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广西首例人感染H10N3禽流感合并重度急性呼吸窘迫综合征患者静脉-静脉体外膜肺氧合治疗策略探析 被引量：1
1
作者 谭仕稷 韦静 +7 位作者 刘升 陆宁 卢宇明 李幼玲 李梅 陈跃华 岑平 谢周华 《新发传染病电子杂志》 2025年第2期1-6,共6页
目的探讨静脉-静脉体外膜肺氧合(veno-venous extracorporeal membrane oxygenation,VVECMO)在治疗人感染H10N3禽流感并发重度急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)患者中的应用价值及可行性。方法回顾性分析2... 目的探讨静脉-静脉体外膜肺氧合(veno-venous extracorporeal membrane oxygenation,VVECMO)在治疗人感染H10N3禽流感并发重度急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)患者中的应用价值及可行性。方法回顾性分析2024年12月南宁市第四人民医院收治的广西首例人感染H10N3禽流感并发ARDS患者应用VV-ECMO辅助治疗过程及效果。结果患者主要临床表现为发热、咳嗽及气促。经中国疾病预防控制中心对患者呼吸道样本的流感病毒深度测序确诊为人感染H10N3禽流感。患者在接受VV-ECMO支持治疗后,肺部病灶得以吸收,最终痊愈。结论VV-ECMO在人感染H10N3禽流感并发ARDS患者中的应用展现了显著的治疗成效,为疾病控制及肺功能恢复赢得了宝贵时间,可提升患者的生存率。 展开更多
关键词 人感染H10n3禽流感 急性呼吸窘迫综合征 静脉-静脉体外膜肺氧合
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人感染H10N3禽流感的影像学表现与病理机制分析——附2例病例报道 被引量：1
2
作者 李敏媛 单秋兰 +3 位作者 张乐 覃春乐 李翔 卢亦波 《新发传染病电子杂志》 2025年第2期7-13,共7页
人感染H10N3禽流感是由H10N3亚型禽流感病毒感染所致的一种罕见呼吸道感染性疾病。禽流感病毒在禽类种群中通常表现为低致病性特征,但当发生跨种传播感染人类后,可能引发严重的病毒性肺炎临床表现,并可进一步发展为急性呼吸窘迫综合征(a... 人感染H10N3禽流感是由H10N3亚型禽流感病毒感染所致的一种罕见呼吸道感染性疾病。禽流感病毒在禽类种群中通常表现为低致病性特征,但当发生跨种传播感染人类后,可能引发严重的病毒性肺炎临床表现,并可进一步发展为急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)乃至多器官功能衰竭等危及生命的并发症。2021年江苏省确诊第1例人感染H10N3禽流感病例,随后在我国陆续出现3例病例。本研究基于云南及广西病例的临床资料,进行影像学表现及病理机制分析,旨在阐明人感染H10N3禽流感病毒肺炎的典型影像学表现。结果显示,该病的影像学演变具有明显的阶段性特征,可分为3个时期。①早期(发病第1~7天):两肺出现磨玻璃影伴斑片状实变。②进展期(发病第8~20天):实变区域扩大、融合,小叶间隔增厚及支气管充气征。③恢复期(发病第21天以后):牵拉性支气管扩张及网格状纤维化病灶。本研究对认识人感染H10N3禽流感病毒肺炎的影像学表现、临床诊断、鉴别诊断、疗效评价及预后判断有一定的指导意义。 展开更多
关键词 人感染H10n3禽流感 影像学特征 病理机制 影像学随访 肺纤维化
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央企青年人才“33N3”全链条梯级培养体系建设分析
3
作者 王玲 《市场周刊》 2025年第22期171-174,共4页
在市场竞争日趋激烈的背景下,央企对青年人才培养的需求愈发迫切。文章旨在探究如何构建科学高效的青年人才培养体系,以提升央企竞争力。首先通过对“33N3”全链条梯级培养体系的深入研究,阐述其设计理念和体系架构,并提出相应的实施策... 在市场竞争日趋激烈的背景下,央企对青年人才培养的需求愈发迫切。文章旨在探究如何构建科学高效的青年人才培养体系,以提升央企竞争力。首先通过对“33N3”全链条梯级培养体系的深入研究,阐述其设计理念和体系架构,并提出相应的实施策略。其次通过构建科学的评估体系,确保培养效果与人才发展需求相匹配,实现青年人才的持续成长与企业的长远发展,旨在为央企青年人才培养提供系统性、可操作性的框架,促进青年人才与企业战略的深度融合,推动企业的持续创新与竞争力提升。 展开更多
