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六味地黄丸含药血清对β-淀粉样蛋白损伤PC12细胞中FoxO3a/p-FoxO3a蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 袁永 宋军营 +5 位作者 王丛笑 贾亚泉 谢治深 蔡菊 房红锴 张振强 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第1期320-327,共8页
目的观察不同浓度β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein25-35,Aβ_(25-35))和六味地黄丸含药血清(medicated serum of Liuwei Dihuang Pill,MSLDP)对PC12(pheochromocytoma cells)细胞及FoxO3a(Forkhead box protein O 3a)、p-FoxO3a蛋白表... 目的观察不同浓度β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein25-35,Aβ_(25-35))和六味地黄丸含药血清(medicated serum of Liuwei Dihuang Pill,MSLDP)对PC12(pheochromocytoma cells)细胞及FoxO3a(Forkhead box protein O 3a)、p-FoxO3a蛋白表达的影响,研究六味地黄丸含药血清预处理对Aβ_(25-35)损伤AD(Alzheimer’s disease)细胞模型的保护作用。方法配制Aβ_(25-35)母液和制备六味地黄丸含药血清,用含有不同浓度的Aβ_(25-35)(10μmol·L^(-1)、20μmol·L^(-1)、40μmol·L^(-1))和六味地黄丸含药血清(2.5%、5%、10%、20%、30%)的培养基培养PC12细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,同时观察细胞形态的变化,免疫印迹法检测细胞中FoxO3a及p-FoxO3a蛋白表达量的变化。取合适浓度的六味地黄丸含药血清预处理Aβ_(25-35)诱导的AD细胞模型,观察细胞形态、活力及FoxO3a、p-FoxO3a表达量的变化。结果①Aβ_(25-35)显著降低PC12细胞存活率(P<0.01),并造成细胞形态的改变,细胞内p-FoxO3a表达量降低,而FoxO3a的表达升高。②六味地黄丸含药血清显著提高PC12细胞存活率(P<0.01),并促使细胞增加分化趋势,细胞内FoxO3a表达降低,而p-FoxO3a的表达随着血清浓度的增加而增加。③六味地黄丸含药血清预处理能够明显降低Aβ_(25-35)对PC12细胞的损伤,与模型组相比,六味地黄丸含药血清干预组FoxO3a的蛋白表达降低(P<0.01),p-FoxO3a的蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论六味地黄丸含药血清能够提高AD细胞模型的细胞活性,对PC12细胞具有明显的保护作用,磷酸化FoxO3a蛋白表达水平的提高可能是其相关的作用机制。 展开更多
关键词 六味地黄丸 阿尔茨海默病 AΒ25-35 FoxO3a/p-foxo3a 保护作用
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黄芪-地龙调节pJNK/pSTAT3/pFOXO1氧化应激通路干预肺纤维化的机制研究 被引量:1
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作者 胡艾悦 张珍珍 +5 位作者 胡诗维 刘珊 柯孟婷 夏慧 陈龙云 陈会敏 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第10期1838-1847,共10页
目的探讨黄芪-地龙药对治疗肺纤维化的作用机制。方法利用中药数据库以及疾病靶点数据库分别收集黄芪-地龙有效成分和肺纤维化疾病靶点,将交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,选取FOXO信号通路潜在靶点与药对主要有效成分进行分子对... 目的探讨黄芪-地龙药对治疗肺纤维化的作用机制。方法利用中药数据库以及疾病靶点数据库分别收集黄芪-地龙有效成分和肺纤维化疾病靶点,将交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,选取FOXO信号通路潜在靶点与药对主要有效成分进行分子对接。