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西方蜜蜂lncRNA13922的时空表达谱与潜在调控作用分析
1
作者 董舒楠 曹瑞华 +9 位作者 陈颖 荆欣 臧贺 孙恺玥 刘锋 徐细建 骆群 陈大福 邱剑丰 郭睿 《昆虫学报》 北大核心 2025年第4期397-406,共10页
【目的】通过测定lncRNA13922在西方蜜蜂Apis mellifera工蜂不同发育阶段和成虫组织的表达谱,并解析lncRNA13922的调控方式和作用,为进一步探究lncRNA13922的调控功能和机制提供科学依据。【方法】通过RT-PCR验证lncRNA13922在西方蜜蜂... 【目的】通过测定lncRNA13922在西方蜜蜂Apis mellifera工蜂不同发育阶段和成虫组织的表达谱,并解析lncRNA13922的调控方式和作用,为进一步探究lncRNA13922的调控功能和机制提供科学依据。【方法】通过RT-PCR验证lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂成虫不同组织(触角、毒腺、脑、中肠、脂肪体、表皮和咽下腺)中的表达量;采用RT-qPCR检测lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)和工蜂成虫组织(触角、毒腺、脑、中肠、脂肪体、表皮和咽下腺)中的相对表达量;通过Pearson相关性分析预测与西方蜜蜂lncRNA13922共表达的mRNA;利用miRDeep2将lncRNA13922的核苷酸序列比对到miRBase数据库,再通过miRPara来预测miRNA前体;联用Miranda,RNAhybrid和TargetScan软件分别预测lncRNA13922靶向的miRNA及miRNA靶向的mRNA,取交集作为可靠的靶标集合;根据靶向关系构建竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络,进而利用相关软件对靶mRNA进行GO和KEGG数据库注释。【结果】lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂成虫的触角、脑、中肠、脂肪体、咽下腺、表皮和毒腺均能被扩增出符合预期大小(约127 bp)的目的片段。lncRNA13922在西方蜜蜂卵、3日龄幼虫、1和2日龄预蛹及4日龄蛹中差异表达,在卵中的表达量最高,且显著高于3日龄幼虫及1和2日龄预蛹中的表达量;lncRNA13922在1,2,6,12,15和17日龄成虫体内均有表达,但表达量存在差异;lncRNA13922在2日龄成虫体内的表达量最高且显著高于1和17日龄成虫体内的表达量。lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂成虫上述7种组织中差异表达,在毒腺中的表达量最高,且显著高于脑、中肠、脂肪体和咽下腺中的表达量。lncRNA13922与29条mRNA潜在共表达且它们的表达量具有正相关关系,与12条mRNA潜在共表达且它们的表达量具有负相关关系。lncRNA13922可作为2个miRNA的潜在前体。lncRNA13922可靶向75个miRNA进而靶向1833条mRNA。上述靶mRNA涉及细胞部分和细胞等603个GO条目与内吞作用和嘌呤代谢等56条KEGG通路。【结论】西方蜜蜂lncRNA13922在工蜂的不同发育阶段和成虫不同组织中动态差异表达,并通过反式作用、miRNA前体和ceRNA作用网络潜在参与调控发育过程。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 长链非编码RNA 反式作用 内源性竞争RNA 时空表达谱
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意大利蜜蜂lncRNA15837的调控作用和表达模式分析
2
作者 宋宇轩 李坤泽 +8 位作者 臧贺 刘小玉 吴陶 徐细建 刘锋 骆群 邱剑丰 陈大福 郭睿 《昆虫学报》 北大核心 2025年第2期144-153,共10页
