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结核分枝杆菌katG、rpoB、rpsL耐药基因快速检测方法的建立 被引量：2
1
作者 杨柳 苏明权 +4 位作者 程晓东 岳乔红 马越云 刘家云 郝晓柯 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第8期1735-1737,共3页
目的:建立一套应用multi-PCR-SSCP(multiple-Polymerase Chain Reaction-Single Strand Cinformation Poly-morphism)快速检测结核分枝杆菌耐药基因突变的方法,评价该方法的临床应用价值。方法:分别用常规PCR和multi-PCR-SSCP检测58株... 目的:建立一套应用multi-PCR-SSCP(multiple-Polymerase Chain Reaction-Single Strand Cinformation Poly-morphism)快速检测结核分枝杆菌耐药基因突变的方法,评价该方法的临床应用价值。方法:分别用常规PCR和multi-PCR-SSCP检测58株结核分枝杆菌临床分离株katG、rpoB、rpsL基因突变并与常规药敏试验检测结果进行对比。结果:经常规药敏试验检测,58株结核分枝杆菌临床分离株中有41株耐药,其中,耐异烟肼(INH)35株;耐利福平(RFP)31株;耐链霉素(SM)31株。单基因PCR-SSCP与multi-PCR-SSCP分析结果一致,检出katG、rpoB、rpsL基因的突变率分别为65.7%(23/35)、84%(26/31)、71%(22/31),17株药物敏感株中有1株rpoB基因SSCP电泳条带与结核杆菌标准株结果有差异。结论:multi-PCR-SSCP方法敏感、特异,可快速检测结核分枝杆菌katG、rpoB、rpsL耐药基因的突变,将该方法与药敏试验联合应用可互相弥补,成为临床指导用药的好方法。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 KATG RPOB RPSL 基因突变 multi-pcr-sscp
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耐多药肺结核耐药基因突变与临床疗效探讨 被引量：11
2
作者 林明贵 李洪敏 +6 位作者 吴雪琼 金关甫 王巍 王安生 张韬 丹子军 李燕峰 《中国防痨杂志》 CAS 2005年第4期229-232,共4页
目的了解耐多药肺结核耐药基因的突变与临床疗效的关系,为耐多药肺结核的治疗提供参考依据.方法 108例病人痰标本用PCR-SSCP方法检测了五种耐药基因和传统的药敏试验,并与临床疗效进行比较分析.结果耐多药肺结核耐药基因检测率分别是耐... 目的了解耐多药肺结核耐药基因的突变与临床疗效的关系,为耐多药肺结核的治疗提供参考依据.方法 108例病人痰标本用PCR-SSCP方法检测了五种耐药基因和传统的药敏试验,并与临床疗效进行比较分析.结果耐多药肺结核耐药基因检测率分别是耐异烟肼的katG基因突变率为70.4%,耐利福平的rpoB基因突变率72.2%,耐链霉素的rpsL基因突变率71.9%,耐吡嗪酰胺的pncA基因突变率53.4%,耐乙胺丁醇的embB基因突变率31.7%,其中高浓度耐药菌的基因突变率远高于低浓度的突变率.根据药敏试验及耐药基因检测结果指导治疗,应用以KAOP为基础的化疗方案,配合患者过去未曾用过的1～2种抗结核药物,经过平均1.4年的治疗,108例耐多药病人74.1%的病人痰菌阴转,且67.5%的病人痰结核杆菌培养阴转,83.3%的病人病灶吸收好转,65.3%的空洞闭合,取得了临床上较为满意的疗效.结论对耐多药肺结核进行耐药基因检测是一项重要工作,对指导治疗及预后判断有一定的参考价值.但尚需进行更多的观察. 展开更多
关键词 耐多药 肺结核 耐药性 基因突变 分枝杆菌 聚合酶链反应-单链构象多态性
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淋球菌多重耐药调节基因(mtrR)突变与多重耐药关系的研究 被引量：6
3
作者 齐素文 夏忠弟 +1 位作者 邹明祥 王冬梅 《实用预防医学》 CAS 2004年第2期221-223,共3页
目的　研究淋球菌多重耐药调节基因mtrR突变与淋球菌多重耐药的关系。　方法　①纸片扩散法检测 5 2株淋球菌对四种抗生素的敏感性 ;②PCR扩增mtrR基因中最常发生突变的 2 5 0个碱基进行SSCP(单链构象多态性 )分析 ;③根据SSCP的结果选... 目的　研究淋球菌多重耐药调节基因mtrR突变与淋球菌多重耐药的关系。　方法　①纸片扩散法检测 5 2株淋球菌对四种抗生素的敏感性 ;②PCR扩增mtrR基因中最常发生突变的 2 5 0个碱基进行SSCP(单链构象多态性 )分析 ;③根据SSCP的结果选取 11株标本 ,扩增其mtrR基因、测序 ,将其核苷酸序列与标准敏感株ATCC1942 4进行比较。结果　 5 2株细菌中有 8株对四种抗生素都敏感 ;对一种抗生素耐药的有 19株 ,只有一株mtrR基因发生点突变 ;对两种抗生素耐药的有 16株 ,其中有两株mtrR基因发生了点突变 ;对三种抗生素和四种抗生素耐药的株菌分别是 7株和 2株 ,它们的mtrR基因都发生了点突变。在这 11株标本中 ,发生 45位gly(GGC)→ (GAC)asp突变的为 5株 ,10 5位his(CAC)→(TAC)tyr突变的为 6株。　 结论　①mtrR基因突变介导淋球菌的多重耐药 ;②mtrR基因 45位 gly(GGC)→ (GAC)asp和 10 5位his(CAC) (TAC)tyr的突变与淋球菌多重耐药的关系密切。 展开更多