动物模型验证,博来霉素气管灌注建立肺纤维化(PF)模型,分为正常组、模型组、治疗组和阳性对照组。取各组小鼠肺组织进行HE、Masson染色观察,ELISA法检测血清炎症因子、羟脯氨酸和氧化应激相关指标,流式细胞术检测活性氧表达及线粒体膜电位,Western blot检测FOXO1/p-FOXO1、JNK/p-JNK和STAT3/p-STAT3蛋白表达。结果黄芪地龙药对与PF相互作用的潜在靶点蛋白主要有FOXO、JNK、STAT3。动物实验显示气管滴注BLM后成功诱导了小鼠肺纤维化模型,Masson染色显示出现肺纤维化典型特征,黄芪-地龙治疗后小鼠肺部结构损坏减轻,纤维化特征缓解。ELISA结果显示MDA水平下降,SOD、POD表达增加,TGF-β、IL-2及IL-6水平下降,线粒体ComplexⅤ(ATP合酶)活性及ATP含量增加。WB检测显示治疗组p-JNK/p-STAT3/p-FOXO1水平降低。结论黄芪-地龙通过调节p-JNK/p-STAT3/p-FOXO1信号通路解除FOXO1钝化,发挥抗氧化应激作用,改善线粒体功能,降低炎症反应,抑制细胞外基质沉积从而治疗PF。 展开更多
关键词 黄芪-地龙 肺纤维化 p-JNK/p-STAT3/p-foxo1 氧化应激
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AKT/FoxO3a通路在白藜芦醇抑制大鼠肾脏间质纤维化中的作用 被引量:2
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作者 孙荣嵘 冯小华 +3 位作者 王婷婷 刘楠 张瑞城 钟良宝 《药物评价研究》 CAS 2019年第11期2165-2168,共4页
目的探讨蛋白激酶B (Akt)/FoxO3a通路在白藜芦醇抑制肾脏纤维化中的作用。方法将55只SD大鼠随机分为假手术组(10只)和造模组(45只),采用单侧输尿管梗阻法构建大鼠肾间质纤维化模型,45只造模SD大鼠术后随机分为模型组和白藜芦醇(20、40 m... 目的探讨蛋白激酶B (Akt)/FoxO3a通路在白藜芦醇抑制肾脏纤维化中的作用。方法将55只SD大鼠随机分为假手术组(10只)和造模组(45只),采用单侧输尿管梗阻法构建大鼠肾间质纤维化模型,45只造模SD大鼠术后随机分为模型组和白藜芦醇(20、40 mg/kg)干预组,每组15只。干预组大鼠于术后ig白藜芦醇20、40 mg/kg,1次/d,持续2周。模型组大鼠ig等量生理盐水。HE、Masson染色观察肾组织病理变化,免疫组化检测α-SMA阳性细胞,Western blot检测Akt、p-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a蛋白。结果假手术组、模型组、白藜芦醇20 mg/kg干预组和白藜芦醇40 mg/kg干预组肾小管损伤病理评分分别为(0.36±0.05)、(4.07±0.53)、(3.92±0.48)和(3.21±0.35),其中白藜芦醇20 mg/kg干预组与模型组间无显著性差异,假手术组评分显著低于白藜芦醇干预组(P<0.05),白藜芦醇40 mg/kg干预组又显著低于造模对照组(P<0.05)。假手术组、模型组和白藜芦醇40 mg/kg干预组α-SMA阳性细胞比例分别为(3.84±0.62)%、(52.36±14.27)%和(26.15±4.63)%,3组间具有显著性差异(P<0.01)。FoxO3a和Akt蛋白表达三组间无显著性差异,p-Akt和pFoxO3a蛋白表达在模型组SD大鼠显著减低,但白藜芦醇40 mg/kg干预组p-Akt和p-FoxO3a蛋白表达高于模型组,低于假手术组。结论白藜芦醇可以减低p-Akt和p-FoxO3a蛋白表达,发挥抗肾间质纤维化作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 AKT/FoxO3a通路 大鼠 肾间质纤维化 P-AKT p-foxo3a
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p-AKT、FOXO3a、Bim在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义 被引量:2
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作者 胡晓静 李红雨 +3 位作者 余亚南 刘星烁 韩会会 曹蒙 《中国妇幼保健》 CAS 2017年第6期1304-1308,共5页