【目的】本研究旨在通过解析意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica lncRNA15837的调控方式和作用,并检测lncRNA15837在工蜂不同发育阶段和成虫不同组织及幼虫应答蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis侵染中的表达模式,为深入探究lncRNA15837的调... 【目的】本研究旨在通过解析意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica lncRNA15837的调控方式和作用,并检测lncRNA15837在工蜂不同发育阶段和成虫不同组织及幼虫应答蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis侵染中的表达模式,为深入探究lncRNA15837的调控功能与机制提供参考和依据。【方法】基于已获得的意大利蜜蜂7和10日龄工蜂成虫中肠高质量转录组数据,利用Miranda,RNAhybrid和TargetScan软件预测lncRNA15837靶向的miRNA及miRNA靶向的mRNA,再通过Cytoscape v3.7.1软件构建并可视化竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络。使用Blast工具将靶mRNA比对至GO和KEGG数据库以获得相应的功能和通路注释。通过RT-PCR验证lncRNA15837在刚出房工蜂成虫不同组织(触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺)中的表达。利用RT-qPCR检测lncRNA15837在工蜂的不同发育阶段(卵、3日龄幼虫、1和2日龄预蛹、4日龄蛹及1,2,6,12,15和18日龄工蜂成虫)、刚出房工蜂成虫不同组织(触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺)和3日龄幼虫感染蜜蜂球囊菌后4,5和6日龄幼虫肠道中的表达量。【结果】LncRNA15837可靶向ame-miR-21-x和ame-miR-0046-3p等29个miRNA,进而靶向1559条mRNA,形成1个复杂的ceRNA网络;上述靶mRNA可注释到436个GO条目,其中114条靶mRNA涉及139个分子功能相关条目,115条靶mRNA涉及257个生物学进程相关条目,67条靶mRNA涉及40个细胞组分相关条目;可注释到224条KEGG通路,其中28条靶mRNA注释到内吞、吞噬细胞和溶酶体等细胞免疫通路,以及157条靶mRNA注释到JAK-STAT,Toll和Imd,NF-kappa B和Toll样受体信号通路等体液免疫通路;lncRNA15837在工蜂卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫中差异表达,在1日龄预蛹中的表达量最低,而在3日龄幼虫中的表达量最高;lncRNA15837在刚出房工蜂成虫的触角、毒腺、脑、中肠、咽下腺、脂肪体和表皮中均有表达但表达量存在差异,在脂肪体中的表达量最低,而在毒腺中的表达量最高;相较于未接种对照组,lncRNA15837的表达量在蜜蜂球囊菌接种组4日龄幼虫肠道中表达量上调,在5和6日龄幼虫肠道中显著上调。【结论】意大利蜜蜂lncRNA15837通过ceRNA网络潜在调控胞吞作用、吞噬细胞和溶酶体等细胞免疫通路和JAK-STAT、Toll和Imd、NF-kappa B和Toll样受体信号通路等体液免疫通路;lncRNA15837在工蜂的3日龄幼虫和工蜂成虫毒腺中特异性高表达;工蜂幼虫肠道中lncRNA15837的表达被蜜蜂球囊菌侵染所激活,提示lncRNA15837是意大利蜜蜂幼虫应答蜜蜂球囊菌侵染的潜在调控因子。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 竞争性内源RNA 长链非编码RNA 时空表达谱 蜜蜂球囊菌
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意大利蜜蜂lncRNA17000的时空表达谱与潜在调控作用
3
作者 康婧 任亚萍 +8 位作者 叶道有 王宁 陈颖 李峥源 徐文华 杨雪 陈大福 邱剑丰 郭睿 《应用昆虫学报》 北大核心 2025年第3期764-773,共10页
