根据GenBank上的禽呼肠病毒（ARV）S1基因序列，设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物，对13个ARV毒株进行RT—PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示，13个ARV毒株的P10蛋白基因ORF全长均为297bp，编码98个氨基酸；P1...根据GenBank上的禽呼肠病毒（ARV）S1基因序列，设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物，对13个ARV毒株进行RT—PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示，13个ARV毒株的P10蛋白基因ORF全长均为297bp，编码98个氨基酸；P17蛋白基因ORF全长为441bp，编码146个氨基酸。这13个ARV毒株P10、P17蛋白基因核苷酸同源性分别在96．6%～100%和95．2％～99．3%之间，推导的氨基酸同源性分别在98．2％～100%和91．9%～99．0%之间。将这13个ARV毒株与Gen Bank上其他正呼肠病毒毒株，包括番鸭株（DRV）和飞狐上分离到的内尔森海湾病毒（Nelson Bay Vir US，NBV）及两个澳洲分离株（ARM—1和SOM-4）进行同源性比较和遗传进化树分析，结果表明，呼肠病毒有地域和种类的差别。展开更多
目的探讨细胞色素P450c17a酶(CYP17A1)在人神经胶质瘤细胞系T98G、U87和U251中的表达情况。方法采用Western blot和实时荧光定量PCR于蛋白质水平和mRNA水平检测细胞色素P450c17a酶(CYP17A1)在三种人胶质瘤细胞系中的表达。结果 Western ...目的探讨细胞色素P450c17a酶(CYP17A1)在人神经胶质瘤细胞系T98G、U87和U251中的表达情况。方法采用Western blot和实时荧光定量PCR于蛋白质水平和mRNA水平检测细胞色素P450c17a酶(CYP17A1)在三种人胶质瘤细胞系中的表达。结果 Western blot检测出CYP17A1蛋白在胶质瘤细胞系T98G、U251和U87中的相对表达量为0.518±0.052、0.460±0.034和0.142±0.025。T98G和U251的CYP17A1蛋白表达水平明显高于U87,差异有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果显示CYP17A1的mRNA在T98G、U251和U87中相对转录水平为1.000±0.122、0.960±0.079、0.611±0.045,T98G和U251细胞中CYP17A1的mRNA转录水平均高于U87,差异有统计学意义(P<0.05)。同时Western blot和实时荧光定量PCR都指出T98G和U251在CYP17A1在蛋白和mRNA的表达上无统计学差异(P>0.05)。结论人胶质瘤细胞系T98G和U251中CYP17A1的表达量较高,这两种细胞系可作为良好的细胞模型用来研究CYP17A1在胶质瘤中的作用机制以及以CYP17A1为靶点的肿瘤治疗等。展开更多
文摘根据GenBank上的禽呼肠病毒（ARV）S1基因序列，设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物，对13个ARV毒株进行RT—PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示，13个ARV毒株的P10蛋白基因ORF全长均为297bp，编码98个氨基酸；P17蛋白基因ORF全长为441bp，编码146个氨基酸。这13个ARV毒株P10、P17蛋白基因核苷酸同源性分别在96．6%～100%和95．2％～99．3%之间，推导的氨基酸同源性分别在98．2％～100%和91．9%～99．0%之间。将这13个ARV毒株与Gen Bank上其他正呼肠病毒毒株，包括番鸭株（DRV）和飞狐上分离到的内尔森海湾病毒（Nelson Bay Vir US，NBV）及两个澳洲分离株（ARM—1和SOM-4）进行同源性比较和遗传进化树分析，结果表明，呼肠病毒有地域和种类的差别。
文摘目的探讨细胞色素P450c17a酶(CYP17A1)在人神经胶质瘤细胞系T98G、U87和U251中的表达情况。方法采用Western blot和实时荧光定量PCR于蛋白质水平和mRNA水平检测细胞色素P450c17a酶(CYP17A1)在三种人胶质瘤细胞系中的表达。结果 Western blot检测出CYP17A1蛋白在胶质瘤细胞系T98G、U251和U87中的相对表达量为0.518±0.052、0.460±0.034和0.142±0.025。T98G和U251的CYP17A1蛋白表达水平明显高于U87,差异有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果显示CYP17A1的mRNA在T98G、U251和U87中相对转录水平为1.000±0.122、0.960±0.079、0.611±0.045,T98G和U251细胞中CYP17A1的mRNA转录水平均高于U87,差异有统计学意义(P<0.05)。同时Western blot和实时荧光定量PCR都指出T98G和U251在CYP17A1在蛋白和mRNA的表达上无统计学差异(P>0.05)。结论人胶质瘤细胞系T98G和U251中CYP17A1的表达量较高,这两种细胞系可作为良好的细胞模型用来研究CYP17A1在胶质瘤中的作用机制以及以CYP17A1为靶点的肿瘤治疗等。
