MicroRNA-520e通过靶向抑制AEG-1发挥抗结直肠癌特性 被引量：1

1

作者 吕飒美 张健 +2 位作者 吴友伟 刘倩 易默 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第17期3229-3237,共9页

目的:探究MicroRNA-520e(miR-520e)在结直肠癌中的表达模式及其对细胞功能的影响。方法:采用qRT-PCR方法检测47例结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织中miR-520e和星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)的mRNA表达水平。将SW480细胞分为对照组、miR... 目的:探究MicroRNA-520e(miR-520e)在结直肠癌中的表达模式及其对细胞功能的影响。方法:采用qRT-PCR方法检测47例结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织中miR-520e和星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)的mRNA表达水平。将SW480细胞分为对照组、miR-520e-mimic组、NC-mimic组、miR-520e-inhibitor组、NC-inhibitor组、miR-520e-mimic+AEG-1-pcDNA3.1组和miR-520e-mimic+NC-pcDNA3.1组。通过MTT法检测SW480细胞的增殖,通过Annexin V-FITC/PI双染色试剂盒检测细胞凋亡,通过Transwell检测细胞迁移和侵袭,通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-520e和AEG-1的靶向关系,通过qRT-PCR或Western blotting检测AEG-1、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9、NF-κB p65(p65)和磷酸化的NF-κB p65(p-p65)的表达。结果:与癌旁组织相比,结直肠癌组织中miR-520e的表达水平降低(t=9.353,P<0.001)。与对照组相比,miR-520e-mimic组的OD值降低,细胞凋亡率升高,细胞迁移和侵袭数量降低,MMP2、MMP9和p-p65蛋白表达水平降低(P<0.001)。与对照组相比,miR-520e-inhibitor组的OD值升高,细胞凋亡率降低,细胞迁移和侵袭数量升高,MMP2、MMP9和p-p65蛋白表达水平升高。与NC-mimic组相比,miR-520e-inhibitor组的相对荧光素酶活性降低(P<0.001)。与对照组相比,miR-520e-mimic组的AEG-1的mRNA和蛋白表达水平均降低,而miR-520e-inhibitor组均升高(P<0.001)。与miR-520e-mimic+NC-pcDNA3.1组相比,miR-520e-mimic+AEG-1-pcDNA3.1组的AEG-1的mRNA和蛋白表达水平升高,OD值升高,细胞凋亡率降低,迁移和侵袭细胞数增加,MMP2和MMP9的蛋白表达水平及p65的磷酸化水平均增加(P<0.001)。结论:miR-520e在结直肠癌中表达降低,可通过靶向抑制AEG-1来发挥抗结直肠癌特性,其抗癌机制可能通过NF-κB信号通路介导。 展开更多

关键词 结直肠癌 microrna-520e 星形胶质细胞上调基因-1 侵袭 NF-ΚB信号通路

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血清miR-520e、miR-146a表达与老年HBV相关肝癌患者临床病理参数及预后的关系

2

作者 马慧敏 唐微 +3 位作者 许丹 寇丹 宋辉 闫翔 《西部医学》 2024年第9期1336-1340,共5页

目的探讨血清miR-520e、miR-146a表达与老年乙型肝炎病毒(HBV)相关肝癌患者临床病理参数及预后的关系。方法将2018年2月—2021年2月本院收治的HBV相关肝细胞癌患者95例设为观察组,将同期HBV患者100例设为对照组,采用实时聚合酶链反应法(... 目的探讨血清miR-520e、miR-146a表达与老年乙型肝炎病毒(HBV)相关肝癌患者临床病理参数及预后的关系。方法将2018年2月—2021年2月本院收治的HBV相关肝细胞癌患者95例设为观察组,将同期HBV患者100例设为对照组,采用实时聚合酶链反应法(RT-PCR)检测两组血清中miR-520e和miR-146a水平。比较两组血清中miR-520e和miR-146a水平的差异,以及观察组中不同病理特征患者血清中miR-520e和miR-146a水平的差异,绘制不同miR-520e和miR-146a水平肝癌患者的1年无进展生存期生存曲线。结果观察组患者血清miR-520e、miR-146a水平均低于对照组患者(P<0.05);HCC患者中,病灶大小≥3 cm、有癌栓、伴淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的患者血清miR-520e水平明显低于病灶大小<3 cm、无癌栓、不伴淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期的患者(P<0.05);HCC患者中,病灶大小≥3 cm、有癌栓、伴淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的患者血清miR-146a水平明显低于病灶大小<3 cm、无癌栓、不伴淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期的患者(P<0.05);将观察组患者中miR-520e水平低于平均值患者分为低miR-520e表达组,高于平均值患者分为高miR-520e表达组;将观察组患者中miR-146a水平低于平均值患者分为低miR-146a表达组,高于平均值患者分为高miR-146a表达组。曲线分析结果显示,miR-520e和miR-146a高表达者1年内无进展生存期情况均明显优于低表达者(P<0.05)。结论HBV相关肝细胞癌患者中miR-520e和miR-146a血清水平显著低于HBV患者,且不同miR-520e和miR-146a血清水平的HBV相关肝细胞癌患者之间临床病理特征与预后存在显著差异。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 肝细胞癌 miR-520e MIR-146A 临床病理参数