【目的】旨在探究lncRNA17000在意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂不同组织和发育阶段中的表达模式及其调控作用,为进一步的功能和机制研究提供基础。【方法】通过RT-PCR验证lncRNA17000在工蜂不同组织中的表达。采用RT-qPCR检测... 【目的】旨在探究lncRNA17000在意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂不同组织和发育阶段中的表达模式及其调控作用,为进一步的功能和机制研究提供基础。【方法】通过RT-PCR验证lncRNA17000在工蜂不同组织中的表达。采用RT-qPCR检测其不同组织和发育阶段的相对表达量。利用LncTar、Miranda、RNAhybrid和TargetScan等一系列软件分析lncRNA17000的顺式、反式和竞争性内源RNA(Competing endogenous RNA,ceRNA)调控作用。【结果】在工蜂的脑、触角、毒腺、中肠、表皮、咽下腺和脂肪体7个组织中均扩增出符合预期大小(约133bp)的目的片段。LncRNA17000在上述7个组织中差异表达,在触角中的表达量最高且显著高于(P<0.05)脂肪体中的表达量。LncRNA17000在工蜂的卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫中差异表达,在7日龄预蛹中的表达量最高且显著高于(P<0.05)3日龄幼虫、8日龄预蛹和12日龄蛹中的表达量。LncRNA17000在6、12、15和18日龄成虫体内的表达量显著低于(P<0.05)1日龄成虫体内的表达量且表达水平随日龄增长而降低。LncRNA17000潜在调控7个上下游基因的转录和2个共表达基因的表达。LncRNA17000可靶向45个miRNA进而靶向66条mRNA,这些靶mRNA涉及23个GO条目和25条KEGG通路。【结论】LncRNA17000在意大利蜜蜂工蜂的不同组织和发育阶段中动态差异表达,在触角和7日龄预蛹中特异性高表达;lncRNA17000可能通过顺式作用调控TFIID亚基11亚型X2基因转录,通过反式作用调控蜜蜂翼视蛋白基因表达,通过ceRNA网络靶向多个miRNA和mRNA进而影响胰岛素、ErbB和mTOR等信号通路。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 长链非编码RNA lncRNA17000 时空表达谱 调控作用
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基于代谢组学的中华蜜蜂群势强弱相关机制研究
4
作者 邓晓银 武敏 +3 位作者 徐凯 牛庆生 郭丽娜 郭媛 《应用昆虫学报》 北大核心 2025年第3期731-740,共10页
【目的】旨在探究中华蜜蜂Apis cerana cerana强群和弱群的相关代谢差异及潜在分子调控机制。【方法】通过液相色谱-质谱联用(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)联用的非靶向代谢组学筛选中华蜜蜂强群和弱群之间的差异代... 【目的】旨在探究中华蜜蜂Apis cerana cerana强群和弱群的相关代谢差异及潜在分子调控机制。【方法】通过液相色谱-质谱联用(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)联用的非靶向代谢组学筛选中华蜜蜂强群和弱群之间的差异代谢物,并进行KEGG富集分析。利用生化方法测定谷胱甘肽S-转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)和细胞色素P450(CYP450)活性。【结果】中华蜜蜂强群和弱群的工蜂在代谢组学检测到的正、负离子模式下分别有616和212个差异代谢物,注释后筛选到甜菜碱、黄酮类化合物、赖氨酸磷脂酸等与蜜蜂抗氧化、抗炎、抗菌、防止细胞凋亡相关的代谢物。中华蜜蜂强弱群间的差异代谢物显著富集于CYP450、AMPK信号通路、谷胱甘肽代谢、精氨酸生物合成、生热作用、叶酸生物合成等代谢通路。此外,工蜂强群体内CYP450浓度,SOD及GST活性均高于弱群。【结论】中华蜜蜂强群与弱群在代谢物组成上存在显著差异,强群中工蜂的抗氧化应激、能量代谢、抵御外界环境温度和有害物质侵害、抗炎抗菌的能力更强。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 强群 弱群 非靶向代谢组 差异代谢物
原文传递
EDXRF在药品元素杂质分析中的研究进展
5
作者 宁浩然 《科技创新与应用》 2025年第33期88-91,共4页
能量色散X射线荧光光谱分析(EDXRF)是一种利用初级X射线照射样品依靠激发出特征X射线荧光从而确定待测元素种类及含量的技术,因样品制备便捷性、检测高效性甚至可进行无损检测应用在各大检测行业。该文着重介绍EDXRF在原料药和成品制剂... 能量色散X射线荧光光谱分析(EDXRF)是一种利用初级X射线照射样品依靠激发出特征X射线荧光从而确定待测元素种类及含量的技术,因样品制备便捷性、检测高效性甚至可进行无损检测应用在各大检测行业。该文着重介绍EDXRF在原料药和成品制剂中检测金属杂质的应用进展,为该技术在研究药品金属杂质检测方面提供参考。 展开更多
