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电针对原发性痛经大鼠A20/NF-κB/NLRP3/GSDMD信号通路的影响
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作者 薛晓 刘鑫 +10 位作者 刘余 黄艳 江钰 李海英 金浩霖 岳铭坤 夏飞雁 杜政泉 李婧美 邓琪 唐艳华 《针刺研究》 北大核心 2026年第2期161-168,共8页
目的:探讨电针“关元”“三阴交”对原发性痛经(PDM)大鼠泛素编辑酶A20(A20)/核转录因子-κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/Gasdermin D蛋白(GSDMD)信号通路的影响。方法:雌性未孕SD大鼠被随机分为空白组、模型组... 目的:探讨电针“关元”“三阴交”对原发性痛经(PDM)大鼠泛素编辑酶A20(A20)/核转录因子-κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/Gasdermin D蛋白(GSDMD)信号通路的影响。方法:雌性未孕SD大鼠被随机分为空白组、模型组、电针组、布洛芬组,6只/组。苯甲酸雌二醇和缩宫素联合构建PDM模型。电针组造模同时电针“关元”“三阴交”,每次20 min,每日1次,连续10 d。布洛芬组从造模开始用布洛芬溶液(0.8 mL/只)灌胃治疗,1次/d,连续治疗10 d。扭体反应观察大鼠行为学;HE染色观察子宫病理改变;ELISA法检测血清炎性因子前列腺素F2α(PGF2α)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Western blot法检测各组大鼠子宫组织A20、磷酸化核转录因子κB p65(p-NF-κB p65)、NF-κB p65、NLRP3、半胱天冬酶-1(Caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)、GSDMD、Gasdermin D氮端结构域(GSDMD-N)蛋白表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠扭体次数和评分均增加(P<0.05,P<0.01),并出现扭体潜伏期(P<0.01);与模型组比较,电针组与布洛芬组大鼠扭体次数、评分均降低(P<0.05),且扭体潜伏期增长(P<0.01)。空白组子宫组织的黏膜上皮层完整,无明显水肿;模型组大量宫腔上皮坏死,子宫内膜伴有严重的水肿,中性粒细胞增多;电针组和布洛芬组子宫内膜水肿和炎性病理损伤明显缓解。与空白组比较,模型组大鼠血清PGF2α、TNF-α含量,子宫组织p-NF-κB p65、NF-κB p65、NLRP3、IL-1β、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01),A20蛋白表达量下降(P<0.01);与模型组比较,电针组血清PGF2α、TNF-α含量,子宫组织p-NF-κB p65、NF-κB p65、NLRP3、GSDMD、GSDMD-N蛋白水平均降低(P<0.05,P<0.01),A20蛋白表达量升高(P<0.01)。电针组与布洛芬组上述指标相比差异无统计学意义。结论:电针对PDM大鼠的抗炎机制可能与其启动A20介导的NF-κB信号通路负反馈调控途径,抑制NF-κB/NLRP3/GSDMD信号通路有关。 展开更多
关键词 原发性痛经 电针 泛素编辑酶 核转录因子-ΚB 炎性反应
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光暴露对心力衰竭模型大鼠神经递质释放的影响及其分子机制
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作者 阮琳 李佳 +5 位作者 施丽南 朱红 吴东宁 郑迪 李雨鹏 赵妍 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第18期4649-4662,共14页
背景:心力衰竭发生发展与神经内分泌系统的异常激活密切相关。研究表明光暴露能够降低大鼠大脑中的多巴胺水平,进一步增强下丘脑室旁核内多巴胺能神经元的活动,从而促进促肾上腺皮质激素释放因子的释放。现并无直接证据证实光暴露会诱... 背景:心力衰竭发生发展与神经内分泌系统的异常激活密切相关。研究表明光暴露能够降低大鼠大脑中的多巴胺水平,进一步增强下丘脑室旁核内多巴胺能神经元的活动,从而促进促肾上腺皮质激素释放因子的释放。现并无直接证据证实光暴露会诱发心力衰竭。目的:探究光暴露对心力衰竭模型大鼠神经递质释放的影响及其分子机制,并进行细胞学验证。方法:①动物实验:将行心力衰竭造模的SD大鼠分为模型组、光暴露模型组、光暴露治疗组,将假手术大鼠分为光暴露对照组和空白组,每组各6只。8周实验结束后,使用ELISA检测光暴露对心衰大鼠血清神经递质、激素水平的影响,苏木精-伊红染色观察心脏病理变化;Western Blot检测核因子E2相关因子2/血红素氧化酶1/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶1信号通路的调节作用。②细胞实验:将小鼠心肌细胞(HL-1细胞)分为空白组、5-羟色胺高剂量对照组(5-羟色胺500 mg/mL)、脂多糖低剂量组(脂多糖1μg/mL)、脂多糖+5-羟色胺高剂量组(5-羟色胺500 mg/mL+脂多糖1μg/mL)、ML385组(脂多糖1μg/mL+5-羟色胺500 mg/mL+核因子E2相关因子2抑制剂ML385为2.5μg/mL)、白藜芦醇组(脂多糖1μg/mL+5-羟色胺500 mg/mL+核因子E2相关因子2激动剂白藜芦醇30μg/mL),干预36 h,考察各干预条件对于细胞增殖的影响,利用Western Blot方法,验证5-羟色胺对HL-1细胞核因子E2相关因子2/血红素氧化酶1/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶1信号轴的影响。结果与结论:①光暴露能提升心力衰竭模型大鼠血清中的去甲肾上腺素和5-羟色胺水平,加剧心脏损伤;光暴露模型组及模型组心肌组织病理均呈现了明显的损伤,细胞出现了肿胀、核皱缩、空泡等现象;光暴露治疗组大鼠心肌细胞的损伤得到了明显的缓解;光暴露对照组的血管紧张素转换酶2蛋白表达低于空白组(P<0.05)而高于模型组(P<0.05),而Mas、c-fos及血红素氧化酶1表达与空白组相比虽有所下调,但差异无显著性意义(P>0.05)。在光暴露模型组中,血管紧张素转换酶2、Mas、核因子E2相关因子2及血红素氧化酶1蛋白表达均较空白组显著下调(P<0.05)。与光暴露模型组相比,光暴露治疗组中核因子E2相关因子2/血红素氧化酶1/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶1信号通路相关蛋白表达均明显上调(P<0.05)。②细胞实验显示5-羟色胺增加了脂多糖所致的心肌细胞损伤,且该损伤效应与核因子E2相关因子2/血红素氧化酶1/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶1信号通路的抑制相关。结论:过度的光暴露可能通过调节神经递质组成,介导核因子E2相关因子2/血红素氧化酶1/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶1信号通路,加速心力衰竭的进程。 展开更多
关键词 光暴露 心力衰竭 神经递质 5-羟色胺 心肌细胞损伤 核因子E2相关因子2
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补肾止颤方对帕金森病模型大鼠多巴胺能神经元铁死亡及Nrf2调控SLC7A11/GSH/GPX4信号通路的影响
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作者 胡玉英 陈伟营 +3 位作者 宋曦 黎晓东 刘姗姗 罗智慧 《中医杂志》 北大核心 2026年第2期188-195,共8页
