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Phosphodiesterase 9 localization in cytoplasm and nucleus:the gateway to selective targeting in neuroprotection?
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作者 Giovanni Ribaudo Matteo Giannangeli +1 位作者 Margrate Anyanwu Alessandra Gianoncelli 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS 2025年第6期1701-1702,共2页
The umbrella term"neurodege ne rative disorders"(NDDs) refers to several conditions characterized by a progressive loss of structure and function of cells belonging to the nervous system.Such diseases affect... The umbrella term"neurodege ne rative disorders"(NDDs) refers to several conditions characterized by a progressive loss of structure and function of cells belonging to the nervous system.Such diseases affect more than 50million people worldwide.Neurodegenerative disorders are characterized by sundry factors and pathophysiological mechanisms that a re challenging to be fully profiled.Many of these rely on cell signaling pathways to preserve homeostasis,involving second messengers such as cyclic adenosine monophosphate (cAMP)and cyclic guanosine 3',5'-monophosphate(cGMP).Their ability to control the duration and amplitude of the signaling cascade is given by the presence of several common and uncommon effectors.Protein kinases A and G (PKA and PKG),phosphodiesterases (PDEs),and scaffold proteins are among them. 展开更多
关键词 gateway HOMEOSTASIS preserve
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Hengqin:Gateway for Going Global
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作者 ZHU JIE 《China Today》 2025年第1期50-53,共4页
The synergy and complementary strengths between Macao and Hengqin can create an important channel for Chinese companies to internationalize.CHINESE enterprises have placed much emphasis on going global in recent years... The synergy and complementary strengths between Macao and Hengqin can create an important channel for Chinese companies to internationalize.CHINESE enterprises have placed much emphasis on going global in recent years,from traditional manufacturing giants to emerging tech unicorns,and from traditional sectors to emerging industries like electric vehicles,lithium batteries,and photovoltaic products.The enthusiasm to internationalize reached unprecedented levels in 2024. 展开更多
关键词 COMPANIES gateway LITHIUM
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From Silk Road to Global Gateway Rooted in tradition and thriving on creativity, Chengdu is building a global image through culture and connection
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作者 Tan Ping Hu Haoge 《China Report ASEAN》 2025年第6期74-75,共2页