关键词 能量色散X射线荧光光谱法 原料药 药品制剂 金属元素杂质 无损检测
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油套管的服役条件及产品研制开发现状(上) 被引量：30
6
作者 李平全 史交齐 +1 位作者 赵国仙 韩勇 《钢管》 CAS 2008年第4期6-12,共7页
我国油井管制造厂和油田用户密切合作,结合油田实际,联合研发攻关,极大地推进了油井管的国产化进程,使油套管产量、品种规格和质量实现根本性转变。简要介绍了油套管柱的力学、环境服役条件及油套管失效的类型及原因。综述了油套管产品... 我国油井管制造厂和油田用户密切合作,结合油田实际,联合研发攻关,极大地推进了油井管的国产化进程,使油套管产量、品种规格和质量实现根本性转变。简要介绍了油套管柱的力学、环境服役条件及油套管失效的类型及原因。综述了油套管产品研发的进展和现状,建议进一步加强非API钢级、特殊螺纹连接油套管和特殊用途油井管的开发,提出应解决的突出技术问题并注意评价标准的建立和评价方法的科学性。 展开更多
关键词 油井管 油套管 服役条件 损坏失效原因 非API钢级 非调质油套管 连续管 可膨胀套管
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非API套管接头主密封结构气密性能试验分析 被引量：22
7
作者 许志倩 闫相祯 +2 位作者 杨秀娟 殷晓康 王明达 《压力容器》 2014年第4期7-12,共6页
非API套管接头主要通过金属对金属的径向过盈主密封结构，保证气井开采时的井筒内气密性。依据7 in．套管接头尺寸选用锥面对锥面径向主密封结构型式加工试件，通过密封面过盈配合尺寸控制密封预紧力，测试不同密封预紧力下的气体泄漏... 非API套管接头主要通过金属对金属的径向过盈主密封结构，保证气井开采时的井筒内气密性。依据7 in．套管接头尺寸选用锥面对锥面径向主密封结构型式加工试件，通过密封面过盈配合尺寸控制密封预紧力，测试不同密封预紧力下的气体泄漏率；分别采用车削、磨削和研磨工艺加工接触面，对比分析不同表面粗糙度对气密性能影响程度；取径向密封接触宽度范围2．5～25 mm，测试相同密封预紧力和气体压力下，不同接触宽度对应的气体泄漏率。试验测试结果表明，较高的初始接触压力是形成金属对金属密封的必要条件，当接触压力接近2倍材料屈服强度后，随气体压力升高泄漏率曲线近似保持水平，径向金属密封产生稳定气密性能；密封面的表面粗糙度不同，其进入稳定密封状态的快慢程度不同，表面光洁度越高、进入速度越快气密性能越好；径向接触宽度在2．5～10 mm范围内，气体泄漏率随接触宽度增加而显著降低，10 mm以后接触宽度对气密性能影响不大。 展开更多
关键词 密封性能 泄漏率 非API 套管接头 气密性试验
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高性能油井管的需求与发展 被引量：79
8
作者 李鹤林 韩礼红 张文利 《钢管》 CAS 2009年第1期1-9,共9页
在日益复杂和严酷的服役条件下,具有更高使用性能的非API油井管应运而生。在全面分析油井管服役条件变化及评述国内外高性能油井管的产生和发展的基础上,结合我国油气勘探开发对油井管的需求,提出了高性能油井管研究开发工作的建议,包... 在日益复杂和严酷的服役条件下,具有更高使用性能的非API油井管应运而生。在全面分析油井管服役条件变化及评述国内外高性能油井管的产生和发展的基础上,结合我国油气勘探开发对油井管的需求,提出了高性能油井管研究开发工作的建议,包括应用基础研究的主要课题及新产品开发的方向。 展开更多
关键词 高性能油井管 非API油井管 服役条件 开发建议 产品研发方向
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油套管的服役条件及产品研制开发现状(下) 被引量：9
9
作者 李平全 史交齐 +1 位作者 赵国仙 韩勇 《钢管》 CAS 2008年第5期11-14,共4页
