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鹅源禽多杀性巴氏杆菌的分离鉴定和全基因组测序分析
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作者 郑百利 刘英玉 +3 位作者 李玮璐 蔡雨萱 程雅玲 李勇超 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2026年第2期139-146,共8页
目的禽巴氏杆菌病(Avian pasteurellosis)是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multitocida,Pm)引起的一种急性、高致死性传染病,可感染多种禽类,严重危害家禽养殖业。为确定新疆某鹅场成年鹅发病原因,并探究其致病原分子流行病学特征。方... 目的禽巴氏杆菌病(Avian pasteurellosis)是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multitocida,Pm)引起的一种急性、高致死性传染病,可感染多种禽类,严重危害家禽养殖业。为确定新疆某鹅场成年鹅发病原因,并探究其致病原分子流行病学特征。方法无菌采集病死鹅肝脏、肺脏等组织,通过PCR/RT-PCR检测样品中多杀性巴氏杆菌、禽致病性大肠杆菌、禽流感病毒等病原,并针对致病原进行分离鉴定、生化实验、小鼠致病性试验,并通过全基因组测序对分离菌株进行毒力、耐药基因注释和遗传进化等分子生物学信息分析。结果分离鉴定到1株ST85型鹅源多杀性巴氏杆菌PM2023,其基因组全长2272031 bp,编码2136个蛋白质,包含98个毒力基因和40个耐药基因,可引起小鼠死亡。SNP系统发育分析显示,分离菌株与多数禽源多杀性巴氏杆菌聚类于同一进化分支。结论本研究确定该鹅场成年鹅发病致死是由于感染禽多杀性巴氏杆菌,并进一步分离鉴定了该菌株,同时揭示了多杀性巴氏杆菌的流行情况,为多杀性巴氏杆菌的生物学特性研究和科学防控奠定了理论基础。 展开更多
关键词 鹅 禽多杀性巴氏杆菌 分离鉴定 全基因组 生信分析
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多杀性巴氏杆菌重组酶聚合酶扩增快速诊断方法的建立 被引量：3
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作者 张蕾 陈亮 +12 位作者 冯万宇 苗艳 兰世捷 吴宪 沈思思 张艳 田秋丰 杨昊天 姚美玲 南景东 江波涛 史同瑞 黄宣凯 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第1期56-64,共9页
为建立灵敏且特异的多杀性巴氏杆菌(P.multocida)快速、可视化临床诊断方法,本试验基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)和侧流免疫层析试纸条(LFD)技术,以多杀性巴氏杆菌种属特异性KmtⅠ基因为模板,设计了... 为建立灵敏且特异的多杀性巴氏杆菌(P.multocida)快速、可视化临床诊断方法,本试验基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)和侧流免疫层析试纸条(LFD)技术,以多杀性巴氏杆菌种属特异性KmtⅠ基因为模板,设计了用于RPA扩增和nfo RPA扩增的特异性引物、探针,通过琼脂糖凝胶电泳和免疫层吸试纸条分析,筛选最佳引物,优化RPA反应体系并确定最佳反应条件。结果显示,该方法在30℃、20 min内即可获得最佳检测效果,对质粒浓度的最低检测限为2.26×10^(1)copies/μL,且与大肠杆菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和鼠伤寒沙门菌无交叉反应;使用RPA basic、RPA-LFD以及普通PCR同时对15份籽鹅临床样品进行检测,结果一致,阳性检出率均为100%,符合率为100%。综上所述,本试验成功建立了多杀性巴氏杆菌的RPA basic与RPA-LFD快速检测方法,具有较高的灵敏度和特异性,操作简单,对仪器、场地要求低,为多杀性巴氏杆菌病的即时诊断和流行病学调查提供了可靠技术支持。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 重组酶聚合酶 侧流免疫层析试纸条 快速检测
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多杀性巴氏杆菌毒力评估及感染小鼠肺脏转录组的研究
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作者 程逸文 张振兴 +6 位作者 李昊洋 何美荣 陈思 满初日嘎 杜丽 王凤阳 陈巧玲 《微生物学杂志》 北大核心 2025年第6期74-83,共10页
采用腹腔注射的方式构建小鼠感染多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multitocida,Pm)HN01模型,通过半数致死量(LD_(50))、组织载菌量和组织病理学变化评估Pm HN01的毒力。对小鼠肺脏进行转录组高通量测序,并利用qPCR、Western blot和免疫组织... 采用腹腔注射的方式构建小鼠感染多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multitocida,Pm)HN01模型,通过半数致死量(LD_(50))、组织载菌量和组织病理学变化评估Pm HN01的毒力。对小鼠肺脏进行转录组高通量测序,并利用qPCR、Western blot和免疫组织化学方法验证测序结果。结果表明,Pm HN01主要引起小鼠肺脏和脾脏的充血及基础结构的损伤。转录组测序结果显示,Pm HN01感染引起小鼠肺脏1465个基因显著差异上调,1096个基因显著差异下调,差异表达基因显著富集于细胞因子-细胞因子受体互作通路、癌症通路、IL-17信号通路等多条免疫相关通路。随机选择10个与免疫相关的差异表达基因进行qPCR验证,结果显示其中9个基因表达趋势与转录组测序一致。Western blot和免疫组化结果表明,感染小鼠肺脏的SAA3蛋白表达量显著升高,并且主要分布于支气管腔内壁。本研究对Pm HN01的毒力进行了初步评估,通过转录组数据揭示了小鼠在感染Pm HN01后肺脏的基因表达差异,筛选出可能在抗Pm HN01感染中发挥重要功能的免疫通路和关键蛋白,为进一步研究Pm HN01的致病机制和宿主免疫应答提供参考。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multitocida) 毒力 肺脏 转录组测序 SAA3蛋白
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