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题名动物乳腺特异表达载体的构建及其表达特性研究
被引量：11
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作者
孙怀昌
陈刚
张磊
宋红芹
施伟庆
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机构
扬州大学江苏省转基因动物制药工程研究中心
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出处
《江苏农学院学报》
CSCD
2003年第4期1-4,共4页
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基金
国家教育部骨干教师培养计划项目(2000-06)
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文摘
为了研制动物乳腺生物反应器,用中国奶山羊β-乳球蛋白基因的5’-、3’-侧翼区和β-酪蛋白基因的第1内含子构建动物乳腺特异表达载体p205C3。细胞表达试验结果显示,p205C3载体能够指导lacZ基因在SV40 T基因转化的山羊乳腺上皮细胞中表达,不能指导该基因在COS-1细胞和山羊成纤维细胞中表达。将人激肽释放酶(hKLK1)cDNA克隆入p205C3载体,用获得的重组载体p205C3KLK1注射哺乳期小鼠,然后取其心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、胰腺和乳汁,酶活性测定结果显示,乳汁中的酶活性高达255.65 U·mL-1,其他组织中的酶活性与正常小鼠无差异。结果表明:p205C3载体不仅能有效地指导外源基因在山羊乳腺细胞和小鼠乳腺中表达,而且表达具有较好的组织特异性,可以用于动物乳腺生物反应器的研制。
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关键词
转基因动物乳腺生物反应器
特异表达载体
组织特异性
p205c3
细胞表达
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Keywords
goat
mice
mammary gland-specific expression vector
construction
in vitro and in vivo expression
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分类号
TQ464
[化学工程—制药化工]
Q786
[生物学—分子生物学]
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