我国油井管制造厂和油田用户密切合作,结合油田实际,联合研发攻关,极大地推进了油井管的国产化进程,使油套管产量、品种规格和质量实现根本性转变。简要介绍了油套管柱的力学、环境服役条件及油套管失效的类型及原因。综述了油套管产品... 我国油井管制造厂和油田用户密切合作,结合油田实际,联合研发攻关,极大地推进了油井管的国产化进程,使油套管产量、品种规格和质量实现根本性转变。简要介绍了油套管柱的力学、环境服役条件及油套管失效的类型及原因。综述了油套管产品研发的进展和现状,建议进一步加强非API钢级、特殊螺纹连接油套管和特殊用途油井管的开发,提出应解决的突出技术问题并注意评价标准的建立和评价方法的科学性。 展开更多
关键词 油井管 油套管 服役条件 损坏失效原因 非API钢级 非调质油套管 连续管 可膨胀套管
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超高强度抗挤套管的开发 被引量：4
10
作者 田青超 谢慧华 +3 位作者 闫安庆 曹泽甫 郭国强 曹青山 《钢管》 CAS 2013年第3期25-29,共5页
中原油田东濮凹陷地区发育相当成熟的岩层要求套管单轴抗挤强度不低于103MPa,以抵御恶劣的地质条件。为了能和上下管柱设计使用的API标准规格的Φ177.8mm×10.36mm以及Φ177.8mm×11.51mm套管方便地连接,设计了非API标准规格的... 中原油田东濮凹陷地区发育相当成熟的岩层要求套管单轴抗挤强度不低于103MPa,以抵御恶劣的地质条件。为了能和上下管柱设计使用的API标准规格的Φ177.8mm×10.36mm以及Φ177.8mm×11.51mm套管方便地连接,设计了非API标准规格的Φ180mm×11.51mm套管。采用纯净钢技术制造了这种规格的BG160TT超高强度抗挤套管。试制结果表明:该套管屈服强度不低于1210MPa,冲击功不小于110J,抗挤强度不低于110MPa。该超高强度抗挤套管已在中原油田东濮凹陷地区成功下井使用。 展开更多
关键词 石油套管 非API标准规格 BG160TT 超高强度抗挤套管 韧性 强度 纯净钢技术
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非API 13Cr系马氏体不锈钢油套管的发展现状 被引量：4
11
作者 邢娜 何立波 +3 位作者 黄宝 高真凤 张志勤 黄维 《特殊钢》 北大核心 2012年第3期22-25,共4页
API(美国石油协会)13Cr油套管具有良好的耐CO_2腐蚀性,但随新油田的开发,要求油套管具有优良的抗H_2S、CO_2高温耐蚀性。文中分析了国内外非API 13Cr马氏体不锈钢油套管(Cr13-Ni5-Mo,Cr13-Ni5-Mo2,Cr15-Ni6-Mo2-Cu等)的发展现状,叙述了... API(美国石油协会)13Cr油套管具有良好的耐CO_2腐蚀性,但随新油田的开发,要求油套管具有优良的抗H_2S、CO_2高温耐蚀性。文中分析了国内外非API 13Cr马氏体不锈钢油套管(Cr13-Ni5-Mo,Cr13-Ni5-Mo2,Cr15-Ni6-Mo2-Cu等)的发展现状,叙述了相关生产厂家油套管的化学成分、力学性能和耐蚀性。 展开更多
关键词 非API油套管 马氏体不锈钢 耐蚀性
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非API标准Big Omega特殊螺纹接头连接性能数值分析 被引量：18
12
作者 许志倩 闫相祯 杨秀娟 《石油矿场机械》 2009年第6期34-39,共6页
以德国非API标准的Big Omega特殊螺纹接头作为研究对象,应用有限元软件ANSYS建立计算力学模型,模拟套管柱接头行为,通过改变螺纹参数(高度、锥度等),计算得出各扣牙相应的最大法向接触应力与最大接头Mises应力。分析螺纹参数变化对扣牙... 以德国非API标准的Big Omega特殊螺纹接头作为研究对象,应用有限元软件ANSYS建立计算力学模型,模拟套管柱接头行为,通过改变螺纹参数(高度、锥度等),计算得出各扣牙相应的最大法向接触应力与最大接头Mises应力。分析螺纹参数变化对扣牙所受应力的影响规律,从而得到Big Omega接头螺纹参数的改变对套管接头连接性能的影响规律,进而为套管柱接头特殊螺纹扣型的选择提供依据,为套管柱设计提供更为有效的参考。 展开更多
关键词 非API标准 连接性能 螺纹参数 BIG OMEGA
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Ф101mm非标钻具及工具在苏里格气田的应用 被引量：3
13
作者 张国伟 郝荣明 +2 位作者 刘同富 张立英 鲁喜宁 《石油机械》 北大核心 2012年第5期29-32,共4页