关键词 央企 青年人才 “33n3” 梯级培养体系
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302例军校学员n6和n3系多烯脂酸和n6/n3比值的调查
4
作者 沈晓京 施庆国 赖炳森 《感染．炎症．修复》 2004年第4期165-168,共4页
目的:调查302例军校学员的 n3系多烯不饱和脂肪酸(n3-PUFAs,n3系多烯脂酸)、n6系多烯不饱和脂肪酸(n6-PUFAs,n6系多烯脂酸)和 n6/n3比值。方法:用气相色谱法测定302例军校学员血浆脂肪酸中n3-PUFAs 和 n6-PUFAs 组分和含量,并对不同性... 目的:调查302例军校学员的 n3系多烯不饱和脂肪酸(n3-PUFAs,n3系多烯脂酸)、n6系多烯不饱和脂肪酸(n6-PUFAs,n6系多烯脂酸)和 n6/n3比值。方法:用气相色谱法测定302例军校学员血浆脂肪酸中n3-PUFAs 和 n6-PUFAs 组分和含量,并对不同性别组的各种脂肪酸含量进行 t 检验。结果:n6-PUFAs 为45.74%,n3-PUFAs 为2.90%,n6/n3比值为16:12;饱和脂肪酸(S):单烯脂酸(M):多烯脂酸(P)比值为1:0.67:1.58;男学员的油酸和单烯脂酸(MUFA)高于女学员(P<0.01),而二十二碳六烯酸(22:6n-3,DHA)、n3-PU-FAs 和多烯脂酸低于女学员。结论:应适当减少 n6-PUFAs 摄入,增加油酸摄入,并补充22:6n-3,使n6/n3和 S:M:P 比值趋于合理的水平。 展开更多
关键词 n3系多烯脂酸 n6系多烯脂酸 n6/n3比值 血浆脂肪酸 气相色谱
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N1-甲基-N3-十四烷基咪唑甲基橙的合成与溶解性能
5
作者 周峰岩 王星雯 +3 位作者 王向阳 王力卉 程终发 潘发金 《广东化工》 CAS 2020年第19期22-23,共2页
以溴代正十四烷和N-甲基咪唑为原料,合成溴化-N1-甲基-N3-十四烷基咪唑([C14H29MIM]Br);以甲基橙与硝酸银经复分解反应制备甲基橙银盐;将所合成的[C14H29MIM]Br与甲基橙银盐进行离子交换反应,制得用于有机体系的新型酸碱指示剂——N1-甲... 以溴代正十四烷和N-甲基咪唑为原料,合成溴化-N1-甲基-N3-十四烷基咪唑([C14H29MIM]Br);以甲基橙与硝酸银经复分解反应制备甲基橙银盐;将所合成的[C14H29MIM]Br与甲基橙银盐进行离子交换反应,制得用于有机体系的新型酸碱指示剂——N1-甲基-N3-十四烷基咪唑甲基橙([C14H29MIM]MO)。该指示剂微溶于水和甲苯,易溶于甲醇、乙醇、二甲亚砜、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯等有机溶剂,其酸碱指示的溶剂范围得到拓展。 展开更多
关键词 溴化-N1-甲基-n3-十四烷基咪唑 N1-甲基-n3-十四烷基咪唑甲基橙 溶解性 酸碱指示剂
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N3亚型禽流感病毒NA基因在昆虫细胞中的高效表达 被引量：5
6
作者 刘明 刘春国 +1 位作者 张云 杨涛 《动物医学进展》 CSCD 2005年第10期50-54,共5页
通过反向遗传操作技术开发出了防制H5N1亚型高致病力禽流感并能区分疫苗免疫和自然感染个体的重组H5N3 DIVA疫苗;为了建立配套诊断方法,通过杆状病毒表达系统表达了N3亚型禽流感病毒的NA蛋白。Western blotting和ELISA分析表明,表达的N... 通过反向遗传操作技术开发出了防制H5N1亚型高致病力禽流感并能区分疫苗免疫和自然感染个体的重组H5N3 DIVA疫苗;为了建立配套诊断方法,通过杆状病毒表达系统表达了N3亚型禽流感病毒的NA蛋白。Western blotting和ELISA分析表明,表达的NA蛋白具有良好的抗原活性及特异性。NA蛋白的成功表达为重组H5N3 DI-VA疫苗的配套鉴别诊断试剂盒的研制以及该疫苗的推广与应用奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 n3 杆状病毒表达 DIVA疫苗