目的研究上皮性卵巢癌组织中FOXO3a、Bim mRNA及p-AKT、FOXO3a、Bim蛋白的表达情况及与临床病理学特征之间的关系。方法用Real time-PCR法检测FOXO3a、Bim在25例正常卵巢上皮组织(正常组)、21例良性卵巢肿瘤组织(良性组)及43例上皮性卵... 目的研究上皮性卵巢癌组织中FOXO3a、Bim mRNA及p-AKT、FOXO3a、Bim蛋白的表达情况及与临床病理学特征之间的关系。方法用Real time-PCR法检测FOXO3a、Bim在25例正常卵巢上皮组织(正常组)、21例良性卵巢肿瘤组织(良性组)及43例上皮性卵巢癌组织(恶性组)中的mRNA表达情况;用免疫组化法检测3种组织中的p-AKT、FOXO3a、Bim蛋白表达情况。结果 1FOXO3a在正常组、良性组、恶性组中mRNA表达水平无统计学差异(P>0.05);Bim在正常组、良性组、恶性组中mRNA表达水平依次降低(P<0.05)。2p-AKT在正常组、良性组、恶性组中蛋白表达水平依次升高(P<0.05);FOXO3a、Bim在正常组、良性组、恶性组中蛋白表达水平依次降低(P<0.05)。3FOXO3a与p-AKT蛋白表达水平呈负相关(r=-0.584,P<0.05);FOXO3a与Bim蛋白表达水平呈正相关(r=0.437,P<0.05)。4FOXO3a蛋白的表达水平与肿瘤病理分级相关,而与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期等临床病理特征之间均无明显相关性(P>0.05)。结论 p-AKT、FOXO3a、Bim可能与上皮性卵巢癌的发生发展有关。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 P-AKT FOXO3a BIM
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网络药理学结合动物实验探讨二仙汤对顺铂诱导的卵巢衰老大鼠骨骼肌保护作用及其分子机制
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作者 尤凤鸣 陈瑶 +2 位作者 陈思 王宁 赵丕文 《环球中医药》 2025年第1期27-36,共10页
目的通过网络药理学分析和动物实验研究,预测并验证二仙汤通过雌激素受体介导磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/叉头框蛋白O(forkhead box O,FoxO)信号通路对顺铂诱导卵巢衰老... 目的通过网络药理学分析和动物实验研究,预测并验证二仙汤通过雌激素受体介导磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/叉头框蛋白O(forkhead box O,FoxO)信号通路对顺铂诱导卵巢衰老大鼠骨骼肌的保护作用及其分子机制。方法利用网络药理学方法筛选二仙汤的有效成分及其靶点和肌肉质量下降(肌肉减少)的相关靶基因,将筛选出的关键靶点进行京都基因与基因组百科全书和基因本体论富集分析。动物实验选取40只7周龄SD雌性大鼠,随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照(戊酸雌二醇)组、二仙汤低剂量组、二仙汤高剂量组,每组8只。除正常对照组外,剩余各组均采取腹腔注射顺铂制备卵巢衰老模型,正常对照组与模型对照组灌胃生理盐水,二仙汤低剂量组与二仙汤高剂量组每天分别予以7.8 g/kg、15.6 g/kg灌胃,阳性对照组每天给予戊酸雌二醇0.09 mg/kg灌胃,各组持续给药28天。28天实验结束后麻醉、取材。苏木精—伊红染色法染色观察大鼠后肢骨骼肌形态学变化,并计算骨骼肌横截面面积;蛋白印迹法检测PI3K/Akt/FoxO信号通路相关蛋白表达情况。结果(1)网络药理学检测结果表明,二仙汤治疗肌少症的主要通路有雌激素信号通路、PI3K/Akt信号通路、FoxO信号通路等。(2)动物实验结果表明:与空白对照组相比,模型对照组骨骼肌肌纤维横截面积明显降低(P<0.05);与模型对照组相比较,二仙汤低剂量组骨骼肌肌纤维横截面积明显增加(P<0.05),阳性对照组和二仙汤低剂量组磷酸化FoxO3a及磷酸化Akt/Akt蛋白表达显著升高(P<0.01),二仙汤低剂量组PI3K及B淋巴细胞瘤-2蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论二仙汤可以明显改善顺铂诱导的卵巢衰老大鼠骨骼肌肌肉质量,其作用机制与激活雌激素受体介导的PI3K/Akt/磷酸化FoxO3a信号传导通路和抗凋亡作用密切相关。 展开更多
关键词 二仙汤 雌激素 顺铂 肌肉质量下降 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/磷酸化叉头框蛋白O3a
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