目的从铁死亡角度探讨补肾止颤方治疗帕金森病(PD)的可能作用机制。方法70只SD大鼠随机分为对照组、模型组、核转录因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂组、多巴丝肼组及补肾止颤方低、中、高剂量组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠采用蛋... 目的从铁死亡角度探讨补肾止颤方治疗帕金森病(PD)的可能作用机制。方法70只SD大鼠随机分为对照组、模型组、核转录因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂组、多巴丝肼组及补肾止颤方低、中、高剂量组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠采用蛋白酶抑制因子皮下注射建立PD大鼠模型。造模2周后,Nrf2抑制剂组大鼠予ML385小分子化合物50 mg/kg腹腔注射,隔日1次,共3次,其余各组大鼠于同时间点予2 ml/kg生理盐水腹腔注射。造模4周后,补肾止颤方低、中、高剂量组分别给予补肾止颤方颗粒剂溶液1.0、1.5、2.0 ml/(100 g·d)灌胃,多巴丝肼组则予多巴丝肼片200 mg/(100 g·d)灌胃,对照组、模型组、Nrf2抑制剂组大鼠均以生理盐水按2.0 ml/(100 g·d)灌胃。各组大鼠灌胃3周后,采用网格实验、爬杆实验进行行为学检测,对PD大鼠的运动功能进行评估;采用qRT-PCR法检测大鼠中脑黑质Nrf2 mRNA表达,Western Blot法检测Nrf2、溶质载体家族7成员(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白水平,ELISA法检测谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量、亚铁离子(Fe^(2+))、GPX4含量,荧光酶标仪检测活性氧(ROS)水平。结果与对照组比较,模型组大鼠网格实验移动潜伏期、爬杆时间均增加,中脑黑质区GSH、GPX4含量降低,Fe^(2+)、MDA含量升高,Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白水平均降低,ROS水平升高,Nrf2 mRNA表达下降(P<0.05);Nrf2抑制剂组上述各指标与模型组变化趋势相同,且程度较模型组更显著,与模型组、对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,多巴丝肼组和补肾止颤方低、中、高各剂量组各指标均改善(P<0.05),且补肾止颤方高剂量组和多巴丝肼组各指标均较补肾止颤方低、中剂量组改善更为显著(P<0.05);补肾止颤方高剂量组和多巴丝肼组改善情况差异均无统计学意义(P>0.05)。结论补肾止颤方可能通过激活中脑黑质Nrf2表达,调控SLC7A11/GSH/GPX4信号通路,从而抑制脂质过氧化和铁死亡,达到治疗PD的目的。 展开更多
关键词 帕金森病 铁死亡 补肾止颤方 脂质过氧化 核转录因子E2相关因子2 溶质载体家族7成员 谷胱甘肽 谷胱甘肽过氧化物酶4
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凉血活血方抑制铁死亡减轻脓毒症急性肾损伤的实验研究
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作者 卓玉珍 杨磊 +4 位作者 周旻 巩传勇 张萍 李斯雨 李家瑞 《中国中西医结合外科杂志》 2026年第1期115-120,共6页
目的:观察凉血活血方对脓毒症诱导小鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用及机制。方法:15只雄性C57BL/6小鼠,采用盲肠结扎穿刺术(CLP)制备脓毒症AKI小鼠模型,小鼠随机分为3组:假手术组、模型组和凉血活血方组,每组5只。凉血活血方组给予凉血活... 目的:观察凉血活血方对脓毒症诱导小鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用及机制。方法:15只雄性C57BL/6小鼠,采用盲肠结扎穿刺术(CLP)制备脓毒症AKI小鼠模型,小鼠随机分为3组:假手术组、模型组和凉血活血方组,每组5只。凉血活血方组给予凉血活血方(6 g/kg)连续灌胃2 d(1次/d),假手术组和模型组给予同等剂量生理盐水灌胃,术后24 h麻醉取材。HE染色观察肾组织病理变化。生化法检测小鼠肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量,检测血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平。酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾组织炎症因子[白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。Western blotting检测肾组织铁死亡相关蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白水平。结果:凉血活血方可以改善脓毒症小鼠的肾功能损害和肾组织病理损伤,降低肾组织中IL-1β、TNF-α、IL-6等炎症因子水平和MDA含量,同时提高肾组织中SOD、GSH含量及SLC7A11、GPX4、Nrf2、HO-1蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:凉血活血方能够改善脓毒症所致AKI小鼠的肾组织病理损伤和肾功能,其机制可能与抑制肾组织铁死亡有关。 展开更多
关键词 凉血活血方 脓毒症 急性肾损伤 铁死亡 核因子红细胞2相关因子2
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异鼠李素激活Nrf2/HO-1通路对肝硬化大鼠肝纤维化、糖代谢紊乱的影响
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作者 严红梅 余首德 +4 位作者 许话 代琳 许丹 陈琛 常城 《胃肠病学和肝病学杂志》 2026年第1期54-59,共6页
目的探讨异鼠李素(isorhamnetin,ISO)对肝硬化大鼠肝纤维化、糖代谢紊乱及核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1(nuclear factor E2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)通路的影响。方法将实验大鼠随机分为对照组(Control组)、... 目的探讨异鼠李素(isorhamnetin,ISO)对肝硬化大鼠肝纤维化、糖代谢紊乱及核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1(nuclear factor E2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)通路的影响。方法将实验大鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(Model组)、异鼠李素低剂量组(ISO-L组)、异鼠李素高剂量组(ISO-H组)、异鼠李素高剂量+Nrf2/HO-1通路抑制剂组(ISO-H+ML385组),每组18只;全自动分析仪检测糖代谢及肝损伤相关指标;检测葡萄糖耐量;ELISA检测糖代谢相关酶及氧化应激水平;HE染色及Masson染色分别检测肝组织病理损伤及纤维化情况;免疫组化检测肝组织肝型脂肪酸结合蛋白(liver-type fatty acid binding protein,L-FABP)及Ⅰ型胶原(type I collagen,ColⅠ)表达;Western blotting检测Nrf2/HO-1通路相关蛋白表达。结果Model组较Control组肝组织结构破坏,肝细胞发生肿胀且排列紊乱,纤维增生及炎性细胞浸润明显,可见假小叶形成,胶原纤维在汇管区大量沉积并延伸,相互交联,ALT、AST、FPG、FINS、HOMA-IR、MDA含量及L-FABP、ColⅠ表达升高,GCK、PK、SOD活性及Nrf2、HO-1表达降低(P<0.05);ISO处理可改善肝组织病理损伤,减轻胶原纤维沉积现象,逆转上述指标变化趋势;ML385处理可逆转ISO-H对肝硬化大鼠肝纤维化及糖代谢紊乱的改善作用。结论异鼠李素可减轻肝硬化大鼠肝纤维化及糖代谢紊乱,其与激活Nrf2/HO-1通路相关。 展开更多
