA,TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达,IL-6、TNF-α、IL-1β、IgM水平均降低(P<0.05);皮损组织病理损伤明显改善,炎症细胞浸润减轻;细胞miR-26a-5p表达、血清IgG、IgA水平均升高(P<0.05)。与miR-26a-5p agomir组相比,LPS组大鼠PASI评分,TLR4 mRNA,TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达,IL-6、TNF-α、IL-1β、IgM水平均升高(P<0.05);表皮增厚并存在明显炎症细胞浸润;血清IgG、IgA水平均降低(P<0.05)。与miR-NC+TLR4-WT组(共转染阴性对照+野生型TLR4)相比,miR-26a-5p mimics+TLR4-WT组(共转染过表达miR-26a-5p+野生型TLR4)细胞双荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。结论miR-26a-5p可能是通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路的激活,进而抑制银屑病样皮损大鼠皮肤损伤及免疫炎症。 展开更多
关键词 银屑病 miR-26a-5p TOLL样受体4 髓样分化因子88 NF-ΚB 皮肤损伤
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炙甘草汤调控miR-26b-5p/SMAD4通路对心房颤动大鼠模型心房重构的影响
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作者 刘魁智 宣学习 +2 位作者 周芃 袁孝伟 朱自强 《天津医药》 2026年第1期14-22,共9页
目的探讨炙甘草汤对心房颤动(AF)大鼠模型心房重构及微小RNA(miR)-26b-5p/母亲DPP同源物(SMAD)4通路的影响。方法构建AF大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为AF组、维拉帕米组、炙甘草汤低剂量(炙甘草汤-L)组、炙甘草汤高剂量(炙甘草汤-H... 目的探讨炙甘草汤对心房颤动(AF)大鼠模型心房重构及微小RNA(miR)-26b-5p/母亲DPP同源物(SMAD)4通路的影响。方法构建AF大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为AF组、维拉帕米组、炙甘草汤低剂量(炙甘草汤-L)组、炙甘草汤高剂量(炙甘草汤-H)组、炙甘草汤-H+anti-NC组、炙甘草汤-H+miR-26b-5p抑制剂(anti-miR-26b-5p)组,每组18只;另取18只健康大鼠作为对照组。检测各组大鼠心功能、体外AF诱发率;苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察心房组织病理变化;原位末端标记(TUNEL)染色检测心房组织心肌细胞凋亡情况;免疫组化检测心房组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;qRT-PCR检测miR-26b-5p相对表达水平;Western blot检测SMAD4、BCL-2相关X蛋白(BAX)、活化的胱天蛋白酶-3(C-caspase3)的表达;双萤光素酶实验验证miR-26b-5p与SMAD4的靶向关系。结果与对照组相比,AF组心房组织出现严重病理损伤,心肌细胞结构异常、肿胀稀疏排列紊乱、蓝色胶原沉积明显;左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)升高,左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(LVFS)降低;AF诱发率、胶原面积百分数、细胞凋亡率增加;BAX、C-caspase3、ColⅠ、α-SMA、SMAD4蛋白表达水平升高,miR-26b-5p水平降低(P<0.05)。与AF组相比,维拉帕米组、炙甘草汤-L组、炙甘草汤-H组治疗可逆转上述指标的变化趋势,减轻心房组织病理损伤,减少蓝色胶原沉积。炙甘草汤-H+anti-miR-26b-5p组可逆转炙甘草汤-H对AF大鼠模型心房重构的改善作用。Starbase网站及双萤光素酶基因报告结果显示,miR-26b-5p与SMAD4之间存在靶向关系。结论炙甘草汤可能通过上调miR-26b-5p进而抑制SMAD4表达,改善AF大鼠心房重构。 展开更多
关键词 心房颤动 心房重构 炙甘草汤 miR-26b-5p SMAD4
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创维液晶彩电P26TQI开关电源电路原理和维修图解
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作者 李城 《家电检修技术》 2014年第10期I0001-I0001,共1页
关键词 开关电源电路 p26TQI 液晶彩电
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TOSHIBA 35WP26P等离子电视机
16