Chengdu,a city rich in history and culture,is a beacon of China’s storied past embracing a distinct postmodern vibe.As an important hub along the ancient Silk Road,it has long been a meeting point for di!erent civili... Chengdu,a city rich in history and culture,is a beacon of China’s storied past embracing a distinct postmodern vibe.As an important hub along the ancient Silk Road,it has long been a meeting point for di!erent civilizations,where ideas and cultures have exchanged and thrived.Driven by the vision of a community with a shared future for mankind in recent years,Chengdu scholars and media have opened their arms to the world,engaging in multilingual storytelling.These efforts share the warmth and goodwill of a city consistently ranked one of the happiest in China.Through consistent efforts,new insights have emerged—ideas and aspirations intended to be shared with readers both at home and abroad. 展开更多
关键词 history shared future silk road global gateway CREATIVITY CULTURE CONNECTION CIVILIZATIONS
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Research on the Synergistic Application of Secure Isolation Gateways and Zero Trust Architecture in the Oil and Gas IoT
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作者 Wang Bo Wang Wei +1 位作者 Zhang Fan Li Zhaoyun 《China Oil & Gas》 2025年第3期61-66,共6页
As industrialization and informatization in China deeply integrate and the Internet of Things rapidly develops,industrial control systems are facing increasingly severe information security challenges.The industrial c... As industrialization and informatization in China deeply integrate and the Internet of Things rapidly develops,industrial control systems are facing increasingly severe information security challenges.The industrial control system of the gas extraction plant is characterized by numerous points and centralized operations,with a strong reliance on the system and stringent real-time requirements. 展开更多
关键词 industrial control system internet things oil gas IoT control systems secure isolation gateways zero trust architecture information security challengesthe gas extraction plant
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基于Open Gateway的运营商未来网络能力开放运营与思考 被引量:1
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作者 王志佳 杨剑键 +4 位作者 许建宏 李涛 潘思宇 郝婧 孟明明 《长江信息通信》 2024年第11期36-39,共4页
Open Gateway作为GSMA的倡议计划,通过统一API实现跨网络无缝访问,推动网络能力标准化开放,全球已有众多移动运营商参与其中,共同探索网络能力的商业变现。各大运营商对NaaS发展战略态度各异,但均在积极探索网络能力开放的新模式,以满... Open Gateway作为GSMA的倡议计划,通过统一API实现跨网络无缝访问,推动网络能力标准化开放,全球已有众多移动运营商参与其中,共同探索网络能力的商业变现。各大运营商对NaaS发展战略态度各异,但均在积极探索网络能力开放的新模式,以满足数字化转型需求。然而,运营商在开放网络能力方面仍面临跨境数据流动、网络安全和运营体系建设等诸多关键问题,商业模式、发展策略仍存在诸多问题需要决策。本文综合考虑国内外发展形势及实践经验,提出若干运营模式构想及运营发展建议,对运营商开展网络能力开放建设工作具有一定借鉴意义。 展开更多
关键词 Open gateway NaaS API 网络能力开放 运营发展