关键词 异鼠李素 核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1通路 肝硬化 肝纤维化 糖代谢紊乱
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清化凉血化瘀方对急性肝衰竭大鼠肝细胞凋亡及Caspase-3、NF-κB表达的影响
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作者 林彦 聂红明 虞胜 《中医药导报》 2026年第1期37-41,共5页
目的:观察清化凉血化瘀方对急性肝衰竭大鼠肝细胞凋亡及胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法:将160只大鼠随机分为中药组(清化凉血化瘀方灌胃)35只、西药组(复方甘草酸苷溶液灌胃)35只、模型组35只(灭菌蒸馏水... 目的:观察清化凉血化瘀方对急性肝衰竭大鼠肝细胞凋亡及胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法:将160只大鼠随机分为中药组(清化凉血化瘀方灌胃)35只、西药组(复方甘草酸苷溶液灌胃)35只、模型组35只(灭菌蒸馏水灌胃)、中西医结合组(清化凉血化瘀方+复方甘草酸苷溶液灌胃)35只、空白组20只(灭菌蒸馏水灌胃),各组持续灌胃3 d后,空白组除外,按照药物剂量D-氨基半轧糖(D-Ga1)800 mg/kg、脂多糖(LPS)8μg/kg,对剩余的140只各组大鼠制造急性肝衰竭大鼠的模型,行腹腔注射药物造模完成后,各组大鼠再次灌胃1次,分别给予相应的治疗药物溶液灌胃,24 h后行腹主动脉采血并处死各组大鼠,测各项生化及免疫指标。取大鼠肝组织病理标本,光镜下检测凋亡细胞;采用RT-PCR、免疫组化法、蛋白质印迹法检测大鼠肝组织Caspase-3、NF-κB表达水平的变化。结果:模型组大鼠肝组织见大量凋亡细胞,各治疗组凋亡细胞均显著减少,中西医结合组凋亡细胞减少最显著。与空白组比较,模型组大鼠肝组织Caspase-3 mRNA、NF-κB mRNA的表达明显增加,Caspase-3、NF-κB免疫组化指数明显升高,Caspase-3、NF-κB蛋白表达明显升高(P<0.05)。与模型组比较,各治疗组大鼠肝组织Caspase-3 mRNA、NF-κB mRNA的表达明显降低,Caspase-3、NF-κB免疫组化指数明显降低,Caspase-3、NF-κB蛋白表达明显降低(P<0.05),且以中西医结合组大鼠肝组织各项指标的下降程度最为显著,均低于中药组和西药组(P<0.05)。结论:清化凉血化瘀方联合西药的中西医结合治疗能下调急性肝衰竭大鼠Caspase-3、NF-κB的表达,有效减少肝细胞的凋亡,减轻肝细胞损伤。 展开更多
关键词 急性肝衰竭 清化凉血化瘀方 复方甘草酸苷 细胞凋亡 胱天蛋白酶-3 核因子-κB 大鼠
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TNF-α、NF-κB信号通路对AECOPD患者预后的预测价值
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作者 赵娜 徐宏伟 +2 位作者 尹虹雷 王雨 张晓菁 《中国急救复苏与灾害医学杂志》 2026年第2期236-241,共6页
目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子-κB(NF-κB)信号通路对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者预后的预测价值。方法选取2022年10月—2023年10月在黑龙江省医院南岗分院就诊的AECOPD患者80例作为研究对象(急性加重期组),另... 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子-κB(NF-κB)信号通路对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者预后的预测价值。方法选取2022年10月—2023年10月在黑龙江省医院南岗分院就诊的AECOPD患者80例作为研究对象(急性加重期组),另选取稳定期COPD患者40例为对照组。检测所有研究对象的血清TNF-α、NF-κB水平,随访6个月,采用回归分析探讨TNF-α/NF-κB信号通路对AECOPD患者预后的影响。结果急性加重期组血清TNF-α[(52.36±10.25)pg/mL vs.(25.36±7.39)pg/mL]、NF-κB[(1.68±0.48)ng/mL vs.(1.25±0.41)ng/mL]水平均高于对照组(t=14.525、4.848,均P<0.05);感染性组患者TNF-α[(58.36±11.28)pg/mL vs.(42.16±9.82)pg/mL]及NF-κB[(1.82±0.43)ng/mL vs(1.45±0.39)ng/mL]水平高于非感染组(t=6.401、3.789,均P<0.05);随访6个月后,急性加重期组预后不良率为31.25%(25/80)。多因素Logistic回归分析显示,TNF-α(OR=1.137,95%CI:1.026~1.259)、NF-κB(OR=1.257,95%CI:1.039~1.396)水平升高是AECOPD患者预后不良的独立危险因素(均P<0.05);TNF-α、NF-κB联合白细胞介素(IL)-1β、IL-6预测AECOPD患者预后不良的受试者操作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.905(95%CI:0.833~0.977)。结论TNF-α、NF-κB信号通路在AECOPD患者中处于激活状态,血清TNF-α、NF-κB、IL-1β、IL-6水平升高可作为预测AECOPD患者预后不良的指标。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病急性加重期 肿瘤坏死因子-Α 核因子-ΚB 预后
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基于MAPK/NF-B信号通路探讨大蒜素对HPV相关表皮疣的影响
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作者 余明军 赵娜 +1 位作者 褚伟伟 王海明 《现代实用医学》 2026年第1期14-19,共6页
目的探讨大蒜素作用于人乳头瘤病毒(HPV)阳性的人宫颈腺癌细胞系CaSki丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及核因子κB(NF-κB)蛋白的表达情况,分析大蒜素对HPV相关表皮疣的影响。方法构建具有稳定传代复制的CaSki细胞系,分为空白对照组(A组),无处... 目的探讨大蒜素作用于人乳头瘤病毒(HPV)阳性的人宫颈腺癌细胞系CaSki丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及核因子κB(NF-κB)蛋白的表达情况,分析大蒜素对HPV相关表皮疣的影响。方法构建具有稳定传代复制的CaSki细胞系,分为空白对照组(A组),无处理;0.9%氯化钠注射液组(B组),予0.9%氯化钠注射液处理;大蒜素组(C组),予50μg/ml大蒜素处理;顺铂组(D组),予10μg/ml顺铂处理;联合组(E组),予50μg/ml大蒜素+10μg/ml顺铂处理。采用CCK-8法检测大蒜素和顺铂溶液半数抑制率(IC_(50))浓度,流式细胞术检测凋亡率,qPCR检测HPV DNA表达量,Western Blot技术分别检测MAPK及NF-κB的蛋白水平表达情况。结果大蒜素溶液浓度IC_(50)为50μg/ml,顺铂溶液浓度IC_(50)为10μg/ml。细胞增殖实验显示,大蒜素和顺铂均对CaSki细胞生长抑制作用明显,且E组抑制作用效果强于C组(P<0.05);流式细胞术结果显示,大蒜素和顺铂均可诱导CaSki细胞凋亡,且E组对细胞凋亡作用增加效果优于C组(P<0.05);q-PCR结果显示,大蒜素和顺铂组均可下调HPV E6表达量,且E组对HPV DNA表达量调控作用大于C组(P<0.05);Western blot实验结果表明,大蒜素和顺铂组MAPK及NF-κB蛋白表达水平均降低(P<0.05),且E组对MAPK及NF-κB蛋白表达水平抑制作用较C组更明显(P<0.05)。结论大蒜素可抑制CaSki细胞增殖,诱导细胞凋亡,下调HPVDNA表达量,其与顺铂联合使用效果明显优于顺铂单药效果,作用机制与MAPK/NF-κB信号通路高度相关。 展开更多
