文摘目的 探讨miR-383在单钠尿酸盐(monosodium urate, MSU)诱导的非感染性类病原炎症反应中的调控作用,重点评估其在NLRP3炎性体活性调节及炎症自限性维持中的分子机制,为DAMPs介导的无菌性炎症调控提供理论基础。方法 构建miR-383基因敲除(miR-383-/-)及野生型(WT)小鼠的急性痛风性关节炎模型,分别于MSU注射后0、6、12、24、48 h测定足掌厚度。建立腹腔炎症模型并于刺激后6 h和12 h收集腹腔灌洗液,采用流式细胞术分析Ly6G+CD11b+中性粒细胞与F4/80+CD11b+巨噬细胞构成比,ELISA检测IL-1β与IL-6水平。另分离骨髓源性巨噬细胞(BMDMs),于MSU刺激(100μg/mL)后0、4、8 h收集RNA,利用RT-qPCR检测NLRP3、ASC、caspase-1与IL-1β mRNA表达水平。结果 miR-383-/-小鼠在MSU注射后6 h、12 h、24 h的足掌厚度较WT组显著增高(2.81±0.17 mm vs. 2.37±0.14 mm, 3.08±0.21 mm vs. 2.52±0.19 mm, 2.67±0.15 mm vs. 2.29±0.12 mm,均P<0.01)。12 h时腹腔中Ly6G+CD11b+中性粒细胞比例升高至72.34%±4.26%,显著高于WT组的60.91%±3.74%(P<0.01),F4/80+CD11b+巨噬细胞占比亦显著上升(18.46%±2.81%vs. 12.73%±2.57%,P<0.01)。ELISA结果显示miR-383-/-组IL-1β和IL-6峰值分别达641.5±43.6 pg/mL和984.2±51.8 pg/mL,均显著高于WT组(分别为438.7±39.4 pg/mL和732.4±44.9 pg/mL,均P<0.01)。BMDMs中,miR-383-/-组在刺激4 h时ASC mRNA表达为WT组的2.91倍(P<0.01),caspase-1和IL-1β表达分别升高至2.26倍(P<0.01)与3.42倍(P<0.01),NLRP3表达差异无统计学意义(P=0.117)。结论 miR-383通过负向调控ASC表达,从而限制NLRP3炎性体的激活及促炎因子的过度释放。其缺失导致炎症表型加重、免疫细胞过度募集及IL-1β、IL-6水平显著升高,提示miR-383在DAMPs介导的无菌性炎症应答中发挥关键负调控功能。miR-383-ASC信号轴的识别不仅丰富了炎性小体调控网络,也为痛风等炎症性疾病的分子干预提供潜在靶点。