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Gateway球囊扩张治疗症状性大脑中动脉重度狭窄患者效果评价
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作者 周兴磊 魏锋 +3 位作者 吴胤菲 雷剑伟 宋思辉 宋书欣 《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第10期1106-1110,共5页
目的评价Gateway球囊扩张术治疗症状性大脑中动脉重度狭窄的效果。方法回顾性分析2019年5月至2022年8月南昌大学第二附属医院收治的98例症状性大脑中动脉重度狭窄患者临床及影像学资料。分析Gateway球囊扩张治疗前后狭窄血管直径,狭窄... 目的评价Gateway球囊扩张术治疗症状性大脑中动脉重度狭窄的效果。方法回顾性分析2019年5月至2022年8月南昌大学第二附属医院收治的98例症状性大脑中动脉重度狭窄患者临床及影像学资料。分析Gateway球囊扩张治疗前后狭窄血管直径,狭窄段收缩期峰值血流速度(PSV)、舒张末期血流速度(EDV),狭窄病变Mori分型,手术并发症,影像学及临床随访结果等。结果98例患者中Mori分型A型83例(84.69%),B型15例(15.31%)。所有患者Gateway球囊扩张治疗均获成功。术后症状均有不同程度改善或稳定。狭窄病变残余管腔直径由术前(2.01±0.13)mm显著增大至术后(2.33±0.25)mm,狭窄程度由术前(81.28±15.17)%显著降低至术后(50.24±12.83)%,PSV、EDV分别由术前(251.01±60.13)cm/s、(104.28±32.25)cm/s显著降低至术后(155.33±53.28)cm/s、(70.24±36.33)cm/s,差异有统计学意义(均P<0.05)。7例患者出现手术并发症,症状随后得到改善。临床随访10个月,88例(89.79%)患者改良Rankin量表(mRS)评分≤2分,显示生活质量和功能恢复良好。结论Gateway球囊扩张治疗症状性大脑中动脉重度狭窄远期疗效显著,手术并发症少,是治疗该类疾病的有效手段。 展开更多
关键词 gateway球囊扩张 大脑中动脉重度狭窄 狭窄分型 狭窄程度
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Ancient Zhenyuan, Gateway to East Guizhou
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作者 MENG JIAXIN 《China Today》 2024年第1期76-80,共5页
This ancient city has a history going back over 2,000 years.It has witnessed the fusion of multiple ethnic cultures including the Miao,Dong,and Han,and hosts a number of cultural heritage sites.THE old town of Zhenyua... This ancient city has a history going back over 2,000 years.It has witnessed the fusion of multiple ethnic cultures including the Miao,Dong,and Han,and hosts a number of cultural heritage sites.THE old town of Zhenyuan is located in Zhenyuan County,Qiandongnan Miao and Dong Autonomous Prefecture in southwest China’s Guizhou Province.Covering an area of just around three square kilometers,it sits on the banks of the Wuyang River and is surrounded by mountains.Zhenyuan has been a county for more than 2,281 years and was the prefectural capital during the Yuan(1271-1368)and Qing(1644-1911)dynasties.It is a multicultural region,with Miao,Dong,and other ethnic minorities making up nearly half of the population. 展开更多
关键词 GUIZHOU gateway SOUTHWEST
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Energy-Efficient and Reliable Deployment Models for Hybrid Underwater Acoustic Sensor Networks with a Mobile Gateway
8
作者 Tatiana A.Fedorova Vladimir A.Ryzhov +2 位作者 Kirill S.Safronov Nikolay N.Semenov Shaharin A.Sulaiman 《哈尔滨工程大学学报(英文版)》 CSCD 2024年第4期960-983,共24页