关键词 大蒜素 人乳头瘤病毒 表皮疣 丝裂原活化蛋白激酶 核因子KB
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理冲生髓饮治疗卵巢癌作用及机制研究
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作者 于洋 李世颖 韩凤娟 《山东中医药大学学报》 2026年第1期68-77,共10页
目的:探讨理冲生髓饮通过调控三方基序蛋白44(TRIM44)介导核因子-κB(NF-κB)通路发挥抗卵巢癌(OC)作用的相关分子机制。方法:构建TRIM44稳定过表达人卵巢癌细胞(SKOV3),将细胞接种于Balb/C裸鼠皮下制备移植瘤模型,将40只裸鼠随机分别... 目的:探讨理冲生髓饮通过调控三方基序蛋白44(TRIM44)介导核因子-κB(NF-κB)通路发挥抗卵巢癌(OC)作用的相关分子机制。方法:构建TRIM44稳定过表达人卵巢癌细胞(SKOV3),将细胞接种于Balb/C裸鼠皮下制备移植瘤模型,将40只裸鼠随机分别为空白组、顺铂组、中药组、联合组,每组10只。中药组予理冲生髓饮7.52 g/kg灌胃,2次/日;顺铂组予0.1 mg/mL顺铂溶液腹腔注射,隔日1次;联合组予理冲生髓饮7.52 g/kg灌胃,2次/日,同时联合0.1 mg/mL顺铂溶液腹腔注射,隔日1次;空白组予等体积生理盐水灌胃,2次/日。给药干预14 d,观察裸鼠的肿瘤瘤体体积及生长趋势;苏木精-伊红(HE)染色观察瘤体组织病理形态学变化;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测瘤体中抑制因子κB激酶β(IKKβ)、核因子-κB的抑制蛋白α(IκBα)、核因子-κB p65(NF-κB p65)mRNA表达情况;免疫荧光双染检测瘤体中TRIM44、NF-κB p65蛋白分布情况;蛋白免疫印迹法(WB)检测TRIM44、IKKβ、IκBα、磷酸化核因子-κB抑制蛋白α(p-IκBα)、NF-κB p65、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、血管生成因子(VEGF)蛋白表达差异。结果:与空白组相比,顺铂组、中药组、联合组均可抑制OC裸鼠移植瘤的生长;各用药组均能够降低瘤体组织中IKKβ、NF-κB p65mRNA表达,升高IκBαmRNA表达,且联合组差异最为显著(P<0.05);各用药组均能显著降低瘤体组织中TRIM44、IKKβ、p-IκBα、NF-κB p65、Bcl-2、MMP-9、VEGF蛋白表达,升高IκBα、Caspase-3蛋白表达,且以联合组差异为著(P<0.05)。结论:理冲生髓饮能够抑制OC裸鼠移植瘤的生长,并协同顺铂增强抗肿瘤的作用。其作用机制可能是通过下调TRIM44表达,抑制NF-κB信号通路的激活,从而抑制OC侵袭、转移,促进其凋亡。 展开更多
关键词 理冲生髓饮 卵巢癌 三方基序蛋白44 核因子-ΚB 侵袭 转移 凋亡
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HMGB1对妊娠期糖尿病中滋养层细胞损伤及妊娠结局的影响探究
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作者 冯国惠 王婧 黄莺 《国际检验医学杂志》 2026年第3期265-272,278,共9页
目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对妊娠期糖尿病(GDM)中滋养层细胞损伤及大鼠妊娠结局的影响及其机制。方法以人绒毛膜滋养层细胞HTR8/Svneo为研究对象,慢病毒LV-HMGB1转染构建稳定敲低HMGB1的HTR8/Svneo细胞株,慢病毒LV-NC转染作为阴... 目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对妊娠期糖尿病(GDM)中滋养层细胞损伤及大鼠妊娠结局的影响及其机制。方法以人绒毛膜滋养层细胞HTR8/Svneo为研究对象,慢病毒LV-HMGB1转染构建稳定敲低HMGB1的HTR8/Svneo细胞株,慢病毒LV-NC转染作为阴性对照。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测转染后HMGB1表达水平。将HTR8/Svneo细胞分为正常葡萄糖(NG)组、高糖(HG)组、sh-NC组、sh-HMGB1组,NG组用5.5mmol/L葡萄糖培养,其余3组用30mmol/L葡萄糖培养。采用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双染法、Transwell小室法分别检测各组HTR8/Svneo细胞的增殖活性、凋亡率、迁移数目及侵袭数目,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组HTR8/Svneo细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,Western blot检测各组HTR8/Svneo细胞中HMGB1下游信号通路Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)中相关蛋白表达水平。以30只孕鼠为研究对象,随机分为对照组、GDM组、HMGB1抑制剂甘草酸(GA)组,每组10只,GDM组和GA组在妊娠第1天腹腔注射50mg/kg链脲佐菌素,GA组在妊娠第10天以10mg/kg GA灌胃,每日1次,连续9d。妊娠第19天,采用血糖仪和ELISA法测定各组孕鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。妊娠第20天,观察妊娠结局、称量每窝胎鼠体重。结果相较于未转染、转染慢病毒LV-NC的HTR8/Svneo细胞,转染敲除HMGB1的慢病毒LV-HMGB1的HTR8/Svneo细胞中HMGB1mRNA及蛋白表达下调(P<0.05)。与NG组比较,HG组HTR8/Svneo细胞增殖活性下降(P<0.05),凋亡率增加(P<0.05),迁移数目与侵袭数目减少(P<0.05),上清液中TNF-α、IL-6水平升高(P<0.05),细胞中HMGB1、TLR4、NF-κB p65、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、裂解的半胱天冬酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达上调(P<0.05),Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05)。与sh-NC组比较,sh-HMGB1组HTR8/Svneo细胞增殖活性升高(P<0.05),凋亡率减少(P<0.05),迁移数目与侵袭数目增加(P<0.05),上清液中TNF-α、IL-6水平降低(P<0.05),细胞中HMGB1、TLR4、NF-κB p65、Bax及cleaved Caspase-3蛋白表达下调(P<0.05),Bcl-2蛋白表达上调(P<0.05)。与对照组比较,GDM组孕鼠FBG、FINS及HOMA-IR升高(P<0.05),活胎率降低(P<0.05),胎鼠体重增加(P<0.05),窝产仔数减少(P<0.05);与GDM组比较,GA组孕鼠FBG、FINS及HOMA-IR降低(P<0.05),活胎率升高(P<0.05),胎鼠体重减小(P<0.05),窝产仔数增加(P<0.05)。结论敲低HMGB1可改善高糖诱导的HTR8/Svneo细胞损伤,其抑制剂甘草酸能够缓解GDM孕鼠症状,改善妊娠结局。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白B1 妊娠期糖尿病 HTR8/Svneo细胞 甘草酸 Toll样受体4/核因子-κB信号通路