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氧化苦参碱靶向miR-520e调控AEG-1介导的结肠癌细胞的转移、侵袭活性 被引量：3

3

作者 易默 吴友伟 +4 位作者 张健 何瑜 刘倩 史丽萍 吕飒美 《吉林中医药》 2022年第3期328-333,共6页

目的探讨氧化苦参碱(OMT)通过微小RNA(miR)-520e调控星形胶质细胞瘤上调基因1(AEG-1)介导的结肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移的影响。方法不同浓度OMT处理结肠癌细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;对数生长期的结肠癌细胞随机分为Control组、OM... 目的探讨氧化苦参碱(OMT)通过微小RNA(miR)-520e调控星形胶质细胞瘤上调基因1(AEG-1)介导的结肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移的影响。方法不同浓度OMT处理结肠癌细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;对数生长期的结肠癌细胞随机分为Control组、OMT组(含70μmol/L OMT的培养基培养24 h)、NC组(转染阴性对照片段24 h)、miR-520e inhibitor组(转染miR-520e抑制物24 h)和OMT+miR-520e inhibitor组(转染miR-520e抑制物24 h后,70μmol/L OMT处理24 h),MTT法检测细胞存活率,PCR检测miR-520e表达水平,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,双荧光素酶报告实验检测miR-520e与AEG-1靶向关系,蛋白印迹法检测AEG-1、白介素6(IL-6)和磷酸化信号转导子与激活子3(STAT3)蛋白相对表达量。结果随着OMT浓度的增加,结肠癌细胞增殖抑制率升高(P<0.05);与Control组比较,OMT组细胞存活率、侵袭细胞数以及AEG-1、IL-6和p-STAT3蛋白相对表达量降低,miR-520e表达水平以及划痕愈合率升高(P<0.05);与OMT组比较,OMT+miR-520e inhibitor组细胞存活率、侵袭细胞数以及AEG-1、IL-6和p-STAT3蛋白相对表达量升高,miR-520e表达水平以及划痕愈合率降低(P<0.05);与NC组比较,miR-520e inhibitor组侵袭细胞数以及AEG-1、IL-6和p-STAT3蛋白相对表达量升高,miR-520e表达水平以及划痕愈合率降低(P<0.05);与miR-520e inhibitor组比较,OMT+miR-520e inhibitor组细胞存活率、侵袭细胞数以及AEG-1、IL-6和p-STAT3蛋白相对表达量降低,miR-520e表达水平以及划痕愈合率升高(P<0.05)。结论OMT通过上调miR-520e抑制AEG-1表达,降低结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多

关键词 结肠癌 氧化苦参碱 miR-520e AeG-1

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MiRNA-520e对HeLa细胞FOXL2基因的靶向调控作用及细胞迁移增殖的影响 被引量：1

4

作者 刘悦 王晓雨 +3 位作者 曲春安 胡飞 胡亚暖 唐胜建 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第29期8-11,共4页

目的探讨miRNA-520e对人宫颈癌HeLa细胞FOXL2基因的调控作用及对细胞迁移、增殖的影响。方法应用生物信息学分析软件(Target Scan Human 7.1)预测miRNA-520e可能结合于FOXL2 mRNA 3'UTR端,以HeLa细胞作为试验研究对象,将细胞随机分... 目的探讨miRNA-520e对人宫颈癌HeLa细胞FOXL2基因的调控作用及对细胞迁移、增殖的影响。方法应用生物信息学分析软件(Target Scan Human 7.1)预测miRNA-520e可能结合于FOXL2 mRNA 3'UTR端,以HeLa细胞作为试验研究对象,将细胞随机分为阴性对照组(加入无关序列NC Fam mimics)、正常对照组(不加任何干预)、miRNA-520e组(加入miRNA-520e mimics)。运用脂质体法通过Lipofectamine 3000 Reagent将各miRNA mimics转染各组HeLa细胞,48 h后通过实时荧光定量PCR及Western blotting法检测FOXL2 mRNA及蛋白表达;转染24 h后采用细胞划痕试验检测细胞迁移能力,使用ACEA xCELLigence RTCA DP细胞分析仪检测细胞增殖能力。结果 miRNA-520e组HeLa细胞FOXL2 mRNA和蛋白的表达量较正常对照组及阴性对照组降低,且miRNA-520e组细胞的迁移和增殖能力较正常对照组及阴性对照组增强(P均<0.05)。结论 miRNA-520e可抑制HeLa细胞FOXL2 mRNA和蛋白的表达,促进细胞迁移和增殖。 展开更多