This work proposes an innovative approach to evaluate the functional characteristics of a heterogeneous underwater wireless acoustic sensor network(UWASN)using a stochastic model and the network connectivity criterion... This work proposes an innovative approach to evaluate the functional characteristics of a heterogeneous underwater wireless acoustic sensor network(UWASN)using a stochastic model and the network connectivity criterion.The connectivity criterion is probabilistic and considers inherently distinct groups of parameters:technical parameters that determine the network function at specific levels of the communication stack and physical parameters that describe the environment in the water area.The proposed approach enables researchers to evaluate the network characteristics in terms of energy efficiency and reliability while considering specific network and environmental parameters.Moreover,this approach is a simple and convenient tool for analyzing the effectiveness of protocols in various open systems interconnection model levels.It is possible to assess the potential capabilities of any protocol and include it in the proposed model.This work presents the results of modeling the critical characteristics of heterogeneous three-dimensional UWASNs of different scales consisting of stationary sensors and a wave glider as a mobile gateway,using specific protocols as examples.Several alternative routes for the wave glider are considered to optimize the network’s functional capabilities.Optimal trajectories of the wave glider’s movement have been determined in terms of ensuring the efficiency and reliability of the hybrid UWASN at various scales.In the context of the problem,an evaluation of different reference node placement was to ensure message transmission to a mobile gateway.The best location of reference nodes has been found. 展开更多
关键词 Heterogeneous underwater wireless acoustic sensor network Mobile gateway Wave glider Stochastic connectivity model Probabilistic optimality criteria Network reliability Network energy consumption
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The Design of Multi-Connector IoT Central Gateway Based on Raspberry Pi and Docker
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作者 Jie Wang 《Journal of Electronic Research and Application》 2024年第5期66-71,共6页
With the vigorous development of Internet of Things(IoT)technology,the demand for communication and data exchange between different types of IoT devices is increasing day by day.To solve the problems of diversity and ... With the vigorous development of Internet of Things(IoT)technology,the demand for communication and data exchange between different types of IoT devices is increasing day by day.To solve the problems of diversity and complexity of communication protocols between devices,this paper proposes a design scheme of a multi-connector IoT central gateway based on Raspberry Pi and Docker.Through the research and application of related technologies,by integrating multiple communication interfaces and utilizing containerization technology,an efficient,flexible,and scalable IoT central gateway has been realized,which can support the connection and data interaction of multiple communication protocols and provide strong support for the stable operation and development of the IoT system. 展开更多