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脑心安胶囊调节AMPK/GSK-3β/Nrf2信号通路对缺血性中风大鼠的神经保护作用
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作者 李明 李琦 +3 位作者 罗佳晶 张佳诺 李睿 吴圣贤 《中医药导报》 2026年第1期77-81,97,共6页
目的:基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路探讨脑心安胶囊对缺血性中风大鼠的神经保护作用机制。方法:采用线栓法建立缺血性中风大鼠模型,将大鼠分为假手术组(Sham组,不插入栓线... 目的:基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路探讨脑心安胶囊对缺血性中风大鼠的神经保护作用机制。方法:采用线栓法建立缺血性中风大鼠模型,将大鼠分为假手术组(Sham组,不插入栓线)、模型组(M组)、脑心安胶囊组(脑心安组,0.72 g/kg)、AMPK激活剂(AICAR)组(100 mmol/L)、脑心安(0.72 g/kg)+AMPK抑制剂[Compound C(CC),20μmol/L]组。对神经功能损伤进行评分;TTC染色检测脑梗死体积;微量法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平;TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡;免疫组化法检测巢蛋白(Nestin)、神经生长因子(NGF)蛋白表达;蛋白质印迹(Western blotting)法检测AMPK/GSK-3β/Nrf2信号通路相关蛋白表达。结果:与Sham组比较,M组大鼠神经功能损伤评分、脑梗死体积、脑组织MDA水平、细胞凋亡率、Nestin及NGF蛋白表达明显上升,SOD、GSH-Px活性及p-AMPK、p-GSK-3β、Nrf2表达水平明显下降(P<0.05);与M组比较,AICAR组、脑心安组神经功能损伤评分、脑梗死体积、脑组织MDA水平、细胞凋亡率明显下降,SOD、GSH-Px活性及Nestin、NGF、p-AMPK、p-GSK-3β、Nrf2蛋白表达明显上升(P<0.05);与脑心安组比较,脑心安+CC组神经功能损伤评分、脑梗死体积、脑组织MDA水平、细胞凋亡率明显上升,SOD、GSH-Px活性及Nestin、NGF、p-AMPK、p-GSK-3β、Nrf2蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论:脑心安胶囊可以抑制缺血性中风大鼠的氧化应激,减少脑组织细胞凋亡,发挥神经保护作用,其机制可能与激活AMPK/GSK-3β/Nrf2信号通路有关。 展开更多
关键词 缺血性中风 脑心安胶囊 腺苷酸活化蛋白激酶/糖原合成酶激酶3β/核因子E2相关因子2信号通路 神经保护 大鼠
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灵芝孢子粉含药血清通过Nrf2/HO-1通路减轻OGD/R致HT22细胞的氧化应激损伤
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作者 黄力 李月侠 +1 位作者 马凯 金传山 《安徽中医药大学学报》 2026年第1期64-70,共7页
目的 研究灵芝孢子粉含药血清(serum containing bioactive components of Ganodermae Spora,S-GS)对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)致小鼠海马神经元HT22细胞损伤的保护机制。方法 采用OGD/R法诱导HT2... 目的 研究灵芝孢子粉含药血清(serum containing bioactive components of Ganodermae Spora,S-GS)对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)致小鼠海马神经元HT22细胞损伤的保护机制。方法 采用OGD/R法诱导HT22细胞损伤,加入不同浓度S-GS后,采用CCK-8法检测各组HT22细胞存活率及筛选最佳S-GS浓度,ELISA法测定各组细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平,AV-PI流式细胞仪测定HT22细胞凋亡率,Western blot法测定核内核因子E2相关因子2(nucleus nuclear factor E2related factor 2,N-Nrf2)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase,HO-1)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、胞浆核因子E2相关因子2(cytoplasm nuclear factor E2related factor 2,C-Nrf2)蛋白表达水平,免疫荧光染色法测定活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平及Nrf2核转移情况。结果 S-GS可显著升高HT22细胞中SOD活性,降低MDA、ROS水平及细胞凋亡率;且S-GS可显著升高HO-1、N-Nrf2蛋白表达水平,降低C-Nrf2、Keap1蛋白表达水平并促进Nrf2核转移。10%S-GS+ML385(Nrf2抑制剂)可显著升高细胞凋亡率及Keap1、C-Nrf2蛋白表达水平,降低HO-1、N-Nrf2蛋白表达水平及N-Nrf2荧光强度。结论S-GS可通过激活Nrf2/HO-1信号通路保护OGD/R诱导的HT22细胞免于氧化应激损伤,灵芝孢子粉可作为改善缺血性脑卒中的潜在药物。 展开更多
关键词 灵芝孢子粉含药血清 氧糖剥夺/复氧 HT22细胞 Nrf2/HO-1信号通路
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雷公藤甲素治疗骨关节炎的网络药理学分析与实验验证 被引量:1
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作者 陈伊娴 陈晨 +2 位作者 卢立恒 汤锦鹏 于晓巍 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第4期805-815,共11页
