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Mito-Tempo对双酚A诱导猪卵母细胞线粒体功能障碍的缓解作用
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作者 金君学 张善龙 +5 位作者 高乐鹏 王坤 任钧 辛海丰 宋军 孙婧陶 《东北农业大学学报》 北大核心 2025年第4期56-63,共8页
研究建立双酚A(BPA)诱导的猪卵母细胞线粒体损伤模型,评估线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对BPA引起线粒体损伤的修复作用及其对卵母细胞成熟的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中,分别添加100μmol·L^(-1)BPA或BPA+0.1μmol·L^(... 研究建立双酚A(BPA)诱导的猪卵母细胞线粒体损伤模型,评估线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对BPA引起线粒体损伤的修复作用及其对卵母细胞成熟的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中,分别添加100μmol·L^(-1)BPA或BPA+0.1μmol·L^(-1)Mito-Tempo(BPA+MT),检测卵丘细胞扩散指数、卵母细胞成熟及线粒体功能相关指标变化水平,并评估后续孤雌胚胎发育潜能。结果表明:与对照组相比,BPA阻碍卵丘细胞扩展、降低线粒体膜电位,增加卵母细胞线粒体应激水平,显著抑制卵母细胞成熟率[对照组为(83.9±1.3)%,BPA组为(62.1±1.7)%]及其后续孤雌胚胎的囊胚形成率[对照组为(41.9±1.0)%,BPA组为(31.5±0.2)%,P<0.05]。补充Mito-Tempo可降低MitoSOX水平,提高膜电位及线粒体功能相关基因表达,增加猪卵丘细胞扩散指数,改善卵母细胞体外成熟率[BPA组为(62.1±1.7)%,BPA+MT组为(79.4±0.2)%]及其后续孤雌胚胎发育能力[BPA组为(31.5±0.2)%,BPA+MT组为(39.4%±0.1)%,P<0.05]。综上,在猪卵母细胞体外成熟阶段添加Mito-Tempo,可有效缓解BPA诱导的线粒体损伤,提升卵母细胞成熟率及其后续孤雌胚胎发育能力。 展开更多
关键词 卵母细胞 线粒体 双酚A mito-Tempo
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线粒体靶向抗氧化剂Mito-TEMPO对鸡精液冷冻保存效果的影响
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作者 姚博元 张雅茹 +2 位作者 何雨彤 尉斌艳 王欣荣 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第11期1-7,共7页
旨在探究线粒体靶向抗氧化剂Mito-TEMPO在鸡精液冷冻保存中的应用效果,为鸡精液解冻后的精子品质提高提供依据。在精液冷冻稀释液中添加不同浓度的Mito-TEMPO(0、20、40、60和80μmol/m L),检测解冻后鸡精子的质量指标、抗氧化性能和线... 旨在探究线粒体靶向抗氧化剂Mito-TEMPO在鸡精液冷冻保存中的应用效果,为鸡精液解冻后的精子品质提高提供依据。在精液冷冻稀释液中添加不同浓度的Mito-TEMPO(0、20、40、60和80μmol/m L),检测解冻后鸡精子的质量指标、抗氧化性能和线粒体酶活性。结果:与对照组(0μmol/m L Mito-TEMPO)相比,添加40μmol/m L Mito-TEMPO时,解冻后鸡精子的活性、线粒体活性以及顶体、质膜和DNA完整率均显著提高(P<0.05);线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢酶(CAT)活性显著提高(P<0.05);琥珀酸脱氢酶(SDH)、L-乳酸脱氢酶(L-LDH)和谷草转氨酶(GOT)活性及丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05)。结论:在鸡精液冷冻稀释液中添加40μmol/m L的Mito-TEMPO可显著改善解冻后精子的活率和活力,有效保护精子的质膜、顶体和DNA的完整性,提高精子的抗氧化能力和线粒体活性,并减少线粒体相关酶的活性,显著改善鸡精子解冻后的质量。 展开更多
关键词 mito-TEMPO 精液品质 冷冻保存
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Mito-TEMPO对猪精子冷冻保存效果的研究 被引量:2
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作者 刘娟 许春荣 +7 位作者 刘念 张争光 赵文婧 赵欢欢 许鹏 刘德玉 许常龙 胡传活 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期1370-1376,共7页