关键词 Internet of Things Raspberry Pi DOCKER CONNECTOR Central gateway
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利用Gateway克隆技术构建丹参SmNAC1转录因子的RNAi表达载体 被引量:9
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作者 赵容 荣齐仙 +2 位作者 刘玉忠 申业 黄璐琦 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1569-1573,共5页
NAC转录因子参与植物生长发育和对生物和非生物胁迫的应答反应,利用Gateway克隆技术构建丹参NAC转录因子的RNAi植物表达载体,以便进一步研究丹参NAC转录因子的功能。根据Gateway技术要求,设计含有attB接头的引物,使用NEB的Phusion超保... NAC转录因子参与植物生长发育和对生物和非生物胁迫的应答反应,利用Gateway克隆技术构建丹参NAC转录因子的RNAi植物表达载体,以便进一步研究丹参NAC转录因子的功能。根据Gateway技术要求,设计含有attB接头的引物,使用NEB的Phusion超保真聚合酶,通过PCR方法,扩增SmNAC1基因的特异性片段。通过BP重组反应,将带有attB接头的PCR产物克隆到入门载体pENTR/SD/D-TOPO上,再通过LR重组反应,利用入门载体上的SmNACi特异性基因片断克隆到植物表达载体pK7GWIWG2D上。实验结果表明Gateway载体的构建方法能够高效、快速地将目的基因克隆到表达载体上,为植物基因转化提供基础。 展开更多
关键词 RNAI gateway载体 BP和LR反应
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Gateway技术构建酵母双杂分析用辣椒cDNA文库 被引量:11
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作者 邱爱连 刘林林 +5 位作者 蔡汉阳 朱万里 黄木坤 陈雄 何水林 张健 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期791-796,共6页
构建cDNA文库是利用酵母双杂交技术开展特定cDNA分离的重要基础工作。利用Gateway技术,在成功提取辣椒总RNA并分离mRNA的基础上,合成了3种读码框的双链cDNA,通过BP反应构建其相应的入门文库,再通过LR反应将cDNA迅速且定向地重组到酵母... 构建cDNA文库是利用酵母双杂交技术开展特定cDNA分离的重要基础工作。利用Gateway技术,在成功提取辣椒总RNA并分离mRNA的基础上,合成了3种读码框的双链cDNA,通过BP反应构建其相应的入门文库,再通过LR反应将cDNA迅速且定向地重组到酵母双杂分析用目的载体pDESTTM22上,构建成高质量目的文库。经检测入门文库和目的文库滴度均达到(4.0~5.0)×106cfu/mL,文库总容量为(2.4~3.0)×107cfu,平均插入片段大小为1250bp,其质量完全满足于进一步利用酵母双杂体系分析目的基因互作蛋白cDNA。 展开更多
关键词 辣椒 入门文库 目的文库 gateway 酵母双杂
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利用Gateway克隆技术大规模克隆拟南芥转录因子 被引量:19
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作者 梅文倩 宋文强 +2 位作者 潘怡 巩威 朱玉贤 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第3期358-364,共7页
随着越来越多基因组全序列的测定完成,基因组的研究进入了功能研究阶段。功能基因组的研究需要把大量基因连入不同载体,传统的酶切连接构建载体的方法不能满足这种大规模克隆的需要。Gateway技术是一种高效的大规模克隆系统,而且对载体... 随着越来越多基因组全序列的测定完成,基因组的研究进入了功能研究阶段。功能基因组的研究需要把大量基因连入不同载体,传统的酶切连接构建载体的方法不能满足这种大规模克隆的需要。Gateway技术是一种高效的大规模克隆系统,而且对载体和宿主没有依赖性。本文利用Gateway大规模克隆技术将16个拟南芥转录因子的ORF克隆入植物表达载pPTV和酵母表达载体pYTV中,酵母融合表达实验和West-ern-blot检测证明了该克隆途径的可行性,并且得到的His-Tag融合蛋白,为拟南芥转录因子的大规模蛋白质组学研究奠定了良好的基础,同时基因序列的聚类分析为将来进一步的功能研究提供了有利信息。 展开更多
关键词 gateway克隆技术 拟南芥 转录因子 聚类分析 功能基因组
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基于Gateway技术的低成本植物双分子荧光互补分析系统 被引量:6
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作者 周洁 王栩鸣 +5 位作者 陈斌 陈娟 杨勇 余初浪 严成其 陈剑平 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期1024-1030,共7页