关键词 宫颈癌 HeLA细胞 微小RNA-520e FOXL2基因 细胞迁移 细胞增殖

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妊娠糖尿病患者血清microRNA-873-5p、ZEB1与胰岛素抵抗、母婴结局的相关性研究 被引量：19

5

作者 刘莹莹 赵一梅 +1 位作者 杨夫艳 李清桃 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期14-19,共6页

目的探究妊娠糖尿病(GDM)患者血清microRNA-873-5p(miR-873-5p)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)与胰岛素抵抗、母婴结局的相关性。方法选取连云港市第一人民医院2021年1月—2022年6月收治的137例GDM患者为研究组,另选取同期该院体检且一般资... 目的探究妊娠糖尿病(GDM)患者血清microRNA-873-5p(miR-873-5p)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)与胰岛素抵抗、母婴结局的相关性。方法选取连云港市第一人民医院2021年1月—2022年6月收治的137例GDM患者为研究组,另选取同期该院体检且一般资料与研究组患者相匹配的137例健康孕妇为对照组。实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测两组研究对象血清miR-873-5p、ZEB1的表达;Pearson法分析GDM患者血清miR-873-5p、ZEB1与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性;多因素一般Logistic回归分析影响GDM患者母婴结局的相关因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-873-5p、ZEB1对GDM患者母婴不良结局的预测效能。结果研究组患者的空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)及HOMA-IR均高于对照组(P<0.05);研究组患者血清miR-873-5p、ZEB1水平均高于对照组(P<0.05);Pearson法分析结果显示,GDM患者血清miR-873-5p表达(r=0.754,P=0.000)、ZEB1表达(r=0.771,P=0.000)与HOMA-IR均呈正相关;母婴不良结局组的GDM患者血清miR-873-5p、ZEB1表达均高于良好结局组(P<0.05);FPG[OR=1.366(95%CI:1.065,1.752)]、FINS[OR=1.619(95%CI:1.214,2.160)]、HOMA-IR[OR=1.550(95%CI:1.146,2.096)]、miR-873-5p[OR=1.772(95%CI:1.250,2.512)]及ZEB1[OR=1.512(95%CI:1.050,2.177)]均为GDM患者发生母婴不良结局的危险因素(P<0.05);血清miR-873-5p、ZEB1及两者联合预测GDM患者发生母婴不良结局的敏感性分别为71.11%(95%CI:0.670,0.821)、66.67%(95%CI:0.620,0.715)和65.89%(95%CI:0.617,0.727),特异性分别为70.65%(95%CI:0.670,0.821)、85.87%(95%CI:0.775,0.897)和88.04%(95%CI:0.785,0.910),两者联合检测对GDM患者的母婴结局具有较高的特异性。结论GDM患者血清miR-873-5p、ZEB1表达与胰岛素抵抗密切相关,并且两者联合检测对GDM患者的母婴结局具有较好的预测效能。 展开更多

关键词 妊娠糖尿病 microrna-873-5p e盒结合锌指蛋白1 胰岛素抵抗 母婴结局

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MicroRNA-218下调肝细胞癌中的E2F2基因表达抑制细胞增殖的研究 被引量：7

6

作者 王涛 马思聪 +6 位作者 戚星星 汤晓寅 崔丹 王智 池嘉昌 李萍 翟博 《肝脏》 2016年第3期179-182,共4页

目的探讨MicroRNA-218(miRNA-218)下调肝细胞癌中的E2F2基因表达,从而抑制细胞增殖的机制。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H、BEL-7402和正常肝细胞株L02。随后进行细胞培养和转移、反转录多聚酶链反应、免疫印... 目的探讨MicroRNA-218(miRNA-218)下调肝细胞癌中的E2F2基因表达,从而抑制细胞增殖的机制。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H、BEL-7402和正常肝细胞株L02。随后进行细胞培养和转移、反转录多聚酶链反应、免疫印迹分析、细胞增殖和集落形成试验、细胞周期分析和相应的统计学处理。结果 miR-218表达水平在癌细胞中下调。MTT生长曲线表明,当miR-218过度表达时(Huh7中的miR-218 P=0.001;在MHCC-97中的miR-218 P=0.013)细胞增殖能力明显降低。双荧光素酶实验证实,转染了miRNA-218模拟物的细胞的荧光素酶活性显著降低(P<0.01),荧光酶报告基因含有E2F2野生型的第3′非翻译区。这些结果表明E2F2是miR-218的直接作用对象。与阴性对照组相比,转染了miR-218模拟物的Huh7和MHCC-97细胞株中的E2F2的相对mRNA表达显著下调(P<0.05)。结论 miR-218通过直接作用于E2F2基因的第3′非翻译区调节E2F2的表达,从而抑制HCC细胞增殖。 展开更多