【目的】筛选最佳的Mito-TEMPO浓度并探究其对猪精子冻后质量、抗氧化能力及线粒体功能的影响,为改善猪精子冷冻保存方法提供参考依据。【方法】在冷冻Ⅰ液中添加0.5、5.0、50.0和500.0μmol/L Mito-TEMPO,通过评估冷冻解冻后各组精子... 【目的】筛选最佳的Mito-TEMPO浓度并探究其对猪精子冻后质量、抗氧化能力及线粒体功能的影响,为改善猪精子冷冻保存方法提供参考依据。【方法】在冷冻Ⅰ液中添加0.5、5.0、50.0和500.0μmol/L Mito-TEMPO,通过评估冷冻解冻后各组精子的动力学参数和活率,筛选出适用于猪精液冷冻保存的Mito-TEMPO浓度。检测冷冻解冻后猪精子的质膜完整率、顶体完整率、DNA碎片指数(DFI)、活性氧(ROS)水平、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性,以及ATP和线粒体呼吸链复合物Ⅰ~Ⅴ含量。【结果】与新鲜组(F组)相比,冷冻解冻后精子的动力学参数和活率显著降低(P<0.05,下同),而添加Mito-TEMPO对冻后精子动力学参数和活率均有不同程度的改善,以50.0μmol/L Mito-TEMPO最有效。与F组相比,冻后猪精子的质膜和顶体完整率、T-AOC及ATP和线粒体呼吸链复合物Ⅰ~Ⅴ含量显著降低,CAT和T-SOD活性也显著降低,DFI、ROS水平、MDA含量显著升高。与冷冻对照组(C组)相比,50.0μmol/L Mito-TEMPO组(M组)中精子的质膜完整率、顶体完整率、T-AOC及ATP和线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ含量显著升高,DFI、ROS水平、MDA含量显著降低,CAT和T-SOD活性显著提高。【结论】Mito-TEMPO对猪精子具有冷冻保护作用,且Mito-TEMPO的最佳浓度是50.0μmol/L,可通过提高冷冻解冻后猪精子的抗氧化能力和线粒体功能来改善精子质量。 展开更多
关键词 mito-TEMPO 精子 冷冻保存 氧化应激
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Mito-TEMPO通过减轻线粒体损伤抑制铅诱导的BV2小胶质细胞活化 被引量:2
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作者 陈超 赵再华 +2 位作者 王涛 卢金锁 郑刚 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期65-72,共8页
目的:研究线粒体氧化应激在铅暴露诱导的小胶质细胞活化中的作用,观察靶向线粒体的抗氧化剂Mito-TEMPO的保护作用。方法:培养小鼠小胶质细胞系(BV2),建立铅暴露模型。采用噻唑蓝(MTT)比色法测定铅暴露对细胞活力的影响,采用免疫荧光染... 目的:研究线粒体氧化应激在铅暴露诱导的小胶质细胞活化中的作用,观察靶向线粒体的抗氧化剂Mito-TEMPO的保护作用。方法:培养小鼠小胶质细胞系(BV2),建立铅暴露模型。采用噻唑蓝(MTT)比色法测定铅暴露对细胞活力的影响,采用免疫荧光染色法检测M1型活化标志物CD86蛋白的表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;采用线粒体超氧化物(MitoSOX)染色检测线粒体氧化应激水平;采用线粒体膜电位荧光探针(JC-1)染色检测线粒体膜电位;采用细胞能量代谢分析(O2k)检测线粒体呼吸能力。采用Mito-TEMPO抗氧化剂进行干预,研究Mito-TEMPO对BV2线粒体氧化应激、细胞活化的抑制作用。结果:与对照组相比,铅暴露组BV2细胞CD86蛋白表达水平显著升高,促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著升高,线粒体氧化应激水平显著升高,线粒体膜电位、呼吸能力显著降低。Mito-TEMPO处理显著减轻了BV2细胞线粒体氧化应激与功能损伤,并显著抑制了BV2细胞M1型活化水平。结论:Mito-TEMPO能够逆转铅暴露诱导的BV2细胞M1型活化,其机制可能与Mito-TEMPO减轻线粒体氧化应激与功能损伤有关。 展开更多
关键词 mito-TEMPO 线粒体 炎症 BV2小胶质细胞
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mito-K_(ATP)通道在异氟醚预处理减轻沙土鼠脑缺血-再灌注损伤中的作用 被引量:3
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作者 章放香 张伟晶 +2 位作者 王世平 安裕文 邱冰 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1113-1115,共3页
目的观察mito-KATP通道在异氟醚(ISO)预处理脑保护中的作用。方法健康沙土鼠60只随机均分为六组:对照组(A组)、缺血-再灌注组(B组)、1.5%ISO预处理组(C组)、1.5%ISO预处理+5-羟葵酸(5-HD)5mg/kg组(D组)、1.5%ISO预处理+5-HD10mg/kg组(E... 目的观察mito-KATP通道在异氟醚(ISO)预处理脑保护中的作用。方法健康沙土鼠60只随机均分为六组:对照组(A组)、缺血-再灌注组(B组)、1.5%ISO预处理组(C组)、1.5%ISO预处理+5-羟葵酸(5-HD)5mg/kg组(D组)、1.5%ISO预处理+5-HD10mg/kg组(E组)、1.50%ISO预处理+5-HD15mg/kg组(F组)。预处理方法为连续5d吸入1.5%ISO1h/d;末次预处理24h后行缺血-再灌注,D、E、F组缺血前30min分别腹腔注射5、10、15mg/kg5-HD。48h后HE染色观察脑组织形态学变化,TUNEL法检测海马神经元凋亡,免疫组化检测Bcl-2及Bax在海马神经元的表达。结果与A组比较,B、C、D、E、F组脑损伤评分、神经细胞凋亡率、Bax表达均明显升高(P<0.05);而C、D、E、F组Bcl-2阳性表达明显升高(P<0.05)。与C组比较,E、F组脑损伤评分、神经细胞凋亡率及Bax表达明显升高(P<0.05),而Bcl-2阳性表达降低(P<0.05)。结论 mito-KATP通道在ISO预处理脑保护效应中起重要作用。 展开更多
关键词 异氟醚 预处理 脑保护 mito—KATP通道
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Mito-Tempo在LPS诱导的肺动脉内皮细胞损伤中的作用 被引量:1
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作者 张立新 王晓颖 +4 位作者 和思燏 白君娥 朱祥瑞 梅健 马翠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期841-848,共8页