《家庭影院技术》 2003年第1期8-8,共1页
关键词 TOSHIBA公司 35Wp26P 等离子电视机 “黑色采纹”技术
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野黄芩苷调控miR-26a-3p/Survivin分子轴对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响
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作者 黄建成 刘佳 +3 位作者 刘璞娟 董彦博 王军 李红英 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第5期1360-1367,共8页
目的探讨野黄芩苷(Scutellarin,Scu)调控miR-26a-3p/Survivin分子轴对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(Myocardial ischemia/reperfusion injury,MIRI)的影响及其机制。方法将50只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、野黄芩苷组(Scu... 目的探讨野黄芩苷(Scutellarin,Scu)调控miR-26a-3p/Survivin分子轴对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(Myocardial ischemia/reperfusion injury,MIRI)的影响及其机制。方法将50只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、野黄芩苷组(Scu)、miR-26a-3p激动剂组(agomir)和野黄芩苷+miR-26a-3p agomir组(Scu+agomir),每组10只。结扎大鼠冠状动脉前降支建立MIRI动物模型,各组大鼠于术前及术中分别给予20 mg/kg Scu或10 nmol agomir干预,Sham组和Model组大鼠给予等量溶剂。术后48 h,采用超声心动图检查大鼠心功能;苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠心肌组织病理学改变;生化试剂盒检测大鼠血清中心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(CreatinekinaseisoenzymeMB,CK-MB)、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)、心肌肌钙蛋白I(Cardiac troponin I,cTnI)水平以及心肌组织中氧化水平标志物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)含量;TUNEL染色检测大鼠心肌细胞凋亡水平;qRT-PCR检测大鼠心肌组织中miR-26a-3p及生存素(Survivin)mRNA表达水平;Western blot检测大鼠心肌组织中Survivin、细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子(p21)及cleaved-caspase 3蛋白表达水平。结果与Sham组比较,Model组大鼠心肌组织病理损伤严重,心功能LVEDP水平及血清中CK-MB、LDH、cTnI水平显著升高(P<0.01),LVESP、LVEF、LVFS水平显著降低(P<0.01);心肌组织细胞凋亡水平及MDA水平显著升高(P<0.01),SOD、GSH-Px水平显著降低(P<0.01);同时,心肌组织中miR-26a-3p及cleaved-caspase 3蛋白表达水平显著升高(P<0.01),而p21蛋白及Survivin mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与Model组比较,Scu组大鼠心肌组织病理损伤明显改善,心功能LVEDP水平及血清中CK-MB、LDH、cTnI水平显著升高(P<0.01),LVESP、LVEF、LVFS水平显著升高(P<0.01);心肌组织细胞凋亡水平及MDA水平显著降低(P<0.01),SOD、GSH-Px水平显著升高(P<0.01);同时,心肌组织中miR-26a-3p及cleaved-caspase 3蛋白表达水平显著降低(P<0.01),p21蛋白及Survivin mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。然而,使用miR-26a-3p激动剂干预可明显逆转Scu对大鼠MIRI的改善作用。结论Scu可改善MIRI大鼠心功能及心肌损伤,抑制心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调控miR-26a-3p/Survivin分子轴有关。 展开更多
关键词 野黄芩苷 心肌 缺血/再灌注损伤 miR-26a-3p 生存素
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血清LncRNA HCG11及miR-26b-5p与急性缺血性脑卒中患者脑梗死面积及功能预后的相关性 被引量:1