关键词 microrna-218 肝细胞癌 e2F2基因 细胞增殖

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MicroRNA-520a用于异位妊娠血清学诊断的研究 被引量：2

7

作者 冯迟 刘晓巍 《北京医学》 CAS 2020年第2期169-171,174,共4页

目的评估microRNA-520a作为异位妊娠(ectopic pregnancy,EP)患者非侵入性血清学诊断标志物的临床应用价值。方法收集2017年1月至2018年12月首都医科大学附属北京妇产医院185例孕妇的病例资料及其首次就诊送检的血液标本,包括64例宫腔妊... 目的评估microRNA-520a作为异位妊娠(ectopic pregnancy,EP)患者非侵入性血清学诊断标志物的临床应用价值。方法收集2017年1月至2018年12月首都医科大学附属北京妇产医院185例孕妇的病例资料及其首次就诊送检的血液标本,包括64例宫腔妊娠(viable intrauterine pregnancy,VIP)、48例自然流产(spontaneous abortion,SA)以及73例EP,采用定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测患者血浆中microRNA-520a的表达水平。同时检测血清绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)和孕酮水平,并比较各组间差异。采用ROC曲线分析microRNA-520a浓度作为EP血清学诊断标志物的有效性。结果microRNA-520a在EP组血浆中的表达水平(1.88±0.50)与VIP组(2.67±0.61,P=0.000)及SA组(2.77±0.50,P<0.001)比较,均显著下降。用于VIP与EP的鉴别诊断,ROC曲线的AUC为0.82(95%CI:0.68~0.97,P=0.001)。结论异位妊娠者血浆标本中microRNA-520a表达水平显著下降,microRNA-520a可作为血清学标志物应用于早期EP诊断。 展开更多

关键词 microrna-520a 异位妊娠

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滋肾育胎丸联合盐酸利托君治疗先兆流产的效果及对凝血纤溶系统功能、microRNA-141、microRNA-518e表达的影响 被引量：6

8

作者 徐珊 何荣 宋丽华 《临床医学研究与实践》 2023年第17期122-125,共4页

目的 探讨滋肾育胎丸联合盐酸利托君治疗先兆流产的效果。方法 选择2019年1月至2021年2月收治的100例先兆流产孕妇为研究对象,用随机数字表法将其分为对照组与观察组,各50例。对照组采用常规治疗+盐酸利托君,观察组在对照组基础上加滋... 目的 探讨滋肾育胎丸联合盐酸利托君治疗先兆流产的效果。方法 选择2019年1月至2021年2月收治的100例先兆流产孕妇为研究对象,用随机数字表法将其分为对照组与观察组,各50例。对照组采用常规治疗+盐酸利托君,观察组在对照组基础上加滋肾育胎丸治疗。比较两组的治疗效果。结果 观察组的治疗总有效率为94.00%,高于对照组的76.00%(P<0.05)。治疗后4周,观察组的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)长于对照组,组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平低于对照组(P<0.05)。治疗后4周,观察组的microRNA-141、microRNA-518e表达量低于对照组(P<0.05)。结论 滋肾育胎丸联合盐酸利托君治疗先兆流产的效果满意,也能改善凝血纤溶系统功能,调节microRNA-141、microRNA-518e表达,值得推广。 展开更多

关键词 滋肾育胎丸 盐酸利托君 先兆流产 凝血纤溶系统功能 microrna-141 microrna-518e

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母血microRNA-520a水平与胎儿心脏缺陷关系的研究 被引量：1

9

作者 李源 阮焱 舒畅 《中国实验诊断学》 2018年第8期1341-1343,共3页

目的本研究旨在评估母体血循环microRNA-520a作为先天性心脏缺陷胎儿非侵入性诊断标志物的临床应用价值。方法 44例先天性心脏缺陷胎儿孕妇为研究组,34例正常胎儿孕妇做为对照组。定量RT-PCR检测两组孕妇血浆中的microRNA-520a表达水平... 目的本研究旨在评估母体血循环microRNA-520a作为先天性心脏缺陷胎儿非侵入性诊断标志物的临床应用价值。方法 44例先天性心脏缺陷胎儿孕妇为研究组,34例正常胎儿孕妇做为对照组。定量RT-PCR检测两组孕妇血浆中的microRNA-520a表达水平。结果 microRNA-520a在先天性心脏缺陷胎儿孕妇血浆中的表达水平与正常对照组相比显著上升(P<0.001),ROC特征曲线下面积(AUC)为0.92(95%可信区间为0.86-0.97;P<0.001)。研究显示,microRNA-520a的血浆表达水平可以相当准确地诊断妊娠期胎儿的先天性心脏缺陷。结论本研究的结果表明,microRNA-520a在先天性心脏缺陷胎儿孕妇的血浆中表达水平显著上升。母体血循环microRNA-520a表达水平可能作为先天性心脏缺陷胎儿的非侵入性诊断标志物。 展开更多