目的:探讨Mito-Tempo在脂多糖(LPS)诱导肺动脉内皮细胞(PAECs)炎性损伤过程中的作用。方法:体外分离和培养牛PAECs,采用MTT和caspase-3活性检测实验测定不同浓度LPS诱导PAECs损伤情况。细胞经Tempol和Mito-Tempo处理后,分别采用Mito-ro... 目的:探讨Mito-Tempo在脂多糖(LPS)诱导肺动脉内皮细胞(PAECs)炎性损伤过程中的作用。方法:体外分离和培养牛PAECs,采用MTT和caspase-3活性检测实验测定不同浓度LPS诱导PAECs损伤情况。细胞经Tempol和Mito-Tempo处理后,分别采用Mito-roGFP、四甲基罗丹明甲酯(TMRM)和MitoSox检测细胞线粒体氧化应激、线粒体膜电位及活性氧簇(ROS)水平;使用细胞免疫荧光和Western blot方法测定发动蛋白相关蛋白1(Drp1)及磷酸化Drp1的水平;运用划痕、Transwell及小管形成实验考察细胞迁移和小管形成能力。结果:LPS刺激PAECs导致细胞凋亡及功能损伤,线粒体形态及功能失衡;Mito-Tempo显著抑制了LPS诱导的细胞线粒体氧化应激、线粒体去极化和ROS产量,降低了Drp1磷酸化水平,恢复了细胞迁移和小管形成能力。结论:Mito-Tempo能够逆转LPS造成的PAECs损伤,其具体机制可能与Mito-Tempo减轻线粒体形态及功能异常、减少Drp1磷酸化及抑制细胞氧化应激有关。 展开更多
关键词 mito-Tempo 脂多糖 肺动脉高压 肺动脉内皮细胞 线粒体
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Mito-Tempo修复过氧化氢诱导的猪卵母细胞线粒体损伤机制研究 被引量:3
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作者 金君学 綦新月 +3 位作者 刘子瑜 张吉龙 马祥钧 孙婧陶 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期28-34,共7页
本研究探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对过氧化氢诱导猪卵母细胞线粒体损伤修复的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中添加10 mmol·L^(-1)过氧化氢或过氧化氢+0.1μmol·L^(-1)Mito-Tempo,检测卵丘细胞扩散、卵母细胞成熟及... 本研究探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对过氧化氢诱导猪卵母细胞线粒体损伤修复的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中添加10 mmol·L^(-1)过氧化氢或过氧化氢+0.1μmol·L^(-1)Mito-Tempo,检测卵丘细胞扩散、卵母细胞成熟及线粒体功能相关因子,观察孤雌胚胎发育情况。结果表明,与过氧化氢组相比,添加Mito-Tempo可显著提高卵丘细胞扩散指数,显著降低Mito SOX水平,提高膜电位及线粒体功能基因表达水平,显著改善猪卵母细胞体外成熟率及孤雌胚胎发育能力(P<0.05)。证明Mito-Tempo对过氧化氢诱导的猪卵母细胞线粒体损伤具有修复功能。 展开更多
关键词 卵母细胞 线粒体 过氧化氢 mito-Tempo
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从线粒体膜稳定作用探讨线粒体K(MITO-KATP)通道开放剂改善老年冠心病大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制 被引量:8
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作者 张海波 李运丽 +2 位作者 艾景雪 高瑞 宋志明 《中国循证心血管医学杂志》 2019年第5期560-563,568,共5页
目的从线粒体膜稳定作用探讨线粒体K+ATP(MITO-KATP)通道开放剂尼可地尔(Nicorandil,Nic)改善老年冠心病大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制。方法选取60只健康雄性SD老年大鼠(18~20个月),体重400~600g,随机分为3组:假手术(Sham)组、模型(Mod... 目的从线粒体膜稳定作用探讨线粒体K+ATP(MITO-KATP)通道开放剂尼可地尔(Nicorandil,Nic)改善老年冠心病大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制。方法选取60只健康雄性SD老年大鼠(18~20个月),体重400~600g,随机分为3组:假手术(Sham)组、模型(Model)组和尼可地尔(Nic)组,每组10只。建立老年冠心病大鼠心肌缺血再灌注(MI/R)模型,尼可地尔(Nic)组在再灌注之前,股静脉注射尼可地尔5mg/kg,假手术组和模型组注射等量的生理盐水。3组大鼠在术后24h进行腹主动脉取血,分别检测大鼠血清中,肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)的水平变化;采用流式细胞仪测定大鼠心肌细胞线粒体膜电位的变化情况;采用WesternBlot法测定心肌细胞线粒体中p-Cx43蛋白变化情况,心肌组织中Bcl-2和Bax蛋白表达情况的变化。结果与Sham组相比,模型组大鼠血清中CK-MB和LDH的含量增加(P<0.05),说明心肌缺血再灌注会导致心肌细胞损伤;与模型组相比,尼可地尔组大鼠血清中CK-MB和LDH的含量下降(P<0.05),说明尼可地尔有抗心肌缺血的作用。