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禽流感病毒N3亚型神经氨酸酶基因的克隆 被引量：2
7
作者 邓国华 王秀荣 +5 位作者 张立春 刘振勇 乔传玲 田国彬 于康震 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期161-164,共4页
本研究应用11日龄SPF鸡胚增殖禽流感病毒标准株A/Duck/Germany/1215(H2N3),用LSTRIAZOL试剂盒提取病毒RNA,应用自行设计的NA基因半特异性引物进行RT＿PCR扩增,得到NA基因的全长DNA片段,克隆到PMD18＿T载体上,并进行鉴定和序列测定。测... 本研究应用11日龄SPF鸡胚增殖禽流感病毒标准株A/Duck/Germany/1215(H2N3),用LSTRIAZOL试剂盒提取病毒RNA,应用自行设计的NA基因半特异性引物进行RT＿PCR扩增,得到NA基因的全长DNA片段,克隆到PMD18＿T载体上,并进行鉴定和序列测定。测定结果表明所获得的NA基因DNA片段长1451bp,编码469个氨基酸残基,与其他亚型的NA基因编码的氨基酸长度相一致。根据推导的氨基酸序列进行预测,该蛋白具有6个潜在的糖基化位点和19个半胱氨酸残基。与其他亚型的NA基因相比较发现克隆的NA基因符合神经氨酸的分子结构特征,本研究首次获得N3亚型NA基因全序列。 展开更多
关键词 禽流感病毒 神经氨酸酶 n3 NA基因 克隆
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人感染新型H10N3禽流感病毒分子溯源 被引量：5
8
作者 王慎骄 祁贤 +4 位作者 余慧燕 邓斐 黄浩頔 许可 鲍倡俊 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1231-1244,共14页
【背景】1997年香港地区发生人感染禽流感事件以来,禽流感病毒成为持续威胁人类健康和公共卫生的重要病原体。【目的】对一例人感染新型H10N3禽流感病毒病例开展分子溯源研究。【方法】流感病毒分型检测采用RT-qPCR法,在下一代测序平台... 【背景】1997年香港地区发生人感染禽流感事件以来,禽流感病毒成为持续威胁人类健康和公共卫生的重要病原体。【目的】对一例人感染新型H10N3禽流感病毒病例开展分子溯源研究。【方法】流感病毒分型检测采用RT-qPCR法,在下一代测序平台上完成病毒基因组测序,序列和系统进化分析采用BLAST和MEGA 6.1等生物信息学软件。【结果】2021年4月从严重呼吸道疾病患者体内分离到一株病毒,经核酸检测和序列分析,结果表明其为H10N3亚型禽流感病毒。从患者居所附近的农贸市场分离到一株基因高度同源的H10N3亚型禽流感病毒。分离株是一种新的基因重配H10N3禽流感病毒,其血凝素hemagglutinin(HA)和神经氨酸酶neuraminidase(NA)组合最早在2019年华东地区的家禽中检测到,6个内部基因来源于近年来中国南方家禽中流行的H9N2病毒。病毒的HA蛋白的裂解位点含有1个碱性氨基酸R,未插入多个碱性氨基酸,理论上不属于高致病性禽流感病毒。HA蛋白受体结合位点228位氨基酸残基由G突变为S,理论上增强了对人SAα2,6受体的亲和力。另外,未发现PB2蛋白E627K突变,但591位氨基酸残基由Q突变为K,理论上增强了对人体的适应力和致病性。【结论】本研究报道了一例人感染H10N3禽流感病毒病例的分子流行病学特征,揭示了活禽市场在禽流感病毒基因重配和机会性外溢感染人过程中起重要作用。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H10n3亚型 人感染
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新型H3N3亚型禽流感病毒对鸡致病性与传播性研究 被引量：7
9
作者 孙洪磊 佟琪 +7 位作者 余海莉 韩琪祺 李涵 常昊宇 屈亚锦 徐杰 刘思当 刘金华 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期99-107,共9页