关键词 循环microrna-520a 母体血浆表达水平 胎儿 先天性心脏缺陷 产前诊断 逆转录聚合酶链反应 非侵入性产前诊断

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母血microRNA-520α水平与胎儿心脏缺陷关系的研究 被引量：1

10

作者 万斌 何淼 +1 位作者 肖锐 邬琳 《中国优生与遗传杂志》 2019年第10期1217-1219,共3页

目的探讨母血microRNA-520α水平对胎儿心脏缺陷的早期诊断价值及其临床意义。方法选取2016年5月~2018年4月怀有心脏缺陷胎儿孕妇23例(心脏缺陷组),同期产检的神经管畸形胎儿孕妇23例(神经管畸形组)和怀有正常胎儿孕妇30例(正常对照组)... 目的探讨母血microRNA-520α水平对胎儿心脏缺陷的早期诊断价值及其临床意义。方法选取2016年5月~2018年4月怀有心脏缺陷胎儿孕妇23例(心脏缺陷组),同期产检的神经管畸形胎儿孕妇23例(神经管畸形组)和怀有正常胎儿孕妇30例(正常对照组)作为本文的主要研究对象,检测各组孕妇血液中的microRNA-520α水平,并通过ROC曲线分析评估母血microRNA-520α水平诊断胎儿心脏缺陷关系的价值。结果经分娩/引产证实胎儿心脏缺陷例数为22例,准确率为95.65%,误诊1例,漏诊率为4.35%。心脏畸形组的microRNA-520α水平(1.29±0.75)ng/ml,低于神经管畸形组的(1.81±0.95)ng/ml,显著低于正常对照组的(2.65±1.26)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。进一步的ROC曲线分析得出母血microRNA-520α水平诊断胎儿心脏缺陷的曲线下面积(area under curve,AUC)为0.854,在最佳临界值点对应的灵敏度、特异度分别为87%、71.7%,证明microRNA-520α对胎儿心脏缺陷的诊断效能较好。结论母血microRNA-520α水平对胎儿心脏缺陷具有诊断价值,且诊断准确性较好,可为胎儿心脏缺陷早期辅助评估提供客观参考。 展开更多

关键词 母血microrna-520α水平 胎儿心脏缺陷 诊断价值

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Micro302A、Micro498、Micro520E在兔关节软骨细胞损伤后的表达变化

11

作者 王伟 陈传好 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1709-1714,共6页

本试验为了检测和比较在正常和划伤后的兔软骨细胞中Micro302A、Micro498、Micro520E 3种Micro RNA的水平变化。获取兔膝关节软骨细胞进行原代培养后制备细胞损伤模型。利用实时定量PCR对正常软骨细胞以及损伤后1 d、3 d、5 d、7 d 4个... 本试验为了检测和比较在正常和划伤后的兔软骨细胞中Micro302A、Micro498、Micro520E 3种Micro RNA的水平变化。获取兔膝关节软骨细胞进行原代培养后制备细胞损伤模型。利用实时定量PCR对正常软骨细胞以及损伤后1 d、3 d、5 d、7 d 4个时间点软骨细胞内3种MicroRNA水平进行检测。结果表明成功获取兔膝关节软骨细胞进行原代培养后制备了细胞损伤模型。经过实时荧光定量PCR检测对比后发现:Micro302A与正常组相比在损伤后第1天明显升高,第3天升至最高,第5天降至接近正常组水平后持续下降,第7天降至最低。Micro498在损伤后第1天与正常组相比没有明显变化,后快速上升并在第3天达到顶峰后缓慢下降,在第7天达到与正常组相似水平。Micro520E的水平变化在4个时间点内较稳定,幅度较小。第1天至第3天稳步上升至最高后再逐步降低,第7天略低于正常组水平。在关节软骨损伤后不同的时间内,Micro302A、Micro498、Micro520E有明显不同的水平变化,说明这3种MicroRNA在关节软骨损伤后的修复过程中发挥不同的作用,为利用MicroRNA治疗关节软骨损伤提供了一定的实验依据。 展开更多

关键词 软骨细胞 损伤 Micro302A Micro498 Micro520e

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微小RNA-520e对非小细胞肺癌细胞侵袭迁移和JAK1/STAT3信号通路的影响 被引量：5