采用阳离子绿色荧光染料罗丹明123对线粒体的膜电位进行检测,与Sham组相比,模型组大鼠心肌线粒体膜电位降低(P<0.05),而尼可地尔组大鼠心肌线粒体膜电位高于模型组(P<0.05),说明心肌细胞凋亡时会导致线粒体膜电位降低以及功能变化,而线粒体K+ATP通道开放剂尼可地尔可以缓解线粒体的损伤情况。WesternBlot结果表明,与Sham组相比,模型组大鼠心肌线粒体p-Cx43的蛋白表达下调,而尼可地尔组大鼠心肌线粒体p-Cx43的蛋白表达高于模型组,说明尼可地尔能够上调心肌线粒体p-Cx43的蛋白表达,维持线粒体的稳定性。与Sham组相比,模型组大鼠心肌组织中Bcl-2的蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调;而尼可地尔组大鼠心肌组织中Bcl-2的蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调,说明线粒体K+ATP通道开放剂尼可地尔可有效抑制心肌缺血再灌注导致的心肌细胞凋亡。结论线粒体K+ATP通道开放剂尼可地尔对心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能是通过降低大鼠血清中CK-MB和LDH的含量,维持线粒体膜稳定性,抑制心肌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 线粒体K(mito-KATP)通道开放剂 心肌缺血再灌注损伤 线粒体膜电位 心肌细胞
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线粒体靶向抗氧化剂Mito-TEMPO对氮芥诱导BEAS-2B细胞损伤的影响 被引量:3
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作者 赵晨茜 徐安琦 +5 位作者 艾多 孔德钦 张晓迪 李文丽 海春旭 刘江正 《癌变·畸变·突变》 CAS 2022年第3期161-168,共8页
目的:探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-TEMPO对氮芥(HN2)诱导人支气管上皮细胞系BEAS-2B的影响。方法:BEAS-2B细胞分为正常对照组、Mito-TEMPO对照组、HN2染毒组和Mito-TEMPO干预组,其中正常对照组和Mito-TEMPO对照组分别给予含DMSO(体积分... 目的:探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-TEMPO对氮芥(HN2)诱导人支气管上皮细胞系BEAS-2B的影响。方法:BEAS-2B细胞分为正常对照组、Mito-TEMPO对照组、HN2染毒组和Mito-TEMPO干预组,其中正常对照组和Mito-TEMPO对照组分别给予含DMSO(体积分数为0.1%)和Mito-TEMPO(100μmol/L)的无血清培养基处理26 h,HN2染毒组给予含DMSO的无血清培养基预处理2 h,然后给予HN2(8μmol/L)染毒24 h,Mito-TEMPO干预组给予Mito-TEMPO(100μmol/L)预处理2 h,然后HN2(8μmol/L)和Mito-TEMPO(100μmol/L)共处理24 h。分别采用CCK-8法检测细胞活性,速率法检测细胞培养基上清乳酸脱氢酶(LDH)活性,倒置显微镜观察细胞形态,Annexin V/PI探针法流式细胞术检测细胞凋亡,JC-1探针法检测线粒体膜电位,紫外分光光度法检测细胞匀浆ATP含量,MitoSOX、DCFH-DA、DHE探针法分别检测细胞内线粒体ROS、H2O2及总ROS水平,实时荧光定量PCR检测炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达水平。结果:与HN2染毒组相比,Mito-TEMPO干预组细胞活性降低了约42.6%(P<0.05),细胞上清LDH水平显著增加(P<0.05),同时伴有异常形态细胞增多,Mito-TEMPO干预组细胞线粒体ROS水平降低了53.6%(P<0.05),细胞内H2O2水平及总ROS水平分别升高了171%和43.4%(均为P<0.05)。Mito-TEMPO干预对HN2染毒导致的细胞凋亡比例、线粒体膜电位、ATP含量、TNF-α、IL-6的mRNA表达水平等指标改变均无显著影响(P>0.05)。结论:100μmol/L的Mito-TEMPO干预在HN2染毒BEAS-2B细胞模型中促进了细胞损伤,其机制可能与提高细胞内H2O2水平及总ROS水平有关。 展开更多
关键词 线粒体靶向抗氧化剂 mito-TEMPO 氮芥 肺损伤 凋亡 氧化应激 炎症
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Mito-OS-Timer:一种靶向监测线粒体氧化应激的荧光秒表
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作者 张小妮 翁伊纯 +3 位作者 范奕浩 王晓娟 赵佳宇 张云龙 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期97-105,共9页
线粒体氧化应激(mitochondrial oxidative stress,Mito-OS)是一种线粒体内活性氧产生与抗氧化系统失衡状态,活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)诱发氧化应激会造成线粒体损伤,被认为是促发衰老和疾病的一个重要因素。目前,氧化应激... 线粒体氧化应激(mitochondrial oxidative stress,Mito-OS)是一种线粒体内活性氧产生与抗氧化系统失衡状态,活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)诱发氧化应激会造成线粒体损伤,被认为是促发衰老和疾病的一个重要因素。目前,氧化应激细胞或动物模型的评价方法主要基于细胞形态、动物表型或特征代谢产物产生情况等指标,无法实时监测动态变化。本研究建立了一种靶向线粒体的氧化应激荧光蛋白监测系统,命名为Mito-OS-Timer,可实时监测线粒体氧化应激动态变化。主要基于荧光蛋白DsRed1-E5红绿荧光转变速率与氧浓度变化呈正相关机理,将DsRed1-E5基因与定位线粒体内膜的ATP合酶亚基(ATP5PB片段)进行基因融合,构建了pMito-OS-Timer重组质粒以及HEK293T稳定表达细胞株,0-300μmol/L H_(2)O_(2)和0-5μmol/L鱼藤酮分别诱导处理后,结果显示细胞模型线粒体内红绿荧光转变速率与线粒体氧化应激程度呈现明显正相关。另外,利用Mito-OS-Timer检测pLVX-shFLCN沉默folliculin(FLCN)基因诱导氧化应激程度增强。此系统为研究线粒体氧化应激提供了一种新的可视化方法。 展开更多