创制基于Gateway重组技术的双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)载体,同时创制低成本低克隆背景的Gateway入门载体。利用入门载体,采用Gateway技术快速将目标基因重组到BiFC目标载体,并采用农杆菌注射侵染... 创制基于Gateway重组技术的双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)载体,同时创制低成本低克隆背景的Gateway入门载体。利用入门载体,采用Gateway技术快速将目标基因重组到BiFC目标载体,并采用农杆菌注射侵染烟草的方法观察荧光互作结果。构建的Gateway入门载体,由于带有ccdB基因,非线性化的载体无法在ccdB敏感菌株中生长,因此消除了载体本身的背景。同时由XcmⅠ酶切后产生的T突出,可以很好地与PCR产物结合,连接效率和普通商业化T载体一致。此外,由于载体可由实验室自行制备且采用了TA克隆,创制入门克隆的成本大大降低。借助该研究改造的BiFC目标载体,目的基因能快速地重组到目的载体用于基因互作鉴定。利用本研究构建的Gateway系统,能够以较低成本快速的进行基因克隆和互作研究。 展开更多
关键词 入门载体 BIFC 基因互作 gateway
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使用与Gateway技术兼容的T载体获得入门克隆 被引量:10
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作者 陈其军 安瑞 +2 位作者 周海梦 陈珈 王学臣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期951-954,共4页
与Gateway技术兼容的农杆菌双元载体系统已开始应用于植物功能基因组的研究 ,但应用这些载体系统的一个瓶颈问题 ,是如何简单、经济和高效地将PCR产物或其他来源的目的DNA片段构建到入门载体上获得入门克隆 .为此 ,将传统的TA克隆技术与... 与Gateway技术兼容的农杆菌双元载体系统已开始应用于植物功能基因组的研究 ,但应用这些载体系统的一个瓶颈问题 ,是如何简单、经济和高效地将PCR产物或其他来源的目的DNA片段构建到入门载体上获得入门克隆 .为此 ,将传统的TA克隆技术与Gateway重组克隆技术进行整合 ,构建了与Gateway技术兼容的两种TA克隆载体 ,用于在克隆PCR产物或其他来源的目的DNA片段的同时获得入门克隆 .利用兼容Gateway技术的TA克隆载体有效地解决了上述瓶颈问题 . 展开更多
关键词 gateway克隆技术 TA克隆技术 入门载体 T载体 入门克隆
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Gateway技术构建结缕草低温和干旱诱导cDNA文库及其质量鉴定 被引量:11
15
作者 王舟 宗俊勤 +1 位作者 郭海林 刘建秀 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期911-917,共7页
为研究结缕草(Zoysia japonica)胁迫响应信号转导途径中的关键基因,揭示结缕草抗逆分子机制,建立结缕草功能基因组学研究基础平台,以经低温、干旱处理的结缕草为材料,采用Gateway技术构建了首个结缕草低温和干旱诱导的标准cDNA文库。文... 为研究结缕草(Zoysia japonica)胁迫响应信号转导途径中的关键基因,揭示结缕草抗逆分子机制,建立结缕草功能基因组学研究基础平台,以经低温、干旱处理的结缕草为材料,采用Gateway技术构建了首个结缕草低温和干旱诱导的标准cDNA文库。文库质量分析表明,未扩增的原始文库滴度1.76×106 pfu.mL-1,库容7.04×106 pfu,插入片段平均大小大于1kb,重组率90%。文库质量优良,可能包含大量新基因,不仅能为结缕草功能基因组分析提供必要资源,也可为后期进行高通量EST测序、发掘新抗逆相关基因、制作基因芯片等研究奠定基础。 展开更多
关键词 结缕草 CDNA文库 低温胁迫 干旱胁迫 构建 gateway技术
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单子叶植物RNA干扰和过表达Gateway载体的构建 被引量:10
16
作者 毕惠惠 王根平 +1 位作者 王成社 夏兰琴 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期115-123,共9页
基因枪和农杆菌介导的遗传转化是目前常用的两种单子叶植物遗传转化方法。载体的发展和改良是提高植物遗传转化效率的重要基础,RNA干扰载体和过表达载体是目前通过遗传转化研究植物基因功能的主要工具。Gateway克隆技术是一种基于lambd... 基因枪和农杆菌介导的遗传转化是目前常用的两种单子叶植物遗传转化方法。载体的发展和改良是提高植物遗传转化效率的重要基础,RNA干扰载体和过表达载体是目前通过遗传转化研究植物基因功能的主要工具。Gateway克隆技术是一种基于lambda噬菌体特异位点重组特性的通用克隆技术,该技术可以将大批目的基因方便、快捷地连接到受体载体上。本文利用Gateway技术结合传统酶切、连接方法,构建了适用于单子叶植物基因枪和农杆菌转化的RNA干扰Gateway载体pAHC-PSK-RNAi、pClean-G185-RNAi和过表达Gateway载体pAHC-PSK-OE和pClean-G185-OE,为利用基因枪和农杆菌介导的遗传转化,在小麦和水稻等单子叶植物中进行规模化基因功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 单子叶植物 遗传转化 RNA干扰 过表达 gateway
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Gateway~技术构建交链孢菌JH505 cDNA文库 被引量:12
17
作者 龙松华 张宁 +2 位作者 邱德文 黎定军 黄炜 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期963-965,共3页