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作者 周静 孙军 +5 位作者 汪宁 刘义锋 李祥欣 高军 余洋 温昌明 《西南医科大学学报》 2025年第1期81-86,共6页
目的研究急性缺血性脑卒中患者血清长链非编码RNA人类白细胞抗原复合物组11(long non coding RNA human leukocyte antigen complex group 11,LncRNA HCG11)及微小核糖核酸-26b-5p(microRNA-26b-5p,miR-26b-5p)水平与脑梗死面积及功能... 目的研究急性缺血性脑卒中患者血清长链非编码RNA人类白细胞抗原复合物组11(long non coding RNA human leukocyte antigen complex group 11,LncRNA HCG11)及微小核糖核酸-26b-5p(microRNA-26b-5p,miR-26b-5p)水平与脑梗死面积及功能预后的相关性。方法选取2021年1月至2022年12月本院收治的急性缺血性脑卒中患者106例,根据梗死面积将其分为小面积组、中面积组和大面积组,随访1年后根据改良Rankin量表(modified Rankin Scale,mRS)分为预后良好组和预后不良组。采用qRT-PCR检测LncRNA HCG11,miR-26b-5p相对表达量;采用Logistic回归分析影响患者预后的因素;绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析LncRNA HCG11和miR-26b-5p对患者梗死面积的诊断及对预后的预测价值。采用Spearman相关分析LncRNA HCG11、miR-26b-5p与梗死面积及美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NHISS)的相关性。结果急性缺血性脑卒中大面积梗死患者的LncRNA HCG11水平升高,miR-26b-5p水平降低(P<0.05);与预后良好患者相比,预后不良患者的LncRNA HCG11水平升高,miR-26b-5p水平降低(P<0.05);不同梗死面积患者高血压史、高血脂史以及NHISS评分、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)之间比较,差异具有统计学意义(P<0.05);LncRNA HCG11与梗死面积及NHISS均呈正相关(r_(梗死面积)=0.553,P_(梗死面积)<0.001;r_(NHISS)=0.462,P_(NHISS)<0.001),miR-26b-5p与梗死面积及NHISS均呈负相关(r'_(梗死面积)=-0.534,P'_(梗死面积)<0.001;r'_(NHISS)=-0.447,P'_(NHISS)<0.001);miR-26b-5p为影响患者预后不良的保护因素,高血压史、NHISS评分、CRP和LncRNA HCG11为患者预后不良的影响因素(P<0.05);LncRNA HCG11和miR-26b-5p及联合诊断患者梗死面积优于单独指标诊断(Z_(LncRNA HCG11)=3.049,P_(LncRNA HCG11)=0.002;Z_(miR-26b-5p)=2.657,P_(miR-26b-5p)=0.008,AUC=0.937);且LncRNA HCG11+miR-26b-5p对患者预后的预测能力显著优于LncRNA HCG11、miR-26b-5p、CRP、NHISS单独指标(Z_(LncRNA HCG11)=2.207,P_(LncRNA HCG11)=0.027;Z_(miR-26b-5p)=2.080,P_(miR-26b-5p)=0.038;Z_(CRP)=2.341,P_(CRP)=0.019;Z_(NHISS)=2.093,P_(NHISS)=0.036,AUC=0.892);LncRNA HCG11与miR-26b-5p呈负相关(r=-0.425,P<0.05)。结论急性缺血性脑卒中患者血清LncRNA HCG11水平升高,miR-26b-5p水平降低,均为患者脑梗死面积及功能预后的影响因素,对患者脑梗死面积及功能预后具有一定的诊断及预测价值。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 长链非编码RNA人类白细胞抗原复合物组11 微小核糖核酸-26b-5p 脑梗死面积 预后 相关性
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精浆外泌体miR-26a-5p靶向PTEN调控特发性畸形精子症的分子机制及诊断价值
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作者 刘春辉 吴瑞鹏 +2 位作者 王志强 陕文生 李少君 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第20期3256-3266,共11页