关键词 线粒体氧化应激 荧光蛋白计时器 mito-OS-Timer 肿瘤抑制因子 FLCN基因
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Mito-KATP对缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞凋亡的影响及作用机制
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作者 姚菊 曹苏 沈施仁 《山东医药》 CAS 2012年第15期42-45,共4页
目的探讨线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)开放影响缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(MMECs)凋亡的作用机制。方法培养大鼠心肌微血管内皮细胞,随机分为四组:对照组(N组)、模型组(H/R组)、开放剂组(DZ组)、阻断剂组(5-HD组)。DZ组加入10... 目的探讨线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)开放影响缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(MMECs)凋亡的作用机制。方法培养大鼠心肌微血管内皮细胞,随机分为四组:对照组(N组)、模型组(H/R组)、开放剂组(DZ组)、阻断剂组(5-HD组)。DZ组加入100μmol/L二氮嗪预处理2 h,5-HD组在加入100μmol/L二氮嗪前,先用100μmol/L 5-羟葵酸预处理2 h,然后上述两组和H/R组同样进行缺氧2 h复氧2 h。Hoechst染色方法观察凋亡细胞形态,Annexin V-FITC/PI双标记法测定各组细胞凋亡率、RT-PCR法检测各组NF-κB、FKN和p53 mRNA转录水平。结果与N组比较,H/R组可见大量细胞坏死、脱落,细胞凋亡率升高(P<0.01),NF-κB、FKN和p53 mRNA表达上调(P<0.01);与H/R组比较,DZ组可见部分细胞坏死脱落,细胞凋亡率降低(P<0.01),NF-κB、FKN和p53 mRNA表达下调(P<0.01);5-HD组与H/R组比较无显著差异。结论 mito-KATP开放可抑制缺氧复氧所致MMECs凋亡,其机制可能与抑制NF-κB、FKN及p53 mRNA表达有关。 展开更多
关键词 线粒体ATP敏感性钾通道 心肌微血管内皮细胞 缺氧复氧 核因子-κB 趋化因子FRACTALKINE 抑癌基因 p53
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急性间断性缺氧下调大鼠前包钦格复合体中丝切蛋白的表达
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作者 亢君君 卢乃宁 +3 位作者 朱媛媛 黄晓峰 武胜昔 刘莹莹 《神经解剖学杂志》 北大核心 2025年第4期422-428,共7页
目的:探讨丝切蛋白(cofilin)在呼吸中枢前包钦格复合体(pre-BotC)中的表达及超微结构分布,揭示其参与突触后线粒体锚定和突触可塑性的潜在机制。方法:应用神经激肽1受体(NK1R)为pre-BotC形态学标记物,结合Westernblot、RT-qPCR、免疫荧... 目的:探讨丝切蛋白(cofilin)在呼吸中枢前包钦格复合体(pre-BotC)中的表达及超微结构分布,揭示其参与突触后线粒体锚定和突触可塑性的潜在机制。方法:应用神经激肽1受体(NK1R)为pre-BotC形态学标记物,结合Westernblot、RT-qPCR、免疫荧光和免疫电镜双标记技术,观察常氧组(NOR)和急性间断性缺氧(AIH)组pre-BotC神经元cofilin表达及其超微结构分布。结果:cofilin在pre-BotCNK1R阳性神经元胞核、胞体和树突内均有表达,且在AIH干预后cofilin表达降低;免疫电镜结果显示cofilin在树突棘以及突触后丝状或絮状结构上表达,对317个突触(NOR:122;AIH:195)进行了分析,结果显示NOR组65.6%突触后存在cofilin表达,而在AIH组中这一比例下降至47.2%,结合cofilin在肌动蛋白(actin)剪切调控中的作用,提示AIH干预后,cofilin对突触后actin剪切作用减弱,进而可能增强了线粒体的突触后锚定。结论:cofilin是actin结合蛋白,参与actin剪切及解聚调控,AIH干预后cofilin的表达下降,提示cofilin可能促进actin聚合,参与线粒体的突触后锚定和pre-BotC突触可塑性的调控。 展开更多
关键词 前包钦格复合体 丝切蛋白 急性间断性缺氧 超微结构 线粒体 神经激肽1受体 大鼠
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腹内侧下丘脑GLP-1R阳性神经元在糖稳态调控中的作用和机制
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作者 贺承康 龚昌雄 +6 位作者 彭舟舟 张爽 王柄乔 赵源 许鸣锐 林森 杨清武 《中国神经精神疾病杂志》 北大核心 2025年第6期354-362,共9页