新型禽流感病毒对家禽养殖业可造成严重经济损失,及时发现和阻断其传播具有重要意义。2022—2023年,本实验室在我国发病鸡群中监测到新型H3N3亚型禽流感病毒的出现和传播。本研究对发病鸡群开展了临床发病情况调查,对分离病毒进行了全... 新型禽流感病毒对家禽养殖业可造成严重经济损失,及时发现和阻断其传播具有重要意义。2022—2023年,本实验室在我国发病鸡群中监测到新型H3N3亚型禽流感病毒的出现和传播。本研究对发病鸡群开展了临床发病情况调查,对分离病毒进行了全基因组演化分析,并对分离的代表性病毒进行了鸡致病性以及空气传播性试验。结果表明:(1)H3N3最早于2022年12月在华东地区发生产蛋下降的蛋鸡群出现,随后陆续在华东、华北、东北等多个地区的鸡群中监测到,发病群体主要为产蛋鸡,鸡群发病率高,死亡率低(1%~5%),主要引起产蛋率急性下降(10%~40%)。(2)病毒全基因组序列分析显示,H3N3病毒为新型重排病毒,由鸡群中流行的H3N8病毒与H10N3病毒重排产生,6个内部基因来源于H9N2病毒。(3)与H3N8病毒类似,新型H3N3病毒对鸡群高度易感,可在鸡鼻甲、气管、肺等呼吸器官中高效复制并排毒,引起呼吸系统严重病理损伤。(4)空气传播性结果表明,新型H3N3病毒可在鸡群之间空气传播,而H3N8病毒不能在鸡群间空气传播。综上,新型H3N3禽流感病毒对鸡具有较强的致病性和传播性,有可能成为新的优势流行病毒,对我国家禽养殖业威胁较大,需要开展进一步的防控研究。 展开更多
关键词 H3n3 禽流感病毒 鸡 致病性 空气传播性
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洋葱新品种“钻石红N3”的选育 被引量：5
10
作者 李志萌 田朝辉 +3 位作者 崔丽朋 欧阳梦真 李建欣 张恒 《北方园艺》 CAS 北大核心 2022年第13期157-160,F0002,共5页
“钻石红N3”是以“郑州紫红皮”为母本,应用离子束诱变技术及常规育种手段于2016年选育而成的红皮洋葱新品种。该品种属中早熟品种,生育期250~270 d;植株生长旺盛,平均株高76.2 cm,横径9.9 cm,纵径7.2 cm,单球质量282 g,平均总糖含量6.... “钻石红N3”是以“郑州紫红皮”为母本,应用离子束诱变技术及常规育种手段于2016年选育而成的红皮洋葱新品种。该品种属中早熟品种,生育期250~270 d;植株生长旺盛,平均株高76.2 cm,横径9.9 cm,纵径7.2 cm,单球质量282 g,平均总糖含量6.98%,干物质含量95.0 g·kg^(-1),每667 m^(2)产量约5346 kg;抗病性强,高抗紫斑病、霜霉病和病毒病,耐储藏,适宜在我国河南、河北、山东等中部地区栽培。 展开更多
关键词 洋葱 “钻石红n3” 选育 栽培技术
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pEGFP-N3-LPL重组真核表达载体的构建及在Vero细胞中的表达 被引量：3
11
作者 赵佳福 许厚强 +2 位作者 乜玉丽 陈祥 张勇 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期40-45,共6页
目的:构建贵州白香猪LPL基因与增强型绿色荧光蛋白基因的融合表达载体pEGFP-N3-LPL,转染Vero细胞,观察重组质粒的表达.方法:采用HindⅢ和BamHⅠ两种限制性内切酶获得LPL基因编码区片段和pEGFP-N3线型载体,将目的片段与该载体连接、转化... 目的:构建贵州白香猪LPL基因与增强型绿色荧光蛋白基因的融合表达载体pEGFP-N3-LPL,转染Vero细胞,观察重组质粒的表达.方法:采用HindⅢ和BamHⅠ两种限制性内切酶获得LPL基因编码区片段和pEGFP-N3线型载体,将目的片段与该载体连接、转化、挑取阳性克隆,进行菌落PCR、双酶切及测序鉴定.使用Lipofectamine2000将重组质粒转染Vero细胞,观察细胞中绿色荧光蛋白的表达并对其进行mRNA检测.结果:成功构建重组真核表达载体pEGFP-N3-LPL,经mRNA检测,实验组在1 500bp处出现特异性条带,说明重组载体已在Vero细胞中获得表达.结论:本试验构建的真核细胞表达载体pEGFP-N3-LPL,为进一步阐明LPL基因与肌内脂肪沉积间的生物学作用机制奠定了基础. 展开更多
关键词 脂蛋白酯酶 pEGFP-n3 载体 VERO细胞 真核表达 荧光检测
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牛支持细胞和成纤维细胞体外培养及pEGFP-N3转染 被引量：4
12