鉴于API标准S135钢级Ф88.9和Ф101 mm钻杆均不能适应以深井、大位移井为主的苏里格气田的施工要求,推广应用了非标钻具进行施工。推广措施包括非标螺纹钻具设计和配套工具的改进。钻杆接头选用双台肩非API标准螺纹ST39,锥度为1∶12。... 鉴于API标准S135钢级Ф88.9和Ф101 mm钻杆均不能适应以深井、大位移井为主的苏里格气田的施工要求,推广应用了非标钻具进行施工。推广措施包括非标螺纹钻具设计和配套工具的改进。钻杆接头选用双台肩非API标准螺纹ST39,锥度为1∶12。将吊卡台肩上部开口直径改为127 mm,高度不变。方钻杆采用107.95 mm非标四方钻杆。现场应用结果表明,研制的Ф101mm非标钻具及配套工具管体和接头的抗拉、抗扭强度较API标准螺纹更加合理,更加符合长水平段水平井钻井施工要求。 展开更多
关键词 非标钻具 苏里格气田 台肩 钻杆接头 吊卡
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非API油井管技术在中国石化四川天然气勘探区块的应用 被引量：1
14
作者 史雪枝 陈琛 +2 位作者 胡顺渠 蒋龙军 董海峰 《钢管》 CAS 2010年第6期43-46,共4页
介绍了中国石化四川天然气勘探区块在完井工程所遇到的油井管技术难题,主要体现在海相气井油层套管设计和高温高压含CO2气井油套管材质选择两个方面。针对高强度与抗硫能力要求之间的矛盾,采取了组合套管解决方案。针对存在CO2腐蚀的气... 介绍了中国石化四川天然气勘探区块在完井工程所遇到的油井管技术难题,主要体现在海相气井油层套管设计和高温高压含CO2气井油套管材质选择两个方面。针对高强度与抗硫能力要求之间的矛盾,采取了组合套管解决方案。针对存在CO2腐蚀的气井井筒安全经济设计的技术难题,对于腐蚀极严重的情况,采取了生产管柱和封隔器预座封段选用HP1-13Cr非API油井管柱的解决方案;而对于腐蚀较轻的情况,采取了普通材质油井管+特殊螺纹+封隔器完井的解决方案。上述技术方案已在井场得到成功应用。 展开更多
关键词 天然气勘探 油层套管 SSC CO2腐蚀 非API油井管 材质选择 管柱设计
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中国境内不同地理型东方蜜蜂线粒体DNA tRNA^(leu)～COⅡ基因多态性研究 被引量：44
15
作者 姜玉锁 赵慧婷 +4 位作者 姜俊兵 曹果清 张桂贤 朱文进 郭传甲 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1535-1542,共8页
【目的】从线粒体水平上探讨中国境内不同地理型东方蜜蜂的系统发育关系,为东方蜜蜂亚种分化的研究及我国境内东方蜜蜂资源的保护与合理开发利用提供基础资料。【方法】采用公开的E2、H2引物对11个不同地理型东方蜜蜂线粒体DNA tRNAleu... 【目的】从线粒体水平上探讨中国境内不同地理型东方蜜蜂的系统发育关系,为东方蜜蜂亚种分化的研究及我国境内东方蜜蜂资源的保护与合理开发利用提供基础资料。【方法】采用公开的E2、H2引物对11个不同地理型东方蜜蜂线粒体DNA tRNAleu～COⅡ基因进行了PCR扩增、测序,并利用相关软件和网站进行了序列比较分析。【结果】该序列长度为471bp;序列中共有9个位点发生变异;序列相似性均在99%以上;限制性酶切分析表明:云南保山东方蜜蜂缺少一个SwaⅠ酶切位点;部分编码蛋白序列比对表明,海南海口和吉林安图东方蜜蜂各有一个氨基酸发生变异。与GeneBank上公开登录的国内外有关东方蜜蜂相关序列的比较表明,单纯利用非编码区序列对比,不能把日本蜜蜂同中国大陆的东方蜜蜂区别开来;COⅡ基因部分序列对比显示,东方蜜蜂的线粒体类型包括:日本-韩国型、中国大陆型、中国台湾型、马来西亚沙巴州-印度黑色蜜蜂型、中国海南型、印度黄色蜜蜂型、泰国南部型和印度黑色蜜蜂型。【结论】中国境内不同地理型东方蜜蜂存在着较明显的遗传分化,其中海南东方蜜蜂由于长期的海岛隔离形成了一个独特的类群,支持了通过形态学认定的海南东方蜜蜂为东方蜜蜂的一个新亚种的观点。本研究部分测序结果已在美国国家生物信息中心(NCBI)网站GeneBank上登录,登录号为:DQ385854,DQ388602～DQ388609。 展开更多
关键词 东方蜜蜂 线粒体DNA 非编码区 细胞色素氧化酶Ⅱ 序列分析
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非API规格套管在弯曲井段可下入性的计算 被引量：1
16