目的探讨胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)调控糖稳态的神经基础并解析GLP-1影响糖感知神经元活动的分子机制。方法以雄性GLP-1R-Cre、GLP-1R KO以及野生型小鼠为研究对象。采用光纤记录腹内侧下丘脑(ventromedial hypo... 目的探讨胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)调控糖稳态的神经基础并解析GLP-1影响糖感知神经元活动的分子机制。方法以雄性GLP-1R-Cre、GLP-1R KO以及野生型小鼠为研究对象。采用光纤记录腹内侧下丘脑(ventromedial hypothalamus,VMH)神经元钙信号,利用膜片钳分析GLP-1受体阳性(GLP-1R^(VMH))神经元的电生理特性。采用脑立体定位病毒注射和化学遗传学,结合血浆激素检测以及常规糖代谢指标检测,明确GLP-1R^(VMH)神经元对糖稳态的调控作用。利用组织和细胞线粒体呼吸功能测定、透射电镜和常规分子生物学方法,探讨GLP-1R激动剂调节糖稳态的机制。结果在葡萄糖浓度从5.0 mmol/L降低至0.5 mmol/L时,GLP-1R^(VMH)神经元的动作电位频率显著降低[(4.51±0.80)Hz vs.(1.43±0.51)Hz,P<0.01];激活GLP-1RVMH神经元显著增强了胰岛素分泌[(7.60±0.56)μU/mL vs.(11.34±0.93)μU/mL,P<0.01],抑制该类神经元活动则损害了GLP-1激动剂的降糖效率(32.03%±0.91%vs.25.77%±1.09%,P<0.001),其机制与GLP-1调控Drp1磷酸化,促进神经元线粒体分裂并改善线粒体能量代谢有关。结论GLP-1R^(VMH)神经元是一类葡萄糖兴奋神经元,激活该类神经元能够促进胰岛素分泌,GLP-1R受体激动剂发挥降糖作用部分依赖于GLP-1R^(VMH)神经元活动。 展开更多
关键词 腹内侧下丘脑 葡萄糖稳态 胰高血糖素样肽-1 线粒体 线粒体动力相关蛋白1
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线粒体ROS改变参与石蒜碱诱导的HepG2细胞凋亡 被引量:2
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作者 抗晶晶 刘晓宁 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期91-96,共6页
探究石蒜碱诱导HepG2细胞凋亡的分子机理. CCK-8实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测加或不加SS31情况下,石蒜碱对HepG2细胞凋亡比例的影响;用核酸染料Hoechst 33342评估凋亡细胞细胞核的形态变化;用Western blot分析技术检测PARP片段... 探究石蒜碱诱导HepG2细胞凋亡的分子机理. CCK-8实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测加或不加SS31情况下,石蒜碱对HepG2细胞凋亡比例的影响;用核酸染料Hoechst 33342评估凋亡细胞细胞核的形态变化;用Western blot分析技术检测PARP片段的表达情况.成功构建靶向线粒体的Mito-Grx1-roGFP2转基因稳定株肝癌细胞系HepG2. SS31作为线粒体ROS的定向清除剂,能够改善石蒜碱引起的HepG2细胞形态学损伤及细胞核内PARP切割,抑制石蒜碱诱导的细胞凋亡,降低反映线粒体ROS含量的405 nm/488 nm荧光比值.研究结果提示,线粒体内ROS水平的改变是石蒜碱诱导HepG2细胞凋亡的机制之一.石蒜碱有望成为治疗肝癌的潜力药物,值得更深入的研究. 展开更多
关键词 石蒜碱 人类肝癌HepG2细胞 细胞凋亡 mito-Grx1-roGFP2 线粒体ROS SS31
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参仙升脉口服液抑制线粒体活性氧释放治疗病态窦房结综合征小鼠 被引量:2
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作者 毛丹 李志爽 +1 位作者 程佳新 侯平 《热带医学杂志》 CAS 2021年第5期571-574,617,F0003,共6页
目的探索参仙升脉口服液对窦房结功能障碍小鼠线粒体活性氧(mito-ROS)释放的影响,以及mito-ROS释放对窦房结纤维化的影响。方法30只C57B6小鼠随机分为假手术组(Sham组,n=10)、窦房结综合征组(SSS组,n=10)和参仙升脉口服液治疗组(SXSM组,... 目的探索参仙升脉口服液对窦房结功能障碍小鼠线粒体活性氧(mito-ROS)释放的影响,以及mito-ROS释放对窦房结纤维化的影响。方法30只C57B6小鼠随机分为假手术组(Sham组,n=10)、窦房结综合征组(SSS组,n=10)和参仙升脉口服液治疗组(SXSM组,n=10);通过植入Alzet渗透压泵,渗入ANGⅡ的方法建立SSS小鼠模型,SXSM组灌胃参仙升脉口服液0.2 mL/d,持续28 d。对各组小鼠进行心率检测;Masson染色方法观察窦房结纤维化程度;ELISA方法检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、过氧化物酶(MPO)的含量;Western blot法检测内质网应激蛋白GRP78、CHOP及线粒体凋亡;IF法检测mito-ROS的表达情况。结果本研究建立的SSS组小鼠模型心率显著降低,窦房结纤维化明显,氧化应激因子ROS、MDA、MPO含量升高;与其相比,SXSM组心率显著升高,窦房结纤维化得以改善,氧化应激水平受到抑制,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。同时SXSM组小鼠内质网应激蛋白GRP78、CHOP及线粒体凋亡蛋白cleaved-caspase3表达降低,mito-ROS表达降低,与SSS组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论参仙升脉口服液能够提高心率,降低氧化应激反应,减轻SSS小鼠窦房结损伤,其调控机制与抑制mito-ROS的释放有关。 展开更多