作者 于娜 杨泽宇 +3 位作者 林旭 李玉龙 赵洵武 张贵学 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期89-94,共6页
试验以新生牛睾丸组织、牛胎儿皮肤组织为材料,进行支持细胞、成纤维细胞的分离、纯化、鉴定及pEGFP-N3载体转染。结果表明,完善犊牛支持细胞、胎牛皮肤成纤维细胞体外培养体系,细胞纯度可达95%。支持细胞在相同密度下较成纤维细胞能更... 试验以新生牛睾丸组织、牛胎儿皮肤组织为材料,进行支持细胞、成纤维细胞的分离、纯化、鉴定及pEGFP-N3载体转染。结果表明,完善犊牛支持细胞、胎牛皮肤成纤维细胞体外培养体系,细胞纯度可达95%。支持细胞在相同密度下较成纤维细胞能更快完成细胞生长指数期,生长迅速。转染pEGFP-N3载体后,初期EGFP均匀充满胞浆,后期EGFP向细胞核聚集,荧光强度明显高于细胞质中。转染后24、48、72 h,成纤维细胞转染效率高于支持细胞,转染pEGFP-N3的成纤维细胞和支持细胞在转染48 h后达到最大转染效率。转染后成纤维细胞的存活时间明显高于支持细胞,这与支持细胞生物学性质有关。 展开更多
关键词 支持细胞 成纤维细胞 体外培养 pEGFP-n3载体
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卤虫幼虫n3HUFA的营养强化研究 被引量：5
13
作者 陈立新 葛国昌 《海洋通报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期25-32,共8页
本文采用美国BIOCAPSULON强化剂、国产鱼油和微绿球藻对营养状况差异较大的2个产地的卤虫幼虫进行强化培养,并通过气相色谱分析等方法对幼虫n3系列的高度不饱和脂肪酸(n3HUFA)含量的强化效果进行了研究。结果表明,BIOCAPSULON和国产鱼... 本文采用美国BIOCAPSULON强化剂、国产鱼油和微绿球藻对营养状况差异较大的2个产地的卤虫幼虫进行强化培养,并通过气相色谱分析等方法对幼虫n3系列的高度不饱和脂肪酸(n3HUFA)含量的强化效果进行了研究。结果表明,BIOCAPSULON和国产鱼油的强化效果相似,无论对营养价值较低的内陆产卤虫幼虫还是对营养价值较高的沿海产卤虫,均能显著提高其n3HUFA含量。对于n3HUFA营养较低的内陆产卤虫,强化6h的效果比12h的更佳。针对我国生产状况,建议采用时间为6h的鱼油强化。 展开更多
关键词 卤虫 n3HUFA 营养强化 幼虫 鱼类 养殖
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N3H5异构化及构象分析 被引量：1
14
作者 毛双 谭英雄 +2 位作者 蒲雪梅 李来才 田安民 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第6期981-986,共6页
采用量子化学的方法,对氮氢化合物N3H5所有可能的二面角变化进行松散势能面扫描,获得了相应的能量和构象之间的关系,研究了N3H5的异构化机理和构象的变化.分子中的原子(AIM))理论计算得到的键临界点电荷密度的增大和减小,及其拉普拉斯... 采用量子化学的方法,对氮氢化合物N3H5所有可能的二面角变化进行松散势能面扫描,获得了相应的能量和构象之间的关系,研究了N3H5的异构化机理和构象的变化.分子中的原子(AIM))理论计算得到的键临界点电荷密度的增大和减小,及其拉普拉斯值的正负变化,可以清楚地反映构象转化过程中键的增长、断裂和新键生成的相关信息.自然键轨道(NBO)理论分析表明,立体排斥作用使分子能量升高,而超共轭作用使分子能量降低,它们对分子构象的相对稳定性起了重要作用. 展开更多
关键词 n3H5 异构化 构象 AIM NBO
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白纹伊蚊CYP6N3基因启动子序列的分子克隆与功能分析 被引量：2
15
作者 周国理 黄炯烈 +1 位作者 吴瑜 王玲 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2002年第1期12-20,共9页