背景:骨关节炎是一种具有致残性的慢性关节退化性疾病,以持续性炎症和软骨破坏为主要病理特征。雷公藤甲素可用于治疗各种慢性关节疾病,但雷公藤甲素治疗骨关节炎的作用机制尚未明确。目的:通过网络药理学筛选雷公藤甲素治疗骨关节炎的... 背景:骨关节炎是一种具有致残性的慢性关节退化性疾病,以持续性炎症和软骨破坏为主要病理特征。雷公藤甲素可用于治疗各种慢性关节疾病,但雷公藤甲素治疗骨关节炎的作用机制尚未明确。目的:通过网络药理学筛选雷公藤甲素治疗骨关节炎的有效靶点,并利用骨关节炎模型探讨雷公藤甲素对骨关节炎的治疗效果。方法:利用网络药理学预测雷公藤甲素治疗骨关节炎的潜在靶点和信号通路,之后应用分子对接技术对核心靶点进行验证。采用前交叉韧带横断术建立大鼠骨关节炎模型,造模8周后予雷公藤甲素及玻璃酸钠关节腔注射给药6周。干预6周后进行苏木精-伊红染色及番红O-固绿染色观察大鼠膝关节病理变化;ELISA法检测大鼠血清中炎症因子的水平;免疫组织化学染色法检测大鼠关节软骨中蛋白聚糖、含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚素金属蛋白酶5、Ⅱ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶13的蛋白表达。结果与结论:(1)网络药理学结果表明,雷公藤甲素的作用靶点可能与抑制白细胞介素6、肿瘤坏死因子ɑ、白细胞介素1β、基质金属蛋白酶9等因子的释放,及NF-κB/JAK2-STAT3信号通路的过度活化相关;(2)雷公藤甲素可减轻骨关节炎大鼠的关节肿胀程度;改善关节软骨组织病理状态,维持软骨结构;降低骨关节炎大鼠血清中白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶3的水平;减少关节软骨中基质金属蛋白酶13和含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚素金属蛋白酶5的蛋白表达,增加软骨中Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达,达到保护软骨的作用。 展开更多
关键词 骨关节炎 雷公藤甲素 网络药理学 炎症 关节软骨 基质金属蛋白酶13 核因子ΚB信号通路 工程化组织构建
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哈巴俄苷改善小鼠代谢功能障碍相关脂肪性肝炎的研究
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作者 王筱懿 王可可 +3 位作者 贾王雅 李剑 徐红 季莉莉 《药学学报》 北大核心 2026年第1期163-172,共10页
探究玄参中环烯醚萜类成分哈巴俄苷(harpagoside,HPG)对代谢功能障碍相关脂肪性肝炎(metabolic dysfunction-associated steatohepatitis,MASH)的改善作用及其潜在机制。采用蛋氨酸-胆碱缺乏饲料(methioninecholine-deficient diet,MCD... 探究玄参中环烯醚萜类成分哈巴俄苷(harpagoside,HPG)对代谢功能障碍相关脂肪性肝炎(metabolic dysfunction-associated steatohepatitis,MASH)的改善作用及其潜在机制。采用蛋氨酸-胆碱缺乏饲料(methioninecholine-deficient diet,MCD)喂养6周诱导小鼠MASH模型,口服灌胃给药4周,综合检测血清生化指标、氧应激和炎症指标,并结合肝脏病理形态变化,全面评价哈巴俄苷对小鼠MASH的改善作用(本实验获得上海中医药大学实验动物伦理委员会批准,批准号为PZSHUTCM2305180005)。进一步采用蛋白免疫印记(Western blot,WB)、实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)及体外细胞模型,深入探究哈巴俄苷改善小鼠MASH的作用机制。结果显示,哈巴俄苷(30和60 mg·kg^(-1))能够显著改善MCD诱导MASH小鼠的肝损伤(P<0.05,P<0.001),有效减轻肝脏脂肪累积(P<0.05,P<0.001),降低升高的非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)活动性评分(NAFLD activity score,NAS)(P<0.05,P<0.01,P<0.001),同时降低肝脏氧应激水平并抑制肝脏炎症(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。WB及qPCR实验结果表明,哈巴俄苷能够促进MCD诱导的MASH小鼠肝脏及小鼠AML-12正常肝细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的核转位激活(P<0.05),同时抑制小鼠肝脏及THP-1细胞中核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的核转位激活(P<0.05)。以上结果表明,哈巴俄苷可能通过激活Nrf2抗氧化信号通路,抵御肝脏氧应激损伤,并通过抑制NF-κB信号通路缓解炎性反应,从而发挥改善MASH的药效。 展开更多
关键词 哈巴俄苷 代谢功能障碍相关脂肪性肝炎 氧应激 炎症 核因子E2相关因子2 NF-ΚB信号通路
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菟丝子活性成分苦参碱治疗绝经后骨质疏松症:网络药理学分析及实验验证
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作者 徐晟 张稳稳 +6 位作者 张薇薇 王宏涛 张军 杨瑞盛 原媛 王丽 郝海虎 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第11期2702-2711,共10页
背景:传统中药材菟丝子是妇科常用药且不良反应相对较小,逐渐展现出抗绝经后骨质疏松症的潜力,为这一疾病的治疗提供了新的思路和可能。目的:基于网络药理学分析和分子对接探究菟丝子抗绝经后骨质疏松症的作用机制,并结合动物实验验证... 背景:传统中药材菟丝子是妇科常用药且不良反应相对较小,逐渐展现出抗绝经后骨质疏松症的潜力,为这一疾病的治疗提供了新的思路和可能。目的:基于网络药理学分析和分子对接探究菟丝子抗绝经后骨质疏松症的作用机制,并结合动物实验验证。方法:在TCMSP数据库中筛选菟丝子的主要活性成分和对应靶点,在GeneCards、OMIM、PharmGKB数据库中收集绝经后骨质疏松症的疾病靶点;取共同作用靶点后进行一系列分析,筛选出核心靶点;通过GO功能分析核心靶点并通过分子对接验证核心靶点的作用,选择对应的活性成分进行动物实验验证。结果与结论:①筛选出菟丝子主要活性成分共11个,菟丝子和绝经后骨质疏松症的共同作用靶点共110个,筛选出10个核心靶点;②GO功能分析表明核心靶点与氧化应激以及雌激素密切相关;③将排名前2位的核心靶点蛋白白细胞介素6、活化T细胞核因子1进行分子对接,选择亲和力排名前2位的苦参碱和白细胞介素6、苦参碱和活化T细胞核因子1进行动物实验验证;④动物实验显示苦参碱能抑制白细胞介素6和活化T细胞核因子1水平,改善绝经后骨质疏松症大鼠的骨小梁结构。结果表明:低剂量苦参碱通过下调白细胞介素6水平,影响白细胞介素6/可溶性白细胞介素6受体系统的平衡状态,与核因子κB、丝裂原活化蛋白激酶信号通路共同抑制下游活化T细胞核因子1的表达,从而抑制破骨细胞分化,减少骨吸收,治疗绝经后骨质疏松症。 展开更多
关键词 菟丝子 绝经后骨质疏松症 网络药理学 分子对接 苦参碱 白细胞介素6 活化T细胞核因子1
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核因子κB激活激酶在自身免疫、肿瘤防治等领域的研究脉络与趋势
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作者 徐灿丽 何文星 +4 位作者 王玉萍 巴寅颖 迟莉 王文娟 王佳佳 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第28期7456-7464,共9页