12

作者 言成一 杨继承 袁跃西 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期978-983,共6页

目的探讨微小RNA-520e(miR-520e)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞侵袭迁移和Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞株H1299、H1975、H1650、A549的m... 目的探讨微小RNA-520e(miR-520e)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞侵袭迁移和Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞株H1299、H1975、H1650、A549的miR-520e水平;体外常规培养A549细胞并采用脂质体分别转染模拟物(过表达组)和阴性对照序列(NC组),以仅经脂质体处理的细胞为对照组。采用QPCR、活细胞计数CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测miR-520e和含锌指和BTB结构域7A(ZBTB7A)水平、增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-9、磷酸化JAK1(p-JAK1)和磷酸化STAT3(p-STAT3)水平;双荧光素酶报告基因系统联合荧光素酶报告质粒psiCHECK-2验证miR-520e与ZBTB7A的靶向关系。结果与正常细胞相比,NSCLC细胞的miR-520e水平降低,其中A549细胞最低,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达组的miR-520e水平为19.562±1.448,高于对照组的1.002±0.057和NC组的1.053±0.082,ZBTB7A水平为0.173±0.026,低于对照组的1.109±0.091和NC组的1.076±0.136,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组和NC组相比,过表达组转染36、48 h后的增殖活力及转染48 h后的MMP-9、p-JAK1和p-STAT3水平均降低(P<0.05)。过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(23.618±3.684)%和(51.644±7.069)个,低于对照组的(57.089±4.569)%和(152.269±12.833)个及NC组的(59.267±5.671)%和(149.075±11.239)个(P<0.05)。MiR-520e模拟物与携带野生型ZBTB7A 3’端非翻译区的psiCHECK-2载体共转染细胞的相对荧光强度降低(P<0.05)。结论 miR-520e在NSCLC细胞中表达下调且可能通过靶向ZBTB7A降低JAK1/STAT3信号通路活性来抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 微小RNA-520e 侵袭迁移 含锌指和BTB结构域7A

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微小RNA-520e通过下调自噬调控肝癌细胞失巢凋亡抵抗 被引量：2

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作者 汪佳兵 王石健 +3 位作者 魏静 陈丽君 毛娟娟 金茜 《江苏医药》 CAS 2022年第11期1081-1084,1089,F0002,共6页

目的探讨微小RNA-520e(miR-520e)是否通过下调自噬调控肝癌细胞失巢凋亡抵抗。方法选择具有高迁移潜能的人肝癌细胞株HCCLM3,使用Lipofectamine 2000将miR-520e类似物(miR-520e-mimic)和阴性对照序列(mimic NC)转染HCCLM3细胞分为miR-52... 目的探讨微小RNA-520e(miR-520e)是否通过下调自噬调控肝癌细胞失巢凋亡抵抗。方法选择具有高迁移潜能的人肝癌细胞株HCCLM3,使用Lipofectamine 2000将miR-520e类似物(miR-520e-mimic)和阴性对照序列(mimic NC)转染HCCLM3细胞分为miR-520e mimic组和mimic NC组。在失巢状态下,采用MTT法检测细胞生存率,采用细胞划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭情况,采用免疫荧光检测细胞自噬水平,采用Western blot检测细胞人微管相关蛋白轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)和LC3-Ⅱ蛋白表达。结果在失巢状态下,与mimic NC组比较,miR-520e-mimic组细胞生存率降低,细胞迁移下降,细胞侵袭数量减少,自噬现象被抑制,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-520e通过下调自噬介导失巢凋亡,抑制HCCLM3细胞生长、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 微小核糖核酸520e 自噬 失巢凋亡 肝癌

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血瘀证相关的microRNA-520b对白介素-8的影响及丹参酮Ⅱ_A的干预作用 被引量：4

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作者 熊婷婷 周健华 +2 位作者 朱丹丹 许清芸 陈利国 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期113-117,共5页

目的:研究血瘀证相关的micorRNA-520b(miR-520b)对白介素-8(IL-8)的影响及丹参酮ⅡA(TanⅡA)的干预作用。方法:采用脂质体介导的转染方法将microRNA-520b模拟物(50 nmol·L-1)或抑制物(100 nmol·L-1)转染进入含1.6×104cel... 目的:研究血瘀证相关的micorRNA-520b(miR-520b)对白介素-8(IL-8)的影响及丹参酮ⅡA(TanⅡA)的干预作用。方法:采用脂质体介导的转染方法将microRNA-520b模拟物(50 nmol·L-1)或抑制物(100 nmol·L-1)转染进入含1.6×104cells/well人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)的6孔板中24,36,48 h,采用5,10,20,40 mg·L-1TanⅡA干预24,48 h。荧光显微镜观察转染情况,MTT法检测细胞活性(n=5),硝酸还原酶法、酶联免疫法(ELISA)测定培养液中一氧化氮(NO),内皮素(ET),蛋白C受体(EPCR),血管内假性血友病因子(v WF)和血栓调节蛋白(TM)含量(n=3)。半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测细胞IL-8信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达水平(n=3)。结果:与对照组比较,模型组(miR-520b组)细胞有荧光,48 h荧光最强。细胞活性降低(P<0.01)且48 h最显著,NO含量下降(P<0.01),EPCR,v WF,ET含量升高(P<0.01),转染48 h后IL-8 mRNA和蛋白质表达下调(P<0.01)。与模型(miR-520b)组比较,给药组(TanⅡA组)细胞活性升高(P<0.01),TanⅡA(10 mg·L-1,48 h)干预效果最佳;NO含量升高(P<0.01);EPCR,v WF,TM,ET含量降低(P<0.01),IL-8 mRNA和蛋白质表达上调(P<0.01)。结论:miR-520b调节IL-8在血瘀证中发挥作用,可能为TanⅡA作用靶点。 展开更多

