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mCTAB-dLiCl法高效提取花生各组织部位RNA及其验证
被引量：
5
1
作者
熊发前
刘俊仙
+7 位作者
王丛丛
贺梁琼
韩柱强
蒋菁
钟瑞春
李忠
唐秀梅
唐荣华
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1781-1784,共4页
【目的】探讨花生不同组织部位RNA提取方法,为开展花生分子生物学研究奠定基础。【方法】在CTAB法的基础上,设计一种改良的mCTAB-dLiCl法,其使用高质量体积分数的KAC除去组织中的多糖,使用两次10.0 mol/L的LiCl沉淀RNA,采用琼脂糖凝胶...
【目的】探讨花生不同组织部位RNA提取方法,为开展花生分子生物学研究奠定基础。【方法】在CTAB法的基础上,设计一种改良的mCTAB-dLiCl法,其使用高质量体积分数的KAC除去组织中的多糖,使用两次10.0 mol/L的LiCl沉淀RNA,采用琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量,核酸蛋白分析仪测定RNA纯度,并通过逆转录、RT-PCR和cDNA-SCoT验证其质量。【结果】采用mCTAB-dLiCl法的RNA产率为554.80μg/g,RNA的A260/A280比率为1.89,RNA非变性琼脂糖凝胶电泳未出现可见的DNA条带;扩增的28S和18S条带比值为2∶1,且条带清晰无拖尾现象;提取的RNA通过逆转录、RT-PCR扩增和cDNA-SCoT扩增验证,均获得较好的扩增效果,获得的RNA和cDNA质量好。【结论】mCTAB-dLiCl RNA提取方法是一种高效提取花生各组织部位RNA的方法,可在花生分子生物学研究中应用。
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关键词
花生
RNA提取
mCTAB-d
licl
法
组织部位
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职称材料
油桐叶片和种仁总RNA提取方法
被引量：
1
2
作者
徐玲娜
汪阳东
+2 位作者
陈益存
周冠
张小平
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2011年第S1期39-43,共5页
本研究测得油桐叶片和种仁总糖含量分别为75.20,32.80 mg/g,总酚含量分别为15.75,0.57 mg/g,在此基础上对TRIzol法、CTAB-LiCl法进行改良,分别提取出高质量的种仁、叶片总RNA,并与异硫氰酸胍法及NOGEN试剂盒法进行比较,结果表明:改良TRI...
本研究测得油桐叶片和种仁总糖含量分别为75.20,32.80 mg/g,总酚含量分别为15.75,0.57 mg/g,在此基础上对TRIzol法、CTAB-LiCl法进行改良,分别提取出高质量的种仁、叶片总RNA,并与异硫氰酸胍法及NOGEN试剂盒法进行比较,结果表明:改良TRIzol法提取的油桐种仁总RNA OD260/OD280稳定在1.9～2.0,28S rRNA和18S rRNA条带清晰完整,RNA产率较高,改良CTAB-LiCl法得到的种仁总RNA有部分降解,异硫氰酸胍法则对小分子盐类去除不够充分,而试剂盒提取出的油桐种仁总RNA有少许降解且有DNA杂质污染。上述4种方法中只有改良CTAB-LiCl法能成功提取出质量较高的油桐叶片总RNA。因此,改良TRIzol法和改良CTAB-LiCl法可分别作为提取油桐种仁和叶片总RNA的首选方法。
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关键词
油桐
总RNA提取
改良TRIzol法
改良CTAB-
licl
法
异硫氰酸胍法
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职称材料
题名
mCTAB-dLiCl法高效提取花生各组织部位RNA及其验证
被引量：
5
1
作者
熊发前
刘俊仙
王丛丛
贺梁琼
韩柱强
蒋菁
钟瑞春
李忠
唐秀梅
唐荣华
机构
广西农业科学院经济作物研究所
广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室
广西农业科学院甘蔗研究所
仲恺农业工程学院
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1781-1784,共4页
基金
国家自然科学基金项目(31240059)
广西农业科学院科技发展基金项目(桂农科2013JQ05)
文摘
【目的】探讨花生不同组织部位RNA提取方法,为开展花生分子生物学研究奠定基础。【方法】在CTAB法的基础上,设计一种改良的mCTAB-dLiCl法,其使用高质量体积分数的KAC除去组织中的多糖,使用两次10.0 mol/L的LiCl沉淀RNA,采用琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量,核酸蛋白分析仪测定RNA纯度,并通过逆转录、RT-PCR和cDNA-SCoT验证其质量。【结果】采用mCTAB-dLiCl法的RNA产率为554.80μg/g,RNA的A260/A280比率为1.89,RNA非变性琼脂糖凝胶电泳未出现可见的DNA条带;扩增的28S和18S条带比值为2∶1,且条带清晰无拖尾现象;提取的RNA通过逆转录、RT-PCR扩增和cDNA-SCoT扩增验证,均获得较好的扩增效果,获得的RNA和cDNA质量好。【结论】mCTAB-dLiCl RNA提取方法是一种高效提取花生各组织部位RNA的方法,可在花生分子生物学研究中应用。
关键词
花生
RNA提取
mCTAB-d
licl
法
组织部位
Keywords
peanut
RNA extraction
modified ctab-double licl method
tissue
分类号
S565.2 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
油桐叶片和种仁总RNA提取方法
被引量：
1
2
作者
徐玲娜
汪阳东
陈益存
周冠
张小平
机构
安徽师范大学生命科学学院
中国林业科学研究院亚热带林业研究所
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2011年第S1期39-43,共5页
基金
国家林业局"948"项目(2009-4-23)
文摘
本研究测得油桐叶片和种仁总糖含量分别为75.20,32.80 mg/g,总酚含量分别为15.75,0.57 mg/g,在此基础上对TRIzol法、CTAB-LiCl法进行改良,分别提取出高质量的种仁、叶片总RNA,并与异硫氰酸胍法及NOGEN试剂盒法进行比较,结果表明:改良TRIzol法提取的油桐种仁总RNA OD260/OD280稳定在1.9～2.0,28S rRNA和18S rRNA条带清晰完整,RNA产率较高,改良CTAB-LiCl法得到的种仁总RNA有部分降解,异硫氰酸胍法则对小分子盐类去除不够充分,而试剂盒提取出的油桐种仁总RNA有少许降解且有DNA杂质污染。上述4种方法中只有改良CTAB-LiCl法能成功提取出质量较高的油桐叶片总RNA。因此,改良TRIzol法和改良CTAB-LiCl法可分别作为提取油桐种仁和叶片总RNA的首选方法。
关键词
油桐
总RNA提取
改良TRIzol法
改良CTAB-
licl
法
异硫氰酸胍法
Keywords
Tung tree
Total RNA isolation
modified
TRIzol
method
modified
CTAB-
licl
method
Guanidinium idothiocyanate
method
分类号
S3 [农业科学—农艺学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
mCTAB-dLiCl法高效提取花生各组织部位RNA及其验证
熊发前
刘俊仙
王丛丛
贺梁琼
韩柱强
蒋菁
钟瑞春
李忠
唐秀梅
唐荣华
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
油桐叶片和种仁总RNA提取方法
徐玲娜
汪阳东
陈益存
周冠
张小平
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2011
1
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职称材料
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