背景:肿瘤双向调控因子核因子κB激活激酶的研究成果逐年增多,但是却没有相关文献计量学分析。目的:通过文献计量学分析肿瘤逃避因子核因子κB激活激酶的研究现状、热点及趋势。方法:基于Web of Science核心合集中的SCIE数据库筛选近10... 背景:肿瘤双向调控因子核因子κB激活激酶的研究成果逐年增多,但是却没有相关文献计量学分析。目的:通过文献计量学分析肿瘤逃避因子核因子κB激活激酶的研究现状、热点及趋势。方法:基于Web of Science核心合集中的SCIE数据库筛选近10年来核因子κB激活激酶相关研究文献,导入Cite Space 6.3.R1软件中分别以国家(地区)、作者、机构、参考文献和关键词5个选项进行文献计量及可视化分析,并运用Origin 2021软件绘制相关统计图。结果与结论:核因子κB激活激酶的发文量、文献共被引次数呈现上升的趋势,Chen,Dan-Dan、Gui,Jian-Fang、Qin,Qiwei和Li,Shun 4位作者发文量最多(11篇),中国科学院、中国科学院大学、浙江大学、中国农业科学院、武汉大学的发文量较大(>50篇)。近10年来关于核因子κB激活激酶的研究热点主要集中在innate immunity、c GAS-STING pathway、NF-κB、inflammation、optineurin、expression、cancer等模块。结果表明,近年来各国学者在相关领域进行了持续且深入的研究,核因子κB激活激酶在自身免疫系统、信号通路、基因表达、肿瘤防治等方面显示出巨大的科研潜力。但是学者之间、机构之间的学术合作并不紧密,今后学者应加强合作与交流,把握核因子κB激活激酶的研究热点与趋势,拓展在疾病领域中的研究范围,为进一步阐明疾病的药效机制和病理变化提供更多证据。 展开更多
关键词 TANK结合激酶1(TBK1) 核因子κB激活激酶 CiteSpace Web of Science 文献计量学 可视化 共被引 研究热点 前沿
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纤维长度与掺量对水泥改良风积沙宏微观特性的试验影响研究
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作者 马学宁 刘晨阳 +1 位作者 赵文杰 王乐 《铁道学报》 北大核心 2026年第2期137-145,共9页
为研究聚丙烯纤维的长度和掺量对纤维-水泥改良风积沙无侧限抗压强度及微观特性的影响,开展不同纤维配比的改良风积沙无侧限抗压强度试验与核磁共振试验(NMR)。选取水泥掺量为5%,试样压实度为95%,标准养护7 d,纤维掺量α_(f)分别为3‰、... 为研究聚丙烯纤维的长度和掺量对纤维-水泥改良风积沙无侧限抗压强度及微观特性的影响,开展不同纤维配比的改良风积沙无侧限抗压强度试验与核磁共振试验(NMR)。选取水泥掺量为5%,试样压实度为95%,标准养护7 d,纤维掺量α_(f)分别为3‰、4‰、5‰、6‰、7‰,纤维长度l分别为3、6、9、12 mm。结果表明,纤维掺量与长度对改良风积沙的无侧限抗压强度有显著性影响,其随二者的增大而增大。随着纤维长度与掺量的提高,应力-应变曲线有向应变硬化型发展的趋势,其峰值压应变也随之增加;建立考虑纤维掺量、纤维长度及二者交互作用影响下的多元非线性预测模型。纤维掺量与纤维长度的增加使T_(2)谱分布曲线向左偏移,减小改良土的孔隙率,使得土体内大孔向小孔与中孔转化;揭示纤维长度与掺量对改良风积沙力学性能与微观特性的作用机理;建议纤维-水泥改良风积沙最优配比为α_(f)=7‰,l=6 mm。研究成果可为高速铁路风积沙路基基床底层及以下路基填料改良提供技术支撑和参考。 展开更多
关键词 风积沙 无侧限抗压强度 核磁共振 聚丙烯纤维 多因素预测模型
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葡萄籽原花青素经Nrf2/HO-1增强自噬抑制糖脂毒性诱导的MIN6细胞铁死亡
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作者 李婷婷 杨瑞瑞 +2 位作者 王浩 陆恒 丁玉松 《食品工业科技》 北大核心 2026年第6期407-416,共10页
目的:探讨葡萄籽原花青素提取物(Grape seed procyanidin extract,GSPE)能否通过核因子E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶1(Heme oxygenase-1,HO-1)信号通路增强自噬,从而抑制糖脂毒性诱导... 目的:探讨葡萄籽原花青素提取物(Grape seed procyanidin extract,GSPE)能否通过核因子E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶1(Heme oxygenase-1,HO-1)信号通路增强自噬,从而抑制糖脂毒性诱导的小鼠胰岛β细胞株(MIN6)铁死亡。方法:采用25 mmol/L葡萄糖与200μmol/L棕榈酸钠(GP)联合处理MIN6细胞(0、6、12、24、48 h),建立胰岛β细胞损伤模型。使用自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA,0.1μmol/L)、自噬抑制剂氯喹(Chloroquine,CQ,60 nmol/L)和不同浓度的GSPE(10、20、30 mg/L)干预MIN6细胞,再利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默Nrf2的表达。细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8 assay,CCK-8)评估细胞活力。线粒体膜电位检测试剂盒(Mitochondrial membrane potential assay kit,JC-1)染色评估线粒体膜电位。免疫印迹法(Western Blot,WB)评估自噬标志物微管相关蛋白l轻链3(Microtubule-associated protein1 light chain3,LC3)与螯合体1(Sequestosome-1,P62),铁死亡关键蛋白酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(Acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)与谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione Peroxidase 4,GPX4)以及通路蛋白Nrf2和HO-1。结果:与对照组相比,GP处理24 h后,细胞活力和GPX4表达下降,LC3Ⅱ、P62和ACSL4表达升高(P<0.05),表明GP诱导MIN6细胞发生自噬障碍和铁死亡,进一步用CQ抑制自噬会加剧铁死亡,而使用RAPA激活自噬则会抑制铁死亡(P<0.05)。此外,GSPE使线粒体膜电位、GPX4、LC3Ⅱ、Nrf2和HO-1表达上升,P62表达下降(P<0.05),而沉默Nrf2后,GSPE增强自噬和抑制铁死亡的作用被拮抗(P<0.05)。结论:GSPE能通过激活Nrf2/HO-1信号通路增强自噬,从而抑制糖脂毒性诱导的胰岛β细胞铁死亡。 展开更多
关键词 葡萄籽原花青素 核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1 自噬 糖脂毒性 铁死亡
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葛根素对高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪性肝病的改善作用及其机制
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作者 陈思童 杨丹 +4 位作者 李庆杰 唐晓雷 王汉 刘扬扬 刘铁军 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2026年第1期44-55,共12页