关键词 淋病奈瑟菌 多重耐药 点突变 PCR—SSCP
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快速检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药相关基因mPCR—SSCP建立及应用 被引量：3
4
作者 褚美芬 严杰 +3 位作者 钟雅文 吴亦斐 王欢 孙爱华 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期655-660,共6页
目的建立快速检测结核分枝杆菌异烟肼（INH）和利福平（RFP）耐药相关基因katG、inhA和rpoB突变的多重聚合酶链反应-单链构象多态性（multi PCR-single strand conformational polymorphism analysis，mPCR-SSCP）方法。方法药敏试验检... 目的建立快速检测结核分枝杆菌异烟肼（INH）和利福平（RFP）耐药相关基因katG、inhA和rpoB突变的多重聚合酶链反应-单链构象多态性（multi PCR-single strand conformational polymorphism analysis，mPCR-SSCP）方法。方法药敏试验检测134株结核分枝杆菌临床菌株对INH和RFP的耐药性。设计结核分枝杆菌INH和RFP耐药相关katG、inhA和rpoB基因PCR引物，建立mPCR-SSCP技术检测上述菌株katG、inhA和rpoB基因的突变，同时采用PCR直接测序技术（PCR—DS）检测上述基因片段突变情况，并对上述3种方法检测结果进行分析和比较。结果134株临床菌株均含有katG、inhA和rpoB基因，其中42株（31．3％）对INH耐药、45株（33．6％）对RFP耐药。mPCR-SSCP和PCR-DS检测结果显示，92株INH敏感菌株katG和inhA基因均未发生突变，检测特异性均为100％；89株RFP敏感菌株中rpoB基因分别有2株和1株检测出突变，检测特异性分别为97．8％和98．9％；42株INH耐药菌株中分别有33株和36株katG和／或inhA基因突变，检测灵敏度分别为78．6％和85．7％；45株RFP耐药菌株中rpoB基因分别有41株和43株发生突变，检测灵敏度分别为91．1％和95．6％。结论本研究建立的mPCR-SSCP能快速、简便、特异，并有一定的敏感性检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药相关基因katG、inhA和rpoB突变，具有临床应用前景。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 异烟肼/利福平/耐药 基因突变 多聚合酶链反应-单链构象多态性/检测
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哈萨克羊VRTN基因多态性与胸椎数量性状的关联分析
5
作者 李慧向 杨志江 +3 位作者 张梦丹 刘莉 倪伟 胡圣伟 《东北农业科学》 2023年第3期75-78,111,共5页
VRTN基因在胚胎的早期胸腔发育中起着重要作用,并调节胸椎的数量和发育。为了研究哈萨克绵羊VRTN基因的单核苷酸多态性(SNP)与胸椎数目性状之间的关系,使用聚合酶链反应单链构象多态性(PCR-SSCP)来检测399只哈萨克羊VRTN基因的多态性。... VRTN基因在胚胎的早期胸腔发育中起着重要作用,并调节胸椎的数量和发育。为了研究哈萨克绵羊VRTN基因的单核苷酸多态性(SNP)与胸椎数目性状之间的关系,使用聚合酶链反应单链构象多态性(PCR-SSCP)来检测399只哈萨克羊VRTN基因的多态性。通过独立卡方检验分析了哈萨克绵羊VRTN基因与胸椎数量性状的相关性,并利用DNA测序技术证实了PCR-SSCP试验的结果。发现哈萨克绵羊的SNP(rs82505838:C>T)与胸椎数目显著相关(P<0.01),偏离哈迪温伯格平衡。研究结果表明,VRTN基因SNP(rs82505838:C>T)可能影响哈萨克羊的胸椎数量,可能被用作胸椎性状数量的标记和哈萨克羊未来分子遗传育种的分子标记位点。 展开更多
关键词 绵羊 PCR-SSCP VRTN 多胸椎
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