Gateway○R技术构建cDNA文库,利用λ噬菌体的位点特异性重组,避免使用限制性内酶切割cDNA,能够解决常规方法构建cDNA文库的技术缺陷。首次应用Gateway○R技术构建交链孢菌cDNA文库,经检测cDNA入门文库的滴度达到1×107cfumL,文库总... Gateway○R技术构建cDNA文库,利用λ噬菌体的位点特异性重组,避免使用限制性内酶切割cDNA,能够解决常规方法构建cDNA文库的技术缺陷。首次应用Gateway○R技术构建交链孢菌cDNA文库,经检测cDNA入门文库的滴度达到1×107cfumL,文库总容量为9×107cfu,平均插入片段为1510bp。通过LR重组把入门文库转换为表达文库,表达文库的滴度为1.58×106cfu/mL,文库总容量为6.32×106cfu,平均插入片段大小为1680bp。表达文库的构建为进一步克隆植物激活蛋白基因打下了基础。 展开更多
关键词 gateway技术 交链孢菌 激活蛋白 cDNA入门文库 CDNA表达文库
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应用Gateway技术构建水稻OsDAD1基因的RNA干涉载体 被引量:16
18
作者 徐化学 熊建华 傅彬英 《分子植物育种》 CAS CSCD 2007年第1期133-136,共4页
近年来,RNA干涉广泛应用于植物基因功能研究。Gateway技术是通过采用多重载体高效构建目标基因及任何DNA片段克隆和表达载体的研究平台,该技术以λ噬菌体的位点特异性重组体系为基础,两端具有重组位点的DNA片段或目标基因可以非常容易... 近年来,RNA干涉广泛应用于植物基因功能研究。Gateway技术是通过采用多重载体高效构建目标基因及任何DNA片段克隆和表达载体的研究平台,该技术以λ噬菌体的位点特异性重组体系为基础,两端具有重组位点的DNA片段或目标基因可以非常容易地被重组克隆到含同源重组位点的载体上。这种以重组为基础的克隆体系目前已被广泛应用于分子生物学中来分析基因的功能。本文应用Gateway技术体系替代传统载体构建方法,构建了水稻基因OsDAD1的RNA干涉载体,从而证明了Gateway技术的可行性。 展开更多
关键词 RNA干涉 载体 gateway OsDAD1基因
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Gateway技术构建盐和干旱胁迫下水稻根系混合cDNA文库及其质量鉴定 被引量:3
19
作者 彭晓珏 刘瑢 +4 位作者 阳菁 丁霞 王芳 李阳生 蔡耀辉 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期291-294,共4页
为研究水稻非生物胁迫响应信号转导的网络途径,揭示水稻抗逆的分子机制,以NaCl胁迫、干旱胁迫处理及正常生长的水稻根系为材料,采用Gateway技术构建了水稻根系受盐和干旱诱导的混合cDNA文库.cDNA文库质量分析表明,未经扩增的原始文库容... 为研究水稻非生物胁迫响应信号转导的网络途径,揭示水稻抗逆的分子机制,以NaCl胁迫、干旱胁迫处理及正常生长的水稻根系为材料,采用Gateway技术构建了水稻根系受盐和干旱诱导的混合cDNA文库.cDNA文库质量分析表明,未经扩增的原始文库容量为1.5×106 cfu,插入片段大小主要为1 kb左右,重组率为100%.文库随机挑选克隆测序,结果显示插入序列完整性良好,文库中包含水解酶基因、逆境响应蛋白基因、氧化还原酶基因和富含甘氨酸的RNA结合蛋白质基因等.因此,本研究构建的盐和干旱诱导的水稻根系混合cDNA文库符合高质量文库的标准,可以用于进一步开展相关基因的克隆及功能研究. 展开更多
关键词 水稻 抗逆 gateway CDNA文库 盐胁迫 干旱胁迫
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番茄核体系酵母文库的构建及ToCV CP互作蛋白的筛选
20
作者 王利娜 高亢 +5 位作者 康忱 田哲娟 李亚栋 王鹏 李朝炜 吴志明 《华北农学报》 北大核心 2025年第3期34-43,共10页
旨在从cDNA文库中筛选潜在与番茄褪绿病毒(ToCV)外壳蛋白(CP)互作的蛋白,探究ToCV的侵染机制及CP在侵染过程中的功能,以应对当前越夏、秋延后番茄生产中因番茄褪绿病毒病大肆传播而致使番茄产量和品质严重受影响的状况。以感染ToCV的Mon... 旨在从cDNA文库中筛选潜在与番茄褪绿病毒(ToCV)外壳蛋白(CP)互作的蛋白,探究ToCV的侵染机制及CP在侵染过程中的功能,以应对当前越夏、秋延后番茄生产中因番茄褪绿病毒病大肆传播而致使番茄产量和品质严重受影响的状况。以感染ToCV的Moneymaker番茄品种作为试验材料,采用Gateway技术构建感染ToCV的番茄核体系酵母cDNA文库,并构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-CP(CP-BD)。以CP为诱饵蛋白,通过核体系酵母文库筛选出上百种参与多种生理过程的潜在互作蛋白,并进一步通过一对一的酵母双杂交验证以及NCBI BLAST比对确定与ToCV CP互作的相关蛋白。构建了核体系酵母文库,初级文库总克隆数为1.60×10^(7),重组率达100%,平均插入片段长度超过1000 bp;次级文库总克隆数同样为1.60×10^(7),重组率为100%,平均插入片段长度大于1000 bp,达到质量标准,满足后续酵母杂交试验的条件。由文库筛选得到的ToCV CP互作蛋白涵盖了细胞过程、生物调节、细胞物质运输等类别,其中在病毒复制和运输、侵染宿主细胞以及调节宿主细胞的代谢和细胞周期等生物过程相关的蛋白数量较多。此外,还涉及蛋白质结合、核酸结合、水解酶活性等相关蛋白,其中RNA酶最为丰富,在病毒侵染过程中发挥重要作用。最终确定了HSPs、DnaJ与TCPs等30种与ToCV CP互作的蛋白,为后续深入研究ToCV的侵染机制及CP在侵染过程中的功能奠定了良好基础。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 外壳蛋白 gateway技术 酵母双杂交 核体系
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