目的:探讨葛根素(Pue)对高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的改善作用,并阐明其可能的作用机制。方法:将36只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量Pue组(20.0 mg·kg^(-1))、中剂量Pue组(40.0 mg·kg^(-1))、... 目的:探讨葛根素(Pue)对高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的改善作用,并阐明其可能的作用机制。方法:将36只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量Pue组(20.0 mg·kg^(-1))、中剂量Pue组(40.0 mg·kg^(-1))、高剂量Pue组(80.0 mg·kg^(-1))和阳性药组[阿托伐他汀钙(AT)组](10.0 mg·kg^(-1)AT),每组6只。除对照组小鼠给予正常饮食外,其余各组小鼠均给予高脂饮食喂养以建立NAFLD模型。测量各组小鼠体质量,并计算肝指数;采用HE染色观察各组小鼠肝组织病理形态表现;采用生化试剂盒测定各组小鼠血清和肝组织中总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)水平,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,肝组织中丙二醛(MDA)水平以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并检测肝组织中炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平。基于网络药理学框架,通过整合PubChem和SwissTargetPrediction等数据库预测Pue的潜在治疗靶点,结合GeneCards等平台获取的NAFLD相关疾病靶点构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。采用Western blotting法检测各组小鼠肝组织中Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达水平。另取30只小鼠分为对照组、模型组、Pue组(80.0 mg·kg^(-1)Pue灌胃)、模型+Nrf2抑制剂ML385组(30.0 mg·kg^(-1)ML385腹腔注射)和Pue+Nrf2抑制剂ML385组(80.0 mg·kg^(-1)Pue灌胃+30 mg·kg^(-1)ML385腹腔注射),每组6只。再次检测上述氧化应激和炎症指标以及相关蛋白表达情况。结果:与对照组比较,模型组小鼠体质量和肝指数明显升高(P<0.01);与模型组比较,低、中和高剂量Pue组及AT组小鼠体质量以及肝指数明显降低(P<0.05或P<0.01)。HE染色,与对照组比较,模型组小鼠肝组织出现明显的脂质积累和病理损伤;与模型组比较,低、中和高剂量Pue组及AT组小鼠肝组织的脂滴积累情况以及病理损伤均有不同程度的改善。与对照组比较,模型组小鼠肝组织中TC、TG、IL-6、IL-1β、TNF-α和MDA水平以及血清中TC、TG、ALT和AST水平明显升高(P<0.01),肝组织中SOD和GSH-Px活性明显降低(P<0.01);与模型组比较,低、中和高剂量Pue组及AT组小鼠肝组织中TC、TG、IL-6、IL-1β、TNF-α和MDA水平以及血清中TC、TG、ALT和AST水平明显降低(P<0.05或P<0.01),肝组织中SOD和GSH-Px活性明显升高(P<0.05或P<0.01)。网络药理学分析筛选获得Pue治疗NAFLD的核心靶点包括Nrf2、TNF和IL-6等,预测Pue可能通过调控氧化应激、炎症和凋亡等途径发挥作用。Western blotting法,与对照组比较,模型组小鼠肝组织中Keap1蛋白表达水平升高(P<0.01),Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平均降低(P<0.01);与模型组比较,低、中和高剂量Pue组及AT组小鼠肝组织中Keap1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01),Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平均升高(P<0.05或P<0.01)。Nrf2抑制剂ML385干预后,与Pue组比较,Pue+ML385组小鼠肝组织中IL-6、IL-1β、TNF-α和MDA水平均明显升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性均明显降低(P<0.05或P<0.01),肝组织中Keap1蛋白表达水平升高(P<0.01),Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)。结论:Pue能够改善NAFLD小鼠的脂质代谢和肝功能,减轻肝脏损伤,提高肝组织抗氧化能力,并减少炎症因子释放,其机制可能与激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路有关。 展开更多
关键词 葛根素 非酒精性脂肪性肝病 氧化应激 炎症 核因子E2相关因子2
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电针改善溃疡性结肠炎小鼠炎性病理进程及肠道完整性
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作者 张家豪 刘继东 +3 位作者 曲怡 王建波 李阳 薛亚楠 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第18期4663-4674,共12页
背景:针灸是治疗溃疡性结肠炎的重要方法之一,但作用机制尚不明确。目的:探讨电针对小鼠溃疡性结肠炎病理进程及辅助性T细胞17/调节性T细胞免疫稳态失衡的调控机制,解析电针对促炎-抗炎细胞亚群动态平衡的重构作用及与核受体信号通路的... 背景:针灸是治疗溃疡性结肠炎的重要方法之一,但作用机制尚不明确。目的:探讨电针对小鼠溃疡性结肠炎病理进程及辅助性T细胞17/调节性T细胞免疫稳态失衡的调控机制,解析电针对促炎-抗炎细胞亚群动态平衡的重构作用及与核受体信号通路的交互关系。方法:将60只C57BL/6雄性小鼠分为正常组、模型组、假电针组、电针组及西药组5组(n=12),除正常组外,其余组连续自由饮用7 d 3%葡聚糖硫酸钠溶液诱导溃疡性结肠炎模型。电针组刺激“足三里(ST36)”“天枢(ST25)”穴位(20 min/d×7 d);假电针组将电针在“足三里”及“天枢”穴位浅刺至皮下,全程避免行针手法操作,电极装置处于非激活状态;西药组予美沙拉嗪溶液(33.4 g/kg)灌胃。干预结束后测量小鼠体质量及结肠长度,评估疾病活跃程度和结肠黏膜损伤等级,苏木精-伊红染色观察结肠组织病理变化,qPCR法定量分析结肠相关mRNA表达,Western blot、免疫组化法、免疫荧光法观察结肠相关蛋白表达,流式细胞术定量分析辅助性T细胞17/调节性T细胞亚群比例失衡状态。结果与结论:①与正常组相比,模型组小鼠体质量下降、结肠长度缩短、疾病活动指数评分和结肠黏膜损伤指数评分升高、炎性细胞浸润密度增加(P<0.01);模型组促炎递质环氧化酶2、CC趋化因子配体2、CXC趋化因子配体2表达量增加(P<0.01),低氧诱导因子1α及其下游靶点基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9、核因子κBp65表达量增加(P<0.01),过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达量降低(P<0.01),而辅助性T细胞17分化关键因子维甲酸相关孤儿受体γt表达量降低(P<0.01),血液中辅助性T细胞17百分比升高、调节性T细胞百分比降低(P<0.01);②与模型组相比,电针组与西药组均能逆转上述病理改变(P<0.01),其中电针治疗使炎性细胞浸润减少、隐窝结构完整性提升;电针组小鼠血液中辅助性T细胞17百分比下降、调节性T细胞百分比升高(P<0.01)。结果表明,电针刺激“足三里”“天枢”穴可能通过调节过氧化物酶体增殖物激活受体γ/核因子κB信号转导并介导辅助性T细胞17/调节性T细胞免疫平衡的双向调控网络,重塑肠道免疫微环境,为溃疡性结肠炎治疗提供新型干预策略。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 电针 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 核因子ΚB信号通路 辅助性T细胞17 调节性T细胞
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