关键词 microrna-520b 血瘀证 白介素-8 丹参酮ⅡA

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microRNA-125b通过调控Nrf2/Keap1信号通路影响光感受器细胞氧化应激 被引量：6

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作者 刘金霞 王钰池 +3 位作者 郭卓 赵江月 孔珺 秦宇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期976-980,985,共6页

目的研究在H_(2)O_(2)诱导的光感受器细胞氧化应激模型中microRNA-125b(miR-125b)调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)信号通路的作用机制,探讨其在干性年龄相关性黄斑变性(AMD)发病过程中的作用。方法利用H... 目的研究在H_(2)O_(2)诱导的光感受器细胞氧化应激模型中microRNA-125b(miR-125b)调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)信号通路的作用机制,探讨其在干性年龄相关性黄斑变性(AMD)发病过程中的作用。方法利用H_(2)O_(2)(800μmol/L)构建小鼠视锥细胞系661W细胞氧化应激模型,用实时荧光定量PCR(q PCR)检测mi R-125b及Keap1/Nrf2/HO-1 mRNA的表达。分别转染miR-125b模拟物、模拟物对照、抑制物、抑制物对照至661W细胞中,调控细胞miR-125b的表达,48h后用qPCR在661W细胞氧化应激模型中检测miR-125b及Keap1/Nrf2/HO-1 mRNA的表达。用Western blotting检测Keap1蛋白的表达。结果与对照组相比,miR-125b的表达在661W细胞氧化应激模型中显著降低,Nrf2及其下游基因HO-1 mRNA表达显著升高,Keap1 mRNA表达明显降低;与转染miR-125b模拟物对照组相比,转染miR-125b模拟物组Nrf2、HO-1与miR-125b mRNA表达显著升高,Keap1表达在mRNA水平无明显变化,在蛋白水平显著降低;与转染miR-125b抑制物对照组相比,转染miR-125b抑制物组Nrf2、HO-1与miR-125b mRNA表达显著降低,Keap1 mRNA表达水平无明显变化,蛋白表达显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-125b可能通过调控Nrf2/Keap1信号通路影响光感受器细胞氧化应激反应,调控干性AMD的发生,因而可能成为干性AMD治疗的新靶点。 展开更多

关键词 microrna-125b 核因子e2相关因子 氧化应激 干性年龄相关性黄斑变性

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MicroRNA-520家族与血瘀证相关性探讨 被引量：2

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作者 熊婷婷 朱丹丹 +2 位作者 许清芸 蔡云飞 陈利国 《成都中医药大学学报》 2015年第3期119-123,共5页

从分子生物学的角度探讨microRNA-520家族与血瘀证的相关性,认为microRNA-520家族是通过介导炎症反应、免疫紊乱、NF-κB信号通路调节血瘀证的形成过程,可以作为血瘀证的生物标记物,为中医药防治血瘀证提供新的治疗依据,,具有重要的临... 从分子生物学的角度探讨microRNA-520家族与血瘀证的相关性,认为microRNA-520家族是通过介导炎症反应、免疫紊乱、NF-κB信号通路调节血瘀证的形成过程,可以作为血瘀证的生物标记物,为中医药防治血瘀证提供新的治疗依据,,具有重要的临床应用价值。 展开更多

关键词 microrna-520家族 血瘀证 炎症反应 免疫紊乱 NF-ΚB信号通路 理论探讨

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千里光总黄酮上调miR-520e对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响 被引量：3

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作者 张春瑞 卞艳丽 +1 位作者 张体鹏 薛飞 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第18期4564-4569,共6页