目的探讨精浆外泌体miR-26a-5p及其靶基因在特发性畸形精子症中的作用机制,揭示其调控精子形态异常的通路,为临床诊断和靶向干预提供依据。方法采用病例对照研究设计,纳入154例男性受试者(畸形精子症组TZS 84例,正常对照组NC 70例)。通... 目的探讨精浆外泌体miR-26a-5p及其靶基因在特发性畸形精子症中的作用机制,揭示其调控精子形态异常的通路,为临床诊断和靶向干预提供依据。方法采用病例对照研究设计,纳入154例男性受试者(畸形精子症组TZS 84例,正常对照组NC 70例)。通过精浆外泌体分离,筛选差异表达miRNA,分析预测靶基因及信号通路。利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-26a-5p与PTEN的直接结合作用,通过实时荧光定量PCR、Western blot检测miRNA及蛋白表达水平。采用Spearman相关性分析评估miR-26a-5p、PTEN与精子形态参数的关系,并通过ROC曲线分析诊断效能。结果精浆外泌体miRNA测序共鉴定出11种差异表达miRNA,其中miR-26a-5p在TZS组显著上调(P<0.05),且与TZS组的正常形态精子占比呈负相关(r=-0.762,P<0.05)。PTEN为miR-26a-5p的直接靶基因,其表达在TZS组显著降低(P<0.05),并与TZS组的精子正常形态率呈正相关(r=0.821,P<0.05)。miR-26a-5p与PTEN呈负相关(r=-0.878,P<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-26a-5p可特异性抑制PTEN 3'UTR活性(荧光素酶活性降低45%,P<0.05)。功能富集分析显示,miR-26a-5p-PTEN轴通过调控PI3K/AKT/mTOR、p53、Wnt/β-catenin及NF-κB通路,加剧氧化应激、DNA损伤及精子细胞分裂异常。ROC曲线分析表明,miR-26a-5p与PTEN对畸形精子症的诊断效能分别为AUCROC=0.785(灵敏度78.9%,特异度71.3%)和AUCROC=0.754(灵敏度73.3%,特异度75.1%)。结论miR-26a-5p通过靶向抑制PTEN,激活PI3K/AKT/mTOR等通路并抑制DNA修复功能,导致氧化应激积累及精子形态异常。精浆外泌体miR-26a-5p高表达与PTEN低表达的组合模式显示出对特发性畸形精子症的诊断潜力,其分子机制为标志物开发提供了理论依据。靶向沉默miR-26a-5p或联合AKT/mTOR抑制剂及抗氧化治疗,可能成为改善精子形态的新策略。 展开更多
关键词 精浆外泌体 畸形精子症 miR-26a-5p PTEN 分子机制
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精浆miR-26a-5p靶向调控PTEN基因对精子DNA完整性的影响
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作者 刘春辉 陕文生 +5 位作者 王志强 李少君 朱晨 王海 周于娜 吴瑞鹏 《中华男科学杂志》 2025年第9期780-790,共11页
目的:通过分析精子DNA碎片指数(DFI)正常者与异常者的精浆差异性miRNA,寻找可能影响精子DNA完整性的miRNA以及靶基因,并尝试分析其可能的作用机制。方法:收集161例研究对象,根据DFI检测结果分为正常对照组、DFI中等组和DFI异常组。通过m... 目的:通过分析精子DNA碎片指数(DFI)正常者与异常者的精浆差异性miRNA,寻找可能影响精子DNA完整性的miRNA以及靶基因,并尝试分析其可能的作用机制。方法:收集161例研究对象,根据DFI检测结果分为正常对照组、DFI中等组和DFI异常组。通过miRNA芯片分析,查找出差异性miRNA。经生物信息分析以及靶基因预测,找出与精子DFI相关的miRNA以及特异性靶基因。对比各组差异性miRNA及靶基因的相对表达量,探讨其差异性表达对精子DFI产生何种影响。结果:经miRNA芯片分析,共检测出11种差异性miRNA。生信分析提示miR-26a-5p可能与精子DNA完整性降低有关;基因预测提示PTEN是miR-26a-5p的特异性靶基因。相较于正常对照组,DFI中等组与DFI异常组的miR-26a-5p相对表达量均表现为降低,而PTEN的相对表达量均表现为升高。miR-26a-5p相对表达量在各组当中均与DFI呈现出负性相关,PTEN相对表达量在DFI中等组和DFI异常组当中与DFI呈现出正性相关。DFI中等组miR-26a-5p的AUC ROC为0.740(P<0.05),敏感度为73.6%,特异性为71.5%;PTEN的AUC ROC为0.797(P<0.05),敏感度为76.5%,特异性为78.4%。DFI异常组miR-26a-5p的AUC ROC为0.848(P<0.05),敏感度为81.3%,特异性为78.1%;PTEN的AUC ROC为0.763(P<0.05),敏感度为77.2%,特异性为80.2%。结论:miR-26a-5p可以通过负向调控PTEN的表达来影响精子DNA完整性,精浆miR-26a-5p与PTEN的相对表达量对精子DNA完整性受损具有良好的诊断价值,有助于精子DFI异常的病因学诊断和预后分析,为研究、诊断无明确诱因的精子DFI异常提供诊治思路。 展开更多
关键词 精子DNA碎片指数 精浆 miR-26a-5p PTEN 差异性表达
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