关键词 参仙升脉口服液 病态窦房结综合征 纤维化 mito-ROS
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茉莉酸甲酯通过破坏线粒体功能及诱导氧化应激抑制肝星状细胞活化的研究
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作者 石麒麟 邓湘萍 向莉 《中国医药科学》 2025年第23期25-29,101,共6页
目的探讨茉莉酸甲酯(MeJA)对肝星状细胞(HSCs)活力、线粒体数量与功能及纤维化表型的影响,以阐明其抗肝纤维化的潜在作用机制。方法采用3种肝星状细胞系(LX-2、HSC-T6和CFSC-8B)进行实验,通过CCK-8法检测不同浓度MeJA处理后的细胞存活... 目的探讨茉莉酸甲酯(MeJA)对肝星状细胞(HSCs)活力、线粒体数量与功能及纤维化表型的影响,以阐明其抗肝纤维化的潜在作用机制。方法采用3种肝星状细胞系(LX-2、HSC-T6和CFSC-8B)进行实验,通过CCK-8法检测不同浓度MeJA处理后的细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC_(50))。选择LX-2细胞进行后续功能验证,通过Mito Tracker FM Green评估线粒体数量变化;采用DCFH-DA和MitoSOX荧光探针检测细胞内及线粒体活性氧水平(ROS和mtROS);利用Western blot和qPCR技术检测纤维化标志物,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)的表达水平。结果MeJA以浓度依赖性方式显著抑制3种HSCs活力,其IC_(50)值分别为3.16 mmol/L(LX-2)、2.61 mmol/L(HSC-T6)和4.43 mmol/L(CFSC-8B)。在LX-2细胞中,MeJA可减少线粒体数量、抑制腺苷三磷酸(ATP)生成,同时促进mtROS和ROS的积累,此外,MeJA处理显著下调α-SMA和CollagenⅠ的表达,表明其可能通过破坏线粒体功能及诱导氧化应激来抑制HSCs活化并诱导其凋亡。结论本研究证实MeJA可通过抑制线粒体活性与功能、促进ROS生成及下调纤维化标志物表达等多重途径抑制HSCs活化并诱导其凋亡,提示其具有显著的抗肝纤维化潜力。然而,其具体分子机制及体内疗效仍需通过后续研究进一步验证。 展开更多
关键词 茉莉酸甲酯 肝纤维化 肝星状细胞 线粒体
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大黄素对高糖培养的GMC增殖、FN表达及p38MAPK的影响 被引量:35
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作者 李学娟 陈泽彬 +3 位作者 魏红 王国兵 刘敏 黄河清 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期233-238,共6页
目的本研究旨在观察大黄素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)的增殖与细胞外基质的主要成分——纤维连接蛋白(FN)表达的影响,观察大黄素对高糖培养的p38MAPK信号转导通路的影响,以探讨大黄素调节p38MAPK信号通路抗糖尿病肾脏纤维化... 目的本研究旨在观察大黄素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)的增殖与细胞外基质的主要成分——纤维连接蛋白(FN)表达的影响,观察大黄素对高糖培养的p38MAPK信号转导通路的影响,以探讨大黄素调节p38MAPK信号通路抗糖尿病肾脏纤维化的分子作用机制。方法 MTT比色法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞周期分布;Western blot方法检测FN、p-p38MAPK蛋白表达情况。结果高糖能够诱导大鼠GMC增殖、上调FN的表达以及促进p38MAPK活化,与正常培养组相比差异有统计学意义(P<0.05);大黄素可以抑制高糖诱导的大鼠GMC增殖、FN表达与p38MAPK活化,与高糖组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论大黄素抗糖尿病肾脏纤维化的作用可能与大黄素抑制p38MAPK信号通路密切相关。 展开更多
关键词 大黄素 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 细胞增殖 纤维粘连蛋白 P38丝裂原活化蛋白激酶
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松果菊苷对TNFα诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用 被引量:34
18
作者 邓敏 赵金垣 +2 位作者 屠鹏飞 姜永 陈静 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期169-174,共6页