目的探讨千里光总黄酮对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及分子机制。方法将肝癌细胞Huh-7随机分为对照组,低、中、高剂量组,miR-NC组,miR-520e组,高剂量+miR-NC组,高剂量+miR-520e组。流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;Transwel... 目的探讨千里光总黄酮对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及分子机制。方法将肝癌细胞Huh-7随机分为对照组,低、中、高剂量组,miR-NC组,miR-520e组,高剂量+miR-NC组,高剂量+miR-520e组。流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;Western印迹检测细胞增殖核抗原(Ki67)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3、N-钙黏附蛋白(N-cadherin)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)表达;实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-520e表达水平;荧光素酶报告实验检测miR-520e和周期素依赖性激酶(CDK)2的靶向关系。结果中、高剂量千里光总黄酮处理肝癌细胞Huh-7后,G0-G1期细胞所占比例显著升高,S期细胞所占比例显著降低(P<0.05),G2-M期细胞所占比例无显著差异(P>0.05);凋亡率显著升高,迁移、侵袭细胞数显著降低,miR-520e表达水平显著升高,Ki67、N-cadherin表达水平显著降低,Caspase3、E-cadherin表达水平显著升高,且呈剂量依赖性(P<0.05)。过表达miR-520e可抑制Huh-7细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡;且可增强千里光总黄酮对Huh-7细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用。miR-520e靶向CDK2。结论千里光总黄酮通过调控miR-520e/CDK2抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 千里光总黄酮 miR-520e 肝癌 增殖 凋亡 迁移 侵袭

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首发精神分裂症患者血浆microRNA-30e表达水平与症状的关系 被引量：3

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作者 付广慧 许俊亭 +2 位作者 李奕 方芳 谢守付 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期489-492,共4页

目的探讨精神分裂症患者血浆micro RNA-30e表达水平变化及其与临床症状的相关性。方法纳入17例首发精神分裂症患者和16名健康对照者,年龄17~45岁。采用定量反转录聚合酶链式反应检测两组血浆micro RNA-30e的表达水平,使用阳性与阴性症... 目的探讨精神分裂症患者血浆micro RNA-30e表达水平变化及其与临床症状的相关性。方法纳入17例首发精神分裂症患者和16名健康对照者,年龄17~45岁。采用定量反转录聚合酶链式反应检测两组血浆micro RNA-30e的表达水平,使用阳性与阴性症状量表(positive and negative symptom scale,PANSS)、个人和社会功能量表(personal and social functioning scale,PSP)对患者组进行评定。结果 与对照组比较,精神分裂症患者血浆micro RNA-30e相对表达量下降,差异有统计学意义(Z=-2.180,P=0.029)。患者血浆micro RNA-30e相对表达水平与PANSS中攻击危险性得分存在正相关(r=0.517,P=0.040),与PANSS总分、阳性症状、阴性症状、一般精神病理学症状相关性无统计学意义(P>0.05);micro RNA-30e相对表达水平与PSP总分、对社会有益的活动、个人关系和社会关系、自我照料、扰乱及攻击行为相关性无统计学意义(P>0.05)。结论 血浆micro RNA-30e的表达水平可能与精神分裂症有关,与急性期冲动控制能力有关系;micro RNA-30e可能是精神分裂症的疾病性质指标,而非状态依赖性指标。 展开更多

关键词 精神分裂症 microrna-30e 生物标记物

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MicroRNA-520b靶向白介素-2调节肝癌细胞生长、转移和药物敏感性研究 被引量：2

19

作者 遆振宇 王晓锋 +4 位作者 许全林 武晓军 陈文浩 闫漫 赵彩红 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2022年第3期255-259,共5页

目的:研究microRNA-520靶向调节IL-2对肝癌细胞生长、转移和药物敏感性的影响。方法:选择并收集原发性肝细胞癌患者术后肝癌及其癌旁组织,采用RT-PCR检测miR-520b表达,采用免疫组化的方法检测IL-2的表达。培养肝癌细胞系HepG2,将细胞分... 目的:研究microRNA-520靶向调节IL-2对肝癌细胞生长、转移和药物敏感性的影响。方法:选择并收集原发性肝细胞癌患者术后肝癌及其癌旁组织,采用RT-PCR检测miR-520b表达,采用免疫组化的方法检测IL-2的表达。培养肝癌细胞系HepG2,将细胞分为对照组、空白对照组和miR-520b过表达组(简称过表达组),空白对照组和过表达组细胞分别转染miR-NC及miR-520b mimics,3组细胞均加入重组IL-2培养12 h。检测miR-520b、IL-2的表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-520b对IL-2的靶向调控作用。采用MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell实验检测细胞转移和侵袭能力。检测细胞药物敏感性。结果:肝癌组织中miR-520b和IL-2表达均显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);体外模型中,过表达组细胞野生型IL-2的3′UTR的荧光素酶报告基因的表达较空白对照组降低(P<0.05)。转染miR-520b后,过表达组细胞生长率较对照组和空白对照组显著降低,凋亡率则显著增加,细胞转移和侵袭能力降低(P<0.05);miR-520b联合IL-2培养肝癌细胞的细胞增殖率较单独使用IL-2或miR-520b低(P<0.05)。结论:micro-520b可以靶向调节肝癌细胞中IL-2的表达,抑制癌细胞的生长、转移,增强药物敏感性,micro-520b对肝癌的诊断和治疗具有潜在的价值。 展开更多

关键词 肝癌 microrna-520b IL-2 转移 侵袭 靶基因

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