作者 李建亮 王磊 +1 位作者 姬丙寅 史交齐 《钢管》 CAS 2019年第4期61-64,共4页
套管在弯曲井眼里的可下入计算,是在下套管作业前判断在弯曲井眼能否顺利下入套管的重要计算依据。采用解析法和有限元法对非API规格套管在弯曲井眼里的可下入性进行分析计算。结果表明:解析法和有限元法计算的结果基本一致;解析计算公... 套管在弯曲井眼里的可下入计算,是在下套管作业前判断在弯曲井眼能否顺利下入套管的重要计算依据。采用解析法和有限元法对非API规格套管在弯曲井眼里的可下入性进行分析计算。结果表明:解析法和有限元法计算的结果基本一致;解析计算公式能够满足现场运用,为非API规格套管下入提供理论支持。 展开更多
关键词 套管 非API规格 弯曲井段 可下入性
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非API油井管的发展及质量控制方式 被引量：6
17
作者 王双来 彭娜 +1 位作者 胡松超 刘卜 《石油工业技术监督》 2015年第9期10-14,共5页
随着石油勘探开采条件的日益复杂和严酷,油井管服役环境也越来越苛刻,为了适应不同工况的需求,国内外油井管制造公司相继开发了不同使用用途的非API油井管。介绍了目前国内外主要的非API油井管种类、服役工况、使用特点及存在的问题,并... 随着石油勘探开采条件的日益复杂和严酷,油井管服役环境也越来越苛刻,为了适应不同工况的需求,国内外油井管制造公司相继开发了不同使用用途的非API油井管。介绍了目前国内外主要的非API油井管种类、服役工况、使用特点及存在的问题,并结合我国油田实际工况条件,提出了新形势下非API油井管的质量控制方式:通过订货技术标准提出质量指标要求、通过驻厂监造落实质量指标、通过全尺寸评价试验验证油套管质量是否符合订货技术标准、通过下井应用跟踪验证订货技术标准是否合理等,以确保油井管的产品质量。 展开更多
关键词 非API油井管 特殊螺纹 质量控制
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育王框位置对中华蜜蜂蜂王质量的影响 被引量：2
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作者 胡景华 廖春华 +3 位作者 江武军 黄新然 王子龙 颜伟玉 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期925-930,共6页
蜂王质量的好坏决定了蜂群的群势和生产性能。培育优质的蜂王有利于蜂群的饲养管理及提高经济效益。在育王过程中,育王框所处位置对王台接受率以及蜂王质量均有所影响。本研究基于免移虫育王技术,以中华蜜蜂为研究对象,探究育王框在不... 蜂王质量的好坏决定了蜂群的群势和生产性能。培育优质的蜂王有利于蜂群的饲养管理及提高经济效益。在育王过程中,育王框所处位置对王台接受率以及蜂王质量均有所影响。本研究基于免移虫育王技术,以中华蜜蜂为研究对象,探究育王框在不同类型子脾之间的位置(封盖子脾之间、幼虫脾之间以及混合脾之间)对王台接受率、蜂王个体形态指标及蜂王卵巢卵黄原蛋白基因表达的影响。研究结果表明,育王框置于幼虫脾之间蜂王幼虫接受率和蜂王卵黄原蛋白表达量显著高于封盖子脾,但对蜂王个体指标无影响。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 免移虫育王 育王框位置 蜂王质量
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意大利蜜蜂工蜂中肠发育过程中长链非编码RNA的差异表达分析 被引量：18
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作者 郭睿 耿四海 +7 位作者 熊翠玲 郑燕珍 付中民 王海朋 杜宇 童新宇 赵红霞 陈大福 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第18期3600-3613,共14页