根据本室已获得的白纹伊蚊CYP6N亚家族新成员CYP6N3全长cDNA的 5′ 末端核苷酸序列 ,设计 2个反向特异引物 (GSP1和GSP2 ) ,利用 4种限制性内切酶DraⅠ、EcoRⅤ、PvuⅡ和StuⅠ分别消化白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株高分子量基因组DNA ,消化产... 根据本室已获得的白纹伊蚊CYP6N亚家族新成员CYP6N3全长cDNA的 5′ 末端核苷酸序列 ,设计 2个反向特异引物 (GSP1和GSP2 ) ,利用 4种限制性内切酶DraⅠ、EcoRⅤ、PvuⅡ和StuⅠ分别消化白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株高分子量基因组DNA ,消化产物与适配子连接产生 4种消化的DNA库 ,并分别以此为模板 ,进行基因步移。用特异引物GSP1与适配子引物AP1进行第 1步PCR扩增 ,然后再以第 1步PCR产物为模板、用内部特异引物GSP2与内部适配子引物AP2进行第 2次PCR扩增。将扩增产物进行T A克隆及测序。结果显示 :分别以DraⅠ、EcoRⅤ、PvuⅡ和StuⅠ消化的DNA库为模板而获得 4个长短不一的DNA序列 :80 6bp、 2 190bp、 3 0 76bp和 2 2 0 6bp ,它们均包括有CYP6N3全长cDNA5′ 非翻译区序列及氨基端开头 10个氨基酸的编码序列 ;在其ATG上游序列中均存在有若干个典型的TATA盒、Barbie盒和 或CCAAT盒、抗氧化剂反应元件或外源化合物反应元件。表明本实验已成功地获得了白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株CYP6N3基因 4个上游启动子区序列 ,并分析、讨论了它们在蚊虫中细胞色素P45 展开更多
关键词 基因步移 白纹伊蚊 细胞色素P450 CYP6n3 启动子 分子克隆 功能
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人Notch受体胞内区基因N2ICD和N3ICD克隆及真核表达体系的构建 被引量：2
16
作者 孙芳 李玉霞 +7 位作者 毛艳 凌焱 张小男 李伟东 刘刚 梁龙 陈珊 陈惠鹏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期108-113,共6页
Notch信号通路与多种肿瘤的发生发展密切相关。对该通路中各受体功能的深入研究能够为揭示其致癌作用奠定基础。本研究采用RT-PCR的方法从人宫颈癌细胞系HeLa细胞的cDNA中克隆人Notch2和Notch3受体胞内区基因(N2ICD和N3ICD基因),并构建... Notch信号通路与多种肿瘤的发生发展密切相关。对该通路中各受体功能的深入研究能够为揭示其致癌作用奠定基础。本研究采用RT-PCR的方法从人宫颈癌细胞系HeLa细胞的cDNA中克隆人Notch2和Notch3受体胞内区基因(N2ICD和N3ICD基因),并构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体N2ICD/pEGFP和N3ICD/pEGFP,将序列正确的重组质粒转染HeLa细胞,显微镜下可见明显的绿色荧光,并定位在细胞核内。Western blotting检测目的蛋白成功融合表达,并能够提高其下游靶基因Hes1的转录活性。 展开更多
关键词 NOTCH信号通路 N2ICD/pEGFP n3ICD/pEGFP 真核表达
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一锅法合成N1,N3-二烷基取代-3,4-二氢嘧啶-2(1H)-酮及其抗菌活性研究（英文） 被引量：1
17
作者 曾荣今 刘传磊 +3 位作者 沈鹏飞 唐沙 熊春刚 吴湘思 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1531-1538,共8页
在温和的相转移催化剂存在下,合成得到一系列N1,N3-二烷基取代-3,4-二氢嘧啶-2(1H)-酮,并测定了取代二氢嘧啶酮对灰霉菌、小麦赤霉菌、辣椒疫霉病菌、油菜菌核病菌、水稻纹枯病菌、稻瘟病菌六种霉菌的抗菌活性。多数取代二氢嘧啶酮对后... 在温和的相转移催化剂存在下,合成得到一系列N1,N3-二烷基取代-3,4-二氢嘧啶-2(1H)-酮,并测定了取代二氢嘧啶酮对灰霉菌、小麦赤霉菌、辣椒疫霉病菌、油菜菌核病菌、水稻纹枯病菌、稻瘟病菌六种霉菌的抗菌活性。多数取代二氢嘧啶酮对后五种霉菌体现出不错的抗菌活性,特别是N原子上被(CH2)nBr取代的二烷基取代二氢嘧啶酮对于油菜菌核病菌、小麦赤霉菌以及辣椒疫霉病菌表现出不错的抗菌活性。数据表明,二氢嘧啶酮中嘧啶环和酯基上的取代基变化有助于改善嘧啶酮的抗菌活性。 展开更多