 目的 探讨肉苁蓉提取物松果菊苷对TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法 用MTT法检测细胞存活率,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,以激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生和线粒体膜电位的变...  目的 探讨肉苁蓉提取物松果菊苷对TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法 用MTT法检测细胞存活率,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,以激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生和线粒体膜电位的变化,并用荧光酶标仪测定caspase 3的活性。结果 100μg·L-1 TNFα处理细胞 36h显著降低细胞的存活率;诱导细胞发生凋亡,凋亡率达37%;细胞内活性氧水平及caspase 3的活性升高;而线粒体膜电位却明显降低,红 /绿荧光强度的比值由正常的 5 97降低为 0 35左右。而预先给予 1, 10或者 100mg·L-1浓度的松果菊苷处理细胞 2h,可提高细胞存活率;并可有效抑制DNAladder的发生;流式细胞仪检测凋亡率分别降低到25 9%, 18 3% 和 8 2%;激光共聚焦显微镜结果显示松果菊苷可明显抑制细胞内活性氧产生;并可逐渐恢复线粒体的高能量状态;caspase 3的活性不断降低,并呈现了一定的剂量依赖性。结论 松果菊苷能抑制TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡,其神经细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平,抑制caspase 3的活性和维持线粒体膜电位的高能状态有关。 展开更多
关键词 松果菊苷 细胞凋亡 TNFΑ SH-SY5Y细胞 线粒体 膜电位 活性氧 caspase-3
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JNK信号通路与细胞凋亡关系的研究进展 被引量:48
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作者 魏娜 贺海波 +2 位作者 张长城 袁丁 王婷 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2013年第7期807-812,共6页
c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal ki-nase,JNK)信号通路是近20年来发现的与细胞分化、细胞凋亡、应激反应以及多种人类疾病的发生和发展关系非常密切的通路之一,其生物化学功能和对细胞生理、病理情况下的调节作用一直被国内外学者... c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal ki-nase,JNK)信号通路是近20年来发现的与细胞分化、细胞凋亡、应激反应以及多种人类疾病的发生和发展关系非常密切的通路之一,其生物化学功能和对细胞生理、病理情况下的调节作用一直被国内外学者所关注。近年来,研究发现JNK信号通路在调控细胞凋亡中发挥重要作用,通过调节JNK信号通路有望成为治疗细胞凋亡引起的疾病的重要靶点。本文就其生物学功能及其与细胞凋亡关系作一阐述。 展开更多
关键词 JNK信号通路 细胞凋亡 丝裂原活化蛋白激酶
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吡咯喹啉醌对脂肪肝蛋鸡肝损伤的保护作用机制 被引量:15
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作者 赵芹 张海军 +4 位作者 武书庚 岳洪源 王晶 齐广海 孙琳琳 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期651-658,共8页
本试验旨在研究吡咯喹啉醌(PQQ)防治蛋鸡脂肪肝综合征的作用机制。选用29周龄海兰褐蛋鸡288只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复12只鸡。Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮(代谢能11.03 MJ/kg,粗蛋白质16.2%);Ⅱ组为病理模型组,饲喂高能低蛋... 本试验旨在研究吡咯喹啉醌(PQQ)防治蛋鸡脂肪肝综合征的作用机制。选用29周龄海兰褐蛋鸡288只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复12只鸡。Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮(代谢能11.03 MJ/kg,粗蛋白质16.2%);Ⅱ组为病理模型组,饲喂高能低蛋白质饲粮(代谢能12.75 MJ/kg,粗蛋白质13.0%);Ⅲ和Ⅳ组分别在Ⅱ组的高能低蛋白质饲粮基础上添加0.08和0.16 mg/kg的PQQ。试验期4周。结果表明:1)与Ⅰ组相比,Ⅱ组高能低蛋白质饲粮成功诱导了蛋鸡脂肪肝试验模型,表现为肝细胞弥散性脂肪变性,肝脏中甘油三酯、总胆固醇含量显著升高(P<0.05),血浆谷丙转氨酶活性显著升高(P<0.05);2)饲粮PQQ可显著抑制高能低蛋白质饲粮引起的肝脏中甘油三酯和总胆固醇含量及血浆中谷丙转氨酶活性的升高(P<0.05),达到与对照组相当的水平;3)饲粮PQQ可显著抑制高能低蛋白质饲粮引起的肝脏中超氧化物歧化酶活性降低和丙二醛含量升高(P<0.05);4)饲粮PQQ可显著抑制高能低蛋白质饲粮引起的蛋鸡肝脏线粒体相对含量减少(P<0.05),抑制柠檬酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性降低(P<0.05);5)饲粮PQQ可阻止采食高能低蛋白质饲粮的蛋鸡发生脂肪肝,维持与正常对照组相当的水平,不同剂量PQQ之间未见显著差异(P>0.05)。由此可见,饲粮PQQ可通过改善蛋鸡肝脏线粒体功能、调节脂质代谢和抗氧化功能预防蛋鸡脂肪肝综合征。 展开更多
关键词 吡咯喹啉醌 蛋鸡脂肪肝综合征 高能低蛋白质饲粮 脂质代谢 线粒体
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