【目的】长链非编码RNA(lncRNA)在真核生物的基因表达、表观遗传和细胞周期调控等方面发挥重要功能。本研究旨在探究意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)工蜂中肠发育过程中lncRNA的表达谱及其作用。【方法】利用RNA-seq技... 【目的】长链非编码RNA(lncRNA)在真核生物的基因表达、表观遗传和细胞周期调控等方面发挥重要功能。本研究旨在探究意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)工蜂中肠发育过程中lncRNA的表达谱及其作用。【方法】利用RNA-seq技术和链特异性建库方法对意蜂7和10日龄工蜂中肠(Am7、Am10)进行深度测序,下机的原始数据经过Perl脚本过滤得到高质量有效读段。利用bowtie工具将有效读段比对核糖体数据库,进一步利用Top Hat2软件将未比对到核糖体数据库上的数据比对到参考基因组。利用CPC和CNCI软件对转录本的编码能力进行预测。通过RT-PCR对部分lncRNA进行鉴定。利用edgeR软件进行差异表达lncRNA(DElncRNA)分析,进而预测lncRNA的上下游基因,并对上下游基因进行GO及KEGG代谢通路富集分析。联用RNAhybrid、Miranda和Target Scan软件预测DElncRNA靶向结合的mi RNA及mi RNA靶向结合的靶基因,并通过Cytoscape软件构建DElncRNAs-mi RNAs-m RNAs的调控网络。最后,通过RT-qPCR验证测序数据的可靠性。【结果】Am7和Am10的深度测序分别获得134 802 058和147 051 470条原始读段,经严格过滤分别得到134 166 157和146 293 288条有效读段;共得到3 890个DElncRNA,包括2 005个上调lncRNA与1 885个下调lncRNA。RT-PCR验证结果显示共有8个lncRNA能扩增出符合预期的目的片段,表明预测出的lncRNA真实存在。DElncRNA的上下游基因数为1 793个,它们涉及42个GO条目,包括代谢进程、发育进程、细胞进程、应激反应和免疫系统进程等;这些上下游基因还涉及251条代谢通路,包括碳代谢、嘌呤代谢和脂肪酸的生物合成等物质代谢通路,硫代谢、甲烷代谢和氧化磷酸化等能量代谢通路,Hippo信号通路、Wnt信号通路和Notch信号通路等信号通路,溶酶体、内吞作用和泛素介导的蛋白水解等细胞免疫通路,以及MAPK信号通路、Jak-STAT信号通路和NF-kappa B信号通路等体液免疫通路,上述结果表明DElncRNA在意蜂中肠发育过程中参与物质和能量代谢、细胞生命活动和免疫调控。进一步分析发现TCONS_00020918可通过调控西方蜜蜂王浆主蛋白1编码基因在意蜂工蜂中肠的营养吸收、级型分化中发挥功能。DElncRNA的调控网络分析结果显示DElncRNA与mi RNA、m RNA间存在复杂的调控关系,部分DElncRNA处于调控网络的中心位置且能靶向结合较多的mi RNA,也有部分mi RNA可被多个DElncRNA共同靶向,表明这些DElncRNA可能在中肠发育中发挥重要作用。随机挑取5个DElncRNA进行RT-qPCR验证,结果显示它们的表达量变化趋势与测序结果一致,证实了本研究测序数据的可靠性。【结论】差异表达长链非编码RNA(DElncRNA)广泛参与意蜂工蜂中肠的新陈代谢、细胞活动和免疫调控并作为竞争性内源RNA(ce RNA)发挥作用,研究结果为关键lncRNA的筛选和功能研究提供了必要的数据支持。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 中肠 发育 长链非编码RNA 上下游基因
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非API规格偏梯形套管螺纹的开发 被引量：4
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作者 张垂贵 《焊管》 2016年第12期23-26,30,共5页
为了满足特殊井况结构螺纹接头的需要,提出了非API规格套管设计方法,在原有API偏梯形螺纹齿形和参数的基础上,重新设计计算了中径、完整螺纹长度、管端至消失点总长度、接箍镗孔直径、管端至三角形标志长度和全顶螺纹长度等6项参数,对... 为了满足特殊井况结构螺纹接头的需要,提出了非API规格套管设计方法,在原有API偏梯形螺纹齿形和参数的基础上,重新设计计算了中径、完整螺纹长度、管端至消失点总长度、接箍镗孔直径、管端至三角形标志长度和全顶螺纹长度等6项参数,对设计的非API规格偏梯形螺纹套管进行了有限元分析,并进行了拉伸试验和静水压试验。结果表明,设计的非API规格偏梯形螺纹套管性能满足相关标准要求,其抗拉伸及抗内压性能达到管体100%,抗压缩性能达到管体40%。 展开更多
关键词 偏梯形螺纹 非API 套管 设计
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