关键词 N1 n3-二烷基取代 3 4-二氢嘧啶-2(1H)-酮 无溶剂 相转移催化 抗菌活性
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360度反馈评价在N3、N4级护士临床教学效果中的应用 被引量：3
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作者 杨英 周建芳 杨志兰 《吉林医学》 CAS 2017年第7期1357-1359,共3页
目的:探讨360度反馈评价法运用于临床N3、N4级护士教学效果的能力评价。方法:将临床N3、N4级76例护士作为被评价者,护理部在查阅文献的基础上,制订9个考核指标,通过问卷调查的方式,调查科室护士长、下级护士及N3、N4级护士自评三种方式,... 目的:探讨360度反馈评价法运用于临床N3、N4级护士教学效果的能力评价。方法:将临床N3、N4级76例护士作为被评价者,护理部在查阅文献的基础上,制订9个考核指标,通过问卷调查的方式,调查科室护士长、下级护士及N3、N4级护士自评三种方式,将2014年作为对照组、2015年作为试验组,对N3、N4级护士临床教学效果进行对比分析。结果:经χ~2检验,对照组与试验组每个人实施频次比较,差异有统计学意义(χ~2=17.52,P<0.01);下级护士评与自评比较,差异有统计学意义(χ~2=17.02,P<0.01);护士长评与自评比较,差异有统计学意义(χ~2=5.87,P<0.01)。结论:运用360度反馈评价法对N3、N4级护士教学效果行动态监控、评价,能全面、客观、合理评价N3、N4级护士工作,为深化护士岗位管理提供依据,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 360度反馈评价 n3、N4级护士 临床教学 效果
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S100A9真核表达载体pEGFP-N3-S100A9的构建及其对U251细胞生长的影响 被引量：1
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作者 陈松 程远 +1 位作者 廖鹏 邓金木 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期1596-1599,共4页
目的构建S100A9真核表达载体pEGFP-N3-S100A9,观察其对胶质瘤细胞系U251内S100A9基因表达及细胞生长的影响。方法应用RT-PCR和DNA重组技术构建pEGFP-N3-S100A9融合蛋白表达载体,并用双酶切、测序进行鉴定,用脂质体转染胶质瘤细胞系U251... 目的构建S100A9真核表达载体pEGFP-N3-S100A9,观察其对胶质瘤细胞系U251内S100A9基因表达及细胞生长的影响。方法应用RT-PCR和DNA重组技术构建pEGFP-N3-S100A9融合蛋白表达载体,并用双酶切、测序进行鉴定,用脂质体转染胶质瘤细胞系U251细胞。荧光显微镜下动态观察U251细胞绿色荧光的变化;培养24 h后提取转染细胞的总RNA及总蛋白。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)观察其mRNA表达情况,Western blot检测其蛋白表达情况,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果酶切鉴定与S100A9全长基因长度一致(345 bp);测序证实重组质粒中含有一与GenBank上登录的S100A9基因(NM_002965)序列完全一致的片段,表明成功构建真核表达载体;荧光显微镜下转染U251细胞可见绿色荧光蛋白表达,12 h后逐渐增多,24～48 h达高峰,且稳定表达较长时间;24 h后通过qRT-PCR检测到mRNA表达,Western blot检测到14×103目的蛋白表达(P<0.05),其增殖能力明显增强(P<0.01),且引起细胞G1期减少,S期增加(P<0.05)。结论成功构建真核表达载体pEGFP-N3-S100A9,转染到U251细胞后能有效上调S100A9基因的mRNA及蛋白的表达、促进细胞增殖。 展开更多
关键词 pEGFP-n3 S100A9 胶质瘤 基因转染
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